小分子干扰RNA抑制肺癌细胞Survivin表达对凋亡和顺铂耐药性的影响

目的 观察应用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制肺癌A549细胞中Survivin表达对细胞凋亡和顺铂耐药性的影响.方法 设计、合成特异性抑制Survivin表达的siRNA,转染肺癌A549细胞48 h后,检测Survivin基因mRNA表达量以及肺癌细胞凋亡率和对顺铂耐药性变化.结果 A549细胞转染Survivin特异siRNA后,Survivin/β-actin基因mRNA表达比例1.17±0.25下降至0.41±0.18,抑制率65.10%;细胞凋亡率由2.67%上升至32.33%;顺铂半数抑制浓度(ICSO)由6.37 ms/L降低至2.42 ms/L.结论 通过siRNA特异性抑制肺癌A549细胞中Survivin基因表达可增加凋亡,逆转顺铂耐药.     

基于多肽的循环肿瘤细胞纳米磁珠检测对肺部结节的鉴别诊断价值

目的探索一种新型的循环肿瘤细胞(CTC)检测技术对肺部结节良恶性鉴别的能力。方法对入组的肺部结节73例患者进行了新型的基于上皮细胞粘附分子(Ep CAM)特异性识别多肽和纳米磁珠技术的CTC分离和检测。其中恶性病变组48例[男13例、女35例,年龄(57.0±11.9)岁],良性病变组25例[男11例、女14例,年龄(53.1±13.2)岁]。以病理为金标准,探究CTC计数鉴别诊断的效能,并按照实性成分比进行亚组分析,同时与PET/CT进行对比。结果恶性病变组的CTC计数显著高于良性病变组(0.50个/ml vs.0.00个/ml,P0.05)。依据CT影像学的实性成分比(CTR)进行亚组分析发现,恶性病变组和良性病变组的CTC计数在纯磨玻璃影(p GGO)结节组的差异有统计学意义(1.00个/ml vs.0.00个/ml,P0.05),而在部分实性结节组和纯实性结节组差异无统计学意义。CTC计数鉴别p GGO结节良恶性的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.833,显著高于最大标准化摄取值(SUVmax,P0.001),其灵敏度和特异度分别为80.0%和83.3%。结论基于多肽的CTC纳米磁珠检测对p GGO结节具有鉴别诊断能力,作为一种有潜力的肺部良恶性结节无创、无辐射鉴别方法,有很好的应用前景。     

环孢素A和他克莫司对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生物学行为的影响

目的 研究环孢素A(CsA)和他克莫司(Tac)对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生长及凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 用肺癌A549细胞建立Balb/c小鼠移植瘤模型,分为3组实验.对照组,不给予任何免疫抑制剂;CsA组,腹腔注射CsA;Tac组,腹腔注射Tac.根据各组小鼠瘤体积变化绘制移植瘤生长曲线,根据终末瘤质量计算影响率.以细胞侵袭实验研究各组小鼠肺癌细胞迁移能力的改变.用细胞凋亡原位末端标记法检测细胞凋亡情况.荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肿瘤细胞凋亡抑制基因(Bcl-2)mRNA和肿瘤细胞凋亡促进基因(Bax) mRNA的表达.结果 CsA组和Tac组移植瘤增长迅速,质量和体积均高于对照组(P＜0.05),2组的影响率分别为19％(P＜0.05)和25％(P＜0.05).CsA组和Tac组肿瘤细胞的迁移能力均明显高于对照组(P＜0.01,P＜0.01).对照组肿瘤凋亡指数为(0.049±0.008)％,CsA组为(0.009±0.001)％,Tac组为(0.007±0.001)％,对照组高于CsA组和Tac组(P＜0.05,P＜0.05).与对照组相比较,CsA组和Tac组肿瘤细胞中Bcl-2 mRNA的表达较高(P＜0.05),Bax mRNA的表达较低(P＜0.05).结论 CsA和Tac对裸鼠体内移植的肺癌A549细胞的生长均有促进作用,会增强肿瘤细胞的侵袭力,其机制可能与影响肿瘤细胞凋亡相关.     

纳米羟基磷灰石介导靶向hTERT的RNA干扰可有效抑制人肺癌A549细胞增殖

目的 探讨纳米羟基磷灰石(nHAP)介导靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)的RNA干扰对人肺癌A549细胞的影响.方法 采用均相沉淀法制备nHAP.分为nHAP-PLL组、脂质体组、nHAP组及对照组,分别配制转染复合物并转染人肺癌A549细胞.MTT法测定细胞生长活力;Western Blot检测hTERT蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 nHAP-PLL组、脂质体组与nHAP组的A549细胞增殖受到抑制,较对照组差异有统计学意义(P<0.05);nHAP-PLL组抑制细胞增殖较脂质体组及nHAP组明显,差异均有统计学意义(P<0.05).各组的hTERT蛋白表达的变化趋势与人肺癌A549细胞的增殖情况一致.流式细胞仪检测nHAP-PLL组、脂质体组及nHAP组均有不同程度的细胞凋亡,凋亡率与对照组差异有统计学意义,P<0.05.结论 nHAP本身能诱导人肺癌A549细胞凋亡,经PLL修饰后能有效地结合保护DNA并介导人肺癌A549细胞的基因转染,介导靶向hTERT的RNA干扰可有效抑制人肺癌A549细胞增殖.     

英夫利昔单抗联合miRNA-21抑制剂对肺癌A549细胞的影响

目的探讨英夫利昔单抗联合miRNA-21抑制剂对肺癌A549细胞的影响。方法体外培养A549细胞, 随后将其分为4组(空白组、英夫利昔组、miRNA-21 inhibitor组和联合处理组)。CCK-8实验检测细胞增殖情况;流式细胞术实验检测细胞凋亡情况;Western blot检测蛋白表达。结果 miRNA-21 inhibitor组和联合处理组A549细胞存活率分别为(48.67%±2.83%), (25.69%±1.98%), 差异有统计学意义(P<0.001);miRNA-21 inhibitor组和联合处理组中A549凋亡细胞比例分别为(46.73%±2.18%), (76.58%±3.67%), 差异有统计学意义(P<0.001);凋亡相关蛋白检测中联合处理组的Caspase-3(1.21±0.26 vs 0.57±0.07)和Bad(1.08±0.11 vs 0.52±0.06)的表达量与miRNA-21 inhibitor组相比显著升高, Bcl-2(0.11±0.02 vs 0.32±0.06)的表达量显著降低, 差异有统计学意义(P<0.001);...     

Notch信号通路在肺癌干细胞中的表达及其对增殖的影响

目的 观察Notch信号通路在肺癌干细胞中的表达及阻断Notch信号通路对肺癌干细胞增殖的影响.方法 以CD133作为肿瘤干细胞表面标志,采用流式细胞仪高速分选技术从人肺腺癌细胞株A549中分离肺癌干细胞及普通肿瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞内的Notch信号通路的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖能力,并绘制生长曲线;使用γ-分泌酶抑制剂(DAPT)阻断Notch信号通路传导,观察肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外生长差异.结果 流式分选前检测CD133阳性细胞(肺癌干细胞)占所有A549细胞的百分比为(0.40±0.11)％,而流式分选后所得细胞中,CD133阳性细胞占百分比为(95.00±0.63)％,两者差异有统计学意义(P＜0.01).Notch通路在肺癌干细胞及普通肿瘤细胞中均表达,Notch1及Notch2在肺癌干细胞中的表达显著低于在普通肿瘤细胞内的表达,差异有统计学意义(P ＜0.05);Hes1仅在普通肿瘤细胞中表达,在肺癌干细胞中未检测到表达.肺癌干细胞与普通肿瘤细胞的增殖能力差异无统计学意义(P＞0.05),而在DAPT干预48 h后,肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖均受到了抑制,肺癌干细胞的生长抑制率[(33.7±1.9)％]显著高于普通肿瘤细胞的生长抑制率[(21.5±3.4)％],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 较之普通肿瘤细胞,阻断Notch通路传导对肺癌干细胞的生长抑制效果更强,这可能与DAPT抑制了Notch的过高表达对肺癌细胞的负反馈作用有关.     

纳米免疫磁珠联合巢式PCR检测胰腺癌患者外周循环微转移的意义

目的:建立一种检测胰腺癌患者外周血循环微转移的有效方法。方法:用人胰腺癌细胞株PANC-1与正常人外周血单核细胞(PBMC)以不同比例混合,用EpCAM抗体的纳米免疫磁珠对各比例组进行阳性分选,分离富集出肿瘤细胞,用巢式RT-PCR(RT-nest-PCR)检测细胞中端粒酶亚催化单位(h-TERT)和c-met的表达,以确定该检测方法的敏感度;用以上纳米免疫磁珠联合RT-nest-PCR方法检测25例胰腺癌患和15例良性病患者PBMC中h-TERT和c-met的表达,并分析两者与胰腺癌患者临床病理因素的关系。结果:纳米免疫磁珠联合RT-nest-PCR法检测h-TERT和c-met的敏感度分别为1个肿瘤细胞/1×107个PBMC和1个肿瘤细胞/1×106个PBMC。良性疾病组h-TERT及c-met基因表达率均为0(0/15),胰腺癌组h-TERT和c-met基因表达率分别为100%(25/25)和80%(20/25),且c-met阳性表达率与肿瘤分期有关(P<0.05)。结论:免疫磁珠联合RT-nest-PCR法检测h-TERT和c-met是发现胰腺癌外周血循环微转移的高敏感度方法。     

血管内皮生长因子-C和人表皮因子受体2共沉默对人肺腺癌细胞生物学行为的影响

目的 观察靶向血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、人表皮因子受体2(HER2/neu)基因的小干扰RNA(siRNA)转染对肺腺癌细胞株A549生物学行为的影响.方法 构建靶向VEGF-C、HER2/neu的siRNA表达质粒,转染A549细胞,Transwell小室检测细胞体外侵袭能力,噻唑蓝(MTY)比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术测定凋亡率.结果 siVEGF-C组、siHER2/neu组、共转染组的细胞侵袭数分别为(42.76±2.87)、(47.10±3.63)、(40.50±3.21),显著低于阴性对照组(61.00±2.48,P＜0.01);转染48 h生长抑制率分别为(19.77±1.15)%、(22.98±2.13)%、(41.27±0.51)%,显著高于阴性对照组(4.99±0.14)%(P＜0.01);转染48 h肿瘤细胞凋亡率分别为(10.8±1.8)%、(11.7±1.5)%、(20.2±3.4)%,显著高于阴性对照组(2.6±0.7)%(P＜0.01).与单独一种siRNA转染比较,联合转染肿瘤细胞生长抑制率增加(P＜0.01),凋亡率增加(P＜0.01).结论 靶向VEGF-C、HER2/neu的siRNA转染后可以显著降低A549细胞侵袭能力,抑制增殖,诱导细胞凋亡,共转染后对增殖和凋亡影响更显著.     

顺铂联合唑来膦酸对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制

目的 观察顺铂联合唑来膦酸对肺癌A-549细胞增殖的影响并探讨其作用机制.方法 以噻唑蓝(MTT)比色法观察顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的影响,以Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNA损伤检查点蛋白调节因子1(MDC1)mRNA的表达.结果 顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的抑制率(39.16±4.94)％高于顺铂(16.87±2.50)％、唑来膦酸(19.66±4.57)％;联合用药诱导A549细胞的凋亡率(32.30±0.50)％较顺铂(23.90±2.46)％、唑来膦酸(18.87±3.04)％上升;联合用药后A549细胞MDC1 mRNA的相对表达水平(0.134 ±0.037)较顺铂(0.356±0.033)、唑来膦酸(0.208 ±0.040)下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 顺铂、唑来膦酸可抑制肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡;顺铂联合唑来膦酸抑制A549细胞的增殖具有协同作用;其协同作用可能与下调MDCl mRNA表达有关.     

抑制骨桥蛋白表达对肺癌侵袭、增殖的影响

目的 观察抑制骨桥蛋白(OPN)表达对肺癌细胞株A549侵袭、增殖的影响.方法 构建针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR~(TM)/U6-INF(pINF-1)及对照质粒pENTR~(TM)/U6-CTR(pCTR),将其转染A549细胞.Western blot测定OPN的表达;噻唑蓝(MTY)比色法检测A549增殖力;Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变.结果 与空白对照组(1.23±0.16)比较,转染72 h后pINF-1组OPN蛋白表达(0.17±0.07)下降85%;转染 pINF-1后,A549细胞增殖力下降56%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Matrigel实验示,与空白对照组(72.4±6.5)比较,转染pINF-1组细胞穿过人工基底膜的数量(15.2±2.8)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01).结论 pINF-1可以特异性抑制肺癌细胞株A549中OPN的表达,可显著降低其侵袭力和增殖.     

肺腺癌A549细胞CD133~+CD44~+表型在裸鼠体内成瘤能力的研究

目的 探讨肿瘤标志物CD133和CD44的表达与人肺腺癌A549细胞株在裸鼠体内形成肿瘤能力的关系.方法 使用单细胞克隆的方法 ,筛选出能够持续增殖分裂的肿瘤细胞,应用免疫荧光方法 和流式细胞仪检测CD133和CD44在具有增殖分裂能力的A549细胞和普通A549肿瘤细胞的表达情况;按表达结果 对A549细胞进行分组,应用单克隆方法 对各组细胞进行培养,并按不间密度注射于裸鼠皮下,观察各个组别的成瘤能力.结果 (1)在倒置显微镜下观察肿瘤细胞生长情况,发现多数细胞死亡,1周后仅有4.11%的细胞能够增殖分裂形成克隆.(2)具有增殖分裂能力肿瘤细胞的免疫荧光结果 :CD133阳性率为19.0%,CD44阳性率为57.0%;普通A549肿瘤细胞免疫荧光结果 :CD133阳性率为2.5%,CD44阳性率为34.0%;具有分裂增殖能力的肿瘤细胞CD133和CD44阳性表达率显著高于普通A549肿瘤细胞(P<0.01).(3)裸鼠体内成瘤能力实验提示:CD133~+CD44~+(A组)细胞成瘤能力显著高于CD133~-CD44~-(B组)、CD133~-CD44~+(C组)和CD133~+CD44~-(D组)细胞(P<0.05);裸鼠瘤块病理检查证实均为腺癌,各脏器检查未发现转移:在接种CD133~+CD44~+(A组)细胞的瘤块组织中发现除了有CD133~+CD44~+细胞外,还有CD133~-CD44~-细胞.结论 肺腺癌A549细胞株中CD133~+CD44~+细胞在裸鼠体内的成瘤能力显著高于其他细胞.     

非小细胞肺癌循环肿瘤细胞的定量检测

目的 探讨非小细胞肺癌循环肿瘤细胞(CTCs)定量检测方法 .方法 CD45免疫磁珠阴性分选组20例,CD326免疫磁珠阳性分选组25例,均为明确诊断的非小细胞肺癌患者.磁性分离富集后肺静脉与外周静脉血标本应用多参数流式细胞仪对CTCs进行定量检测.结果 阴性分选由于只能去除CD45阳性细胞,回收目的 细胞纯度低.阳性分选组中25例术中肺静脉血CTCs定量检测阳性率为64%(16/25),外周静脉血CTCs阳性率40%(10/25,P＜0.05).结论 免疫磁珠富集联合流式细胞分析检测CTCs的敏感性和特异性较高.     

氧化苦参碱对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察氧化苦参碱(OXY)对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响并探讨其机制.方法 噻唑蓝(MTT)法测定OXY对A549人肺癌细胞活力的作用.流式细胞术测定A549细胞凋亡率.荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Westem blot方法测定OXY对A549细胞B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax) mRNA和蛋白表达的影响.Western blot方法测定OXY对A549细胞的细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、p38丝裂原活化激酶(p38MAPK)、磷酸化ERK(p-ERK)、p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达的影响.结果 OXY可抑制A549细胞增殖.与对照组[(5.63±0.76)％]比较,OXY组细胞凋亡率[(13.26±2.15)％]上升(P＜0.01);与对照组(1.02±0.27、0.23±0.04)比较,OXY组bax mRNA(1.61±0.19)和蛋白(0.71±0.10)表达上升(P＜0.05,P＜0.01);与对照组比较(0.94 ±0.14、0.64±0.09),OXY组bcl-2mRNA(0.42±0.05)和蛋白(0.21±0.04)表达下降(P＜0.01).与对照组(0.29±0.03)比较,OXY组p-JNK表达水平(0.66 ±0.06)明显升高(P＜0.01),其他蛋白表达均无明显变化.与OXY组(0.66±0.07、0.28±0.03、0.65±0.08)比较,同时给予OXY和p-JNK抑制剂SP600125组bax蛋白表达(0.39±0.05)下降,bcl-2表达(0.50±0.08)上升,p-JNK蛋白(0.26 ±0.04)表达下降(P＜0.01).结论 OXY碱可诱导A549细胞凋亡,可能与升高p-JNK水平有关.     

敲除NET-1基因对肺癌细胞行为和肿瘤生长的影响

NET-1基因是新近报道的肿瘤相关分子基因,与肿瘤细胞增殖、迁移、浸润相关.我们通过靶向性短发卡RNA( shRNA)敲除肺癌A549细胞中NET-1基因的表达,研究其对A549细胞癌生物学行为的影响,进一步制备荷人肺腺癌裸鼠移植瘤模型,观察沉默NET-1基因后对裸鼠体内肿瘤生长的影响,探讨肺癌中NET-1基因表达的意义. 一、材料与方法 将NET-1基因的shRNA真核表达载体转染A549细胞,实时定量聚合酶链反应( RT-qPCR)、Western blot法分别检测细胞内NET-1 mRNA和蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞仪分别检测增殖与不同周期细胞百分比;     

信号转导与转录激活因子3下调DNAJB6在肺癌生物学行为中的机制

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中信号转导与转录激活因子3(STAT3)与DNA结合蛋白B6(DNAJB6)的关系及铁死亡对NSCLC生物学行为的影响。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞增殖试验和细胞划痕实验对非小细胞肺癌细胞系A549和H1650进行细胞增殖能力检测。通过慢病毒转染A549和H1650细胞系, 检测NSCLC细胞的迁移和侵袭能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测NSCLC细胞系A549和H1650各项靶蛋白的表达, 组间比较采用t检验, 多组比较采用方差分析。结果 Western blot结果显示在膜上约80 kDa处, 肿瘤组织蛋白条带较正常相邻组织颜色更深(P<0.01)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析结果显示, 肿瘤组织中STAT3/DNAJB6 mRNA与GAPDH mRNA的比值高于正常相邻组织(1.184±0.168比0.378±0.136)差异有统计学意义(P<0.01)。CCK-8实验结果, 在24、48、72、96 h时, STAT3组的NSCLC细胞系A549增殖率比相应对照组高[(1.000±0.01...     

微小RNA-296-3p靶向Notch2对非小细胞肺癌迁移及侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miR)-296-3p靶向Notch同源物2(Notch2)对非小细胞肺癌(NSCLC)迁移及侵袭的影响。方法收取南通市第一人民医院胸外科2022年4月至2023年3月间手术的50例, 50～65岁间的肺腺癌患者的癌及癌旁组织, 其中男30例, 女20例, 术后病理均无淋巴结及远处转移, 应用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测上述组织中miR-296-3p的表达。利用慢病毒构建miR-296-3p过表达的A549/miR-296-3p, 对照组为A549/miRNA。利用Transwell实验检测miR-296-3p过表达对A549细胞迁移及侵袭的影响;通过蛋白质印迹法(Western blot)检测各组A549细胞中Notch2的表达。利用双荧光素酶报告实验验证Notch2是否为miR-296-3p的靶基因。组间数据比较采用t检验。结果 qRT-PCR结果提示, miR-296-3p在非小细胞肺癌癌旁组织中的表达水平(4.215±1.600)显著高于癌组织(1.931±0.700), 差异有统计学意义(t=9.539, P<0.01)。在细胞层面...     

Omi/HtrA2短发夹siRNA对肺癌细胞凋亡的影响

目的检测肺癌组织中促凋亡因子Omi／HtrA2的表达,观察Omi／HtrA2的短发夹状小干扰RNA(shRNA-Omi／HtrA2)载体对肺癌细胞生长的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测50例非小细胞肺癌和10例正常肺组织中Omi／HtrA2的表达;将shRNA-Omi／HtrA2载体转染至人肺腺癌细胞株A549,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测其对Omi／HtrA2转录和表达的下调作用,流式细胞术检测Omi／HtrA2下调后A549细胞凋亡的变化。结果Omi／HtrA2在非小细胞肺癌中的表达明显高于正常肺组织(P<0．05)。shRNA-Omi／HtrA2载体能显著抑制A549细胞Omi／HtrA2基因的表达(88％)。转基因组细胞经顺铂处理后凋亡率为(13．00±0．98)％,显著低于对照组的凋亡率(24．00±1．08)％(P<0．05)。结论Omi／HtrA2的高表达参与肺癌的发展,Omi／HtrA2短发夹siRNA可抑制A549细胞的凋亡。     

dsRNA激活PTEN基因对肺癌细胞生物活性的影响

目的 探讨双链RNA分子(dsRNA)促进肺癌细胞中PTEN基因表达后,肺癌细胞生物活性的改变.方法 根据前期研究结果,利用针对PTEN基因启动子区域非CpG岛序列的dsRNA,将其转染入肺癌肿瘤细胞A549和H292,绘制生长曲线,探讨转染后细胞增殖变化通过Transwell小室法检测侵袭能力,以及通过流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果 A549和H292细胞转染特异dsRNA分子后,与未经转染的细胞相比,PTEN基因mRNA表达量可增至4倍,但细胞的增殖、侵袭能力无显著变化.与对照组比,较多细胞停留于G1期.结论 dsRNA分子激活后可以增加PTEN基因表达,但对于其细胞功能并无显著影响.     

非小细胞肺癌循环肿瘤细胞的定量检测意义

目的 探讨定量检测非小细胞肺癌病人肺静脉和外周静脉血循环肿瘤细胞与临床分期、治疗及预后监测的相关性.方法 选择25例非小细胞肺癌病人,10例良性肺疾病者(对照组)、健康志愿者10位.经CD326免疫磁珠阳性分选富集循环肿瘤细胞(CTCs)标本后,行CK-FITC、CD45PE荧光抗体标记,应用多参数流式细胞仪对CTCs进行定量检测.结果 25例非小细胞肺癌病人术中肺静脉血CTCs定量检测阳性率为64%(16/25例),明显高于外周静脉血CTCs阳性率40%(10/25例)的水平(P<0.05);Ⅰ期13例中外周血CTCs阳性3例(23.0%),肺静脉血CTCs阳性8例(61.5%).结论 非小细胞肺癌CTCs水平的定量检测是较为敏感的肿瘤进展、治疗反应和预后预测的评价指标;免疫磁珠富集联合流式细胞分析技术检测CTCs的敏感性和特异性较高,具有一定的临床应用前景.     

载顺铂的纳米羟基磷灰石对A549肺腺癌细胞体外胀亡的影响

目的探讨载顺铂的纳米羟基磷灰石对体外培养的人肺腺癌细胞A549增殖及胀亡的影响。方法用机械融合法制备载顺铂的纳米羟基磷灰石粒子,将肺腺癌A549细胞暴露于该粒子中培养。进行形态学观察,MTT法检测载顺铂的纳米羟基磷灰石粒子体外作用于人肺癌A549细胞的量效和时效关系,流式细胞仪分析细胞周期的时相变化。结果载顺铂的纳米羟基磷灰石粒子在体外对人肺癌A549细胞系具有明显的抑制作用,并呈现良好的量效和时效关系。肺癌细胞的生长阻滞于G2/M期,细胞体积增大,胞质空泡化,染色质凝集,胞浆溶解。结论载顺铂的纳米羟基磷灰石粒子具有体外抗肺腺癌系A549的作用,细胞增殖阻滞于G2/M期,阻断细胞周期的进展,导致癌细胞溶解坏死,诱导细胞凋亡是其可能的机制之一。