支气管内超声引导针吸活检术在肺内病变诊断中的应用

目的 探讨支气管内超声引导针吸活检术(EBUS-TBNA)在明确邻近大气道肺内占位诊断中的应用价值.方法 回顾性分析2009年9月至2011年9月,33例常规气管镜等检查未能明确诊断的影像学可疑肺癌患者,为明确肺内邻近大气道病变诊断接受EBUS-TBNA.对于经EBUS-TBNA检查后未能明确恶性诊断者,进一步接受胸腔镜或开胸手术确证.结果 33例经EBUS-TBNA检查后明确肺部恶性病变29例,其中非小细胞肺癌25例,小细胞肺癌4例;4例患者穿刺细胞及组织病理学检查无明确恶性证据,其中3例经电视胸腔镜或开胸手术证实为鳞癌,1例经胸腔镜手术证实为肺内炎性病变.本组EBUS-TBNA在大气道旁肺实质内占位中诊断的敏感性、特异性和准确性分别为90.2％、100.0％和90.9％,阳性预测价值和阴性预测价值分别为100％和25％.所有患者检查耐受良好,无任何相关并发症发生.结论 对于邻近大气道临床可疑肺癌的肺内病变,EBUS-TBNA具有较高的诊断价值.     

胸腔镜胸腺扩大切除术治疗重症肌无力的疗效观察及影响因素分析

目的对胸腔镜胸腺扩大切除术治疗重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的疗效进行总结,分析影响MG手术疗效的因素。方法回顾性研究我院2000年6月～2009年10月47例MG接受胸腔镜手术的临床资料,采用单因素分析和logistic回归模型对患者性别、年龄、病程、MGFA分型、胸腺病理类型等可能影响因素进行分析。结果 45例完成随访,随访16～111个月,平均51个月。根据MGFA提出的治疗后状况分类:完全稳定缓解占64.4%(29/45),药物缓解占17.8%(8/45),微小症状表现占8.9%(4/45),恶化占2.2%(1/45),复发占4.4%(2/45),死亡占2.2%(1/45)。年龄(β=0.059,P=0.027,OR=1.060,95%CI为1.007～1.117)和胸腺病理类型(β=1.558,P=0.025,OR=4.750,95%CI为1.214～18.584)是影响手术疗效的因素。结论 MG行电视胸腔镜下胸腺扩大切除术疗效满意,年龄和胸腺病理类型是手术疗效的影响因素。     

应用EpCAM/PAN-CK荧光标记流式细胞术检测肿瘤浸润淋巴细胞中肿瘤细胞残留的研究

作为新兴的肿瘤免疫治疗管线之一，过继性细胞免疫疗法(adoptive cell therapy/ACT)已日趋成熟；其中最直接的手段是从实体瘤组织中提取靶向性与特异性俱佳的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte/TIL),经体外激活、扩增和优化后回输患者而达到安全、有效的临床疗效。具体的TIL工艺流程除了要保证淋巴细胞的充分扩增(数量)和免疫学活性(质量)以外，还需要解决肿瘤细胞残留问题。虽然在TIL培养过程中肿瘤细胞因为营养成分的相对缺乏和淋巴细胞的持续攻击而逐渐凋亡，在理论上不能完全排除癌细胞残留的可能性。为充分解决这一切实问题，本研究比较、分析了多种有关肿瘤细胞残留的检测方法，并根据灵敏度、可靠性、器材要求和检测效率等参数综合权衡利弊，最后将流式细胞术作为优选方案，并在检测肿瘤细胞系和源自乳腺癌患者和肺癌患者的TIL产品(N=60)时得到进一步验证。这一方法依赖荧光标记的特异性抗体有效识别上皮细胞普遍携带的标志物，即泛细胞角蛋白(pan-cytokeratin);其检测灵敏度<0.05%,而且有进一步提升空间，因此可以作为今后TIL和同...     

电视胸腔镜手术治疗食管平滑肌瘤

目的探讨电视胸腔镜手术治疗食管平滑肌瘤的安全性和可行性。方法1996年9月～2009年2月共施行电视胸腔镜食管平滑肌瘤摘除术49例。手术通过3～4个胸壁小切口完成,镜下剥离摘除食管平滑肌瘤操作与开胸手术基本相同。结果42例在胸腔镜下顺利完成手术,7例中转开胸（2例因胸膜腔致密粘连,3例因肿瘤〈1.0cm,胸腔镜下无法定位,2例因肿瘤较大并与食管黏膜粘连紧密）。手术时间平均90min（50～210min）,肿瘤长径平均3.7cm（0.5～10.0cm）,无严重并发症及手术死亡。43例随访1～73个月,平均27.1月,无复发。结论电视胸腔镜食管平滑肌瘤摘除术安全可靠,可替代大部分常规开胸手术。     

dsRNA介导的PTEN基因表达上调及其与启动子区甲基化的关系

目的 观察以启动子区非CpG岛序列为靶点的dsRNA促进PTEN基因的表达,并探讨RNAa现象对PTEN基因启动子区DNA甲基化的影响.方法 将与PTEN基因启动子区非CpG岛DNA序列互补的双链RNA分子(dsPTEN) 转染入A549和H292肺癌细胞中,采用real-time聚合酶链反应(PCR)检测PTEN的表达,筛选能够促进PTEN基因表达的有效dsRNA序列.通过甲基化特异性PCR(MSP)产物测序,检测dsRNA转染前后启动子区甲基化程度的变化.结果 经多条dsRNA分别转染肺癌细胞,证实针对PTEN基因-57到-38的序列(dsPTEN2-2)转染H292肺癌细胞后出现PTEN基因表达的明显上调,上调最高达5.1倍(与对照dsRNA比较,P<0.05),证实了RNAa现象的存在;使用5-Aza处理后的A549和H292细胞与空白组比较CpG点甲基化明显减少(5±3比10±4、6±3比9±3,P均<0.05),而转染PTEN2-2 dsRNA后的两个细胞株CpG点甲基化情况与未转染组比较无明显变化(9±2比10±4、9±3比9±3,P均>0.05).结论 dsRNA可以促进PTEN基因表达的上调,RNAa现象并不改变PTEN基因启动子区甲基化程度.

Abstract：

Objective To evaluate the phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) gene activation induced by double-standed RNA (dsRNA) in lung cancer cell line and its correlation with CpG island methylation in the promoter region. Methods Specific dsRNA complementary to the non-CpG island sequence in the promoter of PTEN gene was designed and transfected into H292 and A549 cell lines, and the expression of PTEN mRNA was determined by real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR). The methylation status of the CpG island in the promoter region was tested by DNA sequencing on the bisulfate modified DNA. Results By testing several dsRNA sequences targeting promoter region of PTEN, a dsRNA named PTEN2-2 (target on -57 to -38 of the PTEN) was identified, which could upregulate the PTEN expression by 5.1 times at most (P<0.05, controlled with the dsControl). Epigenetic analysis of PTEN promoter region confirmed DNA hypermethylation. PTEN2-2 dsRNA transfection turned on the expression of PTEN without affecting the methylation status of promoter DNA (9±2 vs 10±4, 9±3 vs 9±3, both P>0.05), as the DNA methyltransferase inhibitor did (5±3 vs 10±4, 6±3 vs 9±3, both P<0.05). Conclusion The expression of PTEN mRNA could be enhanced by inducing the dsRNA into the cells, but no evidence was found that dsRNA could affect the methylation status of the CpG island in the promoter region of this gene.     

全胸腔镜下肺叶切除手术的扶镜技巧

目的探讨全胸腔镜下肺叶切除手术中扶镜手的作用以及扶镜技巧。方法 2006年9月～2010年4月,我们完成全胸腔镜下肺叶切除术329例。通过胸部3个小切口非直视下完成肺叶解剖性切除,恶性肿瘤行淋巴结清扫。施行右肺上叶切除84例,右肺中叶切除32例,右肺下叶切除65例,左肺上叶切除73例,左肺下叶切除66例,联合肺叶或全肺切除9例。结果全部患者手术均顺利,因淋巴结干扰、出血或肿瘤体积大等原因而中转开胸27例。手术时间（194.5±60.1）min（75～490 min）,术中出血量中位数200 ml（20～1800 ml）。术后胸腔闭式引流时间（7.4±3.4）d（1～22 d）,术后住院时间（10.2±4.5）d（1～36 d）。无严重并发症发生,无围手术期死亡患者。结论全胸腔镜下肺叶切除手术中扶镜手需要熟知手术步骤,了解术者操作习惯,实时调节镜头焦距和角度,以配合术者进行手术。     

全胸腔镜肺叶切除术中血管的处理

全胸腔镜肺叶切除术在国内真正开展还不到3年.其中很重要的原因就是镜下操作技术尚不熟练,对血管的处理心存忌惮.现总结我们关于血管处理的顺序、技巧及出血时处理的经验报道如下.     

全胸腔镜肺叶切除手术操作流程及技巧的优化:北京大学人民医院经验

目的 总结北京大学人民医院全胸腔镜肺叶切除手术的操作流程和技巧的优化改进经验.方法 2006年9月至2010年8月连续开展全胸腔镜肺叶切除手术408例,男214例,女194例,平均年龄58.6岁.实体肿瘤平均最大径30.1 mm.手术采用双腔气管插管全身麻醉,健侧单肺通气.胸腔镜观察口选择第7或8肋间腋后线,长1.5 cm;辅助操作切口选择在肩胛下角线第7或8肋间,长1.5 cm;主操作口选择在第4或第5肋间腋前线,长约4 cm,无需放置开胸器,不牵开肋骨.全部操作过程完全在胸腔镜下完成.术者位于病人前侧,双手分别握持吸引器和电凝钩,在主操作口内进行操作;助手位于病人背侧,使用卵圆钳经辅助操作口帮助牵拉显露.基本操作顺序与传统开胸肺叶切除相同.肺癌病人均清扫纵隔淋巴结:肿瘤位于右侧,清扫2、4、3A、3P、7、8、9、10组淋巴结;左侧清扫3、5、6、7、8、9、10组淋巴结,必要时清扫第4组淋巴结.结果 全组手术顺利,围手术期死亡1例,无严重并发症发生.平均手术时间195 min,平均术中出血249 ml.术后病理良性疾病86例,恶性疾病322例.全组中转开胸35例,中转开胸率8.6%.术后轻微并发症48例,并发症发生率11.8%.术后平均带胸管时间7.9天,术后平均住院天数10.9天.结论 全胸腔镜肺叶切除手术操作难度较高,开展此项手术应具备5个方面条件:(1)较清晰的胸腔镜设备,(2)良好的术野显露,(3)熟练的镜下血管解剖分离技巧,(4)能将血管和支气管置入缝合切开器内,(5)纵隔淋巴结清扫技术.掌握正确的操作流程及一些关键技巧,可以缩短学习曲线.     

全胸腔镜肺叶切除治疗支气管扩张症

目的探讨全胸腔镜下肺叶切除治疗支气管扩张症的安全性、可行性和有效性。方法回顾性分析我中心2007年4月～2009年11月完成的24例全胸腔镜肺叶切除手术治疗支气管扩张症的临床资料。全胸腔镜下解剖性肺叶切除,不牵开肋骨,以切割缝合器分别处理肺血管和支气管。如遇严重粘连或出血等则中转开胸手术。记录手术时间、出血量、术后带管时间以及并发症等。结果全组中2例(8.3%)因为胸腔内粘连重,叶间裂分化差或肺门处严重粘连并有大量迂曲扩张的血管,镜下处理困难而中转开胸行VATS辅助小切口手术。余22例在全胸腔镜下完成,肺切除范围包括右肺上叶1例,右肺中叶1例,右肺下叶3例,左肺上叶2例,左肺下叶13例,左肺下叶+左肺上叶舌段1例,左肺下叶+右肺中叶1例。手术时间(173.6±57.1)min(80～280min),出血量(173.9±65.9)ml(50～300ml),术后带管时间(6.1±3.8)d(2～19d),术后住院时间(8.6±3.9)d(4～22d)。术后病理均符合支气管扩张症改变。无围手术期死亡。并发症4例,均为肺持续漏气7d,引流7～19d后自愈拔除胸腔引流管。全组随访1～31个月,平均13.7月,其中13例12个月。15例(62.5%)术后咳痰或咯血症状完全消失,7例(29.2%)痰量明显减少,但仍间断有咳痰或咯血等症状。2例(8.3%)咯血量或痰量较前无明显变化。结论全胸腔镜肺叶切除术是治疗支气管扩张症的一种安全有效的方法 。     

支气管内超声引导针吸活检术（EBUS-TBNA）临床应用的初步体会

目的探讨支气管内超声引导针吸活检术（endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration,EBUS-TBNA）在明确纵隔和肺门肿大淋巴结定性诊断中的应用价值。方法2009年9~11月,对25例胸部CT检查提示纵隔和（或）肺门淋巴结肿大（短径〉1 cm）进行EBUS-TBNA检查,阴性者进一步接受纵隔镜检查或胸腔镜、开胸手术加以确证。结果本组25例共穿刺32组淋巴结。EBUS-TBNA明确淋巴结恶性转移者15例;EBUS-TBNA阴性者10例,其中1例开胸术后证实隆突下淋巴结转移。EBUS-TBNA在纵隔和肺门肿大淋巴结良恶性鉴别诊断中的敏感性、特异性和准确性分别为94%（15/16）,100%（9/9）和96%（24/25）。所有患者检查耐受良好,无任何相关并发症发生。结论EBUS-TBNA是评价纵隔及肺门淋巴结安全有效的方法。