IgG和IgE介导的免疫反应在旋毛虫病免疫机理中的作用

【目的】探讨IgG和IgE依赖中性粒细胞(Neu)和单核细胞(Mon)介导的细胞毒效应杀伤旋毛虫肌幼虫的免疫机理。【方法】以雄性Wistar大鼠为旋毛虫病实验动物模型,在动态检测不同感染时相大鼠血清中IgE、IgG的基础上,应用体外培养法观察经不同温度和时间处理的免疫血清对大鼠血液中Neu和Mon杀伤旋毛虫肌幼虫作用的影响。【结果】大鼠在感染旋毛虫后2~3周,血清中的总IgE和特异性IgE达最高值;总IgG和特异性IgG在5周达高峰。体外培养48 h后,Neus和Mons对旋毛虫肌幼虫的杀伤率分别为42.1%和23.2%。【结论】大鼠感染旋毛虫后,其血清中总IgE与特异性IgE及总IgG与特异性IgG同步增加。当免疫血清存在时,感染鼠和非感染鼠的Neu和Mon均具有杀伤旋毛虫肌幼虫的作用,但感染鼠的作用更强。Neu和Mon在发挥杀伤旋毛虫肌幼虫的作用时,主要依赖的是IgG。     

旋毛虫感染小鼠IL-4、IL-5的表达及嗜酸性粒细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

【目的】探讨感染旋毛虫小鼠嗜酸性粒细胞（Eosinophil,Eos）在体外对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用及脾细胞中IL-4和IL-5的表达。【方法】制作旋毛虫感染小鼠模型,采用体外培养法,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入感染旋毛虫小鼠外周血提取的Eos、旋毛虫肌幼虫、血清（对照血清或经不同条件处理的血清）及含有10%灭活小牛血清的PRMI1640培养液,连续培养2d。显微镜下,在12、24、48h等时相观察小鼠Eos对旋毛虫肌幼虫的影响;用RT-PCR方法检测感染旋毛虫小鼠脾脏中IL-4、IL-5的mRNA含量,观察这两种细胞因子的表达情况。【结果】在体外培养的条件下,单纯Eos对旋毛虫肌幼虫无杀伤作用,在免疫血清参与下,Eos对幼虫的杀伤作用明显增强,在灭活IgE前后,Eos的杀伤作用明显改变,在灭活补体和IgE后Eos的杀伤作用明显减弱,与单纯Eos的情况无差别。感染组小鼠脾脏中IL-4和IL-5mRNA的含量均明显高于对照组。【结论】Eos对旋毛虫肌幼虫杀伤的过程需要免疫血清的参与,且IgE是Eos发挥ADCC效应所依赖的重要免疫球蛋白,IgG可能在Eos发挥ADCC效应的过程中并没有明显作用。感染旋毛虫小鼠脾脏细胞IL-4和IL-5表达量明显升高。     

IgE在小鼠旋毛虫感染急性期免疫反应中的作用

目的观察感染旋毛虫小鼠IgE水平的动态变化及其抗体依赖细胞介导的细胞毒效应(antibody-dependent cell cytotoxicity,ADCC),并通过IL-4、IL-5的表达测定,探讨IgE在旋毛虫感染小鼠急性期免疫反应中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法,分别检测感染旋毛虫后7、14、21、28、35、60d小鼠外周血中总IgE水平,同时用间接ELISA法测定特异性IgE水平,采用体外培养法做IgE介导嗜酸性粒细胞对旋毛虫肌幼虫的体外杀伤实验,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入感染旋毛虫小鼠外周血提取的嗜酸性粒细胞(Eos)、感染鼠血清及感染鼠的旋毛虫肌幼虫与含有10%灭活小牛血清的RPMI-1640培养液,共培养2d。显微镜下,分别在12、24、48h观察小鼠Eos对旋毛虫肌幼虫的影响,另外,用RT-PCR方法观察感染旋毛虫小鼠脾脏中IL-4、IL-5的mRNA含量,观察这两种细胞因子的表达情况。结果实验组较对照组总IgE水平增高,在14、21d达到高峰(P0.01),第3周后逐渐下降,特异性IgE在14和21d组与对照组比较差异有统计学意义(P0.01),阳性率达88.9%。在体外培养的条件下,单纯Eos对旋毛虫肌幼虫无杀伤作用,在免疫血清参与下,Eos对幼虫的杀伤作用明显增强,灭活IgE后,Eos的杀伤作用明显减弱,与单纯Eos的情况无差别。感染组小鼠脾脏中IL-4和IL-5mRNA的含量均明显高于对照组。结论血清中IgE抗体参与了旋毛虫急性期的免疫,主要作用为快速排出肠道内的旋毛虫脱囊幼虫,Eos对旋毛虫肌幼虫杀伤的过程需要IgE的参与,且IgE是Eos发挥ADCC效应所依赖的重要免疫球蛋白,感染旋毛虫小鼠的IL-4和IL-5表达量明显升高,故说明IgE是小鼠旋毛虫感染急性期重要的抗体。     

中性粒细胞、免疫血清及补体对体外培养旋毛虫幼虫杀伤作用的研究

目的：了解中性粒细胞对旋毛虫是否有杀伤作用。方法：用体外培养方法观察了小鼠腹腔中性粒细胞、中性粒细胞与免疫血清及补体对旋毛虫新生幼虫的杀伤作用。结果与结论：单纯中性粒细胞或其与正常血清对幼虫无杀伤作用；中性粒细胞在抗体及补体参与下，对幼虫杀伤作用明显增强；感染鼠和正常鼠中性粒细胞在抗体参与下对幼虫均有杀伤能力。     

单核细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

【目的】探讨单核细胞对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用。【方法】用体外培养法观察了大鼠单核细胞、免；赃清及补体对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用。【结果】单纯单核细胞或免疫血清对旋毛虫肌幼虫均无明显杀伤作用；在抗体及补体参与下，单核细胞对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用显增强。【结论】单核细胞在IgG类抗体及补体的协同下，具有杀伤旋毛虫肌幼虫的作用。     

中性粒细胞,免疫血清及补体对体外培养旋毛虫幼虫杀伤作…

目的：了解中性粒细胞对旋毛虫是否有杀伤作用。方法，用体外培养方法观察了小鼠腹腔中性粒细胞，中性粒细胞与免疫血清补体对旋毛虫新生幼虫的杀伤作用。     

旋毛虫感染大鼠血清中IgE水平的动态观察

【目的】观察感染旋毛虫大鼠IgE水平的动态变化 ,探讨IgE在大鼠旋毛虫感染急性期免疫机理中所起的作用。【方法】采用双抗体夹心ELISA法 ,分别检测感染旋毛虫后 7、 14、 2 1、 2 8、 35、 6 0d大鼠外周血中总IgE水平 ,同时用间接ELISA法测定特异性IgE ,并做了特异性肥大细胞脱颗粒实验。【结果】实验组较对照组总IgE水平增高 ,在 14、 2 1d达到高峰 (P <0 0 5 ) ,第 3w后呈逐渐下降 ;特异性IgE在 14和 2 1d组与对照组有显著差异 (P <0 0 1) ,阳性率达 88 9%。实验组特异性肥大细胞脱颗粒实验与对照组有显著差异 (P <0 0 5 ) ,阳性率达 6 6 7%。【结论】血清中IgE抗体参与了旋毛虫急性期的免疫 ,主要作用为快速排出肠道内的旋毛虫脱囊幼虫 ,并可致敏肥大细胞 ,使其在旋毛虫幼虫抗原的作用下发生脱颗粒 ,故说明IgE是大鼠旋毛虫感染急性期重要的抗体。     

小鼠中性粒细胞对体外培养日本血吸虫童虫杀伤作用的研究

用体外培养方法,观察了小鼠腹腔中性粒细胞、中性粒细胞与免疫血清、补体等因子对体外机械转变的日本血吸虫童虫的杀份作用。实验结果表明:单纯小鼠中性粒细胞对童虫无杀伤作用;但在抗体及补体参与下,对童虫的杀伤明显增强,提示中性粒细胞与血清免疫因子对童虫的杀伤有协同作用。此外,比较正常小鼠和感染小鼠中性粒细胞对童虫的杀伤能力,比较不同虫龄对中性粒细胞参与的免疫作用的敏感性,证实机械转变童虫孵育24h 后对中性粒细胞参与的免疫杀伤的抵抗力增强(P<0.01)。文中对中性粒细胞依赖抗体、补体对童虫的杀伤机理进行讨论。并提出评价血吸虫细胞免疫标准化问题的意见。     

小鼠感染不同数量旋毛虫后幼虫在鼠体内的发育及分布

目的 :观察小鼠感染不同数量旋毛虫幼虫后 ,幼虫在体内的发育、分布以及密度上的差异。方法 :小鼠随机分组感染不同数量旋毛虫幼虫 ,2 8天、35天后解剖观察鼠体不同组织内幼虫的发育 ,分布以及密度。结果 :旋毛虫在 3组小鼠体内发育情况大体相同 ,幼虫在鼠体膈肌和咬肌中的密度最高。不同动物组感染不同数量旋毛虫后 ,鼠体幼虫密度和分布有明显差异。结论 :研究结果表明 ,较小数量旋毛虫幼虫感染适宜于旋毛虫保种 ,较大数量旋毛虫幼虫感染适合于旋毛虫幼虫的收集及进行旋毛虫病的试验研究。     

间接荧光抗体试验诊断实验性旋毛虫病的研究

本文应用间接荧光抗体试验比较了４种方法制备的旋毛虫幼虫抗原诊断实验性旋毛虫病的效果。结果表明，旋毛虫纯净幼虫冰冻切片抗原优于完整幼虫抗原、超声粉碎幼虫抗原及膈肌幼虫冰冻切片抗原。用此抗原检测感染旋毛虫的大鼠血清时，抗体阳性率为１００％（１３／１３），而１０份正常大鼠血清均为阴性反应。小鼠感染旋毛虫后２周即可检测到抗旋毛虫抗体，阳性率为１１．１１％（１／９），感染后５周抗体阳性率已升到１００％（８／８），升高的抗体滴度可一直持续至感染后第１５周。此抗原在－２０℃至少可保存２．５年而不丧失其活性和特异性。应用滤纸血也可取得满意的检测结果。     

供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的免疫保护作用

目的探讨供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的保护作用及机理。方法对16例高度致敏患者进行配对分组,实验组肾移植术中先予供体脾灌注。前瞻性观察脾灌注对受者群体反应性抗体（penel reactive antibody,PRA）、补体依赖细胞毒性（complement dependent cytotoxicity,CDC）试验、血清补体溶血活性（CH50）、可溶性人类白细胞抗原Ⅰ（soluble human leucocyte antigen-Ⅰ,sHLA-Ⅰ）以及术后早期移植肾排斥反应和移植肾功能的影响。结果供体脾灌注40min后,患者的PRA、CDC和CH50较灌注前显著降低,血清sHLA-Ⅰ浓度显著增加。对照组肾移植术后发生超急性排斥1例,加速性排斥反应3例,急性排斥反应3例。对照组排斥反应严重程度明显较灌注组高（u=2.54,P〈0.05）;对照组排斥反应发生时间为（3.3±2.6）d（中位数3.0d）,脾灌注组为（10.5±6.2）d（中位数8.5d）,组间比较差异具有统计学意义（t=10.46,P〈0.01）;术后近期血肌酐（serumc reatinine,Scr）值显著高于脾灌注组。结论供体脾灌注可以延缓高度致敏患者术后近期移植肾排斥反应的发生,减轻排斥反应强度,改善移植肾功能;其机制可能与供体脾脏特异性吸附受者毒性抗体,消耗血清补体和分泌s HLA-Ⅰ类抗原有关。     

骨髓瘤病人血清某些免疫学性质的研究

本文对21例多发性骨髓瘤病人(MM)和1例巨球蛋白血症(WM)血清Ig、补体C_3、溶菌酶含量及循环免疫复合物(CIC)进行了测定,观察了血清及血中单克隆Ig(M-蛋白)对正常人淋巴细胞功能的影响。本实验的结果表明MM血清功能性Ig、C_3、溶菌酶含量均明显下降;血清CIC阳性率显著高于正常人;血清及M-蛋白对正常人淋转均有抑制作用。上述结果提示,MM血清中某些免疫成分的异常可能对病人机体免疫功能产生影响。     

重组V2毒素延长中性粒细胞的功能性生命期限

目的：揭示V毒素在溶血性尿毒症（HUS）和其他与多源性大肠杆菌（VTEC）相关疾病中的病理性损伤作用。方法：运用流式细胞技术，荧光标记探针－BCECF／AM和细胞色素C还原法测定超氧离子（O2^-）技术。结果：重组V2毒素（rVT2）对中性粒细胞自发性凋亡有着显著性的抑制作用。被rVT2延迟了凋亡的中性粒细胞仍然保留多种生物学活性，如：细胞表面粘附分子的表达（CD62L减少和CD11b/CD18增加），粘附人脐带静脉血管内皮细胞（HUVEC）以及产生超氧离子（O2^-)。结论：V2毒素延长中性粒细胞的功能性生命期限，会加重炎症局部的炎症反应，这可能是HUS和VTEC相关疾病的发生过程中，中性粒细胞介导的组织损伤的一个重要因素。     

Targeted anti-tumor agents and their cytotoxicity on gastric cancer cells in vitro.

Several chemotherapeutic drugs including methotrexate, daunomycin, mitomycin C and toxin such as ricin, A chain of ricin were chosen to conjugate with murine monoclonal antibodies MGb2 and MG11. The drugs were linked to antibody directly or through human serum albumin as intermediary. The ELISA results showed that the antibody retained well the antigen-binding capacity during conjugation. These conjugates showed highly selective cytotoxic effect on target cells. In chronic cytotoxicity tests, the cytotoxic effect of these conjugates on human gastric cancer cells KATOIII was quite similar to that of free drugs or ricin, but greater than that of irrelevant conjugates, while they had a little effect on non-target cells, suggesting that the selective cytotoxicity on target cells of the conjugates be mediated by antibodies.

     

糖尿病病人红细胞C_3b受体免疫粘附活性观察及意义探讨

本文测定了50例糖尿病病人红细胞C_3b受体免疫粘附活性。结果表明,糖尿病病人红细胞C_3b受体免疫粘附活性降低,粘附抗体补体调理的微生物减少,协助清除中性粒细胞吞噬过程中所产生的活性降代谢产物降低,促进中性粒细胞吞噬微生物的作用减弱。