IL—6基因转染的骨髓基质细胞系对骨髓移植小鼠造血功能恢复？…

目的：探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）基因转染的骨髓基质细胞系ＱＸＭＳＣ１ＩＬ－６对骨髓移植后造血功能的重建作用。方法：将骨髓造血细胞和骨髓基质细胞系一起经尾静脉注射给同系小鼠，建立骨髓移植（ＢＭＴ）模型。小鼠的造血功能用脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）、粒－单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）、红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ）测定及外周血各项血液学指标来确定。结果：ＷＸＭＳＣ１ＩＬ－６转基因骨髓基质细胞可明显增强ＢＭ     

用PCR技术评价微量残留白血病细胞体外净化的效果

应用系列稀释法ＰＣＲ技术检测含５％携带ＰＣＲγ基因重排的ＣＣＲＦ－ＣＥＭ株细胞的模拟缓解期白血病骨髓的微量残留白血病细胞，敏感性为１０＾－＾５－１０＾－＾６水平。经ＶＰＬ加ＡＤＭ，Ｖｐ１６，ＶＣＲ联合体外净化１小时，结果显示有３个对数级的杀伤作用。用体外克隆形成培养法观察该联合方案对急性期白血病患者白病祖细胞集落，（ＣＦＵ－Ｌ）及正常骨髓造血干细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）的抑制作用，ＣＦＵ－ＧＭ存活率     

人胎盘无细胞是悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用

为了探讨人胎盘无细胞悬液对骨髓造血干／祖细胞的体外扩增作用及与已知的几种细胞因子进行比较，用人胎盘无细胞悬液及ＩＬ－３，ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＦＰＯ作为刺激因子，并应用甲基纤维素半固体培养体 对骨髓ＧＭ－ＣＦＵ，ＧＭ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ进行了培养和比较，研究结果表明，人胎盘无细胞悬液对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＧＥＭＭ和ＢＦＵ－Ｅ体外扩增最适蛋白浓度是２００－３００μｇ／Ｌ，人胎盘无细胞悬液作刺激因子对骨髓血干／祖细胞的体外扩增效果优于单独ＩＬ－３，单独ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＥＰＯ组。结论提示，人胎盘无细胞悬液可能含有多种细胞因子，用人胎盘无细胞悬液作扩增剂体外扩增骨髓造血干／祖细胞细胸具有有效而价廉的特点。     

长效睾丸酮合并环孢霉素A治疗慢性再生障碍性贫血

目的：探讨进一步提高慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）疗效的方法。方法：长效睾丸酮（ＴＬＤ）单用（１５例）及合用环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）（３０例）治疗ＣＡＡ４５例。按全国统一标准评定疗效，并采用甲基纤维素培养法观察治疗前、后骨髓造血祖细胞水平的变化。结果：ＴＬＤ＋ＣｓＡ组有效率为８３．３％，高于单用ＴＬＤ组的６０．０％，且ＴＬＤ＋ＣｓＡ组有效者骨髓造血祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－ＧＭ）恢复明显优于单用ＴＬＤ组有效者并更为迅速，两组间无效者骨髓ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－ＧＭ水平无明显变化。结论：ＴＬＤ＋ＣｓＡ治疗ＣＡＡ疗效不仅高于单用ＴＬＤ，且其有效者血液学恢复更为完全。     

巨细胞病毒对人骨髓粒-巨噬系祖细胞生长的影响

目的探讨人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）对人骨髓粒巨噬系祖细胞集落（ＣＦＵＧＭ）是否有直接抑制作用。方法采用造血祖细胞体外培养技术,研究病毒株ＨＣＭＶＡＤ１６９对ＣＦＵＧＭ生长的影响,用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测ＣＦＵＧＭ的细胞内ＨＣＭＶＡＤ１６９ＤＮＡ。结果高浓度ＨＣＭＶＡＤ１６９（２×１０６ｐｆｕ／ｍｌ和２×１０５ｐｆｕ／ｍｌ）在体外能明显抑制ＣＦＵＧＭ的生长（Ｐ＜０．０１）,而低浓度（２×１０４ｐｆｕ／ｍｌ）ＨＣＭＶＡＤ１６９则无此作用,ＨＣＭＶＡＤ１６９对骨髓ＣＦＵＧＭ的抑制作用因其浓度的不同而有差异;经ＩＳＰＣＲ检测发现在ＣＦＵＧＭ的细胞核中存在ＨＣＭＶＡＤ１６９ＤＮＡ。结论ＣＦＵＧＭ是ＨＣＭＶＡＤ１６９的宿主细胞之一,ＨＣＭＶＡＤ１６９对骨髓ＣＦＵＧＭ生长的抑制作用与其对ＣＦＵＧＭ的直接感染有关。     

G－CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响

通过对１１例急性白血病患者单独化疗与化疗后加用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的对比，动态观察了Ｇ－ＣＳＦ对外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）的动员作用。发现化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ比单用化疗的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）增加５．１倍，红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）增加４．５倍。Ｇ－ＣＳＦ还可使ＣＦＵ－ＧＭ＞１００／ｍｌ和ＢＦＵ－Ｅ＞２００／ｍｌ的持续时间延长；化疗后ＣＦＵ－ＧＭ的最高值提早出现，而不影响ＢＦＵ－Ｅ／ＣＦＵ－ＧＭ比值。结果表明，化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ可明显提高ＰＢＳＣ的收集效率，Ｇ－ＣＳＦ是一种有效的ＰＢＳＣ动员剂。     

脐血造血祖细胞培养及T淋巴细胞亚群的研究

采用甲基纤维素半固体体外培养法对脐带血造血祖细胞进行研究。人脐带血粒单祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆式集落（ＢＦＵ－Ｅ）含量显著高于成人外周血，也高于骨髓（ＣＦＵ－ＧＭ，Ｐ＜０．０５；ＢＦＵ－Ｅ，Ｐ＜０．０１）。脐血造血祖细胞的出现晚于骨髓，但存活时间较长。在不外加促红细胞生成素时，脐血中有少量ＢＦＵ－Ｅ生成。将两份不同胎儿的脐血细胞混合后培养并与单个胎儿脐血细胞培养相比较，两者在祖细胞生成数量和生长特征方面无明显差别。采用单克隆抗体技术检测脐血中ＯＫＴ＿３，ＯＫＴ＿４，ＯＫＴ＿８阳性率，与成人相比，ＯＫＴ＿３￣＋降低，而ＯＫＴ＿４￣＋，ＯＫＴ＿８￣＋和ＯＫＴ＿４￣＋／ＯＫＴ＿８￣＋与成人相似。     

脐血CD_(34)~ CD_(19)~－细胞与体外培养集落的相关性分析

用两种单克隆抗体（单抗）标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ，ＣＤ＿（３４））用流式细胞仪分析，并比较两种单抗标记的细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和混合集落形成单位的相关性，结果表明脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ阳性的细胞占１．０５１０．７２％，Ｔｕｋ３（纯抗体）阳性细胞占２．０６±１．２５％，差别显著（Ｐ＜０．０５），每μｌ脐血两种单抗标记的细胞分别为９６．５６±５６．６４和２３１．４０±１６３．９３（Ｐ＜０．０５），变异系数依次为５８．４７％和６８．４３％。尽管抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ阳性细胞与阳性细胞数量呈显著正相关，但前者与ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｍｉｘ以及ＣＦＵｓ（ＣＦＵ－ＧＭ＋ＢＦＵ－Ｅ＋ＣＦＵ－Ｍｉｘ）均呈正相关，而后者仅与ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵｓ呈正相关。研究结果提示在检测造血祖细胞时，用抗ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ代替可降低假阳性，获得较好的细胞与ＣＦＵ间的线性关系。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者T淋巴细胞对造血祖细胞的影响

目的：研究阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者的Ｔ淋巴细胞对造血祖细胞的影响。方法：将ＰＮＨ患者外周血制备的植物血凝素刺激的Ｔ淋巴细胞条件培养液（ＰＨＡＴＣＭ）加入造血祖细胞的培养基中，用于ＰＮＨ患者和正常人骨髓的粒巨噬细胞系集落形成单位（ＣＦＵＧＭ）和红系爆式集落形成单位（ＢＦＵＥ）的培养。结果：在含有初发ＰＮＨ患者的ＰＨＡＴＣＭ培养条件下，ＰＮＨ患者和正常人骨髓ＣＦＵＧＭ和ＢＦＵＥ数明显低于含有正常人ＰＨＡＴＣＭ培养条件下的集落数；在含有好转和治愈的ＰＮＨ患者的ＰＨＡＴＣＭ培养条件下，正常人骨髓ＣＦＵＧＭ和ＢＦＵＥ数增加和恢复到正常范围。结论：初发ＰＮＨ患者的Ｔ淋巴细胞对造血祖细胞的支持作用减弱，治愈的ＰＮＨ患者的Ｔ淋巴细胞对造血祖细胞的支持作用恢复正常     

纤维连结蛋白,粘附抗原和造血祖细胞

纤维连结蛋白（ＦＮ）是广泛存在于多种细胞表面、基质及血浆中的一种糖蛋白，在细胞粘附、迁移、分化及成熟中的作用已有较多研究。但ＦＮ与髓系祖细胞分化成熟的关系研究尚少。除ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ皆能和ＦＮ分子中ＲＧＤ短肽相结合外，最近发现，原始造血祖细胞（ＬＴＢＭＣ－ＩＣ）多向造血祖细胞（ＣＦＵ－ＭＩＸ）、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－ＧＭ还能和ＦＮ分子肝素结合片段中的“ＣＳ１”多肽结合     

严重型再生障碍性贫血患者骨髓和外周血 HLA-DR~ T 细胞的变化及其淋巴细胞造血抑制活性的研究

目的：进一步阐明免疫紊乱在严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）发病中的作用。方法：对１３例初诊ＳＡＡ、７例抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）治疗后恢复期ＳＡＡ（ｒＳＡＡ）患者骨髓和外周血及对照组（包括９名骨髓对照和１１名外周血对照）的ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞进行检测，并对部分患者和对照组刺激的外周血去单核细胞的单个核细胞培养上清液（ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ）的造血活性进行检测。结果：初诊ＳＡＡ患者骨髓及外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者骨髓和外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞较初诊ＳＡＡ下降，但仍高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＳＡＡ患者骨髓内ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于外周血（Ｐ＜０．００１）；与对照组比较，初诊的ＳＡＡ患者外周血ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ具有显著的抑制作用（Ｐ＜０．００１），而ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用明显减弱。结论：ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞在ＳＡＡ的发病中可能发挥重要的作用。     

G—CSF对化疗后外周血干细胞动员作用的影响

通过对１１例急性白血病患单独化疗与化疗后加用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的对比，动态观察了Ｇ－ＣＳＦ对外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）的动员作用。发现化疗后加用Ｇ－ＣＳＦ比单用化疗的粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）增加５．１倍，红系式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）增加４．５倍。Ｇ－ＣＳＦ还可使ＣＦＵ＞１００／ｍｌ和ＢＦＵ－Ｅ＞２００／ｍｌ的持续时间延长；化疗后ＣＦＵ－ＧＭ的最高值提早出现，而     

小鼠c-kit~＋Sca-1~＋和c-kit~＋Sca-1~－细胞代表不同分化阶段的造血干／祖细胞

为深入研究造血干细胞（ＨＳＣ）的生物学功能，根据表面标志，采用流式细胞仪分离和富集了小鼠骨髓中两类不同特征的ＨＳＣ亚群ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋和ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞。体外集落培养表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞对ＩＬ－３或ＧＭ－ＣＳＦ单独刺激无反应，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则可形成大小不等的细胞集落。多种造血生长因子［ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ＋干细胞生长因子（ＳＣＦ）］联合可诱导ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞形成大的细胞集落，但在培养１２天时尚无ＢＦＵ－Ｅ和粒、单核、红和巨核系细胞集落（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）形成；而同样条件下，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞可形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ以及其它各类集落。体内实验表明ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞在培养８天时无脾集落（ＣＦＵ－Ｓ）形成，与ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞显著不同（Ｐ＜０．０１）。相反，ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞包含了骨髓造血重建活性细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则缺乏。结果提示ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１＋细胞为早期的具重建长期造血功能的干细胞，而ｃ－ｋｉｔ＋Ｓｃａ－１－细胞则为相对分化后期的造血祖细胞。     

紫外线照射对恶性肿瘤患者粒—单造血祖细胞集落形成和细胞活？…

目的 研究短波紫外线照射对恶性肿瘤患者粒－单造血祖细胞集落形成和细胞活力的影响。方法 应用０．５０、１００,３００、４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２的ＵＶＣ照射应用干细胞生长因子动员后白细胞外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）,观察７ｄ后粒－单系造血祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）以及于ＵＶＣ照射后１,３,５,７ｄ观察细胞活力。结果 ５０,１００,２００,４００,８００ｍＪ／ｃｍ＾２ＵＶＣ照射后ＣＦＵ－ＧＭ集落个     

化疗药物与细胞因子协同作用引起小鼠T淋巴瘤细胞凋亡

本实验旨在了解化疗药物和细胞因子协同作用对细胞凋亡的影响。在培养的小鼠Ｔ淋巴瘤ＲＭＡ细胞系中加化疗药物地塞米松（ＤＥＸ）、足叶乙甙（ＶＰ１６）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）及维甲酸（ＡＴＲＡ）以及培养细胞中先分别与细胞因子ＩＬ－２,ＩＬ－６和ＧＭ－ＣＳＦ共同培养后再加入上述药物,观察对引起细胞凋亡的影响。四种化疗药均能抑制ＲＭＡ细胞增殖,ＤＥＸ,ＶＰ１６和Ａｓ２Ｏ３可以诱导细胞凋亡,单独使用ＡＴＲＡ不     

基因重组干扰素γ体外对骨髓增生异常综合征患者造血祖细胞的…

对基因重组干扰素γ（ＩＦＮ－γ）体外对３２例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者造血祖细胞的作用进行了研究，结果如下：①ＭＤＳ患者ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ明显低于对照组，ＣＦＵ－Ｅ减低者占３０／３２例，ＣＦＵ－ＧＭ减低者占３１／３２例。②ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ患者ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的促增殖作用与患者自身集落数有关，在自身集落数正常和稍减低者这种作用最明显，在明显减低者这种作用小甚至为０。④上海和日本     

黄芪多糖对小鼠粒巨噬系祖细胞的影响

本文观察了黄芪多糖对小鼠ＣＦＵ－ＧＭ生成的影响，结果显示，剂量２０ｍｇ／ｋｇ的黄芪多糖连续注射三天，能提高小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的生成（Ｐ〈０．０５），而１００ｍｇ／ｋｇ的剂量则抑制ＣＦＵ－ＧＭ的生成（Ｐ〈０．０１），注射环磷酰胺（ＣＴＸ）后小鼠ＣＦＵ－ＧＭ生成受抑，与ＣＴＸ同步一次性注射黄芪多糖１００ｍｇ／ｋｇ，或２０ｍｇ／ｋｇ的剂量连续注射三天，均不能逆转抑制作用，只有黄芪多糖１００ｍｇ／ｋｇ连续注     

IL-2和(或)IL-3重组腺病毒直接体内注射对大剂量化疗后小鼠造血功能恢复的影响

目的：检测应用直接腹腔注射白细胞介素２（ＩＬ－２）重组腺病毒和（或）白细胞介素３（ＩＬ－３）重组腺病毒方法对化疗后小鼠造血功能恢复的影响。方法：正常小鼠腹腔注射大剂量环磷酰胺（２００ｍｇ／ｋｇ）２４小时后，直接腹腔注射ＩＬ－２重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－２）和（或）ＩＬ－３重组腺病毒（Ａｄ－ＩＬ－３），用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测相应细胞内细胞因子ｍＲＮＡ，并持续观察小鼠外周血白细胞、股骨单个核细胞、骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的恢复情况。结果：腹腔注射Ａｄ－ＩＬ－２和（或）Ａｄ－ＩＬ－３组小鼠腹腔细胞可测及相应细胞因子ｍＲＮＡ，血清中可测及相应细胞因子；腹腔注射Ａｄ－ＩＬ－３组小鼠外周血白细胞、股骨单个核细胞、骨髓ＣＦＵ－ＧＭ最低值均显著提高（Ｐ＜０．０５），但腹腔注射Ａｄ－ＩＬ－２组小鼠对化疗后小鼠造血功能无明显影响，联合应用Ａｄ－ＩＬ－２和Ａｄ－ＩＬ－３与单独应用Ａｄ－ＩＬ－３相比无显著性差异。结论：腹腔直接注射Ａｄ－ＩＬ－３能促进化疗后小鼠造血功能的恢复。     

小鼠骨髓程序移植的实验研究

目的：探讨进一步提高骨髓移植效果的新方法。方法：以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了骨髓程序移植后小鼠活存率及造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的观察。结果：骨髓程序移植可使小鼠移植细胞数降至１０５数量级，活存率达３０％；骨髓程序移植４×１０６个细胞时，于照射后１７天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数显著回升，ＣＦＵＥ、ＣＦＵＧＭ、ＣＦＵＳ、ＣＦＵＦ已达正常，ＧＶＨＤ较一次移植１×１０７骨髓细胞组轻，活存率达６０％，显著高于一次骨髓移植组（３０％）。结论：骨髓程序移植可能充分利用了每次腾出的“龛位”，增加干细胞植入，却减少了移植细胞数，减轻了ＧＶＨＤ，提高了移植效果，是一种较好的移植新方法     

尼尔雌醇对荷瘤小鼠造血细胞放射损伤的保护作用

研究尼尔雌醇对荷瘤小鼠造血细胞放射损伤的保护作用及作用机制，结果表明，尼尔雌醇可提高经６Ｇｙ全身照射荷瘤小鼠外周血白细胞数，骨髓及脾脏有核细胞数及造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）产率；荷瘤小鼠应用尼尔雌醇后血清造血刺激因子（ＣＳＦ）活性，骨髓细胞表面Ｇ－ＣＳＦ受体表达均高于对照组，骨髓ＣＦＵ－Ｓ中的Ｓ期细胞的比例亦增高。