鲨肝活性肽对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨鲨肝活性肽(sHSS)对对乙酰氨基酚(AAP)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法用AAP(200 mg·kg^-1,ip)诱导小鼠急性肝损伤,用改良赖氏法测血清ALT和AST,通过光镜和电镜观察肝细胞显微和亚显微结构的变化,用流式细胞仪分析肝细胞凋亡,同时用RT-PCR方法分析Fas mRNA表达水平。结果sHSS 3.0和1.5 mg·kg^-1可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST的水平;改善模型鼠肝组织细胞坏死及炎症反应;高剂量sHSS(3 mg·kg^-1)对肝线粒体具有保护作用,下调Fas mRNA的表达水平,并具有抗凋亡作用。结论sHSS对AAP诱导的肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与保护肝线粒体、抑制Fas基因表达及肝细胞凋亡有关。     

白花蛇舌草总黄酮的免疫调节作用

目的　研究白花蛇舌草总黄酮(FOD)的免疫调节作用。方法　通过测定小鼠脾细胞IgM抗体形成,脾淋巴细胞的增殖反应,小鼠血清IL- 2和IFN -γ含量以及观察对小鼠白细胞数量的影响,研究白花蛇舌草总黄酮的免疫调节作用。结果　白花蛇舌草总黄酮(15、30、60mg·kg-1 )促进免疫功能低下小鼠由ConA或LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应,并提高小鼠血清IL 2和IFN -γ的含量;白花蛇舌草总黄酮(60mg·kg-1 )促进免疫功能低下小鼠脾脏IgM抗体形成,并升高抗肿瘤药物(环磷酰胺或阿糖胞苷)所致的小鼠白细胞减少。结论　白花蛇舌草总黄酮具有增强机体特异性免疫功能和非特异性免疫功能的作用。     

豹皮樟总黄酮对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的研究豹皮樟总黄酮(litsea coteana total flavone,LCTF)对环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)诱导的免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法以Cy50mg·kg-1ip给药,每天1次,连续2d,诱导小鼠免疫低下模型,采用碳廓清试验、溶血素生成试验、二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发性超敏反应,观察LCTF对免疫低下小鼠非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫的影响。结果碳廓清试验,LCTF(200、400mg·kg-1)组可提高Cy致免疫低下小鼠的吞噬指数α值和廓清指数K值,提高免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能;溶血素试验,LCTF(100、200mg·kg-1)组能提高免疫低下小鼠血清IgM和IgG的生成,LCTF(100、200、400mg·kg-1)能增加免疫低下小鼠脾细胞溶血素的产生;LCTF(200、400mg·kg-1)组可明显促进免疫低下小鼠DTH反应,LCTF(100、200、400mg·kg-1)能提升CD4+、CD8+细胞数以及CD4+/CD8+比值,并能提高脾淋巴细胞生产IL-2含量。结论以上结果表明,LCTF通过广泛刺激小鼠的特异性及非特异性免疫应答,对免疫低下小鼠的免疫功能有良好的增强作用。     

rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 ,并参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗银屑病动物的作用     

白芍总甙的免疫调节作用及机理

本文报道TGP的免疫调节作用,并探讨其作用机理。TGP 5 mg·kg~(-1)·d~(-1) ip 5～8 d对Cy诱导的小鼠DTH反应增高或降低呈反向调节,也可拮抗Cy诱导的小鼠溶血素生成量下降,表现出双向调节特征。TGP本身无有丝分裂原样作用,但终浓度45和450 ng/ml可促进ConA诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖;同样浓度还可促进NDV诱导的人脐血白细胞产生IFNα,TGP的这种免疫增强作用可能是其体内向上恢复免疫功能的机理之一。TGP 5～10 mg·kg~(-1)·d~(-1) ip 4～8 d对DXM抑制小鼠溶血素的生成及DTH反应无明显拮抗作用,同时TGP还可使正常小鼠和DXM处理的SRBC致敏小鼠血浆CS水平下降。     

姜黄素具有抑制血管生成与诱导肿瘤细胞凋亡双重作用

目的　探讨姜黄素的抗肿瘤机制。方法　采用鸡胚绒毛尿囊膜模型观察姜黄素对血管生成的影响 ;利用培养的肿瘤细胞SMMC 772 1,采用电子显微镜及流式细胞仪观察姜黄素诱导SMMC 772 1细胞凋亡的作用。结果　姜黄素能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜内的血管生成 ,2 0 μmol·L-1的姜黄素即可诱导SMMC 772 1细胞凋亡。结论　姜黄素的抗肿瘤机制是多方面的 ,既可抑制血管生成又可诱导肿瘤细胞凋亡     

沙苑子黄酮抗裸鼠人肝癌移植瘤的实验研究

目的观察沙苑子黄酮(ACF)对人肝癌细胞SMMC7721裸鼠移植瘤生长的影响。方法30只裸小鼠建立人肝癌SMMC7721细胞皮下移植瘤模型后随机分为模型组、环磷酰胺(CTX,25mg·kg-1)组、ACF-1(400mg·kg-1)、ACF-2(200mg·kg-1)和ACF-3(100mg·kg-1)5组,给予相应药物,观察肿瘤生长曲线和移植瘤重量,计算肿瘤抑制率;免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)在肿瘤组织中的表达;光镜和电镜观察肿瘤组织病理变化。结果ACF-1组和ACF-2组裸鼠肿瘤体积和重量明显降低,ACF各给药组平均抑瘤率分别为68.20%、41.19%、26.79%;ACF-1组和ACF-2组肿瘤组织PCNA表达率明显减少(P<0.01,P<0.05);病理学观察结果,ACF可引起SMMC7721细胞坏死,诱导SMMC7721细胞凋亡。结论ACF可抑制SMMC7721裸鼠移植瘤的生长,其作用可能与下调肿瘤组织PCNA表达和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

白芍总苷对小鼠系统性红斑狼疮样改变的保护作用

目的　观察白芍总苷 (TGP)对空肠弯曲菌CJ S13 1诱导的小鼠SLE样改变的保护作用。方法　采用空肠弯曲菌CJ S13 1和CFA混合免疫动物 ,诱导小鼠SLE样改变。结果　TGP 5 0 ,10 0 ,2 0 0mg·kg-1·d-1× 2 8d ,ig能部分或完全拮抗血清IgG型自身抗体水平的升高 ,抑制ConA及LPS诱导的淋巴细胞增殖反应的增强和IL 1生成的增多。结论　一定剂量的TGP对小鼠SLE样改变具有一定的保护作用     

木瓜总苷抑制小鼠接触性超敏反应及对其胸腺T淋巴细胞亚型的调节作用

目的　探讨木瓜总苷对小鼠接触性超敏反应 (CHS)的影响及部分机制。方法　采用了 2 ,4 二硝基氟苯 (DNFB)诱导小鼠CHS模型 ,采用流式细胞术检测小鼠胸腺T淋巴细胞亚型 ,MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖 ,ConA诱导的胸腺T淋巴细胞培养上清中TGF β1和IL 4水平检测采用ELISA法 ,IL 2活性检测采用活化的小鼠脾细胞MTT比色法。结果　于初次致敏前 5d灌胃木瓜总苷 6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1和阳性对照药阿克他利 12 0mg·kg-1,连续给药 10d。木瓜总苷 2 4 0mg·kg-1可降低CHS小鼠脾指数和胸腺指数、木瓜总苷 6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1均可降低CHS小鼠耳肿胀度、抑制ConA诱导的脾T淋巴细胞过度增殖 ;木瓜总苷 2 4 0mg·kg-1可降低CHS小鼠胸腺异常增高的CD4 + CD8+ 亚型T淋巴细胞比例、恢复降低的CD4 + CD8-亚型T淋巴细胞比例 ;木瓜总苷 6 0、2 4 0mg·kg-1可恢复CHS小鼠低下的CD4 -CD8-亚型T淋巴细胞比例。同时 ,木瓜总苷还可有效抑制ConA诱导的CHS小鼠胸腺T淋巴细胞培养上清液中的TGF β1和IL 2水平 ,并对同一培养上清液中的IL 4水平也有提高作用。结论　木瓜总苷对小鼠CHS有明显抑制作用 ;可有效抑制过度的脾T淋巴细胞增殖 ,调节小鼠胸腺T淋巴细胞亚群和细胞因子产生平衡     

固本养血口服液药效学研究

目的:研究固本养血口服液对环磷酰胺(CTX)致小鼠免疫和造血系统抑制的影响。方法:采用CTX腹腔注射(50mg·kg-1)复制免疫抑制小鼠模型,同时给予不同剂量的固本养血口服液,以贞芪扶正胶囊作对照,分别进行外周血细胞、免疫器官质量、血清溶血素的测定。结果:87.3g·kg-1剂量的固本养血口服液能够提高CTX致免疫抑制小鼠的白细胞(WBC)、淋巴细胞(L)、中性粒细胞(N)、血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素水平;26.3g·kg-1剂量的固本养血口服液能提高CTX模型小鼠的WBC、N、Hb、RBC、PLT、脾脏指数、血清溶血素水平;7.96g·kg-1剂量的固本养血口服液能提高CTX模型小鼠的WBC、N、血清溶血素水平。结论:固本养血口服液能够增强CTX所致免疫抑制小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能,对CTX所致造血功能低下有显著促进恢复作用。     

鸡枞菌多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的探讨鸡枞菌多糖(TAP)对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法以黄芪多糖(APS)为阳性对照,用不同剂量的TAP对免疫抑制小鼠进行腹腔注射,检测其腹腔巨噬细胞吞噬功能,免疫器官指数、血清溶血素、T淋巴细胞亚群、细胞因子、脾淋巴细胞增殖等免疫指标。结果 TAP在5～20 g.L-1浓度范围内不同程度增强巨噬细胞吞噬功能及提高免疫器官指数,且有剂量依赖性;20 g.L-1TAP可明显降低免疫低下小鼠CD4+/CD8+比值,并使IL-2、IFN-γ水平分别上升312.3%和88.1%,同时降低IL-4水平;TAP能明显提高脾淋巴细胞增殖能力。结论 TAP可提高免疫抑制小鼠体液及细胞免疫功能,且效果优于APS。     

Jaceosidin inhibits contact hypersensitivity in mice via down-regulating IFN-γ/STAT1/T-bet signaling in T cells

In the present study, we aimed to investigate the immunosuppressive activity of jaceosidin, a flavone isolated from Artemisia vestita, on T lymphocytes both in vitro and in vivo, and further explore its potential molecular mechanism. Jaceosidin exerted a significant inhibition on the T cell proliferation and activation induced by concanavalin A (Con A) in a concentration-dependent manner and it also inhibited the secretion of the proinflammatory cytokines such as IL-2, TNF-α and IFN-γ of activated T cells. Further study showed that jaceosidin down-regulated STAT1 activation and T-bet expression in activated T cells. Moreover, in order to investigate the immunosuppressive effect of jaceosidin in vivo, the picryl chloride (PCl)-induced ear contact dermatitis model was performed on BALB/c mice. Jaceosidin significantly ameliorated PCl-induced ear swelling in a dose-dependent manner, which was due to its inhibition of the STAT1/T-bet signaling pathway. In summary, these findings suggest that jaceosidin exerts its immunosuppressive effect both in vitro and in vivo through inhibiting T cell proliferation and activation, which is closely associated with its potent down-regulation of the IFN-γ/STAT1/T-bet signaling pathway.     

参芪扶正注射液对肝癌细胞株H22的抑制作用及机制研究

目的研究参芪扶正注射液体内外对肝癌H22细胞的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测参芪扶正注射液体外对H22细胞增殖的影响;利用H22小鼠模型进行体内抗肿瘤作用试验,计算抑瘤率;酶联免疫ELISA法测荷瘤小鼠血清IFN-γ含量;双抗体夹心ABC-ELSA法测荷瘤小鼠血清TNF-α的含量。结果参芪扶正注射液体内外均能抑制H22细胞的生长,具有浓度和时间依赖性;促进荷瘤小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的表达。结论参芪扶正注射液体内外均能抑制肝癌H22的生长,其抗肿瘤作用与调节荷瘤小鼠的免疫功能有关。     

人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应

目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR鉴定后用MTT法、Ho-echst染色和流式细胞术检测CHO细胞表达的rhIL-24诱导A549人肺腺癌细胞凋亡的抗肿瘤效应,用ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6和IFN-γ的功能。结果经双酶切和PCR鉴定,重组真核表达载体构建正确,人IL-24在CHO细胞中获得稳定表达,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及上调免疫细胞表达IL-6和IFN-γ的免疫刺激活性。结论人IL-24基因的稳定表达和抗肿瘤效应的实验研究,为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。     

Fas抗体对体外培养的气道上皮细胞凋亡增殖的影响

目的观察Fas抗体、白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的气道上皮细胞(AEC)凋亡、增殖的影响。方法分离培养兔的AEC,加入IL-1β与不同浓度的Fas抗体共同孵育,以流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶介导脱氧三磷酸核苷缺口标记技术(TUNEL)法检测AEC凋亡的变化,以免疫细胞化学法检测AEC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达程度。结果随Fas抗体浓度(500,1000ng/ml)增加,PCNA表达阳性率逐渐增高,分别为(49.7±6.7)%和(57.0±1.9)%,IL-1β组和IL-1β+Fas抗体(500ng/ml)组PCNA表达阳性率为(72.2±5.9)%和(44.6±8.0)%,以上各实验组与对照组表达阳性率[(36.5±2.1)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.05),各加Fas抗体组与单加IL-1β组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Fas抗体能够有效地诱导正常和炎症状态下原代AEC发生凋亡,IL-1β能有效地增强AEC的增殖作用,Fas抗体可以有效抑制IL-1β所致AEC的增殖作用,可能对抑制气道炎症和气道重塑有积极作用。     

Immune responses to novel allergens and modulation of inflammation by vitamin K3 analogue: a ROS dependent mechanism

The possibility of newer allergens being responsible for atopy needs to be explored at regional level due to environmental variables. Current studies were undertaken to identify common environmental allergens causing atopy in a defined population of India and to correlate the presence of various risk factors with the clinical presentation of allergy. Newer allergens like human dander and rice grain dust were identified and reported as the most common cause of atopy in this region. Atopy, elevated serum total IgE and familial tendency, was observed in 88%, 69% and 58% of allergic patients respectively. Further, allergen-specific immune responses like lymphocyte proliferation and cytokine secretion were studied in vitro using peripheral blood mononuclear cells (PBMC) isolated from both allergic and non-allergic individuals. Although, some allergens induced significant lymphocyte proliferation in vitro, allergen-induced cytokine secretion except that of TNF-α was not seen. Significantly higher ratio of secreted IL-4/IFN-γ cytokines was observed in PBMC isolated from allergic subjects in response to PHA. Plumbagin (vitamin K3 analogue) completely inhibited PHA-induced cytokine production in PBMC, in both allergic and non-allergic individuals. Plumbagin modulated the levels of intracellular reactive oxygen species and glutathione and suppressed PHA induced activation of NF-κB in human PBMC. The results thus show in human PMBC, for the first time, the anti-allergic and anti-inflammatory effects of plumbagin and underscore its therapeutic potential.     

核心蛋白聚糖协同白细胞介素24对人外周血单个核细胞作用的体外研究

目的 探讨核心蛋白聚糖(decorin,DCN)联合白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)对人外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖及分泌干扰素γ(Interferon-γ,IFN-γ)的影响.方法 构建重组质粒pcDNA3.1(+)-DCN和pcDNA3.1(+)-IL-24,并利用脂质体将两种质粒转染PBMC.根据转染质粒的不同将PBMC分为空白对照组、脂质体组、空质粒组、DCN组、IL-24组、DCN与IL-24联合组.采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测PBMC的增殖,ELISA测定细胞培养上清中IFN-γ的表达,流式细胞技术检测PBMC表面程序性死亡分子1(PD-1)的表达.采用LSD-t检验进行统计学分析.结果 重组质粒pcDNA3.1(+)-IL-24构建成功.与其他组相比,DCN与IL-24联合能显著提高PBMC增殖率和IFN-γ分泌量,同时也能上调PD-1的表达水平.结论 DCN与IL-24双基因联合在体外能促进PBMC的增殖,并能增强PBMC的功能.     

CpG寡脱氧核苷酶对2型糖尿病患者外周血Th1/Th2型免疫应答的调节作用

目的观察CpG寡脱氧核苷酶(ODN)对2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法将20例T2DM患者和20名健康人PBMC根据刺激物不同分为空白对照组、CpG ODN组(2μmol/L)。用实时足量聚合酶链反应(real time-PCR)法检测PBMC IFN-γmRNAI、L-12 mRNA和IL-10 mRNA的表达。结果T2DM患者PBMC空白对照组IFN-γmRNA和IL-12 mRNA的表达低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10 mRNA的表达与健康人相似(P>0.05)。经CpGODN刺激,IFN-γmRNA和IL-12 mRNA的表达高于空白对照组(P<0.01,P<0.01),但低于健康人(P<0.01,P<0.05),IL-10 mRNA的表达与空白对照组相似(P>0.05),与健康人差异无统计学意义(P>0.05)。结论CpG ODN可促进T2DM人PBMC产生IFN-γ和IL-12,增强Th1型免疫反应。