自制人类免疫缺陷病毒抗体质控参考品的探讨

目的 探讨自制HIV抗体弱阳性质控血清作为室内质控参考品,对抗-HIV检测的结果进行质量控制、评价和分析并考核其稳定性,提高人类免疫缺陷综合征(AIDS)筛查的实验室检测质量.方法 采用阳性对照品自制临界的弱阳性血清,作为室内质控参考品.结果 依据HIV抗体弱阳性的标准,经20次试验检测确定按照1 ∶6稀释度(含HIV-1抗体)和1 ∶8稀释度(含HIV-2抗体)制备室内质控参考品,其质控参考品吸光度值/临界值(s/co)分别为2.58和2.62,变异系数分别为4.65%和4.32%.结论 自制HIV抗体室内质控参考品对HIV筛查实验室进行质量控制是经济、有效并值得推广的.     

加样时间对酶联免疫吸附测定室内质控的影响

目的探讨加样时间长短对酶联免疫吸附测定(ELISA)室内质控的影响。方法使用质控品和100例全阴血清标本,利用不同加样时间进行实验。结果HBsAg、HBsAb、HBeAg室内质控品加样后立即加酶与15min、30min、60min后加酶比较标本吸光度/临界值(S/CO)值差异有显著性(P<0.05)。结论加样时间对ELISA的特异性没有影响,但对室内质控S/CO值和变异系数产生影响。     

用保鲜膜封板混匀可减少ELISA试验假阳性结果

部分检验项目 EL ISA试验结果判断标准的局限性 ,以HBs Ag为例 ,Cutoff值 =阴性对照吸光度值× 2 .1,阴性对照吸光度值小于 0 .0 5时按 0 .0 5计算 ,而操作随机误差很容易造成假阳性结果。在我们实际工作中经常发现强阳性标本测定孔的周围孔有低吸光度值的假阳性结果 (复检证实 ) ,尤其是实习生、进修生进行 EL ISA操作初期 ,经分析原因多为混匀时用力过大 ,孔内液体外溅造成。保鲜膜透明且稍有黏性 ,可直接观察到孔内液体运动情况 ,而部分试剂盒中备用封片均不透明。我们尝试用保鲜膜封板 (孔 )后混匀 ,效果非常满意 ,可有效减少因标…     

艾滋病病毒抗体检测外部质控参考品制备和应用

目的 制备艾滋病抗体检测的外部质控参考品,以保证艾滋病筛查实验室的检测质量.方法 用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清稀释阳性对照的方法 ,经过国产试剂检测,制备出弱阳性标本的质控参考品,并绘制质控图.结果 根据HIV抗体弱阳性的标准,确定按照1:8稀释度制备外部质控血清,其质控物吸光度值/临界值(S/CO)为2.54,变异系数为15.2%.结论 自行制备的HIV抗体弱阳性标本质控参考品用于HIV筛查实验室的质量控制和评价是经济可行的.     

透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达

目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果　AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论　透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。     

华支睾吸虫病快速诊断试剂盒质量控制10年分析

目的：建立华支睾吸虫病快速诊断试剂盒的质量控制体系，并以此对试剂盒进行质量监控。方法：建立了由200份确诊病人血清混合而成的阳性质控品和由200份非流行区健康人血清混合而成的阴性质控品，确定了包括对阳性质控品和阴性质控品的检测标准。结果：对10年104批次共101万人份的诊断试剂盒进行了监测，阳性质控品和阴性质控品的平均吸光度值分别为0．444和0.066，总阳性质控品和总阴性质控品变异系数分别为7．60％和10．72％。结论:华支睾吸虫病快速诊断试剂盒具有高度的敏感性、特异性和稳定性，质量监测体系也是一种性能可靠、行之有效的质量控制方案。     

灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响

目的　探讨灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响。方法　将 2级SD大鼠分为对照组 (A组 )、低氧组 (B组 )和低氧 灯盏花素组 (C组 ) ,低氧时间为 4周。采用透射电镜、免疫组织化学和原位杂交等方法研究灯盏花素对慢性低氧大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、平均颈总动脉压 (mCAP)、肺细小动脉超微结构、肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ型胶原和Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的影响。结果　 1.B组mPAP显著高于A组 (P <0 .0 1) ,C组mPAP显著低于B组 (P <0 .0 1) ;三组间mCAP差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 2 .电镜显示B组肺动脉胶原纤维较A组明显多 ;C组较B组明显少。 3.免疫组织化学显示B组肺细小动脉 (直径 10 0～ 2 0 0 μm)Ⅰ型胶原含量(测平均吸光度值 )较A组明显高 (P <0 .0 1) ,C组较B组低 (P <0 .0 1) ;Ⅲ型胶原平均吸光度值各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。原位杂交显示B组肺细小动脉 (直径 10 0～ 2 0 0 μm)Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值较A组明显高 (P <0 .0 1) ,C组较B组明显低 (P <0 .0 1) ;Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　灯盏花素可预防慢性低氧肺动脉高压的形成及肺动脉管壁胶原的生成和沉积     

自制冻干多项目肿瘤标志物质控品的评价

目的 评价自制冻干多项目肿瘤标志物质控品的可靠性及稳定性.方法 多次重复检测自制冻干多项目肿瘤标志物质控品相关项目,评价瓶间差异、室内差异、室间差异;于2～8℃温度中置0、6、12和18个月,37C中置1周分别评价其稳定性.结果 自制冻干多项目肿瘤标志物质控品外观为乳酪色疏松体,复溶后澄明液体,无异物;瓶间分装差异为0.60％,15个项目的批内最佳条件变异值均小于5.0％;本实验室与其它4家三甲医院实验室对此自制冻干质控品的结果比较差异无统计学意义(P＞0.05);置2～8℃ 0、6、12和18个月结果比较,除CA125 6个月、FER 18个月2项外,其余无统计学差异(P＞0.05);破坏性试验表明自制质控品在37℃存放1周后,结果 比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 自制冻干多项目肿瘤标志物质控品可靠且稳定,能满足肿瘤标志物检测质控的要求.     

标本混匀方式对HIV抗原抗体酶联免疫吸附试验结果的影响

目的 研究标本混匀方式对HIV抗原抗体(HIVAg/Ab)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)结果的影响.方法 使用全自动标本处理系统对北京市红十字血液中心8种类型的标本进行加样,包括4种试剂盒标本(HIV抗原阳性对照品、HIV-1抗体阳性对照品、HIV-2抗体阳性对照品和阴性对照品)、HIV-1标准物质、3种献血者血浆标本(阴性、弱阳性和阳性),根据标本混匀方式分为4组(组1～4分别为加样后抽吸混匀0次、4次、7次、10次,其中组4为对照组).每种标本每组进行72孔重复试验,比较和分析试验有效率和S/CO值差异.结果 除HIV抗原阳性对照品外,其他7种标本的4组试验有效率均为100.0％(72/72).HIV抗原阳性对照品组1～4试验有效率分别为88.9％(64/72)、95.8％(69/72)、100.0％(72/72)和100.0％(72/72).除HIV抗原阳性对照品外,其他7种标本4组试验S/CO差异均无统计学意义(P＞0.05).与组4(6.654)相比,HIV抗原阳性对照品的组1(5.158)和组2(6.368)结果偏低,差异有统计学意义(P＜0.05),组3差异无统计学意义(P＞0.05).结论 实验室应对标本加样后混匀环节进行验证,确保检测结果的准确性.     

溶血对ELISA一步法检测HBsAg阴性结果的影响及抗溶血因素干扰的研究

目的探讨样本溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法检测阴性乙肝表面抗原(HBsAg)结果的影响及抗溶血因素干扰的研究。方法将60例HBsAg阴性的样本人为造成溶血,通过对溶血标本增设试验孔,酶标仪检测该孔的吸光度值(OD值),用溶血标本孔的OD值减去该孔的OD值,比较溶血前后样本OD值的变化差异以及误判率,分析试验孔是否达到抗溶血因素干扰的目的。结果轻度溶血时溶血前后样本OD值差异有显著性(P<0.05),11例假阳性结果均得到纠正,经试验孔纠正后轻度溶血样本孔OD值与溶血前相比较差异无显著性;重度溶血时溶血前后样本OD值差异有高度显著性(P<0.01),7例假阳性结果得到纠正,15例未能纠正,经试验孔纠正后重度溶血样本孔OD值与溶血前相比较差异有高度显著性。结论通过对溶血样本增设一试验孔的方法能纠正轻度溶血时血红蛋白(Hb)对试验结果的干扰,能纠正部分重度溶血时Hb对试验结果的干扰。     

重组人白血病抑制因子的原核表达及优化

目的在大肠杆菌中表达重组人白血病抑制因子(HLIF)蛋白,并探索其高效表达的条件。方法将HLIF重组质粒转化至大肠杆菌BL21,分别给予不同诱导时间(4、8、12、16、20、24 h)、不同浓度大肠杆菌(吸光度值分别为0. 5、0. 6、0. 8、1. 0)、不同诱导温度(20、25、30、37、42℃)、不同浓度诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5 mmol·L-1)、不同浓度乙酸(0. 0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4 mmol·L-1)进行培养,蛋白电泳考马斯亮蓝染色后,采用Image J软件分析HLIF蛋白的相对表达量,观察不同干预条件对HLIF表达的影响。结果不同诱导时间下HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=22. 088,P <0. 05),诱导16 h时的HLIF蛋白相对表达量显著高于诱导4、8、12、20、24 h(P <0. 05)。不同浓度(以吸光度值表示)大肠杆菌诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=17. 153,P <0. 05);吸光度值为0. 8时HLIF蛋白相对表达量显著高于吸光度值为0. 5、0. 6时(P <0. 05),吸光度值为1. 0时与吸光度值为0. 8时HLIF蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。不同温度诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=18. 053,P <0. 05),25℃时HLIF蛋白相对表达量显著高于20、30、37、42℃时(P <0. 05)。不同浓度诱导剂诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(F=1. 181,P> 0. 05)。不同浓度乙酸诱导时HLIF蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=27. 181,P <0. 05),乙酸浓度为0. 00 mmol·L-1时HLIF蛋白相对表达量显著高于乙酸浓度为0. 1、0. 2、0. 3、0. 4 mmol·L-1时(P <0. 05)。结论成功在大肠杆菌表达了HLIF,并探索出了适合最佳表达的诱导时间、大肠杆菌浓度、诱导温度、诱导剂浓度、乙酸浓度等条件。     

新型义齿稳固剂对全口义齿咀嚼效能的影响

目的　评价新型义齿稳固剂对全口义齿的影响。方法　随机选择长期戴用全口义齿的无牙患者 12例 ,制作全口义齿 ,3月后用自身前后对照的方法 ,以花生米作试物 ,分光光度计测定咀嚼后花生米悬浊液的吸光度 ,观察新型义齿稳固剂使用前后吸光度值的变化。结果　数据统计分析表明 ,新型义齿稳固剂使用前后吸光度值的变化有显著性差异 ( P<0 .0 1)。结论　新型义齿稳固剂能明显提高全口义齿的咀嚼效能     

QTcd、JTcd在运动试验中的意义

为了解QTcd、JTcd在心电图活动平板运动试验结果判断中的价值 ,对 10 0例活动平板运动试验阳性者及 80例阴性者运动前后的心电图QTcd、JTcd进行对比观察。结果表明 :运动前两组QTcd、JTcd差异均无显著性 ( P〉0 .0 5 ) ;运动后 2min运动试验阳性组与阴性组比较 ,QTcd、JTcd差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ;阳性组运动试验后 2minQTcd、JTcd均较运动前显著延长 ( P <0 .0 1) ;阴性组运动后 2minQTcd、JTcd与运动前比较差异无显著性 ( P >0 .0 5 )。认为运动试验后QTcd、JTcd延长可作为判断运动试验结果的指标。     

ELISA法检测乙肝标志物影响因素的探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝血清标志物的影响因素。方法 用ELISA法检测5项乙肝血清标志物，对影响检测结果的几个重要因素进行统计分析。结果 5项乙肝标志物的孔间差变异系数（CV）为5％～25％，常规质控CV为18％～65％，阳性／阴性对照CV为4％～31%。用ELISA法和微粒子酶免分析（MEIA）法分别检测抗HBc，其结果有极显著性差异（p＜0.01）。在HBBAg、抗HBe检测中周围孔和中央孔吸光度（A）值比较，P＜0．01和P〈0．05。终止反应后随比色时间的延长A值逐渐下降，并且HBeAg浓度越高其A值下降越快。不同稀释方法检测抗HPc，各组间A值比较差异有统计学意义。随样品与加入酶结合物间隔时间的延长，假阳性率逐渐增加。结论 ELISA检测结果的可靠性主要受试剂质量（尤其是抗HBe、抗HBc）和检测过程中操作误差的影响；质控物浓度的高低可以影响常规质控CV的大小。     

阴性、阳性精神分裂症患者听觉P300显著性概率地形图研究

目的　探讨阴性、阳性精神分裂症听觉P30 0颅脑区域性改变特征 ,以及抗精神病药物的可能影响。方法　应用显著性概率地形图方法 (t SPM ) ,对 2 2例阴性、2 7例阳性精神分裂症患者与 17例正常人进行对比研究。结果　阴性组与阳性组比较 ,顶区、左枕颞区、左中央前额区显著性差异 (P <0 .0 5 )。与治疗前比较 ,治疗后阴性组前额区、左右中央区、右顶区有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,阳性组左颞顶区有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　阴性、阳性精神分裂症亚型之间可能有不同的神经生物学基础 ,抗精神病药物可以改善某些大脑皮质机能。     

对中国药典诺氟沙星对照品在不同溶媒中的稳定性研究

目的：考察不同溶媒配制的诺氟沙星对照品溶液能否保存。方法：用紫外分光光度法分别对5℃放置的使用不同溶媒的对照品溶液在0d、10d、20d、30d、40d测定最大吸收波长、吸收值。结果；以0．4％NaOH溶液为溶媒的诺氟沙星对照液于5℃放置40d，最大吸收波长、吸收值均未发生变化（无显著性差异P＞0．05）。而以pH4.0醛酸缓冲液、pH7．4磷酸盐缓冲液为溶媒的两种对照液5℃放置40d，最大吸收波长未发生变化，但吸收值明显降低（有显著性差异P＜0．05）。结论：用0．4％NaOH溶液配制的诺氟沙星对照品溶液在适宜的条件下（5℃，避光密闭）保存，40d内是稳定的，可继续使用。而用pH4．0醋酸缓冲注和pH7．4磷酸盐缓冲液配制的诺氟沙星对照品溶液则不能保存使用，必须临用新配。     

乙型肝炎病毒DNA定量检测室内质控品的制备与评价

目的自制乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)临界阳性、强阳性和阴性3个水平的室内质控品,对其临床检验实际应用价值进行初步评价。方法收集日常工作中HBV-DNA强阳性、临界阳性和阴性标本,分别混合后分装冷冻于-80℃,按方法学评价进行均一性、重复性、准确性和稳定性研究。结果自制HBV-DNA3个水平室内质控品的均一性、重复性、准确性均达到实验要求;15个月的自制质控品均数(x珋)、标准差(s)、变异系数(CV)差异无统计学意义,稳定性好,符合检测项目质控要求。结论自制HBV-DNA3个水平的质控品具有良好的均一性、重复性、准确性和稳定性,可用于HBV-DNA室内质控。     

临床生化的简易质控法

基层医院实验室由于受标本量、资金等诸多因素制约 ,开展系统的室内质控工作有一定困难 ,工作中我室采用了一种简易的质控办法 ,既节约试剂 ,又可起到质控效果。　　随检验标本同时作定值质控血清及标准液测定。用分光光度计比色时 ,记录二者吸光度 ,允许误差在△± 0 .0 1范围内 ;质控血清结果误差控制在 x± 2 SD范围内 ,每月连续测3～ 4次 (试剂、实验条件、应用仪器不变 ) ,日常工作中观察标准液的吸光度误差即可。用半自动生化仪测定时 ,记录系数 K值 ,日常工作中观察 K值或输入该 K值 ,检测标准液浓度值 ,允许误差± 0 .2。定值质…     

手术前后乳腺癌患者外周血淋巴细胞端粒酶活性检测及临床意义

目的　检测乳腺癌根治术前后患者外周血淋巴细胞端粒酶活性的表达。方法　利用端粒重复序列扩增技术(TRAP)分别结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native -PAGE)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测乳腺癌患者外周血淋巴细胞端粒酶活性。36例端粒酶阳性乳腺癌患者,术前1～3天及术后8～1 0天各取外周静脉血标本一次,经端粒重复序列扩增技术(TRAP)扩增,所得样本分别用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native -PAGE)定性检测和酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测端粒酶活性。ELISA法检测各样本的吸光度(ΔA) ,将同一时相样品的吸光度(ΔA)分为一组,用方差分析法进行组样品ΔA均数间的比较。结果　Native -PAGE定性检测结果:术前各样本凝胶电泳染色后有明显间隔6bp条带;术后各样本在电泳图上的条带较术前减弱。ELISA定量检测结果:样品的吸光度(ΔA) ,术前1～3天为0 .35 0±0 .0 2 6,术后8～1 0天为0 .2 5 1±0 .0 2 3,两者相比,差异有显著性(P <0 .0 0 1 )。结论　( 1 )乳腺癌根治手术可以明显降低乳腺癌患者外周血淋巴细胞端粒酶的活性表达。( 2 )外周血端粒酶活性可能作为乳腺癌判断疗效的指标。     

非均匀恒磁场对小鼠学习记忆能力的影响

目的　探讨非均匀恒磁场N、S极对小鼠学习记忆的影响。方法　用避暗实验法和自主活动法 ,分别观察非均匀恒磁场N、S极对学习记忆能力的影响 ;应用光镜观察非均匀恒磁场N、S极治疗后 ,脑组织神经元细胞形态学改变。结果　避暗实验表明磁场N极组与空白对照组比较 ,学习成绩测试错误次数 (mis take ,M值 )减少 ,记忆测试M值减少 ,均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;磁场S极组与空白对照组比较 ,记忆测试M值减少 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;小鼠自主活动测定各组均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;各组比较脑神经元的结构无明显改变。结论　非均匀恒磁场的预防性治疗 ,可提高小鼠的学习记忆能力 ,并以N极为著