兔角膜碱烧伤后角膜和房水中VEGF的表达

目的探讨兔角膜碱烧伤后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth fac-tor,VEGF)的表达。方法用1mol·L-1氢氧化钠溶液烧伤兔角膜建立角膜碱烧伤动物模型,未烧伤眼作为对照;免疫组织化学方法检测正常对照组以及角膜碱烧伤后1d、4d、7d、10d、14d VEGF蛋白在角膜中的表达情况,同时用酶联免疫吸附测定法(enzymelinkedi mmunosorbent assay,ELISA)检测房水中VEGF蛋白的表达量。结果正常对照组中,VEGF蛋白在角膜上皮细胞和内皮细胞仅有弱阳性表达,基质层表达不明显;房水中VEGF表达量为(0.168±0.038)μg·L-1。碱烧伤后,角膜各层组织中VEGF蛋白表达较对照组增强(P<0.05),其中基质层可见大量炎性细胞浸润,伴随有VEGF蛋白在该区域的集中表达。房水中VEGF的表达量于烧伤后1d为(0.336±0.072)μg·L-1,随后持续升高,至14d达(1.294±0.216)μg·L-1,各检测点均较对照组有显著差异(P<0.05)。同时房水中VEGF表达量与角膜中检测结果呈正相关(P<0.01)。结论角膜碱烧伤后早期角膜组织和房水中VEGF蛋白的表达均显著增高,提示VEGF可能在损伤后的早期修复过程中发挥着作用。     

TNF-α和PDGF在保存羊膜移植治疗兔角膜急性碱烧伤中的作用

目的:观察保存羊膜移植治疗兔角膜急性碱烧伤眼的组织学变化并探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)的作用。方法:建立兔急性角膜碱烧伤模型,并于24h内行保存羊膜移植术(右眼,12眼/组),设左眼为对照组。术后观察双眼形态及角膜新生血管变化,并检测房水中TNF-α含量及角膜组织PDGF-BB的表达情况。结果:与对照组比较,治疗组炎症反应轻,角膜溃疡范围小,上皮再生速度快,新生血管长度短(P<0.05)。7,28d治疗组房水TNF-α含量分别为315.5±19.8ng/L和140.6±11.5ng/L,明显低于对照眼的363.0±28.5ng/L和283.5±19.9ng/L(P<0.05)。与对照组比较,治疗组PDGF蛋白表达升高(P<0.05)。结论:角膜急性碱烧伤后早期行保存羊膜移植术,能抑制眼内炎症,促进角膜修复,其作用与抑制TNF-α,促进PDGF表达有关。     

自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症

目的　探讨自体角膜缘干细胞移植在角膜缘功能衰竭症治疗中的作用。方法　将 83例 90眼初发性翼状胬肉、外伤性角膜缘板层缺损及角膜缘碱烧伤患者随机分为A、B组。A组为自体角膜缘干细胞移植组 (干细胞治疗组 ) 4 2例 4 5眼 ,其中 30眼翼状胬肉行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术 ,外伤性角膜板层损伤 10眼、角膜缘碱烧伤 5眼行自体角膜缘干细胞移植术 ;B组为传统单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层损伤、碱烧伤行结膜瓣移植术 (对照组 ) ,4 1例 4 5眼 ,其中翼状胬肉 30眼行单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层缺损 11眼、碱烧伤 4眼行结膜瓣移植术 ,术后观察角膜上皮修复时间、角膜缘新生血管、角膜透明度、泪膜破裂恢复时间以及胬肉复发率 ,术后随诊 6～ 2 4月。结果　A组术后角膜上皮修复时间 2～ 4d、BUT(6 .7± 0 .8)d ,无角膜缘新生血管生长 ,术后翼状胬肉复发率为 0 ,角膜透明 ;B组术后角膜上皮修复时间 5～ 7d ,BUT(7.9± 0 .5 )d ,角膜缘有 3～ 8支新血管生长 ,角膜有不同程度的云翳 ,翼状胬肉复发率 13.33% ,A、B 2组各项指标比较有统计学差异。结论　自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症是一种简单、安全、有效的手术方法。     

地塞米松对碱烧伤后大鼠角膜核转录因子-κB活化的影响

目的 探讨1g·L-1地塞米松对大鼠角膜碱烧伤后核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)活化的影响.方法 24只SD大鼠右眼角膜碱烧伤后随机分为地塞米松组(造模后1g·L-1地塞米松滴眼)和生理盐水组(造模后生理盐水滴眼),每日滴眼4次,连续7d.碱烧伤后7d,裂隙灯观察角膜新生血管、炎症和角膜上皮缺损情况;制备角膜标本,采用苏木精-伊红染色法检测角膜组织病理学变化;免疫荧光染色检测角膜组织中NF-κB活化率,ELISA法测定IL-1β和VEGF蛋白表达水平.结果 碱烧伤后7d,NF-κB活化率比较,角膜基质层地塞米松组为3.81％,生理盐水组为9.58％,差异有统计学意义(P＜0.01);角膜上皮层地塞米松组为14.91％,生理盐水组为15.12％,差异无统计学意义(P=0.70).角膜新生血管面积、炎症指数、IL-1β和VEGF表达水平,地塞米松组分别为(13.15±0.93) mm2、0.27±0.08、(105.71±14.77) ng·L-1和(532.86±74.79)ng·L-1,均低于生理盐水组的(30.07±4.32) mm2、0.65±0.21、(178.17±10.96) ng·L-和(795.01±124.14) ng·L-1,差异均有统计学意义(均为P＜0.01).碱烧伤后7d,两组角膜上皮细胞均完整覆盖伤区.结论 地塞米松抑制大鼠角膜碱烧伤后炎症和新生血管的作用与抑制角膜基质细胞内NF-κB的活化有关,地塞米松不影响角膜上皮的修复.碱烧伤后1周内,1g·L-1地塞米松眼液滴眼是安全、有效的治疗措施.     

VEGF、IL-6的水平与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的:检测2型糖尿病患者眼房水中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的含量,并探讨其临床意义.方法:在白内障手术过程中获取66例2型糖尿病患者的房水,采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定VEGF和IL-6的含量.根据手术后散瞳眼底检查和眼底荧光素血管造影检查确定糖尿病视网膜病变的分期.实验组分为:无糖尿病视网膜病变组(NDR)21例、单纯型糖尿病性视网膜病变组(BDR)26例、增生型糖尿病性视网膜病变组(PDR)19例,正常对照组为健康的老年性白内障患者20例.结果:NDR组、BDR组、PDR组的房水VEGF含量分别为(240.30±26.15)pg/ml、(292.27±58.91)pg/ml、(477.41±91.01)pg/ml,IL-6含量分别为(160.83±33.41)pg/ml、(238.60±62.23)pg/ml、(389.13±90.35)pg/ml,对照组房水VEGF含量为(140.58±26.27)pg/ml、IL-6含量为(82.72±21.53)pg/ml,对照组与实验组比较差异均有统计学意义(F=113.67,P＜0.01;F=106.53,P＜0.01).实验组房水中的VEGF与IL-6含量有相关性(r=0.995,P＜0.01);糖尿病患者的病程与房水中VEGF(r=0.792,0.826,0.841均P＜0.01)、IL-6(r=0.829,0.817,0.896均P＜0.01)含量有相关性.结论:VEGF、IL-6在糖尿病视网膜病变的形成过程中有重要作用,且两者之间有相关性.     

新生血管性青光眼患者房水和血浆中VEGF、TGF-β1和IL-6的测定及意义

背景 新生血管性青光眼(NVG)以虹膜和房角新生血管为主要特征,发病机制尚未完全阐明.研究证实多个细胞因子和炎性因子与新生血管的形成有关,但这些细胞因子与NVG的关系研究尚不完全清楚. 目的 探讨NVG患者房水和血浆中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-p1)和白细胞介素-6(IL-6)质量浓度的变化及其意义.方法 采用前瞻性病例对照研究方法,纳入2014年5月至2015年3月于上海市东方医院确诊的NVG患者8例8眼、原发性开角型青光眼(POAG)患者10例10眼及年龄相关性白内障(ARC)患者10例10眼.眼部手术前1d收集患者空腹肘静脉血3～4 ml,离心后取上清液0.3～0.4 ml,于眼部手术时收集房水0.1 ～0.2 ml,采用ELISA法分别检测患者房水及血浆中VEGF、TGF-β1和IL-6质量浓度,对检测结果进行组间比较. 结果 NVG组患者房水和血浆中VEGF质量浓度分别为(2 769.85±390.88) pg/ml和(529.93±95.20) pg/ml,明显高于POAG组的(208.12±58.59) pg/ml和(219.28 ±24.44) pg/ml及ARC组的(158.88±12.35) pg/ml和(172.82±31.91) pg/ml,组间总体比较差异均有统计学意义(房水:F=433.80,P＜0.01;血浆:F=103.84,P＜0.01).NVG组患者房水和血浆中TGF-β1质量浓度分别为(157.94±113.00) pg/ml和(3 895.78±2 318.00) pg/ml,明显高于POAG组的(54.48±35.58) pg/ml和(2 196.13±1 185.39)pg/ml以及ARC组的(47.98±17.69) pg/ml和(1 937.28±933.27) pg/ml,组间总体比较差异有统计学意义(房水:F=7.88,P＜0.01;血浆:F=4.18,P＜0.05).NVG组房水和血浆中IL-6质量浓度分别为(234.87±41.64) pg/ml和(26.97±8.19) pg/ml,明显高于POAG组的(38.97±19.06) pg/ml和(19.54±5.11) pg/ml以及ARC组的(29.48±14.61) pg/ml和(18.50±3.57) pg/ml,组间总体比较差异均有统计学意义(房水:F=166.27,P＜0.01;血浆:F=5.59,P＜0.05). 结论 NVG患者房水及血浆中VEGF、TGF-β1、IL-6质量浓度明显高于POAG及ARC患者,提示3种细胞因子均参与NVG的发生及虹膜新生血管的形成,可能成为NVG治疗的靶点.     

碱烧伤角膜移植术后肿瘤坏死因子-α含量变化的实验研究

目的探讨碱烧伤角膜移植术后房水及外周血中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量的动态变化及其与角膜移植免疫排斥反应的关系。方法建立角膜碱烧伤动物模型,以鸡为供体,以兔为受体建立异种异体穿透性角膜移植模型(鸡→兔),将健康新西兰白兔24只随机分为3组。A组:正常对照组6只;B组:碱烧伤组8只;C组:碱烧伤异种异体穿透性角膜移植组10只。分别于碱烧伤术后(B组)或角膜移植术后(C组)第3、7、142、8 d抽取兔耳缘动脉血和房水,应用ELISA双抗体夹心法检测房水及外周血中TNF-α的含量变化。结果角膜移植片平均存活(15.67±3.35)d。正常兔房水及外周血中均可检测到少量的TNF-α,含量分别为(30.77±5.96)ng/L(、67.81±12.17)ng/L。术后各组早期房水及外周血中TNF-α含量即升高(P<0.01),其中B组7 d后达最高水平并保持稳定;C组则持续升高,在观察期(28 d)内维持高水平,但B、C组相比差异无统计学意义(P>0.05)。血、房水TNF-α含量变化呈正相关(r=0.741,P<0.01)。结论碱烧伤角膜移植术后外周血TNF-α含量变化可反应局部免疫学状态,但监测外周血TNF-α含量变化不能作为预测排斥反应发生的依据。     

自体血清与小牛血去蛋白眼用凝胶治疗兔角膜碱烧伤的比较

目的:通过建立兔角膜碱烧伤模型,比较自体血清与小牛血去蛋白眼用凝胶在兔角膜碱烧伤治疗中的效果。方法:制作兔右眼角膜碱烧伤模型30眼,造模后碱烧伤分度全部为Ⅲ度烧伤,将其随机分为三组,分别采用生理盐水、小牛血去蛋白眼用凝胶及自体血清滴眼液4次/d,各组滴阿托品眼用凝胶1次/晚,氧氟沙星眼用凝胶1次/晚,连续2wk。治疗7、14d后观察角膜新生血管形态并计算面积;第14d处死各组实验动物后,摘除双眼角膜,其中左眼为正常对照,右眼为实验眼,分别进行常规组织病理学检查,角膜组织匀浆内CD45、IL-10、IFN-γ及VEGF浓度测定。结果:治疗7、14d后小牛血去蛋白眼用凝胶组角膜新生血管面积(29.48±2.27、34.19±2.67mm2)与自体血清组(34.19±2.67、33.89±2.74mm2)无差异(P>0.05)。治疗14d角膜组织匀浆测定:小牛血去蛋白眼用凝胶组(0.56±0.04ng/mL)和自体血清组(0.54±0.05ng/mL)CD45含量均小于生理盐水组(1.27±0.07ng/mL)(P<0.05);自体血清组(452.49±11.40pg/mL)和小牛血去蛋白眼用凝胶组(332.49±13.67pg/mL)IL-10含量均大于生理盐水组(111.05±6.95pg/mL)(P<0.05);小牛血去蛋白眼用凝胶组(23.20±2.89pg/mL)和自体血清组(22.61±2.72pg/mL)IFN-γ含量均小于生理盐水组(41.77±4.26pg/mL)(P<0.05);小牛血去蛋白眼用凝胶组(151.14±18.21pg/mL)和自体血清组浓度(149.11±14.75pg/mL)VEGF含量均小于生理盐水组(391.35±28.59pg/mL)(P<0.05)。结论:兔角膜碱烧伤后抑制炎症因子CD45、IFN-γ及VEGF释放及抑制角膜新生血管形成方面,自体血清与小牛血去蛋白眼用凝胶作用相当;在促进抗炎因子IL-10释放、抑制炎症细胞浸润方面,自体血清作用强,小牛血去蛋白眼用凝胶次之。     

骨髓间充质干细胞移植对角膜化学伤后炎症和血管生成相关因子表达的影响

背景 已有研究证明骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植可重建损伤的角膜上皮并促进角膜上皮的修复,但BMSCs的作用机制尚不明确. 目的 探讨BMSCs移植在大鼠角膜化学伤后抗炎和抗新生血管形成的作用.方法 从2只成年清洁级SD大鼠双侧股骨及胫骨提取骨髓并进行BMSCs培养和传代,第3代细胞种植于羊膜.18只成年清洁级SD大鼠用NaOH滤纸片贴附于角膜中央的方法制作角膜碱烧伤模型,然后按随机数字表法随机分为3组,每组6只眼,均取右眼为模型眼.造模1周后,BMSCs移植组行带有BMSCs的羊膜移植；羊膜移植组行无BMSCs的羊膜移植；模型对照组不进行移植.术后2周裂隙灯显微镜下进行角膜透明度评分并计算角膜新生血管(CNV)面积,ELISA法检测各组大鼠角膜中白细胞介素2(IL-2)、IL-10、干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子B(TGF-β)的含量,荧光实时定量PCR法检测各组角膜中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) mRNA的表达.结果 传代细胞CD90及CD29表达阳性率分别为99.78％及99.79％,CD34、CD45及CD11b的表达率分别为7.90％、1.16％和1.28％,符合间充质干细胞的特征,种植于羊膜后生长状态良好.角膜碱烧伤后1周,各组大鼠角膜水肿混浊评分和CNV面积的差异均无统计学意义(F=0.021,P=0.979；F=0.076,P=0.927).移植术后2周,羊膜移植组和BMSCs移植组大鼠角膜混浊水肿评分均明显低于模型对照组(P=0.011、0.001),CNV面积均小于模型对照组(P=0.005、0.000).与羊膜移植组比较,BMSCs移植组CNV面积较小(P=0.001).角膜中Thl细胞分泌的IL-2和IFN-γ在BMSCs移植组明显下降,与模型对照组及羊膜移植组比较差异均有统计学意义(P=0.000、0.002、0.003、0.045),而Th2细胞分泌的IL-10和TGF-β明显高于模型对照组和羊膜移植组(P=0.000、0.000、0.000、0.021).3个组间VEGF在角膜中的表达差异无统计学意义( F=4.880,P=0.056).BMSCs移植组大鼠角膜中MMP-2及bFGF的表达均明显低于模型对照组及羊膜移植组(P＜0.01).结论 BMSCs移植可调节大鼠角膜碱烧伤后炎性相关因子和新生血管相关因子的分泌,从而减轻角膜炎症反应,抑制CNV的形成.     

恒河猴血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞后房水血管内皮生长因子水平的变化

目的探索恒河猴血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞后房水血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度的变化。方法实验组将体外培养增殖的恒河猴视网膜-脉络膜血管内皮细胞通过离心沉淀法移植到撕除后弹力层的恒河猴角膜内表面;对照组撕除角膜内皮层后,不做任何处理,直接原位缝合角膜植片。分别于术前及术后1周、2周、3周、4周、6周、8周、12周抽取房水,通过ELISA方法检测其中VEGF浓度,并进行统计分析。结果实验组和对照组术后1周时VEGF浓度差异无统计学意义(P>0.05),术后2周、3周、4周时实验组VEGF浓度分别为(374.74±3.30)ng·L-1、(419.06±1.39)ng·L-1、(481.83±3.36)ng·L-1,同时间点对照组分别为(271.11±1.12)ng·L-1、(345.18±3.27)ng·L-1、(380.33±5.03)ng·L-1,差异均具有统计学意义(均为P<0.05),相应时间点实验组显著高于对照组。实验组术后1周、2周、3周、4周VEGF浓度的差异均有统计学意义(均为P<0.05),各时间点与术前(128.75±3.83)ng·L-1差异均有统计学意义(均为P<0.05)。对照组术后各时间点VEGF浓度与术前差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论血管内皮细胞移植到角膜内表面后,房水VEGF浓度在术后4周内持续升高,之后稳定在一较高水平。     

Role of low and high spatial frequencies in the face-selective responses of neurons in the cortex in the superior temporal sulcus in the monkey

There are neurons in the cortex in the anterior part of the superior temporal sulcus of the macaque monkey with visual responses selective for faces. One aim of the present study was to analyze further the information which leads them to respond, by measuring their responses to parametrically filtered stimuli. The responses of 32 such single neurons were measured to faces which were digitized, lowpass filtered at spatial frequencies of 2, 4, 8,...128 cycles/face, highpass filtered at frequencies of 4, 8,...64 cycles/face, and presented in random sequence using a video framestore. It was found that many of the neurons could respond to blurred images of faces, with a mean frequency at half-maximum amplitude of the neuronal response to the series of lowpass filtered images of faces of 3.3 cycles/face. Almost all the neurons had lowpass cutoff frequencies defined in this way below 8 cycles/face. Many of the neurons could also respond to images of faces in which the only information remaining was a limited amount of high spatial frequency edge information. The mean frequency at half-maximum amplitude of the neuronal response to the series of highpass filtered images of faces was 29.7 cycles/face. Almost all the neurons had highpass cutoff frequencies above 8 cycles/face. Thus, many of the neurons could respond to a lowpass and a highpass filtered image of a face even when these had no spatial frequencies in common. The mean separation between the lowpass and highpass cutoff frequencies was 3.2 octaves. For comparison, face recognition in man can be performed with images which contain only information up to 8 cycles/face, or with highpass filtered images which contain only information down to 8 cycles/face. The response of the neurons was not always a smooth function of frequency, but could decrease as higher frequencies were included in the lowpass filtered images of faces, or as low frequencies were included in the highpass filtered images of faces. This indicates that information in certain frequency bands was able to inhibit these neurons. This was particularly likely to occur for the non-optimal face stimulus for a given neuron, indicating that the selectivity of these neurons to different faces was a combination of the excitation produced by some information in faces and inhibition produced by other.     

白血病抑制因子在眼科神经相关病变发病机制中的作用

白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)是一种广泛存在于生物体的多功能细胞因子,属于白介素-6家族的一员.在神经系统,LIF参与了众多的生理和病理过程.在眼部,LIF对视神经、神经视网膜及角膜神经等的保护作用逐渐受到重视.在青光眼中,LIF通过激活JAK/STAT3通路发挥对视神经的保护作用,并能在一定程度上刺激轴突再生.在年龄相关性黄斑变性和视网膜色素变性等疾病中,LIF也能通过诱导相关信号通路阻止光感受器细胞死亡,从而有效维持光感受器的功能.另外LIF也能在一定程度上修复角膜神经受损,加速角膜神经再生.LIF在神经保护以及神经损伤后再生过程中的作用日渐突出,可能成为治疗眼科神经病变的新手段.     

Voriconazole in the treatment of fungal osteomyelitis of the orbit in the immunocompromised host

Scedosporium apiospermum is an uncommon cause of fungal infection in the orbit and sinus. Morbidity and mortality rates in immunocompromised patients are high. We review the first case of Scedosporium apiospermum orbito-sinus infection that was successfully treated with the new antifungal agent voriconazole. We highlight the efficacy of this drug, particularly in the treatment of osteomyelitis of the orbit and sinus, which may lead to an improvement in survival rates after Scedosporium infection.