氧化苦参碱通过Wnt/β-catenin信号通路诱导结肠癌HCT116细胞凋亡和焦亡作用研究

目的 探究氧化苦参碱诱导结肠癌HCT116细胞死亡的作用机制。方法 将结肠癌HCT116细胞随机分为对照组和氧化苦参碱（2、4、8、12、16、20、30、40 mmol·L^-1）组,通过CCK-8法检测各浓度氧化苦参碱作用24、48 h对结肠癌细胞存活率的影响;光学显微镜下观察氧化苦参碱（15、20、25 mmol·L^-1）对HCT116细胞形态的影响;通过Hoechst染色法和Annexin V/PI双染流式细胞术法观察氧化苦参碱对HCT116细胞凋亡的影响;JC-1染色观察细胞线粒体膜电位的变化;Western blotting法检测各组细胞成熟体半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、BCL2关联X蛋白（Bax）、细胞色素C （Cyt-C）、消化道皮肤素E （GSDME）、细胞周期蛋白1（cyclin-D1）、骨髓细胞瘤病毒癌基因（c-Myc）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、β-连环素（β-catenin）、生存素（survivin）的蛋白表达情况。结果 与对照组比较,氧化苦参碱可以明显降低HCT116细胞的存活率,且存在剂量及时间相关性,作用24、48h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为18.80、10.75 mmol·L^-1;氧化苦参碱组形状正常的HCT116细胞明显减少,均出现部分类圆球形的细胞,并且折光率明显降低;经Hoechst染色后氧化苦参碱组HCT116细胞的蓝色荧光明显加深,且相对集中,流式细胞术结果显示细胞凋亡率显著增加（P<0.05、0.01）;JC-1染色结果表明氧化苦参碱可以降低HCT116细胞线粒体膜电位;氧化苦参碱组Bcl-2、β-catenin、c-Myc、cyclin D1和survivin蛋白表达水平显著下降（P<0.05、0.01）,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved PARP、Cyt-C、GSDME蛋白表达水平及Bax/Bcl-2显著上升（P<0.05、0.01）。结论 氧化苦参碱可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路,促进线粒体依赖的细胞内源性凋亡和细胞焦亡发挥抗结肠癌作用。     

樟芝多糖通过调节肠黏膜浸润的Th9及IL-9的表达调控小鼠慢性结肠炎的机制研究

目的 研究樟芝多糖调节结肠黏膜浸润的Th9及其细胞因子IL-9的表达,从而减轻小鼠慢性结肠炎的机制。方法 利用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）构建小鼠慢性结肠炎模型,设置正常组、模型组、阳性对照组（抗IL-9抗体注射组）以及樟芝多糖组（20 mg·kg^-1）。DAI评分综合评价小鼠1个月内活动能力,测定小鼠1个月内的体质量变化,流式细胞术检测外周血、结肠黏膜固有层中单个核细胞中CD4+IL-9+T细胞的比例,ELISA法检测外周血及结肠黏膜中IL-9、TGF-β以及IL-4的表达,实时荧光定量PCR检测小鼠结肠黏膜中IL-9、TGF-β、smad3及IL-4的表达,HE染色观察小鼠结肠组织病理。结果 DSS可以引起小鼠慢性结肠炎性病变,DAI评分结果显示模型组小鼠活动能力明显下降,而樟芝多糖干预后DAI评分显著降低（P<0.05）,模型组小鼠外周血及结肠黏膜固有层中Th9比例相比正常组显著增高（P<0.05）,外周血及结肠黏膜中IL-9、TGF-β及IL-4的蛋白及mRNA表达也显著增高（P<0.05）。阳性对照组及樟芝多糖组小鼠外周血及结肠黏膜固有层中Th9比例相比模型组显著下调（P<0.05）,且外周血及结肠黏膜中IL-9,TGF-β以及IL-4的蛋白及mRNA表达也显著下调（P<0.05）,HE染色结肠病理情况明显好转。结论 樟芝多糖可以通过调节Th9比例和IL-9表达改善小鼠慢性结肠炎,其作用与免疫调节及抗炎作用有关。     

桑黄水煎液对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗氧化作用

目的 观察桑黄水煎液对D-半乳糖诱导小鼠氧化损伤的保护作用,并探讨其保护作用的可能机制。方法 ①ICR小鼠分为正常对照组,桑黄水煎液低、中、高剂量（2,6,12 g·kg^-1）组,连续给药15 d。②ICR小鼠分为正常对照组、模型组、维生素E组（50 mg·kg^-1）,桑黄水煎液低、中、高剂量（2,6,12 g·kg^-1）组,小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖（120 mg·kg^-1）造成亚急性衰老模型,按分组连续给药42 d。比色法测定小鼠肝脏及血清中丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶活力,如超氧化合物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化酶（POD）等。Western blot检测肝脏中核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧合酶1（HO-1）的表达。结果 桑黄水煎液对正常小鼠和D-半乳糖诱导小鼠体质量及脏器指数均无明显影响。桑黄水煎液可显著提高正常小鼠肝脏中T-AOC和SOD酶活力（P<0.01,P<0.05）。各剂量桑黄水煎液可显著提高衰老模型小鼠血清中T-AOC,降低MDA含量（P<0.01,P<0.05）,同时中剂量增强肝脏中SOD （P<0.05）和POD酶活力（P<0.01）,中、高剂量均上调肝脏中Nrf2和HO-1蛋白表达水平（P<0.01）。结论 桑黄水煎液具有提高正常小鼠抗氧化能力和改善D-半乳糖致小鼠氧化损伤作用,此作用可能是通过调节Nrf2/HO-1途径增加体内抗氧化酶的活性,减少过氧化脂质的生成,进而提高机体抗氧化能力。     

不同工艺紫雪散抗惊厥药效特点及机制研究

目的 研究普通工艺、传统工艺制备紫雪散的抗惊厥作用,初步探讨其作用机制。方法 采用雄性SPF级ICR小鼠,随机分为对照组,模型组,传统工艺紫雪散和普通工艺紫雪散低、中、高剂量（0.78、1.56、3.12 g·kg^-1）组及5%苯巴比妥（0.01 mL·g^-1）组。通过颈背部sc尼可刹米注射液诱发小鼠惊厥模型,观察各组小鼠治疗后的惊厥潜伏期、死亡潜伏期、20 min死亡率;采用比色法检测大脑皮层中钙水平;Griess reagent法检测大脑皮层总NO含量;参照试剂盒说明书检测大脑皮层中谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量。结果 与模型组比较,苯巴比妥钠、普通和传统工艺紫雪散的中、高剂量均可显著延长小鼠的惊厥潜伏期（P<0.001）;普通和传统工艺紫雪散的低、中、高剂量均可显著延长惊厥小鼠的死亡潜伏期（P<0.01、0.001）;模型组小鼠死亡率为100%,苯巴比妥钠组没有小鼠死亡,普通和传统工艺紫雪散的中、高剂量组死亡率明显降低。2种工艺紫雪散的抗惊厥作用具有剂量相关性,与普通工艺高剂量比较,传统工艺紫雪散高剂量可以显著延长惊厥模型小鼠的惊厥、死亡潜伏期（P<0.05、0.01）,降低惊厥致死率。与模型组比较,3.12 g·kg^-1传统工艺和普通工艺紫雪散、苯巴比妥钠均可以显著降低小鼠脑内钙含量（P<0.05、0.001）和总NO含量（P<0.001）;与普通工艺紫雪散组比较,3.12 g·kg^-1传统工艺紫雪散可以显著降低惊厥小鼠脑内总NO的含量（P<0.01）。与模型组比较,传统工艺和普通工艺紫雪散3.12 g·kg^-1组、苯巴比妥钠组小鼠脑皮层中Glu含量显著减少（P<0.05、0.001）;传统工艺紫雪散3.12 g·kg^-1组小鼠脑皮层中GABA含量显著增加（P<0.05）。结论 传统工艺和普通工艺紫雪散均具有抗惊厥作用,并且传统工艺紫雪散的抗惊厥作用优于普通工艺紫雪散。     

丙酮酸乙酯对利福平致小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨丙酮酸乙酯（EP）对利福平致小鼠肝损伤的保护作用及其可能机制。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成3组：正常对照组、模型组（利福平,200 mg·kg^-1·d^-1） 和EP组（利福平200 mg·kg^-1·d^-1+丙酮酸乙酯40 mg·kg^-1·d^-1）,每组8只。造模后第7天处死小鼠,检测小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、碱性磷酸酶（ALP）,观察小鼠肝脏病理学变化,检测小鼠肝组织总胆汁酸（TBA）、丙二醛（MDA）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、高迁移率族蛋白B1 （HMGB1） 及乙酰化的HMGB1（AC-HMGB1）蛋白的表达情况。结果 与正常对照组相比,模型组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平升高（P<0.05）;肝细胞空泡变性、脂肪变性明显,部分肝细胞可见嗜酸性变、核溶解或固缩;肝组织TBA、MDA的含量提高（P<0.05）,SOD减少（P<0.05）,HMGB1及AC-HMGB1表达增多（P<0.05）,HMGB1胞浆表达为主。与模型组相比,EP组小鼠血清TBIL、DBIL、ALP、ALT水平降低（P<0.05）;肝组织病理学变化改善;肝组织TBA、MDA的含量降低（P<0.05）, SOD增多（P<0.05）,HMGB1及AC-HMGB1的表达水平降低（P<0.05）,HMGB1以胞核表达为主。结论 丙酮酸乙酯能够减轻利福平所致的小鼠肝损伤,其机制可能与丙酮酸乙酯抗氧化,下调肝组织HMGB1及AC-HMGB1的表达和调节HMGB1的分布有关。     

氧化槐果碱对胃癌MGC80-3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察氧化槐果碱对胃癌MGC80-3细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 采用CCK-8、Hoechest 33342染色、倒置显微镜和流式细胞术测定氧化槐果碱干预后对细胞的增殖、凋亡的影响,qRT-PCR检测胃癌MGC80-3细胞中Bcl-2、Bax mRNA水平,Western blot法检测胃癌MGC80-3细胞中Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白水平。结果 氧化槐果碱能抑制胃癌MGC80-3细胞增殖（P<0.05）,并具有时间和浓度依赖性。0.48,0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能诱导细胞凋亡（P<0.05）,凋亡抑制剂Z-DEVD-FMK能逆转氧化槐果碱的凋亡诱导作用,0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能上调Bax的mRNA水平,下调Bcl-2的mRNA水平,差异均有统计学意义（P<0.05）。0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能上调Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的蛋白水平,下调Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。凋亡抑制剂Z-DEVD-FMK能逆转氧化槐果碱对Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白的影响。结论 氧化槐果碱能通过调节Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达水平,抑制胃癌MGC80-3细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

油酰乙醇胺对东莨菪碱诱导小鼠认知功能损伤的保护作用

目的 探讨油酰乙醇胺对东莨菪碱诱导小鼠认知功能损伤的保护作用。方法 将小鼠随机分为6组：对照组、模型组、多奈哌奇组（阳性药,3 mg·kg^-1）和油酰乙醇胺低、中、高剂量（50、100、200 mg·kg^-1）组,每组6只。在ig给药4周后,除对照组外,各组ip 3 mg·kg^-1的东莨菪碱建立阿尔茨海默病（AD）模型。避暗、跳台行为学实验检测小鼠记忆功能; ELISA法检测小鼠海马和大脑皮层中乙酰胆碱（Ach）和乙酰胆碱酯酶（AChE）水平;HE染色观察小鼠大脑皮层及海马损伤。结果 与对照组比较,模型组的避暗潜伏期显著缩短、避暗错误次数显著增加（P<0.001）;大脑皮层、海马的Ach水平显著减少（P<0.01、0.001）,AChE活性显著升高（P<0.001）;模型组的小鼠脑组织形态结构不均匀,组织细胞呈弥散状,提示组织存在病变。与模型组比较,各给药组的避暗潜伏期显著升高、避暗错误次数显著减少（P<0.01）;油酰乙醇胺给药组的小鼠大脑皮层、海马组织Ach水平显著升高（P<0.05、0.01）,AChE活性显著降低（P<0.01、0.001）;小鼠脑组织形态结构病理改变减轻。结论 油酰乙醇胺对东莨菪碱诱导学习记忆障碍模型小鼠的认知功能具有改善作用,其作用机制可能与调节胆碱能系统功能、促进神经细胞存活有关。     

基于肠道菌群探讨甘草泻心汤对伊立替康致小鼠腹泻的影响

目的 研究甘草泻心汤对化疗相关腹泻小鼠肠道菌群的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、洛哌丁胺（阳性药,0.4 mg·kg^-1）组和甘草泻心汤高、低剂量（16.4、4.1 g·kg^-1）组;采用连续4 d ip 55 mg·kg^-1伊立替康诱导小鼠化疗相关腹泻模型;记录小鼠首次排便时间、稀便级、稀便率和腹泻指数;采用试剂盒测定小鼠肠道消化酶活力及炎症因子水平;采用高通量测序技术分析结肠内容物肠道菌群变化。结果 与对照组比较,模型组小鼠首次排便时间显著缩短（P<0.01）,稀便级、稀便率和腹泻指数显著升高（P<0.01）;消化酶乳酸脱氢酶（LDH）、淀粉酶（AMS）和脂肪酶（LPS）活力显著降低（P<0.01）;炎症因子白细胞介素1β （IL-1β）、环氧化酶2 （COX-2）、细胞间黏附分子1 （ICAM-1）和肿瘤坏死因子α （TNF-α）水平显著升高（P<0.01）;肠道菌群α多样性Simpson指数显著升高（P<0.05）;肠道菌群β多样性差异较大;变形菌门、梭杆菌门、变形菌纲、梭杆菌纲、肠杆菌目、梭杆菌目、拟杆菌科、丹毒丝菌科、埃格特菌科和拟杆菌属丰度显著升高（P<0.01）,Muribaculaceae和norank_f__Muribaculaceae丰度显著降低（P<0.01）。与模型组比较,甘草泻心汤高、低剂量组小鼠首次排便时间显著延长（P<0.05、0.01）、稀便率和腹泻指数显著降低（P<0.05、0.01）,高剂量组稀便级显著降低（P<0.01）;高、低剂量组各消化酶活力显著回升（P<0.05、0.01）;高、低剂量组各炎症因子水平显著降低（P<0.05、0.01）;高剂量组Simpson指数显著降低（P<0.05）,β多样性更趋近对照组,显著回调各优势物种丰度的显著性变化（P<0.05、0.01）。结论 甘草泻心汤对于伊立替康诱导的腹泻小鼠具有明显的治疗作用,可能是其通过调整腹泻小鼠肠道菌群实现。     

氯喹对肝癌小鼠肿瘤生长的影响及作用机制

目的 探讨氯喹对肝癌小鼠肿瘤增殖的影响及其作用机理。方法 建立肝癌小鼠肿瘤模型75只,并随机分为对照组、低剂量氯喹处理组和高剂量氯喹处理组,各25只,低剂量和高剂量氯喹处理组小鼠分别腹腔注射不同剂量氯喹（25 μmol/L和50 μmol/L）,对照组注射生理盐水作为对照,连续处理16 d,采用免疫印迹和免疫组化检测3组小鼠肝癌组织中LC3和P62的表达水平,采用MTT法体外检测25 μmol/L和50 μmol/L浓度的氯喹对HepG2肝癌细胞增殖活力的影响。结果 与对照组相比,氯喹处理组小鼠肝癌组织中LC3（3.15±0.29）和P62（6.24±0.41）的含量显著增加,阳性细胞率更高,染色强度更深（P<0.05）;Western blot检测结果显示,与对照组比较,LC3和P62的表达水平随氯喹浓度的提高而增加,细胞自噬活性受到抑制（P<0.05）;体外HepG2肝癌细增殖活性的检测结果显示,较对照组,氯喹处理组肿瘤细胞的增殖活力受到抑制（162.26±18.62）%（P<0.05）,呈现时间、剂量依赖性（P<0.05）。结论 氯喹可能通过抑制肿瘤细胞的自噬活性抑制肿瘤细胞的增殖。     

茜素型蒽醌化合物体外Pig-a基因突变性试验研究

目的 对具有相同母核结构的7种茜素型蒽醌化合物开展体外Pig-a基因突变试验，分析不同茜素型蒽醌化合物取代基结构与其致突变性的关联。方法 小鼠淋巴瘤细胞L5178Y（tk^+/--3.7.2.C）分别与系列浓度的茜草素、异茜草素、甲基异茜草素、羟基茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚、茜草素-1-甲醚和光泽汀作用4 h（有S9）或24 h（无S9），给药24 h后应用细胞计数仪进行计数，计算细胞相对倍增速率（RPD）评价受试物细胞毒性；细胞培养8 d后经APC-anti-CD45和PE-antiCD90.2抗体孵育后，使用流式细胞仪检测细胞突变（CD45⁺CD90.2^-）率。结果 所有受试物在有或无代谢活化条件下所设浓度组RPD均大于50%，未见明显细胞毒性作用，可排除试验中假阳性结果。在无S9代谢活化条件下，光泽汀（16 μg· mL^-1）组、羟基茜草素（10 μg· mL^-1）组、甲基异茜草素-1-甲醚（31.25 μg·mL^-1）组Pig-a基因突变率与溶媒对照组比较显著升高（P<0.05、0.01、0.001）；在有S9代谢活化条件下，光泽汀（4、8 μg· mL^-1）、羟基茜草素（10 μg· mL^-1）、茜草素-1-甲醚（3.75、15.00 μg· mL^-1）、甲基异茜草素（12.5、25.0、50.0、100.0 μ g · mL^-1）、甲基异茜草素-1-甲醚（15、30、60 μ g · mL^-1）、异茜草素（2.50、5.00 μg·mL^-1）组Pig-a基因突变率与溶媒对照组比较显著升高（P<0.05、0.01、0.001）。结论 羟基取代基所在位点是茜素型蒽醌化合物致突变性强弱的决定性因素，其体内致突变性有待进一步确证。     

康复新液缓解乙酸诱导大鼠急性溃疡性结肠炎及机制研究

目的 研究康复新液对乙酸诱导大鼠急性溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）细胞因子的影响,并初步探讨其作用机制。方法 采用乙酸灌肠建立急性UC大鼠模型,除正常对照组及模型对照组外,其余各组分别灌肠给予结肠宁、康复新液2.50,1.25,0.625 g·kg^-1,测定疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠黏膜损伤指数（colon mucosa damage index,CMDI）及病理组织学评分（histopathological score,HS）,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中白介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,iNOS）以及结肠组织中表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、iNOS的含量。结果 与模型对照组相比,结肠宁及康复新液高剂量能显著降低UC大鼠IL-6、CRP、iNOS、COX-2、MPO表达,升高EGF的表达水平（P<0.01）,改善组织病变情况。结论 康复新液对乙酸诱导的UC有治疗作用,作用机制可能与下调大鼠体内炎症因子的表达量,上调EGF的表达量有关。     

核受体与溃疡性结肠炎大鼠疾病转归的相关性研究

目的 研究大鼠结肠组织中相关核受体的表达与溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠疾病转归的相关性。方法 SD大鼠一次性结肠灌注2，4，6-三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzene sulfonic acid，TNBS）造模，诱导UC急性期和UC炎症消退后恢复期，收集大鼠血浆和结肠组织。计算疾病活动指数、粪便含水率，考察结肠病理变化，评估大鼠UC模型是否成功；ELISA测定血浆肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α），γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ），白细胞介素4（interleukin 4，IL-4）和IL-13的含量；比色法检测结肠髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性；Real-time PCR测定法尼醇X受体（farnesoid X receptor，FXR）、孕烷X受体（pregnane X receptor，PXR）、组成型雄甾烷受体（constitutive androstane receptor，CAR）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators activate receptor g，PPAR γ）mRNA的表达；R软件评估核受体与炎症因子之间的相关性。结果 模型组大鼠疾病活动指数和粪便含水率均明显下降，提示UC大鼠模型建立成功。与正常对照组相比，急性炎症期组大鼠结肠FXR、CAR、PPARγ mRNA表达水平明显下降，血浆TNF-α和IFN-γ含量呈显著负相关升高（P<0.05），FXR与IL-4显著正相关（P<0.05）；结肠PXR表达水平降低，与炎症因子无相关性；此外，大鼠血浆MPO含量升高，与PPARg呈显著负相关（P<0.05）。与急性炎症期组相比，炎症消退后恢复期组大鼠血浆促炎因子TNF-α、IFN-γ含量及血浆MPO活性显著降低（P<0.05），而血浆抑炎因子IL-4与IL-13含量显著升高（P<0.05），结肠FXR、PXR、CAR、PPARγ mRNA表达水平则明显升高（P<0.05）。结论 UC大鼠结肠组织核受体FXR、CAR、PPARγ水平与UC大鼠的发病及转归具有相关性。     

基于网络药理学探究百部止咳作用的机制及实验验证

目的 利用网络药理学探讨百部发挥止咳作用的活性成分、作用靶点及相关通路,探究百部止咳的作用机制.方法 通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)获取并筛选百部主要活性成分及其对应的作用靶点,利用Uniprot蛋白质数据库将作用靶点标准化,利用Cytoscape构建百部"成分–靶点"网络;利用GeneCards获取...     

葛兰心宁软胶囊联合双嘧达莫治疗冠心病心绞痛的临床研究

目的 探讨葛兰心宁软胶囊联合双嘧达莫片治疗冠心病心绞痛的临床疗效.方法 选择2019年6月—2021年6月在南阳南石医院治疗的84例冠心病心绞痛患者,根据用药的差别分成对照组(42例)和治疗组(42例).对照组口服双嘧达莫片,50 mg/次,3次/d;治疗组在对照组基础上口服葛兰心宁软胶囊,1.16 g/次,2次/d....     

消痔丸对复方地芬诺酯致小鼠便秘模型的药效评价及作用机制

目的 探究消痔丸对复方地芬诺酯致小鼠便秘模型的药效作用及机制。方法 ICR小鼠随机分为对照组、模型组、溴化甲基纳曲酮（阳性对照,58.5 mg·kg^-1）组和消痔丸低、中、高剂量（1.17、2.34、4.68 g·kg^-1）组,连续ig给药7 d,给药同时除对照组外,其余各组按照7.5 mg·kg^-1 ig复方地芬诺酯混悬液制备小鼠便秘模型。观察小鼠一般情况;末次给药结束后,各实验组禁食不禁水16 h,模型组和各给药组ig给予复方地芬诺酯,30 min后给药组ig含相应受试药的活性炭悬液,对照组、模型组ig活性炭悬液。第1批小鼠观察首次排黑便时间、6 h内排便粒数、6 h和24 h内排便质量及粪便含水率。第2批小鼠检测小肠推进率,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测结肠组织和血清中5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）、血管活性肠多肽（VIP）水平变化,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测结肠组织水通道蛋白3（AQP3）、AQP9 mRNA水平,Westernblotting法检测AQP3、AQP9蛋白表达水平。结果 与模型组相比,各给药组小鼠粪便干结情况有所好转,排便量均有不同程度的增加,体质量有所增加,精神状态逐渐好转。与模型组相比,各给药组均能显著缩短排首粒黑便时间,提高6 h排便粒数及粪便含水率、6 h及24 h排便质量（P＜0.05、0.01、0.001）;除消痔丸低剂量组,其余各给药组小鼠24 h粪便含水率均显著增加（P＜0.01、0.001）;各给药组小肠炭末推进距离及炭末推进率均明显提高（P＜0.05、0.01、0.001）;各给药组均能显著降低结肠组织中VIP水平（P＜0.01、0.001）,除消痔丸低剂量组,其余各给药组均能显著提高结肠组织中5-HT、SP水平（P＜0.01、0.001）;各给药组均能显著增加血清中5-HT、SP水平并降低VIP的表达水平（P＜0.05、0.01、0.001）;各给药组AQP3蛋白表达量均显著下降（P＜0.01、0.001）,AQP9蛋白表达量均显著上升（P＜0.05、0.01、0.001）;各给药组AQP3 mRNA水平均显著下降（P＜0.01、0.001）,AQP9 mRNA水平均显著上升（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 消痔丸对复方地芬诺酯诱导的小鼠便秘模型有显著的治疗效果,可以显著缩短便秘小鼠排首粒黑便时间、增加排便粒数并提高粪便含水率、显著促进小肠推进作用,作用机制与调节肠液分泌相关因子5-HT、SP、VIP等的释放以及AQP3、AQP9表达相关。     

毛菊苣水提取物急性毒性及其保肝作用研究

摘要：目的 初步探讨毛菊苣水提物（文中简写为MS）的急性毒性,并通过D-氨基半乳糖盐酸盐(D-GaIN)、卡介苗联合脂多糖(BCG LPS)和异硫氰酸-1-萘酯（ANIT）致小鼠肝损伤实验研究探讨MS的保肝作用。方法 急毒实验：将小鼠随机分为给药组和空白对照组,并观察记录14d 内小鼠死亡情况、体质量和摄食量等,14 d 后处死并做大体解剖,观察其各主要脏器是否异常。保肝实验：将小鼠分成空白对照组、模型组、阳性对照组（联苯双酯组/护肝片组）及MS 0.13 g?kg-1 和 0.26 g?kg-1剂量组,采用D-GaIN建立化学性肝损伤模型,BCG LPS建立免疫性肝损伤模型,ANIT建立小鼠黄疸性肝炎模型,经眼球采血,测定血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine transaminase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）和直接胆红素（direct bilirubin,DBIL）水平,同时测定肝脏指数,并取肝脏做常规HE切片观察。结果 急毒实验：本品给小鼠单次给药最大给药量为150 g（生药）?kg-1（为70kg成人每日每公斤体重用量的500倍）未出现死亡及其他急性毒性反应。保肝实验：在D-GaIN致小鼠化学性肝损伤模型中,MS 0.26 g?kg-1剂量组能显著抑制D-GaIN 所致的血清ALT、AST和TBIL活性升高（p<0.05或p<0.01）;在免疫性肝损伤模型中,MS各剂量组均可显著抑制（p<0.01）BCG LPS所致的小鼠血清ALT、AST活性升高,但对血清中TBIL的含量未见明显改变。在黄疸性肝炎模型中,MS 0.26 g?kg-1剂量组可显著抑制（p<0.01）ANIT所致的小鼠血清ALT、AST、TBIL和DBIL活性升高。此外MS 0.13 g?kg-1剂量组对小鼠血清中TBIL和DBIL的含量也有显著的抑制作用（p<0.01）。肝脏病理切片结果显示MS各剂量组对本实验中的三种肝损伤均有明显改善作用;结论 本品以最大剂量150 g（生药）?kg-1 给药对小鼠未见明显急性毒性反应。MS 对实验性肝损伤具有较好的保护作用。     

八子补肾胶囊对快速衰老小鼠视网膜的保护作用

目的 研究八子补肾胶囊（BZBS）对快速衰老小鼠视网膜的保护作用。方法 将快速衰老小鼠SAMP6随机分为模型组和BZBS（2.8 g·kg^-1）组,取抗快速老化SAMR1小鼠作为同源对照（对照组）,每天ig给药1次,对照组与模型组ig 0.9%氯化钠溶液,连续给药9周。HE染色观察视网膜组织病理变化;试剂盒法检测各组小鼠视网膜组织总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平;Western blotting法检测各组小鼠视网膜组织中衰老蛋白P21、P16和自噬蛋白P62、LC3 II/I表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠视网膜外节段呈现空泡样改变,内外核层细胞数量减少且排列不连续,中间的丛状层变薄;T-AOC、SOD水平显著下降,MDA水平显著上升（P<0.001）;衰老蛋白P16、P21表达显著上调（P<0.001）,自噬蛋白P62、LC3 II/I表达显著下调（P<0.001）。与模型组比较,BZBS组小鼠视网膜病理改变得到明显缓解;T-AOC、SOD水平均显著上升,MDA水平显著下降（P<0.05、0.01）;衰老蛋白P16、P21表达显著下调（P<0.001）,自噬蛋白P62、LC3 II/I表达均显著上调（P<0.05、0.01）。结论 BZBS对快速衰老小鼠视网膜有保护作用,能够减少视网膜病理改变,降低衰老蛋白表达,提高视网膜抗氧化水平;其作用机制可能与激活p62-LC3 II/I从而增强自噬有关。     

耳复康口服液对庆大霉素致豚鼠耳聋模型听觉耳动反射及瞬态诱发耳声发射的影响

目的 探究耳复康口服液对庆大霉素致豚鼠耳聋模型听觉耳动反射及瞬态诱发耳声发射（transient evoked otoacoustic emission,TEOAE）的影响。方法 将豚鼠随机分为正常对照组,模型组,耳聋左慈丸组（2.7 g·kg^-1）,高、中、低剂量耳复康口服液组（18,9,4.5 mL·kg^-1）。除空白对照组每天肌肉注射生理盐水2 mL·kg^-1,其余各组每天肌肉注射硫酸庆大霉素80 mg·kg^-1,同时给予相应的药物进行灌胃14 d,分别于第7天、第14天给药后进行听觉耳动反射的测试,第15天时每只豚鼠进行TEOAE测试。结果 对庆大霉素致豚鼠耳聋模型听觉耳动反射的影响：与模型组比,第7天耳复康口服液低剂量组可显著改善豚鼠听觉障碍（P<0.01）;第14天耳复康口服液高、中、低剂量组均可显著改善豚鼠听觉障碍（P<0.01）。对庆大霉素致豚鼠耳聋模型TEOAE的影响：与模型组比,耳复康口服液各剂量组总反应能量显著降低（P<0.05或P<0.01）;耳复康口服液各剂量组总相关度显著降低（P<0.01或P<0.05）。结论 耳复康口服液均对庆大霉素致聋豚鼠的听力障碍有改善作用。     

冬凌草片对炎症后肠易激综合征大鼠的治疗作用

目的 研究冬凌草片对炎症后肠易激综合征（Post-inflammatory Irritable Bowel Syndrome,PI-IBS）大鼠的治疗作用及其机制。方法 用2,4,6-三硝基苯磺酸制备PI-IBS大鼠模型,动物灌胃给予冬凌草片0.4,0.8,1.2 g·kg^-1·d^-1,连续2周。采用腹壁收缩实验测内脏痛阈值;水应激法评价结肠运动;免疫组化法考察嗜铬细胞数;液质联用法测血清素含量,并用免疫印迹法考察色氨酸羟化酶的表达。结果 与正常对照组相比,PI-IBS大鼠内脏痛阈值明显降低、结肠排便增多、肠嗜铬细胞增生、色氨酸羟化酶表达增多及血清素含量增高（P<0.05）。冬凌草片高剂量和中剂量给药可显著提高PI-IBS大鼠内脏痛阈值;显著减少结肠排便数量、肠嗜铬细胞数量、血清素含量和色氨酸羟化酶表达（P<0.05）。结论 冬凌草片通过减少肠道嗜铬细胞增生和血清素含量治疗PI-IBS大鼠内脏痛及结肠运动障碍。     

罗布麻叶水提物镇静催眠作用研究

目的 探讨罗布麻叶水提物（water extract of Apocynum venetum leaves,AVLWE）镇静催眠作用及机制。方法 随机将ICR小鼠分为对照组、右佐匹克隆（阳性药,0.40 mg·kg^-1）组和AVLWE低、中、高剂量（0.58、1.17、2.34 g·kg^-1）组,每天ig给药1次,连续4周,每周称体质量;于末次给药前1 d给药60 min后,应用旷场视频分析系统检测各组小鼠5 min自主活动;于末次给药45 min后,各组动物ip 1%戊巴比妥钠（35 mg·kg^-1,阈下催眠剂量）,记录30 min内入睡潜伏期、入睡动物数、睡眠时间;结束后麻醉处死动物,取脑称质量并计算脑系数。SD大鼠分为对照组、模型组、右佐匹克隆（阳性药,0.27 mg·kg^-1）组和AVLWE低、中、高剂量（0.40、0.81、1.62 g·kg^-1）组,每天ig给药1次,连续4周,每周称体质量;除对照组外,给药第28、29天ip对氯苯丙氨酸（PCPA）制备大鼠失眠模型,给药结束称取脑质量并计算脑系数,取下丘脑,ELISA试剂盒法测定5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量。结果 小鼠实验结果表明,与对照组比较,各给药组第1~4周体质量均显著降低（P<0.01）;右佐匹克隆片和AVLWE中、高剂量组睡眠发生率均显著增加（P<0.05、0.01）;右佐匹克隆片和AVLWE中、高剂量组睡眠时间显著延长（P<0.05）;AVLWE低、中、高剂量组脑系数均显著升高（P<0.01）。大鼠实验结果表明,与对照组比较,AVLWE高剂量组第1~4周体质量均显著降低（P<0.05、0.01）;与模型组比较,AVLWE高剂量组脑系数显著升高（P<0.05）;右佐匹克隆片组、AVLWE高剂量组DA水平显著降低（P<0.05）、5-HIAA水平显著升高（P<0.01）,AVLWE低、中、高剂量组5-HT水平显著升高（P<0.05、0.01）。结论 AVLWE具有改善睡眠的作用,机制可能与上调下丘脑5-HT水平、下调DA水平有关。