血小板糖蛋白特异性抗体在AA患者中的表达及其意义

目的探讨血小板糖蛋白特异性抗体在再生障碍性贫血（AA）患者发病中的作用。方法采用改良的MAIPA法，检测血浆血小板糖蛋白特异性抗体（抗GPⅡb／Ⅲa抗体和抗GPIb／IX抗体）。若患者的OD值大于正常OD值的均数＋3倍标准差则为阳性。结果从组总阳性率为20．00％（6／30），特发性血小板减少性紫癜（IIP）组总阳性率为46．67％（14／30），正常对照组阳性率为0。总阳性率的比较：从组与IIP组，P〈0．05，两者之间有显著性差异。结论部分从患者的糖蛋白特异性抗体为阳性，这表明部分从患者的血小板减少与免疫因素有关，血小板糖蛋白特异性抗体所致的血小板破坏在AA患者的血小板减少中可能具有一定作用，这为从的免疫抑制剂治疗提供了新的依据。     

流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体

目的建立流式免疫微球芯片技术（FCIBA）分析特异性血小板自身抗体的新方法。方法使用不同红色荧光强度的微球，包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体（抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体），制备特异性血小板自身抗体检测微球，用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物，检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA（MACE）进行比较，并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体。结果FCIBA分析抗GPⅡb／Ⅲa、抗GPⅠa／Ⅱa、抗GPⅣ、抗GPⅠb／Ⅸ和抗HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体，批内重复性变异系数（CV）分别为4．82％、6．09％、5．04％、5．73％、5．30％；稀释试验呈对数线性相关，相关系数（r）分别为0．9972．0．9966．0．9988．0．9965、0．9982；新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关，r值分别为0．9289、0．9224、0．8894、0．9100、0．9134（P均〈0．01）。新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51．69％；其中，抗GPⅡb／Ⅲa为40．82％，抗GPⅠa／，Ⅱa为24．45％，抗GPⅣ为19．39％，抗GPⅠb／Ⅸ为32．65％，抗HLA-ABC为17．35％。新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本，阳性率为0。结论本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法，可同时分析抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／，Ⅱa、GPⅣ、GPⅠb／Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体。     

直接MAIPA对免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜的鉴别诊断

目的检测免疫性与非免疫性血小板减少患者血小板膜糖蛋白特异性自身抗体，评价该方法在免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜鉴别诊断中的价值。方法应用改良直接单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测血小板膜糖蛋白(GPⅡh／Ⅲa、GP I b和GPI a／Ⅱa)特异性自身抗体。结果免疫性血小板减少患者自身抗体阳性率(76．4％)显著高于非免疫性血小板减少患者(3．6％)(P＜0．05)。直接MAIPA诊断免疫性血小板减少的敏感性为76．4％，特异性为96．4％，阳性预测值为97．1％。GPⅡh／Ⅲa特异性自身抗体阳性的免疫性血小板减少患者血小板计数与自身抗体吸光度比值呈显著负相关(r=-0．338，P＜0．05)。结论直接MAIPA检测血小板膜糖蛋白特异性自身抗体对于鉴别免疫性与非免疫性血小板减少有一定意义。     

南宁地区成人及儿童ITP患者体内血小板自身抗体特异性分布的研究

目的：研究血小板膜糖蛋白特异性自身抗体在成人及儿童原发免疫性血小板减少症（ITP）患者中分布的异同。方法应用酶联免疫吸附试验（PAKAUTO 试剂盒）检测 ITP 组（83例）及非 ITP 组（58例）患者血小板自身抗体,并分析成人组ITP（46例）,儿童组 ITP（37例）的抗 GP Ⅱ b／Ⅲ a 、抗 GP Ⅰ b／Ⅸ及抗 GP Ⅰ a／Ⅱ a 自身抗体特异性分布规律。结果 ITP 组血小板自身抗体阳性率为66．27％,高于非 ITP 组的6．90％,差异有统计学意义差异有统计学意义（P＜0．05）。成人组女性 ITP 患者占60．87％,儿童组女性 ITP 患儿占64．86％,差异无统计学意义（P ＞0．05）,但两组女性发病率均高于男性,差异有统计学意义（P＜0．05）。成人组 ITP 患者血小板自身抗体阳性率为63．04％,儿童组 ITP 患儿抗体阳性率为70．27％,差异无统计学意义（P＞0．05）;且成人组与儿童组 ITP 患者血小板自身抗体特异性分布差异无统计学意义（P ＞0．05）,均以抗 GP Ⅱ b／Ⅲ a 和抗 GPⅠ b／Ⅸ抗体多见。结论血小板自身抗体检测对 ITP 诊断、鉴别诊断及治疗均有重要的参考价值,GP Ⅰ a／Ⅱ a 抗体介导的 ITP很值得深入研究。     

一步免疫印迹法同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体及其对RA患人的诊断价值

目的 提高抗RA33抗体诊断类风湿性关节炎（RA）的特异性。方法 建立一步免疫印迹法，可同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体。并对266例不同风湿性疾病患者血清和24例正常人血清进行了检测。结果 抗RA33抗体阳性率：RA38％（38/100），SLE35．8％（24/67），MCTD36．4％（8／22），SS8．3％（3/36）。抗RA33抗体阳性血清中抗ENA抗体的检出率：95．8％（23／24）SLE有抗Sm／ulRNP抗体，100％（8／8）MCTD有抗ulRNP抗体，100％（3／3）SS有抗SSA/SSB抗体，RA血清抗ENA抗体均为阴性。结论 本文建立的一步免疫印迹法可有效地鉴别抗RA33抗体阳性的RA和SLE、MCTD等病人。     

病毒性肝炎患者血清自身抗体的变化

目的：探讨病毒性肝炎患者自身抗体的变化及其与病毒性肝炎的相关性。方法采用免疫印迹法检测370例病毒性肝炎患者（包括甲型肝炎56例、乙型肝炎157例、丙型肝炎115例、丁型肝炎23例、戊型肝炎19例）抗线粒体抗体（AMA）、抗线粒体抗体2型（AMA-2）、抗平滑肌抗体（SMA）、抗肝细胞溶质抗原1型抗体（LC-1）、抗肝肾微粒抗体（LKM）、抗可溶性肝抗原／肝胰抗原抗体（SLA／LP）,同时采用免疫荧光法检测抗核抗体（ANA）。结果病毒性肝炎患者 AMA总阳性率为7．03％、AMA-M2总阳性率为3．78％、SMA 总阳性率为0．81％、LC-1总阳性率为0．54％、LKM总阳性率为1．89％、SLA／LP总阳性率为0％、ANA总阳性率为18．38％。5种病毒性肝炎中以丙型肝炎患者自身抗体阳性率最高,为62．61％,且以ANA阳性为主（33．91％）;乙型肝炎次之,为26．75％,也以ANA阳性为主（15．29％）;明显高于其它3种病毒性肝炎（甲型肝炎8．93％、丁型肝炎4．35％）、戊型肝炎0％）。结论病毒性肝炎患者血清中存在多种自身抗体,其中又以乙型肝炎、丙型肝炎多见,自身抗体中则以ANA为主。对病毒性肝炎患者进行自身抗体检测有助于了解患者机体免疫状况,以便指导临床用药。     

抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体对原发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

目的 旨在探讨血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体（Ⅱb/Ⅲa McAb）检测对原发性血小板减少性紫癜（ITP）的诊断价值。方法 共检测成人慢性ITP114例，应用Ⅱb/Ⅲa McAb(SZ-21 SZ-22)与ITP患者的血小板共同孵育，用吸光度计检测其吸光度值并与正常值相比较（做为结合值），如此值＜0．5为阳性，即判定患者血小板膜上原已结合有抗Ⅱb/Ⅲa的自身抗体。同时用竞争性酶联免疫吸附法检测患者的血小板相关IgG(PA IgG)。以非ITP性血小板减少患者做为对照组。结果 114例成人慢性ITP中，GPⅡb/Ⅲa检测阳性率为49％；非ITP组无1例假阳性。ITP组PAIgG阳性率为64％；非ITP组假阳性率为26．6％。结论 实验证实本检测法特异性好，操作简单技术稳定，对ITP的诊断、疗效观察及发病机理研究具有实用价值。     

长期依赖输注红细胞的地中海贫血患者的血小板同种免疫

背景 已研究过长期输注红细胞的地中海贫血患者的血小板同种免疫状况，包括抗HLA抗原及血小板特异性糖蛋白抗原的抗体。研究设计及方法用市售酶免疫试剂检测60例定期输注洗涤红细胞的地中海贫血患者血样的HLA及血小板特异性糖蛋白抗原的抗体，所有患者在12个月～15个月的随访期内反复筛查。结果在第一年的研究期间，19例（31％）患者产生了HLA抗体，13例（22％）患者产生了HLA抗体和血小板一特异性抗体，1例（2％）患者产生了血小板特异性抗体，     

一种新的血小板特异性抗体检测方法对免疫性血小板减少症诊断价值的研究

目的 检测血小板减少患者血清中针对血小板糖蛋白的特异性抗体,评价其对免疫性血小板减少症的诊断价值.方法 采用商业化试剂盒PAKAUTO,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各种血小板减少患者的自身血小板抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠ b/Ⅸ、GPⅠa/Ⅱa特异性抗体.结果 在免疫性血小板减少症诊断中此方法敏感性为44.0％,特异性为95.7％,阳性预测值为98.0％,阴性预测值为26.2％.阳性患者中GPⅡb/Ⅲa抗体阳性率为87％,GP Ⅰ a/Ⅱa抗体阳性率为35％,GPⅠb/Ⅸ抗体阳性率为10％.检测时未用免疫抑制剂患者阳性率(58.5％)高于用药患者(26.9％),差异有统计学意义(P ＜0.01);PLT≤20×109/L患者阳性率(51.6％)高于PLT＞ 20×109/L患者(27.8％),差异有统计学意义(P＜0.01);继发免疫性血小板减少症患者阳性率(66.7％)高于原发免疫性血小板减少症患者(41.7％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PAKAUTO检测特异性强,可有效区分免疫性和非免疫性血小板减少,在免疫性血小板减少症临床诊断中可推广应用.     

严重急性呼吸道综合征冠状病毒Spike蛋白抗原特异性的临床应用研究

目的 探讨严重急性呼吸道综合征（SARS）患者的SARS冠状病毒（SARS—CoV）抗体产生情况以及SARS-CoVSpike蛋白抗原的特异性。方法 运用酶联免疫法（ELISA）和蛋白质印迹法（WesternBlotting）检测95例SARS患者体内抗体的产生情况和验证病毒Spike蛋白抗原的特异性。结果 95例SARS患者血清抗体结果中，大部分患者出现抗体阳性，抗SARS-CoVIgM总阳性率为91．6％（87／95），抗SARS-CoVIgG总阳性率为97．9％（93／95）；高暴露人群组和正常对照组的抗SARS-CoVIgM和抗SARS-CoVIgG阳性率为0％。经过携带Spike-protein基因的重组病毒Ad-sn感染COS-1细胞后表达的s蛋白抗原，使用SARS患者抗血清能够检测出特异性蛋白条带；重组病毒感染CNE-2细胞后，表达的S蛋白抗原，能够通过不同患者抗血清同时检测到相应的特异性抗原蛋白。结论 SARS患者感染SARS-CoV后，体内可产生相应抗体；利用SARS患者所产生特异性抗血清，可以检测出克隆SARS-CoV的Spike基因所表达的Spike蛋白。     

特发性血小板减少性紫癜患者脾脏CD5+和CD5-B细胞共同参与血小板自身抗体的产生

目的：研究慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者脾脏CD5^ B细胞水平的变化及CD5^ 和CD5^-B细胞与血小板膜糖蛋白（GP）特异性自身抗体产生的关系，以识别致病B细胞亚群。方法：应用双色流式细胞仪检测8例慢性ITP患者脾脏CD5^ B细胞水平。选择4例血浆抗GPⅡb/Ⅲa和抗GP Ⅰb/Ⅸ抗体双阳性ITP切脾患者，应用Ficoll密度梯度离心及花环形成分离法分离脾脏B淋巴细胞，继而采用镝产珠分选法分选、纯化CD5^ B细胞和CD5^-B细胞，并分别进行体外培养，应用改良MAIPA法检测血浆和细胞培养上清液的血小板特异性抗体。结果：ITP患者脾脏CD5^ B细胞水平圈晨自身免疫性疾病患者略有增高，二者之间差异无统计学意义。CD5^ B细胞水平与患者血小板计数无相关性。4例血浆抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPⅠb/Ⅸ抗体双阳性。另外1例CD5^ B细胞培养液抗GPⅡb/Ⅲa抗体阴性，抗GPⅠb/Ⅸ抗体阳性;CD5^-B细胞培养液抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPⅠb/Ⅸ抗体双阳性。结论：脾脏CD5^ 和CD5^-B细胞 均可产生血小板GP特异性自身抗体，抗体产生种类和滴度无明显差异。提示二者共同参与了ITP的发病过程。     

血小板特异性自身抗体检测在特发性血小板减少性紫癜中的意义

目的 检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者体内的血小板特异性自身抗体与临床严重程度和临床疗效间的关系. 方法 应用改良的单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MAIPA)法检测血小板膜糖蛋白(GPⅡ bⅢa、GPIb)特异性自身抗体. 结果 ITP组(40例),10例为单一抗GPⅡ b Ⅲa抗体阳性.6例为单一抗GPIbα抗体阳性,20例为双抗体阳性,4例为双抗体阴性.非免疫性血小板减少组与正常对照组均为阴性.抗GPⅡbⅢa抗体(b=-0.071,P<0.01)、抗GPlbα抗体(b=-0.092,P<0.01)均与采血时血小板计数呈显著负相关.治疗后,双抗体阳性组8例治疗无效,单抗体阳性组(16例)1例治疗无效(χ2=6.09,P<0.05). 结论 血小板特异性自身抗体检测对鉴别特发性和非免疫性血小板减少症有一定价值.抗体种类与临床疗效有一定关系.     

Alloimmunization to platelet-specific antigens on glycoproteins IIb- IIIa and Ib/IX in multiply transfused thrombocytopenic patients

The rate of alloimmunization to platelet-specific antigens associated with platelet glycoproteins (GPs) IIb-IIIa and Ib/IX was studied in 293 multiply transfused thrombocytopenic patients. Antibodies to platelet-specific antigens were measured with a solid-phase assay using platelet GP IIb-IIIa or Ib/IX as the antigenic targets. Nine patients were found to have antibodies to platelet GP IIb-IIIa, and no patients had antibodies to platelet GP Ib/IX. In six of these nine patients, the specificity of the antibody was shown by using GP IIb-IIIa from donors with different platelet-specific antigen phenotypes. In the remaining three patients with antibodies to platelet GP IIb-IIIa, no specificity could be identified. These patients had autoimmune thrombocytopenia in association with lymphoma. The alloimmunization rate to platelet-specific antigens associated with GP IIb-IIIa was 2 percent, whereas the rate of alloimmunization to HLA antigens was 23 percent. Of the patients alloimmunized to HLA antigens, 9 percent also had antibodies to platelet-specific antigens. A poor response to HLA-identical platelet transfusions was observed only in those patients with positive assays in the solid-phase test. These results suggest that the incidence of antibodies to platelet-specific antigens carried on GP IIb-IIIa is low. Platelet-specific antibodies may be found more frequently in patients alloimmunized to HLA antigens than in those not so alloimmunized.     

血小板膜糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物表达变化:健康者与2型糖尿病患者的样本分析

背景:研究已证实血小板活化参与了糖尿病血管病变的发生发展.血小板膜糖蛋白Ib/IX/V复合物是血小板膜上主要的糖蛋白分子之一,是血管性血友病因子和凝血酶的受体,在血小板活化中起重要作用.目的:观察2型糖尿病患者血小板膜糖蛋白Ib/IX/V复合物及其组分糖蛋白Ibα表达的变化.设计:病例-对照实验.单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科.对象:根据1999年世界卫生组织制定的糖尿病诊断标准选择2005-12/2007-01本院门诊就诊的外周血小板计数＞ 50×109 L-1 的2型糖尿病患者51例,男28例,女23例,纳入对象在检查前两周内未服用影响血小板功能的药物.根据病情控制情况将患者分为控制良好组(n =25)和控制不良组(n =26);根据是否合并血管病变分为合并血管病变组(n =27)和无血管病变组(n =24).选择同期本院健康体检者23名为健康对照组,年龄、性别与病例组匹配.纳入对象或家属对检测项目和试验知情同意.试验经医院伦理委员会批准.方法:患者均在清晨就诊时抽取空腹肘静脉血进行检测.健康体检者于来院体检时进行相同检测.①生化指标检测:由本院检验科完成空腹血糖、糖化血红蛋白和空腹面胰岛素的检测.②糖蛋白Ib/IX/V复合物及其组分糖蛋白Ibα的表达的检测:采集清晨空腹静脉血3 mL,38 g/L枸橼酸钠抗凝后10 g/L多聚甲醛固定45 min.取50 μL固定后全血加至流式检测管,同时分别向不同管中加入20 μL糖蛋白Ib/IX/V 复合物单克隆抗体CD42a-b-c-d和PE标记的糖蛋白Ibα单克隆抗体CD42b,混匀后室温避光孵育30 min,然后CD42a-b-c-d标记的样品中加入20 μL FITC标记的羊抗鼠 IgG,混匀后室温避光孵育30 min.于FACS420型流式细胞仪上检测样本平均荧光强度.③血小板聚集率测定:参照文献检测血小板聚集率.主要观察指标:①生化指标.②糖蛋白Ib/IX/V复合物及糖蛋白Ibα的表达情况.③血小板最大聚集率.结果:实验纳入的51例2型糖尿病患者和23名健康体检者全部进入结果分析.①生化指标检测结果:控制良好组和控制不良组患者空腹胰岛素与健康对照组比较,差异有显著性意义(P ＜ 0.01).控制不良组患者空腹血糖和糖化血红蛋白均明显高于健康对照组和控制良好组,差异有显著性意义(P ＜ 0.01).②糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物和糖蛋白Ⅰbα表达情况的比较:控制良好组和控制不良组患者糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物和糖蛋白Ⅰbα的表达明显低于健康对照组,控制不良组明显低于控制良好组,差异均有显著性意义(P ＜ 0.05～0.01).无血管病变组和合并血管病变组患者均明显低于健康对照组,差异有显著性意义 (P ＜ 0.01).无血管病变组和合并血管病变组患者糖蛋白Ⅰbα明显低于健康对照组,合并血管病变组明显低于无血管病变组,差异均有显著性意义(P ＜ 0.05).糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物平均荧光强度与空腹血糖、糖化血红蛋白和空腹胰岛素呈明显负相关(r =-0.634,-0.573,-0.649,P ＜ 0.05);糖蛋白Ⅰbα平均荧光强度与空腹血糖和糖化血红蛋白呈明显负相关(r =-0.602,-0.543,P ＜0.05).③血小板聚集功能的比较:2型糖尿病患者血小板最大聚集率较正常人明显升高,差异有显著性意义(t =-3.852,P ＜ 0.01),控制不良组明显高于控制良好组,合并血管病变组高于无血管病变组,差异均有显著性意义(P ＜ 0.05).结论:2型糖尿病患者早期无血管病变时即存在血小板活化,发生血管病变后活化更明显,且血小板活化与血糖呈正相关.血小板糖蛋白Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物作为凝血酶和血管性血友病因子的受体,可能参与了2型糖尿病血管病变的发生发展.     

血小板特异性抗体对特发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

本研究的目的是比较特发性血小板减少性紫癜 (ITP)、慢性再生障碍性贫血 (CAA)、恶性血液病患者及健康志愿者特异性抗体水平 ,以评价血小板特异性抗体在ITP诊断中的价值。用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原 (MAIPA)技术同时检测血小板GPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa、GPⅣ、GPⅤ的特异性抗体。结果表明 :ITP组、CAA组、恶性血液病患者及健康志愿者血小板特异性抗体总阳性率分别为 6 9.99% ,10 % ,2 0 %和 0 %。ITP组与CAA组存在显著性差异 ( χ2 =2 0 .71,P <0 .0 0 5 ) ,ITP组与恶性血液肿瘤化疗组存在显著性差异 ( χ2 =12 .2 2 ,P <0 .0 0 5 )。健康志愿组无 1例阳性。结论 :多种抗体同时检测可提高敏感性 ,血小板特异性抗体对ITP是一种特异性高、敏感性强的实验室诊断指标。     

Prospective evaluation of the immunobead assay for the diagnosis of adult chronic immune thrombocytopenic purpura (ITP)

Summary.  Chronic immune thrombocytopenic purpura (ITP) is an autoimmune disease characterized by antibody-induced platelet destruction. To better define the role of antigen-specific assays in adult chronic ITP, we prospectively measured platelet-associated autoantibody against either glycoprotein (GP) IIb/IIIa or GPIb/IX in 282 patients with chronic ITP and 289 patients with thrombocytopenia of other causes. We divided chronic ITP into four subgroups: presplenectomy, mild (platelet count >30 000 µL⁻¹ requiring no therapy), presplenectomy, severe (platelet count <30 000 µL⁻¹ requiring therapy but not splenectomy), postsplenectomy, remission (postsplenectomy partial or complete remission without further therapy) and postsplenectomy refractory (required therapy after splenectomy failure). Positive results: total ITP group, 55.4%; presplenectomy, mild, 31.1%; presplenectomy, severe, 42.6%; postsplenectomy, remission, 50.0%; and postsplenectomy, refractory, 87.8%. In addition, the degree of positivity increased with the severity of the patient's disease. The assay had a minimum specificity of 84.4% if clinical factors, consistent with immune thrombocytopenia, were not considered in patients with thrombocytopenia associated with other diseases. However, if clinical factors consistent with immune thrombocytopenia were considered and only patients with questionable immune thrombocytopenia and patients 'lost to follow-up' were included in the false-positive group the specificity was 93.1%. We conclude that the presence of immune thrombocytopenia is highly probable if the immunobead assay is positive and that antigen-specific assays are diagnostically useful in adult chronic ITP.     

自身免疫性血小板减少性紫癜相关抗体的研究

目的　探索对自身免疫性血小板减少性紫癜 (AITP)诊断特异和敏感的实验方法。方法　采用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术 (MAIPA技术 )并加以改进 ,对比检测血小板洗脱液和血浆中血小板膜糖蛋白特异性抗体。结果　AITP患者血浆游离抗血小板膜糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )抗体总阳性率为 38.89%(5 4例中 2 1例 ) ,洗脱血小板表面抗血小板膜糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )抗体总阳性率为 6 8.5 2 %(5 4例中 37例 ) ,两者差异有显著性 (校正 χ2 =19.39,P <0 .0 0 5 )。原发AITP组血浆游离及洗脱血小板表面抗血小板糖蛋白 (GPⅡb Ⅲa、GPⅠb Ⅸ )特异性抗体总阳性率与继发性AITP组比较差异无显著性。AITP患者血小板数量与自身抗体滴度呈明显负相关。结论　MAIPA法检测血小板洗脱液中抗血小板糖蛋白抗体在AITP的诊断和治疗中具有高度特异性 ,且敏感性较血浆抗体检测显著提高。     

流式微球技术检测糖蛋白Ⅱb/Ⅲ a自身抗体在特发性血小板减少性紫癜诊断中的应用

目的 建立流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白Ⅱ b/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)特异性自身抗体的方法,比较该方法和改良间接单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)在特发性血小板减少性紫癜(ITP)与非免疫性血小板减少性紫癜鉴别诊断中的价值.方法 应用抗人血小板GPⅡb/Ⅲa单抗(CD41a)包被微球.分离血小板,将血小板裂解后与包被过的微球孵育,再加入PE标记的羊抗人IgG多克隆抗体,流式细胞术分析.分别用该方法和改良间接MAIPA检测血小板表面和血浆中的糖蛋白特异性自身抗体,并将检测结果进行比较.结果 将样本的平均荧光强度值(MFI)与正常对照MFI的均值比较,计算比率.该比率均值及范围在ITP组为3.36(0.84～22.94),非免疫性血小板减少组为1.16(0.67～5.59),正常对照组为1.08(0.72～1.76).非参数检验得ITP组荧光强度比率与非免疫性血小板减少组及正常对照组存在显著差异(P《0.01).若将正常对照组上限作为界值,比率大于1.76定为阳性,则流式微球技术诊断ITP的敏感性为71.43%,特异性为94.28%,阳性预测值为95.24%,其敏感性高于改良间接MAIPA的测定值(51.79%)(χx2=4.57，P<0.05)。由ROC曲线得流式微球法区分ITP患者与正常人的鉴别效度为0.916。结论 流式微球技术检测血小板膜表面糖蛋白特异性自身抗体，耗时短、重复性好，敏感性高于改良间接MAIPA，对提高ITP的实验诊断水平及指导临床治疗有一定的价值。     

Idiopathic thrombocytopenic purpura

Idiopathic(autoimmune) thrombocytopenic purpura(ITP) is characterized by thrombocytopenia and normal to increased numbers of megakaryocytes. ITP is a disease caused by circulating autoantibodies that react with the platelet membrane. It is thought that platelet-associated IgG(PAIgG) plays an important role in the mechanism of ITP, since increases in PAIgG are closely related to decreases in platelet count in patients with this disease. However, it is possible that PAIgG includes immune complex and platelet antibodies to human platelet alloantigens(HPA) other than autoantibodies. There have been several recent reports on autoantibodies to glycoprotein IIb/IIIa and Ib/IX. Although the etiology of ITP remains unclear, both genetic and environmental factors appear to be involved in it. With respect to the genetic aspects of ITP, the human leukocyte antigen (HLA) haplotype of patients is considered a potentially important factor in etiology. Various methods have been used for the treatment of chronic ITP. However, splenectomy and corticosteroids are still the mainstays of therapy. Because of the heterogeneity of the disease, however, approximately 20% of cases are refractory to these treatments. New therapy of chronic or refractory ITP with thrombopoietin, antiCD40 ligand antibody, and Helicobactor pylori eradication have recently been reported.     

流式微球技术检测血小板特异性抗体

目的建立流式微球技术检测血小板特异性自身抗体方法,并对方法学及临床应用进行初步探讨。方法用包被抗血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb、Ⅱb、Ⅲa、Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体的微球捕获与血小板GP结合的特异性抗体,加入FITC标记的羊抗人IgG抗体后用流式细胞仪检测分析。结果特发性血小板减少性紫癜(ITP)组4种单抗荧光强度比值与非ITP血小板减少组和正常对照组有显著性差异(P<0.01);若将ITP组患者4种单抗荧光强度比值分别大于正常对照组上限1.37、1.24、1.48和1.19判断为阳性,则流式微球技术检测血小板特异性自身抗体的敏感性为73.2%,特异性为94.3%;4种单抗联合检测总体敏感性明显高于改良间接单抗特异的血小板抗原固定试验(MAIPA)(P<0.05),且大于各单个抗体检测敏感性。结论流式微球技术可以简便、快捷地检测血小板膜糖蛋白特异性抗体,联合检测多种自身抗体可以提高检测阳性率,对于ITP的诊治具有一定的临床价值。