活化补体对大鼠枯否细胞分泌功能的影响

目的：观察活化补体对大鼠KC合成TNFα和NO的影响。方法：以ZAHS和大鼠KC体外培养建立实验模型，观测KC在ZAHS及经抗人C3、C5中和的ZAHS作用下不同时相时NO和TNFα的合成水平。结果：①ZAHS处理组：KC培养室内上清NO水平逐渐上升，6－48h各点显著高于正常对照组（P＜0．01）；TNFα水平在0－3h处于平稳，3－12h上升，6h后各点测值显著高于正常对照，但仍低于LPS和ZAHS＋LPS组（P＜0．01）。②阻断组：NO6－48h各点及TNFα10h测值较处理组均显著下降（P＜0．01）。结论：ZAHS中的C3、C5片段可刺激KC合成TNFα和NO，这对于研究补体在某些病理情况下介导肝损伤的机制有一定意义。     

旁路活化补体激活内皮细胞表达趋化因子及其NF-kB调控作用的实验研究

目的 研究旁路活化补体在一定条件下直接激活内皮细胞表达趋化因子白介素（IL－8）、单核细胞趋化蛋白（MCP－1）、以及核转录因子kappaB(NF-kB)在其中的调控作用。方法 用酵母多糖活化人血清（ZAHS）直接作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞单层（HUVECS）：放射免疫法（RIA）和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测IL－8和MCP－1的表达水平；凝胶电泳迁移率（EMSA）方法测定NF－kB的活化。结果：（1）ZAHS（1：30）能够诱导内皮细胞表达IL－8和MCP－1，但二者时相变化明显不同。IL－8从4小时开始即有明显上升；而MCP－1水平则从8小时才开始有显著增加。（2）ZAHS能够激活NF－kB,30分钟时即有活化，60分钟明显增加，120分钟达到高峰。NF－kB抑制剂PDTC（pyrrolidine dithiocarbamate,20μmol/L）预先处理HUVECS单层2小时，可以明显降低IL－8和MCP－1的表达（P＜0．05）。结论 旁路活化补体能直接在转录水平诱导人脐静脉内皮细胞表达IL－8和MCP－1，这一过程至少部分通过NF－kB的活化来调控。     

板蓝根多糖对大鼠自体肝移植后一氧化氮和内皮素-1的影响

目的：探讨板蓝根多糖（RIPS）预处理对大鼠自体肝移植后一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的影响。方法实验大鼠随机分正常对照组（NC）、自体肝移植组（AT）和RIPS组,分别于自体肝移植术后1、6、12、24 h检测血清NO、内皮素1（ET-1）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,并进行肝组织形态学观察。结果在术后1、6、12、24 h RIPS组血清ET-1水平显著低于AT组,血清NO水平显著高于AT组,差异有统计学意义（P＜0．05）;RIPS组各时相点血清ALT和AST水平显著低于AT组,差异有统计学意义（P＜0．05）。光镜下肝细胞形态学观察显示,与AT组相比,RIPS组的肝淤血水肿和肝细胞变性坏死明显减轻。结论 RIPS对移植肝具有保护作用可能与提高NO水平、降低ET-1水平相关。     

高压氧综合治疗对严重烧伤患者血浆一氧化氮、内皮素-1含量的影响

目的研究严重烧伤患者血浆一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）含量的变化及高压氧（HBO）的影响。方法选择烧伤总面积（TBSA）≥30％或Ⅲ度面积≥10％的患者84例，分为高压氧组（HBO组）和非高压氧组（non—HBO组），分别于伤后10个时相点抽取静脉血，分别用硝酸还原酶法，放免分析法测定血浆NO，ET-1含量的变化。结果non—HBO组患者伤后各时相点平均血浆ET-1含量明显高于正常对照组（P〈0．01），而NO的含量则显著降低（P〈0．01）；HBO组治疗后NO接近正常对照组（P〉0．05），但ET-1显著低于non—HBO组（P〈0．01）。结论严重烧伤患者血浆NO的降低及ET-1的升高参与烧伤后机体变化的全过程；HBO可显著改变严重烧伤患者血浆NO，ET-1含量，故对烧伤治疗有益。     

检测乙肝病毒前S1蛋白的临床意义

目的：检测乙肝病毒前S1蛋白，评价其在病毒感染、复制、传染性及对肝细胞损伤等方面的临床意义。方法：根据血清标志（HBV—M），将乙肝病毒感染208例分为5组。即HBsAg（＋）组（A组）；HBsAg（＋）及HBeAg（＋）组（B组）；HBsAg（＋）及HBcAb（＋）组（C组）；HBsAg（＋）、HBeAg（＋）及HBcAb（＋）组（D组）；HBsAg（＋）、HBeAb（＋）及HBcAh（＋）组（E组）。分别对各组进行前S1蛋白、HBV-DNA、丙氨酸转氨酶（ALT）检测，并对结果进行分析。结果：前S1蛋白总阳性124例（59．6％），各组分别为0例、16例（69．6％）、12例（32．4％）、60例（90．9%）和36例（50．0％）；HBV—DNA总阳性120例（57．7％），各组分别为1例（10．0％）、18例（78．3%）、13例（35．1％）、58例（87．8％）和30例（41．7％）；ALT总异常82例（39．4％），各组分别为0例、9例（39．1%）、2例（5．4％）、57例（86．4％）和14例（19．4%）。前S1蛋白阳性和HBV—DNA阳性各组差异不显著（P〉0．05），两者的相关系数为0．998；前S1蛋白阳性和ALT异常除D组外均差异非常显著（P〈0.01）。提示，如果前S1蛋白检测阳性，不论HBeAg与ALT检测结果是否正常，都表示存在乙肝病毒复制并具有传染性。结论：乙肝病毒前S1蛋自可作为判断乙肝病毒感染、复制、传染性及对肝细胞损伤的指标。     

肝细胞移植实验研究中大鼠肝细胞的冻存与复苏初探

目的：以大鼠为实验对象，研究冷冻复苏及降温速率对肝细胞活率、形态和功能的影响。方法：改良Seglen门静脉－下腔静脉双插管胶原酶灌注法分离获取游离肝细胞。分别将肝细胞按B程序（渐进式降温程序：－1．5℃/min至－18℃，保持5min,-20℃/min至－80℃，投入液氮保存）；C程序（慢速线形冷冻程序：－2．5℃/min至－80℃，投入液氮保存）进行处理。2组冷冻细胞分别在液氮中冷藏3、15、30d后，40℃水浴复苏。 检测复苏肝细胞活率、形态结构、蛋白质合成功能的改变。结果：（1）B组、C 组冻存后各时间点细胞活率及3H－亮氨酸合成量较新鲜组（A组）均有明显改变。结果：（1）B组、C组冻存后各时间点细胞活率及3H－亮氨酸合成量较新鲜组（A组）均有明显下降（P＜0．001），C组明显低于B组（P＜0．005），2组各组内在不同时间点的活率及3H－亮氨酸合成量无明显差别（P＞0．05）。（2）光学显微镜下见复苏细胞与新鲜细胞无明显区别。电子显微镜下可见B、C组细胞超微结构有明显改变，但B组程度较C组轻。结论：降温速率的快慢直接关系冻存肝细胞的效果。冷冻复苏过程使细胞膜完整性受损、细胞质内内容 丢失导致细胞的复苏后活率降低、细胞功能丧失。肝细胞在液氮中保存，其活率及蛋白质合成功能并不随保存时间的延长而降低。     

黄芪对过氧化损伤软骨细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响

目的：观察黄芪（astragalus）对体外关节软骨细胞过氧化损伤中细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响。方法：原代培养兔膝关节软骨细胞,采用Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光法进行鉴定,分为正常组、过氧化氢损伤对照组（损伤组）和过氧化氢损伤＋黄芪干预组（黄芪组）。损伤组采用终浓度为0．2mmol／L的过氧化氢制造体外软骨细胞过氧化损伤模型,黄芪组将终浓度分别为0．02、0．1、0．5g／L的黄芪在过氧化氖损伤前60min加入。测定各组细胞活力（MTT法）、细胞凋亡率（流式细胞术）、Bim蛋白含量（免疫组化染色）、培养上清LDH活性（紫外分光光度法）。结果：与正常组比较,损伤组细胞活力显著降低,细胞凋亡率增加,Bim蛋白表达增加,培养上清LDH活性显著上升。黄芪组与损伤组比较,细胞活力显著升高,细胞凋亡率下降,Bim蛋白表达降低,培养上清LDH活性显著下降。结论：黄芪能降低细胞凋亡率和Bim蛋白的表达,抵抗过氧化氢造成的体外软骨细胞过氧化损伤。     

瘀胆血清体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）体外诱导其分化为肝细胞的可行性。方法分离、纯化并鉴定大鼠骨髓MSCs,制备正常及瘀胆大鼠血清,取第3代MSCs分组培养：A组：DMEM＋10％FBS;B组：肝细胞生长培养基（HGM）＋5％FBS0、组：HGM＋5％正常大鼠血清;D组：HGM＋5％瘀胆大鼠血清;E纽：HGM＋5％瘀胆大鼠血清＋25ug／LHGF。观察各组细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,采用RT～PCR检测甲胎蛋白（AFP）和细胞角蛋白18（CK18）的表达,溴甲酚绿法检测上清液中白蛋白（ALB）的含量。结果培养过程中,D、E组出现多角形及双核细胞,A、B、C组细胞形态无明显变化。生长曲线显示细胞生长速度C组最快,D、E组均较B组快（P〈0．05）。D、E组于诱导第7,14天出现AFPmRNA阳性表达,第14,21天出现CK18mRNA阳性表达,D、E组上清波中白蛋白浓度随诱导时间延长逐渐升高,且E组高于D组（P〈0．05）。A、B、C组未见AFP、CK18表达及白蛋白浓度变化。结论正常大鼠血清能明显促进MSCs的增殖;瘀胆血清对MSCs有一定促增殖作用,且能有效诱导其向肝细胞分化,联合使用HGF能提高分化率。     

颈5加颈7肌间沟臂丛神经阻滞效果观察

目的：观察C5＋C7肌间沟臂丛神经阻滞的效果。方法：选择上肢手术180例，ASAⅠ或Ⅱ级，随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组，每组各60例。术前均肌注阿托品0．5mg，咪达唑仑0．15mg／kg体重。局麻药均为2%利多卡因10ml＋0．75％布比卡因10ml＋0．9％氯化钠注射液10ml。Ⅰ组（C6水平）、Ⅱ组（C7水平）分别注入局麻药30ml，Ⅲ组（C5和C7水平）在每个穿刺点注入局麻药15ml，阻滞结束后按压两点间部位5min。比较三组麻醉效果、生命体征和不良反应发生率。结果：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组麻醉优良率分别为66．7％、75．0％和94．6％，Ⅲ组麻醉效果优良率明显高于Ⅰ组和Ⅱ组（P〈0．01）。三组均未发生严重并发症，Horner综合征发生率三组比较，差异不显著（P〉0．05）。结论：与传统C6、C7水平肌间沟臂丛神经阻滞相比，C5＋C7肌间沟臂丛神经阻滞麻醉效果更为安全、有效。     

LPS和TNFα对肺微血管内皮细胞内游离钙的影响

目的探讨脂多糖（LPS）、肿瘤坏死因子α（TNFα）对大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVEC）内游离钙浓度（[Ca^2＋]i）的影响。方法将细胞接种于盖玻片上,细胞单层汇合后进行实验。实验分组：LPS组（用10ug/mlLPS）,LPS＋山莨菪碱组（用10ug／mlLPS＋10ug/ml山莨菪碱）,TNFα组（用5000u／mlTNFα）,TNFα＋山莨菪碱组（用5000u／mlTNFα＋10ug／ml山莨菪碱）,正常对照组加等量稀释液。作用15、90min后按照试剂盒提供的方法,并参照文献测定[Ca^2＋]i。结果与正常对照组比较,LPS组、LPS＋山莨菪碱组15min和90min两个时相点[Ca^2＋]i均显著升高（P〈0．01）;LPS组与LPS＋山莨菪碱组比较,15min和90min两个时相点[Ca^2＋]无明显差异（P〉0．05）。同样,与正常对照组比较,TNFα组、TNFα＋山莨菪碱组15min和90min两个时相点[Ca^2＋]i均显著升高（P〈0．01）;TNFα组与TNFα＋山莨菪碱组比较,15min和90min两个时相点[Ca^2＋]i无明显差异（P〉0．05）。结论LPS、TNFα作用可使RPMVEC[Ca^2＋]i显著升高,山莨菪碱对LPS、TNFα诱导的RPMVEC[Ca^2＋]i升高无显著抑制作用;LPS、TNFα引起的[Ca^2＋]i浓度升高与β—AR介导的信号转导通路无关;[Ca^2＋]i升高可能参与了G蛋白偶联受激酶的活性调节。     

丹参对大鼠烧伤后细胞的保护作用

目的:探讨丹参与大鼠烧伤后细胞的保护作用。方法:68只SD大鼠随机分为健康对照组(A)、烧伤对照组(B)、烧伤治疗组(C)。B组和C组造成20%总体表面积Ⅲ度烧伤。在伤后2、6、12小时,动态检测肠组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量、血浆中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)水平的变化。结果:(1)B、C组肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)水平低于A组,C组与A组可差异无统计学意义(P>0.05);(2)B、C组肠组织丙二醛(MDA)含量显著高于A组(P<0.05),C组显著低于B组(P<0.05);(3)B、C组血浆中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)含量显著高于A组(P<0.05);C组低于B组。结论:丹参能减轻大鼠烧伤后细胞损伤;丹参能通过提高SOD降低MDA、ET和NO的生成等途径,减轻烧伤后细胞损伤;有可能减轻烧伤后全身炎症反应综合症和多器官功能障碍综合症,提高治愈率。     

一氧化氮在内毒素血症肝损害发病中的作用

目的：了解一氧化氮（nitric oxide,NO)在急性内毒素血症肝损害发病中的作用。方法：采用内毒素（脂多糖LPS）腹腔内注射,观察大鼠血清NO产物、ALT、AST及LDH水平变化和肝组织结构改变情况。结果：LPS给药后,大鼠血清NO产物、ALT、AST及LDH水平均呈LPS剂量依赖型升高,肝组织结构明显改变,并且NO产物水平与ALT、AST及LDH水平和肝组织病变程度平均积分均呈正相关。结论：在急性内毒素血症肝损害发病中,NO可能具有重要作用。并且血清NO产物水平可能作为该肝损害发生的早期观察指标之一。     

烧伤病人血管内皮细胞及其功能变化与山莨菪碱治疗的临床研究

为研究山莨菪碱对烧作病人血管内皮细胞（ＶＥＣ）的保护作用，６０例烧伤病人，随机分成烧伤对照组（３０例）和山莨菪碱治疗组（３０例），两组病人分别于伤后１、５、１０、２１天取静脉血测定ＣＥＣ、ＥＴ、ＮＯ、ＬＤＨ、ＡＬＴ及白细胞数，１０名正常健康者作为正常对照组，两线病人所测指标皆明显高于正常对照组，治疗组用药期间各指标值明显低于烧伤对照组，尤其用药后５天差异有极显著性意义，说明山莨菪碱对烧伤病人血管内     

酚妥拉明和地塞米松对吸入性损伤大鼠肝脏损伤的保护作用及机理

目的　观察酚妥拉明和地塞米松对重度吸入性损伤大鼠肝脏损害的保护作用及机制。方法　将 72只大鼠随机分为A、B、C 3组。对照组 (C组 )腹腔注射生理盐水 ,A组腹腔注射酚妥拉明 ,B组腹腔注射地塞米松。另取 6只非致伤大鼠做伤前值测定 ,再取 6只致伤大鼠 ,伤后 30分钟做伤后值测定。结果　C组谷丙转氨酶 (GPT)、总胆红素 (TBIL)、丙二醛 (MDA)、MDA/超氧化物歧化酶 (SOD)及组织含水量 (WCT)均明显增高 ,组织中一氧化氮 (NO)水平较伤前值变化不大 ,SOD、ATP水平降低。A组和B组中TBIL、GPT、MDA、MDA/SOD、NO明显低于C组 (P <0 .0 1 ) ,A组ATP和SOD明显高于C组 (P <0 .0 1 ) ;B组SOD高于C组 (P<0 .0 1 ) ,B组的ATP则与C组差别不显著 (P >0 .0 5 ) ,B组肝组织含水量低于对照组 (P <0 .0 1 )。结论　酚妥拉明与地塞米松均可能通过调节机体的NO水平进而提高机体抗氧化能力和能量代谢 ,从而对重度吸入性损伤后大鼠的肝脏起保护作用。在改善能量供应和降低MDA方面酚妥拉明效果优于地塞米松     

Hypoxia-inducible proteins HIF1α and lactate dehydrogenase LDH5, key markers of anaerobic metabolism,relate with stem cell markers and poor post-radiotherapy outcome in bladder cancer

Purpose: To assess whether anaerobic metabolism, proliferation activity and stem cell content are linked with radioresistance in bladder cancer. Materials and methods: Tissue sections from 66 patients with invasive transitional cell bladder cancer treated with hypofractionated accelerated radiotherapy, was immunohistochemically analyzed for the Hypoxia-Inducible Factor 1α (HIF1α) and the anaerobic glycolysis enzyme lactate dehydrogenase 5 (LDH5). Proliferation index (Ki-67) and stem-cell marker (cluster of differentiation CD44, aldehyde dehydrogenase ALDH1) expression was also examined. Results: Both HIF1α and LDH5 expression were linked with high CD44 stem cell population (p?=?0.001 and 0.05, respectively), while high Ki-67 proliferation index was linked with nuclear LDH5 expression (p?=?0.03) and high histological grade (p?=?0.02). A strong significant association of HIF1α (p?=?0.0009) and of LDH5 (p?Conclusions: HIF1α and LDH5 are markers of poor outcome in patients with bladder cancer treated with radiotherapy. Blockage of anaerobic metabolism may prove of importance in clinical radiotherapy.     

大鼠全腹照射后血中NO及iNOS含量的变化

目的　观察大鼠全腹照射后血清一氧化氮 (NO)及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)水平的变化及其与放射性肠道损伤的关系。方法　将 30只SD大鼠随机分为正常对照组、照射对照组、IgY预防组 ,取血清测定NO及iNOS。结果　照射对照组NO及iNOS水平均明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,是后者的 3倍。IgY预防组NO及iNOS水平均明显低于照射对照组 (P <0 0 1) ,稍高于正常对照组。NO与iNOS升高同步。结论　NO及iNOS能较好地反映放射性肠道损伤。     

蝮蛇抗栓酶对烧伤早期组织细胞损伤的影响

本研究针对烧伤后血液呈高凝状态,加重组织损害的特点,利用家兔25％TBSAⅢ°烫伤模型,采用蝮蛇抗栓酶治疗,观察脂质过氧化产物丙二醛（MDA）及血清酶学变化,结果显示：蝮蛇抗栓酶能明显减轻烧伤早期脂质过氧化损害;对烧伤后继发性组织损伤有保护作用。     

数字乳腺X射线摄影中管电流量优化的实验研究

目的:探讨数字乳腺X射线摄影中不同靶/滤过组合时降低管电流量(mAs)对图像质量与辐射剂量的影响。方法:不同靶/滤过组合时,以自动曝光模式(AEC)的mAs为基础,分别降低10%、20%、30%、40%、50%时对厚度为4.4 cm的模体进行曝光,测量所得图像的对比噪声比(CNR)、信噪比(SNR)、品质因子(FOM)...     

Nitric oxide stimulates 18F-FDG uptake in human endothelial cells through increased hexokinase activity and GLUT1 expression.

The endothelium constitutes a functionally active organ critically involved in angiogenesis. Nitric oxide (NO) is an important regulator of vascular homeostasis and angiogenesis and stimulates glucose metabolism in certain cells. We thus investigated the effect of exogenous NO on (18)F-FDG transport in human endothelial cells. METHODS: Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were treated with the NO donors sodium nitroprusside (SNP) or diethylenetriamine (DETA), in concentrations of 1 micromol/L-1 mmol/L for up to 24 h. (18)F-FDG uptake levels corrected for protein content were determined by cellular radioactivity measured after 30-min incubation. Cells were evaluated for total hexokinase activity and plasma membrane glucose transporter 1 (GLUT1) levels, and involvement of potential signaling pathways was investigated by cotreatment with respective protein kinase inhibitors. RESULTS: Both SNP and DETA stimulated HUVEC (18)F-FDG uptake, which began at 16 h and peaked at 24 h. The increase in (18)F-FDG uptake was dose dependent, reaching 464.0% +/- 49.8% and 254.5% +/- 10.8% of control levels at 24 h with 1 mmol/L SNP and DETA, respectively. Exposure of HUVECs to 1 mmol/L SNP resulted in a 3.5 +/- 0.3-fold elevation in hexokinase activity (P < 0.01) and a significant increase in GLUT1 levels. SNP-stimulated (18)F-FDG uptake was abolished by cotreatment with cycloheximide, the tyrosine kinase inhibitor genistein, the phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) inhibitor wortmannin, or the protein kinase C inhibitor staurosporine. CONCLUSION: NO stimulates (18)F-FDG uptake in HUVECs through an increase in GLUT1 expression and hexokinase activity, which appears to involve both protein kinase C and PI3K pathways.     

Dedicated breast CT: radiation dose and image quality evaluation.

PURPOSE: To evaluate the feasibility of breast computed tomography (CT) in terms of radiation dose and image quality. MATERIALS AND METHODS: Validated Monte Carlo simulation techniques were used to estimate the average glandular dose (AGD). The calculated photon fluence at the detector for high-quality abdominal CT (120 kVp, 300 mAs, 5-mm section thickness) was the benchmark for assessing the milliampere seconds and corresponding radiation dose necessary for breast CT. Image noise was measured by using a 10-cm-diameter cylinder imaged with a clinical CT scanner at 10-300 mAs for 80, 100, and 120 kVp. A cadaveric breast was imaged in the coronal plane to approximate the acquisition geometry of a proposed breast CT scanner. RESULTS: The AGD for 80-kVp breast CT was comparable to that for two-view mammography of 5-cm breasts (compressed breast thickness). For thicker breasts, the breast CT dose was about one-third less than that for two-view mammography. The maximum dose at mammography assessed in 1-mm(3) voxels was far higher (20.0 mGy) than that at breast CT (5.4 mGy) for a typical 5-cm 50% glandular breast. CT images of an 8-cm cadaveric breast (AGD, 6.3 mGy) were subjectively superior to digital mammograms (AGD, 10.1 mGy) of the same specimen. CONCLUSION: The potential of high signal-to-noise ratio images with low anatomic noise, which are obtainable at dose levels comparable to those for mammography, suggests that dedicated breast CT should be studied further for its potential in breast cancer screening and diagnosis.