抗疲Ⅰ号耐缺氧抗疲劳的实验观察

目的：观察对进驻高海拔1570～2366m地区士兵疲劳适应性训练具有满意效果的抗疲Ⅰ号对小鼠耐缺氧、抗疲劳的作用。 方法：实验于2004-06／2005-06在解放军兰州军区总医院完成。选取清洁级成年昆明雌性小鼠160只，18-22g，雄性小鼠240只，18-22g。抗疲Ⅰ号由兰州乃夫生物技术研究所研制提供，由枸杞、肉桂、桑叶、茯苓、野菊花等组成。其中总蛋白含量为31．71％，总氨基酸为62．19％，8种必需氨基酸为32．51％，谷光甘肽为383．10mg／g，总多糖为4．13％，总皂甙为3．34mg／g，超氧化物为28.70NU／mg。将雌雄昆明小鼠按体质量分别随机分成按人体推荐抗疲Ⅰ号药用量[0.03g／（kg&;#183;d）]的10，20，30倍[0，3．0．6，0．9s／（kg&;#183;d）13个剂量组和1个阴性对照组，雌性小鼠每组40只，雄性小鼠每组60只。用药组和对照组分别以相应剂量抗疲Ⅰ号（均溶于0．4-0.5mL蒸馏水中）和生理盐水灌胃饲养30d，雌性小鼠每组再随机分为3组，分别进行耐缺氧实验的常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验，分析抗疲Ⅰ号耐缺氧功能；雄性小鼠每组再随机分配，分别进行负重游泳试验，爬杆试验，尿素氮、肝糖原测定试验，乳酸测定试验。通过对各实验组耐缺氧3项实验指标和抗疲劳4项实验指标的统计，分析抗疲Ⅰ号耐缺氧、抗疲劳的可能机制。 结果：耐缺氧试验小鼠160只自然淘汰14只，抗疲劳试验小鼠240只自然淘汰12只，共374只小鼠进入结果分析。①抗疲Ⅰ号0．3g／（kg&;#183;d）剂量组小鼠亚硝酸钠中毒存活时间与对照组相比，差异有显著性意义[（18．65&;#177;2．74），（15．95&;#177;1.68）min，P〈0．05]；0．6g／（kg&;#183;d）剂量组急性脑缺血性缺氧时间与对照组相比，差异有显著性意义[（32．38&;#177;3.57），（29．84&;#177;2．23）s。P〈0．05]。②0.6g／（kg&;#183;d）组负重游泳试验时间与对照组相比，差异有显著性意义[（414．86&;#177;180．54）。（280．28&;#177;78．25）s，P〈0．05]；0．9g／（kg&;#183;d）组爬杆试验时间及肝糖原含量与对照组相比，差异有显著性意义[（327．00&;#177;156．00），（152．00&;#177;118．00）s；（23580．0&;#177;11712．2），（12113．6&;#177;9503．8）mg／kg；P〈0．05]；0．3，0．6g／（kg&;#183;d）组乳酸升幅明显低于对照组（P〈0．05）。 结论：抗疲Ⅰ号有较好的耐缺氧、抗疲劳作用，与其能减少脑耗能、耗氧，清除体内乳酸和自由基，改善小鼠肌肉、肝脏储备糖原营养的功能有关。     

黄体酮对缺氧脑组织一氧化氮含量的影响

目的:观察成年小鼠缺氧后脑内一氧化氮含量的变化及黄体酮的干预作用。方法:实验于2002-09/2003-06在新乡医学院生理学与神经生物学教研室完成。32只雄性昆明种小鼠,随机分为4组,对照组、单纯缺氧组、低孕酮(4mg/kg)组和高孕酮(8mg/kg)组,后两组于缺氧前30min腹腔注射孕酮4mg/kg或8mg/kg。小鼠缺氧24h断头取脑,检测脑皮质及海马组织中的一氧化氮含量。结果:32只小鼠均进入结果分析。①缺氧24h后,单纯缺氧组脑皮质一氧化氮的生成量明显高于对照组眼(2.15±0.29),(1.66±0.65)μmol/g,P<0.05演;经孕酮预处理的两组,脑皮质组织一氧化氮含量较单纯缺氧组均有所下降,4mg/kg组的效果尤为明显,下降了35.81%(P<0.01)。②海马组织在缺氧24h后,单纯缺氧组一氧化氮含量明显高于对照组眼(1.76±0.60),(1.21±0.58)μmol/g,P<0.05演;低孕酮(4mg/kg)组眼(1.07±0.33)μmol/g演显著低于单纯缺氧组(P<0.01);而高孕酮(8mg/kg)组眼(1.27±0.41)μmol/g演与单纯缺氧组差异无显著性(P>0.05)。结论:成年小鼠缺氧24h后脑皮质和海马组织一氧化氮含量明显升高,黄体酮通过降低这种一氧化氮的升高,可能产生一定的神经保护作用。     

中药复方一身清改善便秘小鼠的排便功能

目的:观察中药复方一身清对正常小鼠小肠运动和便秘小鼠排便功能的影响。方法:实验于2004-04/05在北京大学医学部基础医学院药理学系神经药理实验室完成。①选用ICR小鼠80只,雌雄各半,清洁级。②观察中药复方一身清对正常小鼠肠道炭粉推进率的影响:取40只小鼠,随机分为4组,每组10只:对照组(灌胃100g/L阿拉伯胶 50g/L的活性炭液配成的混悬液)和中药复方一身清小、中、大剂量组眼按0.5,1.0,2.0g/kg灌胃0.1mL/10g中药复方一身清混悬液(复方由壳聚糖、拟黑多刺蚁和黑木耳微粉3种成分按4∶3∶3的质量比组成,为灰黑色粉末,易吸水膨胀,不溶于水和有机溶剂。将中药复方一身清原料粉加上述100g/L阿拉伯胶,再加上50g/L的活性炭液按一定比例搅拌混匀,配成50,100,200g/L的中药复方一身清混悬液)演。灌胃20min后处死小鼠,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,将小肠拉成直线,测量肠管总长度和炭粉推进长度,计算炭粉推进率眼炭粉推进长度穴cm雪/小肠总长度穴cm雪×100%演。③观察中药复方一身清对便秘小鼠排便功能的影响:将其余40只ICR小鼠随机分为4组,每组10只:中药复方一身清小、中、大剂量组,模型组。将40只ICR小鼠灌胃复方地酚诺酯(10mg/kg)造成便秘模型。灌胃地酚诺酯1h后,中药复方一身清小、中、大剂量组:干预措施同“炭粉推进率观察”;模型组:只造模。记录给药后6h内小鼠首次排黑便时间、排黑便粒数,称其质量;将粪便干燥,计算粪便含水量(%)眼穴湿便质量-干便质量雪/湿便质量×100%演。④计量资料差异比较采用t检验。结果:进入结果分析小鼠80只,每组10只。①小鼠肠道炭粉推进率:中药复方一身清中剂量和大剂量组明显高于对照组眼穴78±8雪%,穴71±11雪%,(60±9)%,P<0.01,0.05演,以中剂量组作用最为明显;而中药复方一身清小剂量组与对照组相近眼(58±10)%,P>0.05演。②首次排黑便时间:中药复方一身清3个剂量组均明显短于模型组(P<0.01)。③粪便含水量:中药复方一身清3个剂量组明显大于模型组(P<0.05～0.01)。④排黑便粒数:中药复方一身清小、中剂量组明显多于模型组(P<0.01)。结论:中药复方一身清可促进正常小鼠肠蠕动,可促进便秘小鼠排便、增加其便量和粪便中的含水量,起到治疗便秘的作用。     

黑木耳多糖对生物机体运动能力的影响

目的:观察黑木耳多糖对小鼠机体抗疲劳及对离体蟾蜍腓肠肌收缩时间的影响,全面探讨黑木耳多糖对运动能力的影响。方法:实验于2004-02/07在鲁东大学生命科学院生理实验室和体育学院运动生化实验室完成。①雄性昆明种小鼠40只,采用随机数字表法将小鼠分为对照组和多糖组、每组20只。多糖组小鼠灌胃黑木耳粗多糖眼(2.5mg/(kg·d),黑木耳粗多糖由烟台师范学院食用菌研究所提供,黑木耳的深层液体培养菌丝体经破壁、水提、醇沉为黑木耳粗多糖演,对照组灌胃生理盐水0.2mL/d,连续灌胃20d。观察黑木耳粗多糖对小鼠耐缺氧、力竭游泳时间、血红蛋白、肝糖原及小鼠负重5%体质量游泳20min后血乳酸、血尿氮的水平的影响。②7只蟾蜍双毁髓后,分离腓肠肌,去除坐骨神经,浸于20℃任氏液中静置10min。随机将同一只蟾蜍的两条腓肠肌标本分别为多糖组和对照组(n=7),多糖组加入相应体积0.1g/L浓度的黑木耳纯多糖溶液,对照组加入等体积的任氏液。采用脉冲式电流直接刺激离体蟾蜍腓肠肌作为疲劳模型,测定肌肉收缩幅度下降到最大收缩幅度90%的时间,下降到50%的时间和下降到10%的时间。结果:40只小鼠及两组各7个蟾蜍腓肠肌标本全部进入结果分析。①小鼠耐缺氧、力竭游泳时间:多糖组耐缺氧时间显著长于对照组眼(51.5±8.4,42.9±7.4)min,P<0.05演。两组力竭游泳时间差异不显著。②小鼠血红蛋白、肝糖原及定量负荷后血乳酸及血尿素氮水平:多糖组血红蛋白显著高于对照组眼(120.0±4.3),(111.0±5.3)g/L,P<0.05演;多糖组血乳酸及血尿氮水平显著低于对照组眼(4.52±1.69)比(6.43±1.38)mmol/L,(2.52±0.44)比(3.03±0.45)mmol/L,P<0.05演;两组肝糖元水平差异无显著性。③蟾蜍腓肠肌肌肉收缩持续时间:收缩幅度下降到最大收缩幅度90%,50%,10%的时间,多糖组均比对照组明显延长眼(199.71±35.88)比(121.14±47.55)s,(538.29±60.28)比(451.43±82.62)s,(2931.86±238.32)比(2529.14±291.89)s,P<0.05或P<0.01演。结论:①黑木耳粗多糖能明显提高小鼠耐缺氧时间、血红蛋白水平,降低定量负荷后血乳酸及血尿氮水平。②黑木耳多糖能明显延长肌肉收缩幅度下降到最大收缩幅度的时间。③黑木耳多糖具有明显的提高运动能力的作用。     

清宫长春丹胶囊对肾阳虚小鼠应激能力的影响

背景:依据清宫秘方研制而成的纯中药制剂清宫长春丹胶囊,具有补肾益精、强筋壮骨、延缓衰老之功效,临床用于治疗身衰体弱、精力不足、健忘易倦、头晕耳鸣、腰痛膝酸等病症。目的:观察清宫长春丹胶囊对以肌肉注射氢化可的松制备的“阳虚”模型小鼠应激能力的影响。设计:完全随机对照动物实验。地点:承德医学院中药研究所(河北省中药研究与开发重点实验室)。材料:二级昆明种小鼠160只,,体质量19～21g,雌雄各半。方法:实验于2002-02/2002-12在承德医学院中药研究所药理毒理研究室完成。采用昆明种小鼠160只,雌雄各半,随机分为游泳耐力实验组(n=60)、常压耐缺氧实验组(n=50)、单核巨噬细胞吞噬功能组(n=50)3组,每组再平均分为长春丹0.25,0.5,1.0g/kg,模型对照组及正常小鼠对照组共5个亚组。禁食12h,以肌肉注射氢化可的松25mg/kg连续7d制备“阳虚”模型,按分组给不同剂量长春丹,给药容积20mL/kg,连续给药7d,模型对照组给予等容积生理盐水灌胃,最后一次给药40min后,分别进行小鼠游泳耐力实验、小鼠常压耐缺氧时间实验、小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的实验(尾静脉注射印度墨汁0.lmL/kg,分别于注射后2min,10min从眼眶静脉丛取血20μL,计算单核巨噬细胞炭粒廓清指数K值),观察不同剂量的长春丹对小鼠游泳时间、耐缺氧时间和单核巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:纳入实验的160只小鼠全部进入结果统计分析,无缺失值。①长春丹胶囊0.25,0.5,1.0g/kg剂量组及正常对照组小鼠游泳时间均明显长于模型对照组[(10.94±3.79),(13.68±5.62),(14.58±5.49),(16.12±2.35),(6.45±4.87)min;t=2.522,3.367,3.586,3.979,P<0.05～0.001]。②长春丹胶囊0.25,0.5,1.0g/kg剂量组及正常对照组小鼠常压耐缺氧时间均明显长于模型对照组[(19.45±4.63),(21.18±4.25),(22.58±5.21),(23.12±4.78),(12.35±4.89)min;t=1.566,2.104,2.004,2.303,P<0.05～0.01]。③长春丹胶囊0.25,0.5,1.0g/kg剂量组及正常对照组小鼠单核巨噬细胞吞噬功能炭粒廓清指数(K)均明显高于模型对照组(0.0236±0.0106,0.0291±0.0092,0.0308±0.0086,0.0318±0.0101,0.0125±0.0081;t=2.63,4.282,4.898,4.714,P<0.05～0.01)。结论:清宫长春丹胶囊灌胃小鼠游泳时间明显延长,且可剂量依赖的延长小鼠常压耐缺氧时间,提高小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能,显著的增强“阳虚”小鼠的应激能力。     

束缚应激状态下大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮及肿瘤坏死因子α和H2O2的变化

目的:检测牙龈卟啉菌内毒素穴Pg-LPS雪刺激大鼠腹腔巨噬细胞所释放的NO、肿瘤坏死因子α和H2O2是否受到束缚应激的影响。方法:实验于2005-09/2006-02在福建医科医科大学口腔医学院和福建中西医结合研究院实验室进行。①分组:取14只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组及应激组,每组7只。②造模:正常组不加刺激,应激组大鼠置于特制的圆柱形筒内,于实验开始最初3d每日9:00～15:00被置于束缚筒6h,3d后于每日9:00至次日9:00被置于束缚筒24h,正常饲养24h后再应激24h,如此循环直至实验结束。③观察指标:观察造模12d后两组大鼠体质量变化,并及时处死,收集腹腔液,计数巨噬细胞总量。贴壁后的巨噬细胞分成2组分别继续用RPMI-1640培养液和RPMI-1640培养液 1mg/LPg-LPS继续培养,24h后分别收集上清,观察无刺激组、单纯Pg-LPS组、单纯应激组和应激 Pg-LPS组上清液中NO,H2O2和肿瘤坏死因子α水平。结果:14只大鼠全部进入结果分析。①实验完成时应激组大鼠体质量低于正常组眼穴162.14±17.53雪熏穴263.57±19.94雪g熏P<0.05演。②应激组大鼠腹腔巨噬细胞总量低于正常组眼穴9.49±2.75雪×106熏穴31.47±8.00雪×106熏P<0.01演。③NO浓度押单纯Pg-LPS组显著高于无刺激组眼穴265.69±10.86雪熏穴239.40±12.07雪μmol/L,P<0.05演;应激 Pg-LPS组显著高于无刺激组和单纯应激组眼穴257.57±12.43雪熏穴239.40±12.07雪,穴243.32±13.94雪μmol/L,P<0.05演。④H2O2浓度:单纯应激组和应激 Pg-LPS组显著高于无刺激组眼穴7.14±1.04雪熏穴7.54±1.15雪,穴5.27±1.02雪μmol/L,P<0.05演。⑤肿瘤坏死因子α水平:应激 Pg-LPS组显著高于无刺激组眼穴16.81±4.76雪熏穴8.38±0.93雪ng/L熏P<0.05演。结论:①束缚应激可改变巨噬细胞对牙龈卟啉菌内毒素刺激的反应,引起大鼠腹腔巨噬细胞功能紊乱。②应激作为一种不良刺激因素,可以和牙龈卟啉菌内毒素一起发生协同作用,引起炎症反应发生。     

东兰墨米对亚急性衰老模型小鼠的抗衰老作用

目的:通过观察东兰墨米对D-半乳糖致衰老小鼠的血清、肝脏、大脑中超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性及抗耐氧时间、抗疲劳时间的影响,探讨东兰墨米对亚急性衰老模型小白鼠抗衰老作用。方法:实验于2005-07在右江民族医学院应用生理研究室完成。选择健康昆明种小白鼠108只,随机分为正常对照组、衰老模型组、衰老加墨米组3组;衰老模型组皮下注射D-半乳糖100mg/(kg·d)(D-半乳糖由美国Amresco公司生产),并用与墨米混悬液(东兰墨米为市购,加双蒸水配制成0.26g/mL混悬液)等剂量的生理盐水灌胃,连续28d。正常对照组每日皮下注射与D-半乳糖等剂量生理盐水,并用与墨米混悬液等剂量的生理盐水灌胃,连续28d。衰老加墨米组皮下注射D-半乳糖100mg/(kg·d),并用东兰墨米混悬液,按100g/kg剂量给药,每天分两次灌胃,连续28d。然后分别测定血清、肝脏、大脑中超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性;以及进行抗耐氧试验、抗疲劳试验。结果:纳入动物108只,进入结果分析108只。在建立动物衰老模型过程中有5只死亡,后随机补充动物。①衰老加墨米组血清、大脑、肝脏中超氧化物歧化酶活力与模型衰老组相比,均明显升高[(201.64±38.81),(233.49±33.12)U/mL;(147.68±39.18),(189.88±47.29)U/mg;(176.89±17.22),(196.52±22.74)U/mg;t=2.162,2.380,2.384,P<0.05]。②衰老加墨米组血清、大脑、肝脏中丙二醛含量与衰老模型组相比,均明显下降[(5.92±0.81),(5.18±0.69)μmol/L;(18.98±2.54),(16.55±2.30)μmol/g;(6.66±0.49),(6.09±0.54)μmol/g;t=2.415,2.455,2.705,P<0.05]。③衰老加墨米组血清、大脑、肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性与衰老模型组相比,均明显升高,分别为[(131.94±21.49),(151.97±21.99)U/mL;(115.86±17.64),(134.09±19.29)U/mg;(115.83±13.54),(131.18±16.73)U/mg;t=2.158,2.417,2.471,P<0.05]。④衰老加墨米组耐缺氧时间、游泳时间与衰老模型组相比,明显升高[(10.19±1.02),(11.18±0.87)min;(18.71±2.45),(20.90±1.24)min;t=2.547,2.761,P<0.05]。结论:东兰墨米具有较好的清除自由基,降低丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活性,增强抗耐氧、抗疲劳的作用;具有抗衰老作用。     

金银花复方制剂对异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血的影响

目的:探讨具有抗炎、镇痛、抑菌、解毒、扩张血管、抑制血小板聚集及抗血栓功效的纯中药金银花复方口服制剂对异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血的影响。方法:①实验于2005-04/06在延边大学基础医学院药理学实验室完成。选用6～7周龄昆明种雄性小鼠80只。②观察金银花复方制剂金银冠心口服液对异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血密闭缺氧存活时间的影响:取小鼠40只,随机分为4组:正常组、模型组、金银冠心口服液组、阳性对照组,每组10只。金银冠心口服液组给予金银冠心口服液(金银冠心口服液由延边大学药学院药剂科提供,主要成分为金银花、川芎、三七、丹参、玄参、当归、甘草等,每毫升含生药3g)含生药78g/(kg·d),阳性对照组给予0.98%的地奥心血康(成都地奥制药集团有限公司生产,批号0411028,0.1g/粒,临用前将胶囊去壳,内容物用蒸馏水配成0.98%的地奥心血康溶液)溶液0.195g/(kg·d),灌胃容量为0.2mL/10g,正常组及模型组给予等容量生理盐水灌胃,1次/d,连续给药10d。给药第8天起,除了正常组外,各组均腹腔注射异丙肾上腺素0.01g/(kg·d)复制小鼠急性心肌缺血模型。末次给药15min后,将每只小鼠分别放入250mL广口瓶内密闭,记录小鼠存活时间。③观察金银冠心口服液对异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血心肌含水量的影响:将其余40只小鼠随机分为4组:正常组、模型组、金银冠心口服液组、阳性对照组,每组10只。金银冠心口服液组给予金银冠心口服液含生药78g/(kg·d);阳性对照组给予0.98%的地奥心血康溶液0.195g/(kg·d),灌胃容量为0.2mL/10g;正常组及模型组给予等容量生理盐水灌胃,1次/d,连续给药10d。给药第8天起,除了正常组外,各组均腹腔注射异丙肾上腺素0.01g/(kg·d)复制小鼠急性心肌缺血模型。末次给药15min后处死小鼠,迅速取其完整心肌组织,称心肌湿重;110℃干烤8h后,再称其干重,并计算心肌含水量犤(湿重-干重)/湿重×100%犦。④计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:小鼠80只均进入结果分析。①小鼠存活时间:金银冠心口服液组和阳性对照组及正常组明显长于模型组犤(25.73±3.70),(26.05±2.14),(27.34±1.69),(22.47±1.89)min,P<0.01犦。②小鼠心肌含水量:模型组明显高于正常组和金银冠心口服液组犤(79.09±0.86)%,(77.57±0.75)%,(78.09±1.00)%,P<0.05犦。结论:①金银冠心口服液能明显延长异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血密闭缺氧存活时间,提高小鼠耐缺氧能力。②金银冠心口服液能明显抑制异丙肾上腺素诱发急性心肌缺血小鼠心肌含水量的增加。     

石仙桃抗疲劳和耐缺氧作用的动物实验

背景:石仙桃常用于清肺、化痰止咳和抗疲劳等作用,但有关其对心脑缺血缺氧的药理学作用尚未见报道。目的:观察石仙桃提取液对5种缺氧模型小鼠存活时间的影响,探讨其对小鼠的抗疲劳和耐缺氧的保护作用。设计:随机对照实验观察。单位:赣南医学院药理学教研室。材料:实验于2004-03/06在赣南医学院药理教研室完成。取昆明种小鼠170只,雄性25只,雌性95只,体质量(20±2)g,由赣南医学院实验动物中心提供。方法:①常压耐缺氧实验:取40只小鼠随机分为4组,即生理盐水组、盐酸普萘洛尔组(0.02g/kg)、石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组,每组10只。给药20min后,将小鼠放置在密封的含钠石灰的广口瓶中,秒表记录存活时间。②特异性心肌缺氧实验:取30只小鼠随机分为3组,即生理盐水 异丙肾上腺素组、盐酸普萘洛尔(0.02g/kg) 异丙肾上腺素组、石仙桃提取液10g/kg 异丙肾上腺素组,每组10只。其中各组小鼠均给予异丙肾上腺素0.015g/kg。给药40min后,小鼠放置在密封的含钠石灰的广口瓶中,用秒表记录存活时间。③亚硝酸钠引起的缺氧实验:取40只小鼠随机分为4组,即生理盐水组、盐酸普萘洛尔组(0.02g/kg)、石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组,每组10只。给药40min后,腹腔注射200mg/kg亚硝酸钠,分别记录小鼠存活时间。④对抗脑缺血缺氧实验:取30只小鼠,随机分为3组,即生理盐水组、石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组,每组10只。其中盐酸普萘洛尔组给予盐酸普萘洛尔0.02g/kg。给药40min后,麻醉后断头,分别记录小鼠喘息时间。⑤运动耐力实验:取30只小鼠随机分为3组,即生理盐水组、石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组,每组10只。给药40min后,在小鼠尾根部负体质量2%的铅皮,放入水深25cm、直径40cm、桶高30cm的水桶中,每桶同时放进1只小鼠,用秒表立即记录自游泳开始至力竭下沉8s,且不浮出水面为止的时间,计为小鼠游泳时间。主要观察指标:给药后各组小鼠的存活时间和喘息时间。结果:纳入170只小鼠,全部进入结果分析,无脱失。①常压耐缺氧实验:石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组小鼠的生存时间显著长于生理盐水组和盐酸普萘洛尔组(F=70.52,P<0.05),石仙桃提取液10g/kg组显著长于石仙桃提取液5g/kg组(P<0.05)。②特异性心肌缺氧实验:石仙桃提取液10g/kg 异丙肾上腺素组和盐酸普萘洛尔 异丙肾上腺素组小鼠的生存时间显著长于生理盐水 异丙肾上腺素组(F=37.29,P<0.05)。③亚硝酸钠所致缺氧实验:盐酸普萘洛尔组、石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组小鼠的生存时间显著长于生理盐水组(F=34.34,P<0.05),石仙桃提取液10g/kg组显著长于石仙桃提取液5g/kg组(P<0.05)。④对抗脑缺血缺氧实验:石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组小鼠的喘息时间显著长于生理盐水组(F=41.00,P<0.05),石仙桃提取液10g/kg组显著长于石仙桃提取液5g/kg组(P<0.05)。⑤运动耐力实验:石仙桃提取液5g/kg,10g/kg组小鼠的存活时间显著长于生理盐水组(F=33.09,P<0.05),石仙桃提取液10g/kg组显著长于石仙桃提取液5g/kg组(P<0.05)。结论:石仙桃具有抗疲劳及耐缺氧作用,且呈剂量依赖性,这种作用可能与影响Na,K-ATP酶或提高肺泡液清除作用有关。     

精神分裂症社会行为动物模型的建立及抗精神病药的影响

目的:观察非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂苯西克定长期应用对小鼠社会行为的影响,建立精神药理学研究用精神分裂症社会行为动物模型,并观察不同抗精神病药物对小鼠模型的干预作用。方法:实验于2003-06/09在日本名古屋大学医学部动物实验室完成。①实验1,苯西克定剂量及用药时间对小鼠社会行为的影响:选用6周龄的DDY种雄性小鼠,在饲养2周后,被抽签随机分成5组,每组12只,两笼饲养。高剂量苯西克定长期用药组:10mg/kg,14d;低剂量苯西克定长期用药组:3mg/kg,14d;长期用药对照组:生理盐水,14d;高剂量苯西克定短期用药组:10mg/kg,7d;短期用药对照组:生理盐水,7d。所有药物均采用皮下注射方式。在停药第3,7,14,21,28天分别进行社会行为测验。②实验2,抗精神病药对苯西克定小鼠社会行为的影响:另选小鼠60只分为5组,每组12只,分两笼饲养。大剂量氯氮平组:连续注射大剂量苯西克定14d,停药14d后注射氯氮平10mg/(kg·d)7d;小剂量氯氮平组:连续注射大剂量苯西克定14d,停药14d后注射氯氮平3mg/(kg·d)7d;大剂量氟哌啶醇组:连续注射大剂量苯西克定14d,停药14d后注射氟哌啶醇3mg/(kg·d)7d;小剂量氟哌啶醇组:连续注射大剂量苯西克定14d,停药14d后注射氟哌啶醇1mg/(kg·d)7d;生理盐水组:连续注射生理盐水14d,停14d后注射生理盐水7d。各组在停止氯氮平、氟哌啶醇或生理盐水后当日和7d后进行社会行为测验。结果:120只小鼠均进入结果分析,中途无脱落。①实验1显示,高剂量苯西克定长期用药组小鼠停药后3,7,14,21,28d进行社会行为的时间减少眼(16.8±4.3),(13.4±3.5),(15.5±3.9),(28.2±5.0),(32.5±4.9)s,P<0.01演,这一效果在停药后第28天仍然存在。②实验2显示,高剂量苯西克定连续用药所导致小鼠社会行为的减少在给予氯氮平连续7d的治疗后这一现象明显改善穴用药前押(13.8±1.6)s熏停药当天押(143.1±36.1)s熏停药7d后押(64.8±10.3)s熏P<0.01,P<0.05雪,小剂量氯氮平用药7d后苯西克定所致小鼠社会行为的减少没有改变。氯氮平对苯西克定所致小鼠社会行为的改善在停药1周后其作用消失。氟哌啶醇对苯西克定所致小鼠社会行为的影响没有改善作用。结论:10mg/kg苯西克定长期用药可所导致小鼠社会行为减少,10mg/(kg·d)氯氮平可逆转以上苯西克定的作用,提示10mg/kg苯西克定长期用药所致小鼠行为改变可作为抗精神病药物治疗精神分裂症社会行为的动物模型。     

姬松茸复合多糖对环磷酰胺的增效作用及其机制

目的:观察姬松茸复合多糖是否对环磷酰胺的抗肿瘤作用有增效效应,并分析其作用机制。方法:实验于2003-03/2004-04在齐齐哈尔医学院医药科学研究所完成。①选用健康成年昆明种小鼠135只,按随机数字表法分为9组:正常对照组,荷瘤对照组,环磷酰胺组,姬松茸复合多糖高、中、低剂量组,姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组,每组15只。②除正常对照组小鼠外,将0.2mL浓度为1×1010L-1S180肿瘤细胞接种于其余小鼠腋窝皮下。正常对照组和荷瘤对照组灌胃0.5mL生理盐水,1次/d,共10d。环磷酰胺组先灌胃0.5mL生理盐水,6h后腔注射环磷酰胺10mg/穴kg·d雪;姬松茸复合多糖高剂量、中剂量、低剂量组分别按700,350,175mg/穴kg·d雪灌胃姬松茸复合多糖眼姬松茸多糖(50%)、香菇多糖(33%)、茯苓多糖(94%)均购自浙江庆元县金源真菌多糖有限公司。姬松茸多糖、香菇多糖、茯苓多糖以质量比4∶2∶1的比例混合,用前以蒸馏水稀释至所需浓度演1次/d,共10d。姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组先分别灌胃350,175,88mg/穴kg·d雪姬松茸复合多糖,6h后各组小鼠腹腔注射环磷酰胺5mg/kg;正常对照组和荷瘤对照组胃饲给予等体积蒸馏水。1次/d,共10d。③用药4周后,计算抑瘤率眼(1-实验组平均瘤重/荷瘤对照组平均瘤重)×100%演。依q值评价联合用药增效情况。q=两药合用时的抑瘤率/眼A药的抑瘤率 (1-A药的抑瘤率)B药的抑瘤率演。q=0.85～1.25为两药作用相加,q>1.25为两药作用增强(或协同),q<0.85为两药拮抗。④应用电子显微镜观察肿瘤细胞形态变化,采用酶联免疫分析法检测血清白细胞介素2和P27蛋白表达变化。⑤组间比较采用t检验。结果:在实验过程中,荷瘤对照组造模失败1只,死亡3只,环磷酰胺组死亡3只,造模失败2只,姬松茸复合多糖高剂量组死亡2只,联合用药组死亡2只,造模失败1只。有121只进入结果分析。①抑瘤率:姬松茸复合多糖高、中、低剂量组和环磷酰胺组分别为10.6%,52.5%,30.2%,72.1%,姬松茸复合多糖高、中、低剂量 环磷酰胺组分别为65.8%,83.4%,82.7%,q值分别为0.876,0.962,1.027,均>0.85,表明不同剂量的复合多糖能增强环磷酰胺的抗小鼠S180肿瘤的作用。②血清白细胞介素2水平:荷瘤对照组明显低于正常对照组(t=11.655,P<0.01),复合多糖中、低剂量组,姬松茸复合多糖中、低剂量 环磷酰胺组明显高于荷瘤对照组和环磷酰胺组(t=2.413～9.935,P<0.05～0.01)。③P27蛋白表达:荷瘤对照组明显低于正常对照组穴t=68.976,P<0.01雪,而各治疗组明显高于荷瘤对照组(t=3.188～2.684,P<0.01)。姬松茸复合多糖中、低剂量和姬松茸复合多糖高、低剂量 环磷酰胺组明显高于环磷酰胺组(t=3.132～5.511,P<0.01)。④透射电镜观察结果:单用姬松茸复合多糖各剂量组可见肿瘤细胞核固缩明显,凋亡细胞数量增多,部分细胞核崩解形成小体。姬松茸复合多糖各剂量 环磷酰胺组可见肿瘤细胞体积变小,细胞核固缩明显,细胞表面微绒毛消失,细胞内游离核蛋白体明显减少,胞质内线粒体空泡变性。结论:不同剂量的复合多糖均能增强环磷酰胺的抗小鼠S180肿瘤作用,其作用机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡,增强白细胞介素2、抑癌基因p27的表达有关。     

玉竹多糖对衰老模型鼠细胞及体液免疫功能的影响

目的:观察玉竹多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠免疫功能的影响,分析玉竹多糖抗衰老的可能作用途径。方法:实验于2004-07/2005-05在锦州医学院免疫实验室完成。取昆明小鼠50只,按随机数字表法分为5组,即正常对照组、衰老模型组和0.5g/kg,1g/kg,2g/kg玉竹多糖组。除正常对照组外,其余各组每只颈背部皮下注射50g/LD-半乳糖0.5mL,连续6周。同时0.5g/kg,1g/kg,2g/kg玉竹多糖组分别腹腔注射0.5g/kg,1g/kg,2g/kg,0.5mL的玉竹多糖给予治疗,正常对照组和衰老模型组腹腔注射生理盐水0.5mL/只。6周后,将小鼠称重并麻醉剖取小鼠胸腺和脾脏,计算脾指数穴mg/g雪=脾质量穴mg雪/小鼠体质量穴g雪,同法计算胸腺指数。应用MTT法测定脾淋巴细胞转化指数。用免疫荧光法测定脾T淋巴细胞亚群细胞数,观察其对免疫功能的影响。结果:50只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①与正常对照组比较,衰老模型组小鼠胸腺指数和脾指数显著下降(P<0.05～0.01);脾T,B淋巴细胞转化刺激指数显著降低(P<0.05～0.01);CD8 细胞数减少穴P<0.01雪,CD4 /CD8 比值增加穴P<0.01雪。②与衰老模型组比较,0.5g/kg,1g/kg,2g/kg玉竹多糖组小鼠的脾指数、胸腺指数、B淋巴细胞转化指数及CD8 细胞数均显著提高(P<0.05～0.01),而CD4 /CD8 比值显著降低穴P<0.01雪,但3个剂量组之间差异无显著性意义穴P>0.05雪。结论:玉竹多糖可明显改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的细胞及体液免疫功能,提高胸腺指数和脾指数,增加脾T,B淋巴细胞转化刺激指数和CD8 细胞的数量,恢复CD4 /CD8 比值的失衡状态,从而延缓机体的免疫衰老。玉竹多糖不同剂量组间无明显的剂量依赖性。     

混悬型六味地黄颗粒剂与丸剂的药效学指标比较

目的:观察混悬型六味地黄颗粒剂对小鼠游泳耐力、自然活动次数及碳廓清率的影响,并与丸剂进行药效学比较。方法:实验于1993-05/1995-06在承德医学院中药研究所中药化学实验室完成。选用昆明种小鼠260只,购自北京实验动物中心。六味地黄丸(由熟地黄、山药、山茱萸、泽泻、茯苓、牡丹皮6味中药材经粉碎后用蜂蜜配制而成,具有滋阴补肾的功能)为焦作市第二中药厂出品。制备混悬型六味地黄颗粒剂,经检测符合1995年版中国药典的有关标准。①小鼠游泳耐力实验:取昆明种小鼠100只,按随机数字表法分为5组,即颗粒剂20g/(kg·d)组、颗粒剂10g/(kg·d)组、丸剂20g/(kg·d)组、丸剂10g/(kg·d)组及生理盐水组(100mL/(kg·d)),每组20只。连续灌胃给药7d,2次/d,游泳耐力实验前1h最后1次给药。观察小鼠游泳耐力,以沉下不能浮起到水面时,为耐力游泳时间。②小鼠自然活动实验:取昆明种小鼠100只,分组及给药情况同上。连续给药7d,于自然活动实验前最后1次给药,测录小鼠5min的自然活动次数,每组小鼠均以同样方法测录给药前的自然活动次数。③小鼠碳廓清率实验:取昆明小鼠60只,按随机数字表法分为4组,即颗粒剂20g/(kg·d)组、颗粒剂10g/(kg·d)组、丸剂20g/(kg·d)组及生理盐水组,每组15只。给药情况同上。连续给药7d,于碳廓清率实验前1h最后1次给药,各组小鼠分别由尾静脉注入以生理盐水稀释的印度墨汁10mL/kg,2min和20min时各由眼眶静脉取血0.2mL,计算巨噬细胞的吞噬指数。结果:260只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组小鼠的耐力游泳时间比较:颗粒剂及丸剂各剂量组均显著长于生理盐水组(P<0.05～0.01),并且颗粒剂20g/(kg·d)组长于丸剂20g/(kg·d)组(P<0.05),颗粒剂10g/(kg·d)组长于丸剂10g/(kg·d)组(P<0.01)。②各组小鼠给药前及给药7d后的自然活动次数比较:给药7d后颗粒剂20g/(kg·d)组、颗粒剂10g/(kg·d)组、丸剂20g/(kg·d)组、丸剂10g/(kg·d)组均显著高于生理盐水组(P<0.05～0.01),并且颗粒剂20g/(kg·d)组高于丸剂20g/(kg·d)组(P<0.05)。③各组小鼠巨噬细胞的的吞噬指数比较:颗粒剂及丸剂各剂量组均显著高于生理盐水组(P<0.01),而颗粒剂20g/(kg·d)组、颗粒剂10g/(kg·d)组均显著高于丸剂20g/(kg·d)组(P<0.01)。结论:混悬型六味地黄颗粒剂能够增强小鼠的游泳耐力及网状内皮系统的吞噬能力,具有抑制小鼠自然活动的中枢镇静作用,药理作用效果较丸剂显著。     

桑白皮提取物的耐缺氧效应

背景:桑白皮水提取液具有降低大鼠血糖、血脂、抗炎镇痛、平喘、利尿、松弛气管平滑肌等作用。目的:应用常压耐缺氧实验、快速断头实验、异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验,分析桑白皮提取物的耐缺氧作用。设计:随机对照实验。单位:赣南医学院基础医学院病理学教研室与药理学教研室。材料:实验于2003-05/06在赣南医学院科研中心实验室完成。选取健康成年昆明种小鼠106只,分别用于以下3个独立实验。桑白皮提取物由赣南医学院药理教研室提供;盐酸普萘洛尔注射液(北京制药厂,批号770603)。方法:①小鼠常压耐缺氧实验:小鼠40只,随机数字表法分为4组:生理盐水组、普萘洛尔组、桑白皮提取物0.01mL/g组、桑白皮提取物0.02mL/g组,10只/组。生理盐水组腹腔注射生理盐水0.02mg/g,普萘洛尔组腹腔注射10g/L的普萘洛尔溶液0.02mg/g,桑白皮提取物0.01,0.02mL/g组分别腹腔注射0.01,0.02mL/g桑白皮提取液。15min后,将各组小鼠分别放入250mL的磨口广口瓶内,密封,以最后一次呼吸为指标,观察小鼠的存活时间。②小鼠快速断头实验:小鼠30只,随机数字表法分为3组:生理盐水组、桑白皮提取物0.01mL/g组、桑白皮提取物0.02mL/g组,10只/组。生理盐水组腹腔注射生理盐水0.02mg/g,桑白皮提取物0.01,0.02mL/g组分别腹腔注射0.01,0.02mL/g桑白皮提取液。15min后不麻醉,各组小鼠快速断头,记录小鼠断头后至最后一次喘息所需的时间。③异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验:小鼠36只,随机数字表法分为3组:生理盐水组、异丙肾上腺素组、桑白皮提取物0.01mL/g组,12只/组。生理盐水组先皮下注射生理盐水0.03mL/g,5min后再腹腔注射生理盐水0.02mL/g。异丙肾上腺素组先皮下注射异丙肾上腺素0.015mg/g,5min后再腹腔注射生理盐水0.02mL/g。桑白皮提取物0.01mL/g组先皮下注射异丙肾上腺素0.015mg/g,5min后再腹腔注射桑白皮提取物0.01mL/g。给药后15min,各组小鼠分别放入广口瓶内密封,记录小鼠存活时间。主要观察指标:3个独立实验中,各组小鼠的存活时间。结果:实验选取健康成年昆明种小鼠106只,全部进入结果分析。①桑白皮提取物对常压耐缺氧条件下小鼠存活时间的影响:与生理盐水组比较,普萘洛尔组、桑白皮提取物0.01mL/g组、桑白皮提取物0.02mL/g组小鼠存活时间均明显延长眼(36.2±4.3),(81.0±17.0),(66.4±8.9),(90.3±7.4)min;t=3.358～3.617,P<0.01演。②桑白皮提取物对小鼠脑缺血条件下小鼠存活时间的影响:与生理盐水组比较,桑白皮提取物0.01mL/g组、桑白皮提取物0.02mL/g组小鼠断头后至最后一次喘息所需的时间均明显延长眼(17.8±1.3),(21.2±0.8),(23.5±0.7)min;t=2.824～3.432,P<0.05或0.01演。③桑白皮提取物对异丙肾上腺素增加心肌耗氧量条件下小鼠存活时间的影响:与生理盐水组比较,异丙肾上腺素组小鼠存活时间明显缩短,而桑白皮提取物0.01mL/g组小鼠存活时间明显延长眼(36.2±4.3),(27.9±2.6),(50.6±3.4)min;t=2.734～3.035,P<0.05演。结论:桑白皮提取物具有明显的耐缺氧作用。     

白花败酱草提取物的耐缺氧作用

背景:白花败酱草为败酱科植物,味辛、苦性寒,已证实白花败酱草提取物具有中枢抑制作用。目的:观察中药白花败酱草提取物对小鼠耐缺氧的作用,并了解其作用是否有剂量依赖性。设计:随机对照动物实验。单位:赣南医学院药理教研室和病理教研室。材料:实验于2005-03/04在赣南医学院科研中心实验室完成。取健康成年昆明种小鼠100只,用于3个缺氧实验。方法:①常压耐缺氧实验:取小鼠40只随机分为4组:生理盐水组腹腔注射生理盐水2μL/g,普萘洛尔组腹腔注射10g/L普萘洛尔溶液0.02mg/g,白花败酱草0.02,0.04mg/g组腹腔注射白花败酱草提取物0.02,0.04mg/g。25min后,将小鼠放入250mL的磨口广口瓶内,密封,观察小鼠的存活时间。②快速断头实验:取小鼠30只随机分为3组:生理盐水组腹腔注射生理盐水2μL/g,白花败酱草0.02,0.04mg/g组分别于腹腔注射白花败酱草提取物0.02,0.04mg/g,25min后,快速断头,记录小鼠断头后至最后一次喘息所需的时间。③结扎双侧颈总动脉实验:取小鼠30只随机分为3组:生理盐水组灌胃生理盐水2μL/g,白花败酱草组0.01,0.015mg/g灌胃,1次/d,共7d,7d后结扎双侧颈总动脉观察呼吸停止的时间。主要观察指标:①小鼠常压耐缺氧的存活时间。②小鼠脑缺血断头后至最后一次喘息的时间。③小鼠结扎双侧颈总动脉至呼吸停止的时间。结果:100只小鼠全部进入结果分析。①常压耐缺氧条件下鼠的存活时间:白花败酱草0.02,0.04mg/g组显著长于生理盐水组[(57.8±4.6),(76.2±4.9),(42.5±3.6)min,P<0.05,0.01],与普萘洛尔组比较无差异(P>0.05),剂量越大,存活时间越长。②断头小鼠的喘息时间:白花败酱草0.02,0.04mg/g组显著长于生理盐水组[(22.1±1.6),(25.3±2.2),(18.6±0.8)s,P<0.05,0.01],剂量越大,存活时间越长。③结扎双侧颈总动脉小鼠呼吸停止的时间:白花败酱草提取物0.01,0.015mg/g组显著长于生理盐水组[(123.4±25.1),(142.2±30.2),(86.0±12.8)s,P<0.05,0.01],剂量越大,存活时间越长。结论:白花败酱草提取物对脑缺氧、全身性缺氧时所致心肌缺氧及心肌耗氧增加引起的心肌缺氧有明显的改善作用,且剂量越大,效果越显著。可能是白花败酱草提取物能改善心肌及脑耗氧量的结果。     

3''''-大豆苷元磺酸钠的耐缺氧作用

目的:观察3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠耐缺氧作用。方法:实验于2006-01/03在赣南医学院科研中心实验室完成。①常压耐缺氧实验:昆明种小鼠36只单纯随机分为3组(n=12),对照组腹腔注射生理盐水0.02mg/g;普萘洛尔组腹腔注射10g/L普萘洛尔溶液0.02mg/g;3’-大豆苷元磺酸钠组腹腔注射0.02mg/g的3’-大豆苷元磺酸钠溶液。15min后,将小鼠分别放入250mL的磨口广口瓶内,以最后一次呼吸为指标,观察小鼠的存活时间。②小鼠快速断头实验:昆明种小鼠24只单纯随机分为2组(n=12),对照组腹腔注射生理盐水0.02mg/g;3’-大豆苷元磺酸钠组腹腔注射3’-大豆苷元磺酸钠0.015mg/g。15min后,快速断头,记录小鼠断头后至最后一次喘息所需的时间。③异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验:昆明种小鼠36只单纯随机分为3组(n=12),对照组皮下注射生理盐水0.03mL/g,5min后腹腔注射生理盐水0.02mL/g;异丙肾上腺素组和3’-大豆苷元磺酸钠组皮下注射异丙肾上腺素0.015mg/g,5min后异丙肾上腺素组腹腔注射生理盐水0.02mL/g,3’-大豆苷元磺酸钠组腹腔注射3’-大豆苷元磺酸钠0.02mg/g。给药后15min,分别放入250mL的磨口广口瓶内,记录小鼠存活时间。结果:96只小鼠全部进入结果分析。①常压耐缺氧实验结果:3’-大豆苷元磺酸钠组小鼠的存活时间显著长于对照组[(67.7±8.3),(41.2±4.3)min,t=3.287;P<0.01]。②小鼠快速断头实验结果:3’-大豆苷元磺酸钠组小鼠断头后至最后一次喘息时间显著长于对照组[(24.1±1.6),(17.9±1.1)s,t=3.462;P<0.01]。③异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验结果:3’-大豆苷元磺酸钠组小鼠的存活时间显著长于对照组和异丙肾上腺素组[(48.2±6.1),(41.2±4.3),(33.4±3.2)min,P<0.01]。结论:3’-大豆苷元磺酸钠具有显著的耐缺氧作用。     

马齿苋乙醇提取物对小鼠常压耐缺氧能力的影响

目的:观察马齿苋乙醇提取物对小鼠常压耐缺氧作用的影响,分析马齿苋的药用价值。方法:实验于2005-11/12在延边大学基础医学院机能学实验中心完成。①马齿苋乙醇提取物制备:称取马齿苋干草600g粉碎,用体积分数为0.8的乙醇在水浴中回流提取2次,各用10倍量与8倍量乙醇提取2h和1h,过滤,合并滤液浓缩,干燥成粉末,临用前配制成所需浓度。②取43只健康雌雄昆明种小鼠按随机表法分为5组:空白对照组9只、阳性对照药组8只和3个不同剂量的马齿苋乙醇提取物组(0.25g/kg组9只,0.5g/kg组9只,1g/kg组8只),分别灌胃给予蒸馏水、地奥心血康(0.19g/kg)和马齿苋乙醇提取物0.25,0.5,1g/kg。1次/d,连续给药10d。③观察小鼠的缺氧惊厥时间、缺氧存活时间及耗氧量的变化。结果:43只小鼠进入结果分析。①各组小鼠缺氧惊厥时间和存活时间:与空白组比较,马齿苋0.5g/kg组能明显延长小鼠缺氧惊厥时间(13.03±2.04),(15.30±1.55)min,P<0.05);与空白组比较,阳性对照药组和马齿苋0.5,1g/kg组,能明显延长小鼠缺氧存活时间(13.85±1.89),(15.77±1.75),(16.05±1.65),(15.77.±1.75)min,P<0.05)。②各组小鼠死亡时的总耗氧量及不同时间的小鼠存活率:与空白组比较,阳性对照药组和马齿苋乙醇提取物0.25,0.5,1g/kg组能增加缺氧小鼠在15min时的存活率(33%,63%,44%,67%,75%);,阳性对照药组和不同剂量马齿苋组乙醇提取物组小鼠存活期总耗氧量均无明显改变。③各组小鼠各时间段耗氧量及不同时间的累计耗氧量:与空白组比较,阳性对照药组和马齿苋乙醇提取物组0.5g/kg组能明显降低前5min小鼠的耗氧量(10.16±0.75),(9.09±0.92),(9.30±0.67)mL,P<0.05),而对10min和15min的累计耗氧量无明显影响。阳性组和马齿苋乙醇提取物组0.5g/kg组能明显降低0～5min时间段的耗氧量,而5～10min和10～15min时间段的耗氧量则高于空白组。结论:马齿苋乙醇提取物可以明显提高小鼠的常压耐缺氧能力。     

电刺激迷走神经对肠缺血再灌注大鼠血浆一氧化氮和内皮素水平的影响及其意义

目的:观察电刺激迷走神经对肠缺血再灌注模型大鼠血浆中一氧化氮、内皮素水平和血压,以及小肠组织损伤程度的影响。方法:实验于2004-10/2005-04在中山大学省级药理毒理实验室完成。①选用清洁级健康Wistar雄性大鼠40只,体质量280～300g。按随机数字表法将40只大鼠分为4组穴n=10雪:对照组:双侧颈迷走神经分离 仅分离而不阻断肠系膜上动脉;肠缺血再灌注组:双侧颈迷走神经分离 夹闭肠系膜上动脉1h后松夹再灌注2h;双侧颈迷走神经切断组:双侧颈迷走神经分离并切断 夹闭肠系膜上动脉1h后松夹再灌注2h。迷走神经刺激组:双侧颈迷走神经干切断 在夹闭肠系膜上动脉前及再灌注开始时均采用智能型生物信号显示处理系统以5V,2ms和1Hz强度的电流持续刺激左迷走神经干远端20min。②在大鼠肠缺血再灌注2h时,采用放射免疫分析法检测内皮素水平,用硝酸还原酶比色法检测一氧化氮水平。苏木精-伊红染色后,光镜下观察肠组织结构的变化。对小肠组织损伤程度进行判定:0～9分,分数越高表示损伤越严重。于迷走神经刺激前,夹闭0,30min,再灌注0,30,60,90,120min记录平均动脉压。③多组均数比较使用单因素方差分析,两两比较采用LSD鄄t检验。结果:大鼠40只全部进入结果分析。①血浆一氧化氮水平变化:肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组明显低于对照组和迷走神经刺激组眼穴22.42±9.62雪熏穴24.66±10.10雪熏穴36.34±10.81雪熏穴52.08±19.25雪μmol/L熏P<0.05演。②血浆内皮素水平变化:迷走神经刺激组明显高于对照组、肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组眼(270.49±75.43)熏穴170.04±56.30雪熏穴190.73±62.85雪熏穴200.04±65.21雪ng/L熏P<0.05演。③一氧化氮与内皮素比值比较:肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组明显低于对照组和迷走神经刺激组穴0.11±0.04熏0.12±0.04熏0.23±0.10熏0.18±0.07熏P<0.05雪,对照组明显高于迷走神经刺激组(P<0.05)。④小肠组织损伤程度光镜下观察结果:肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组的肠黏膜结构受损最严重,迷走神经刺激组可减轻肠组织损伤程度。⑤肠组织病理损伤程度评分:对照组明显低于其他3组,而迷走神经刺激组明显低于肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组眼穴5.3±0.9雪熏穴6.4±1.9雪熏穴7.0±1.2雪分,P<0.05演。⑥平均动脉压变化:各组大鼠在缺血期基本保持平稳。而在再灌注期,与对照组相比,其他3组随时间延长呈明显下降趋势穴P<0.05雪,而迷走神经刺激组较双侧颈迷走神经切断组、肠缺血再灌注组在各时间点能更明显提高平均动脉压穴P<0.05雪。结论:迷走神经刺激可能通过减轻一氧化氮与内皮素比值失衡,从而改善脏器微循环并延缓血压的下降,减轻肠缺血再灌注损伤。     

连钱草、人参、黄芪等组分的艾克清在小鼠体内抗肿瘤作用

目的:观察由连钱草、人参、黄芪、白术、茯苓、莪术等组成的方剂艾克清在小鼠体内的抗肿瘤作用。方法:实验于2005-06/2005-12在河南中医学院药理毒理学研究室完成。瘤株:小鼠肺癌(Lewis)、小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(HepA)、小鼠艾氏癌(Esc),由中国医学科学院实验动物中心引入。艾克清胶囊内容物(由河南中医学院制剂研室提供,批号20041218),配制成含0.5%的羧甲基纤维素纳混悬液0.1g/mL。取C57BL/6雌性小鼠200只,各取50只分别用于小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌4种不同癌细胞瘤株的注射。将抽取的小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌液体,用生理盐水1∶3稀释成1×107个细胞。在C57BL/6小鼠右腋下分别注入小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌细胞悬液0.2mL。均于接种后次日,按随机抽签法分为5组,每组10只。然后给药:①艾克清小剂量组:灌胃艾克清混悬液1.0g/(kg·d)(相当于临床用量8.7倍)。②艾克清中剂量组:灌胃艾克清混悬液2.0g/(kg·d)(相当于临床用量17.4倍)。③艾克清大剂量组:灌胃艾克清混悬液4.0g/(kg·d)(相当于临床用量34.8倍)。④阳性对照组:肌肉注射环磷酰胺20mg/(kg·d)。⑤模型组:灌胃等体积的生理盐水(艾克清给药量均为等体积)。各组连续给药10d,末次给药后1h,每只C57BL/6小鼠腋下肿瘤生长明显,包膜完整,然后处死小鼠,剥离摘取每只小鼠的肿瘤称重,计算抑瘤率。抑瘤率=(对照组-给药组)/对照组×100%。结果:200只小鼠均进入结果分析。艾克清大、中、小剂量组的小鼠Lewis肺癌瘤质量显著低于模型组[(0.74±0.12),(0.89±0.13),(0.94±0.11),(1.32±0.13)g,P<0.01],抑瘤率分别为43.98%、32.32%、29.22%。艾克清大、中剂量组连续用药10d后,小鼠S180肉瘤质量显著低于模型组[(0.87±0.13),(1.06±0.22),(1.55±0.19)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为43.54%、31.52%。艾克清大、中、小剂量组连续用药9d后,小鼠HepA肝癌瘤质量显著低于模型组[(1.05±0.13),(1.35±0.12),(1.43±0.22),(1.78±0.31)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为40.8%、31.13%,19.43%,小鼠Esc艾氏癌瘤质量显著低于模型组[(1.03±0.12),(1.35±0.12),(1.55±0.15),(1.78±0.17)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为42.24%、24.35%,13.1%。结论:口服4.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA、Esc的抑瘤率均达到40%以上,口服2.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA的抑瘤率均达到30%以上。     

电针胃经穴后胃溃疡大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C活性的变化

目的:观察电针胃经(穴)对应激性胃溃疡大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C活性的影响。方法:实验于2005-07/12在湖南中医药大学针灸基础实验室完成。选择健康SD大鼠60只,随机数字表法分为5组,溃疡血清组穴12只雪、胃经血清组穴12只,取穴:四白、梁门、足三里雪和胆经血清组穴12只,取穴:阳白、日月、阳陵泉雪、胃经血清 PD153035组穴12只雪和胆经血清 PD153035组穴12只雪。采用水浸束缚法制作胃溃疡动物模型。电针刺激用G6805型电针仪,疏密波,电针频率疏波4Hz,密波20Hz,强度以肌肉或针柄微颤为度,电针时间30min。利用链霉蛋白酶消化法分离胃黏膜细胞,分别用表皮生长因子受体抑制剂PD153035和血清孵育胃黏膜细胞,应用同位素掺入法检测蛋白激酶C活性。结果:纳入动物60只,均进入结果分析。溃疡血清组大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C有少量表达眼(29.16±30.94)nkat/g演;胃经血清组和胆经血清组大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C呈现较强上增性表达,其中胃经血清组大鼠上增性表达特别明显,两组相比差异有显著性意义眼分别为(114.92±65.61),(36.47±27.54)nkat/g,P<0.01演;胃经血清 PD153035组和胆经血清 PD153035组大鼠胃黏膜细胞蛋白激酶C可见微弱表达眼分别为(17.39±23.39),(23.44±14.42)nkat/g演,胃经血清组与胃经血清 PD153035组比较差异有显著性意义穴P<0.01雪。结论:针刺能刺激大鼠胃黏膜细胞信号转导通路中蛋白激酶C的活化,并且存在经脉-脏腑的特异性联系。