UPLC法同时测定市售菟丝子中5种化学成分的含量

目的 采用UPLC法同时测定市售菟丝子中5种化学成分的含量。方法 采用Agilent SB-C₁₈（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）;流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液进行梯度洗脱;流速：0.4 mL·min^-1;柱温：35℃;分段检测波长：1~5 min,325 nm;5~12 min,260 nm;12~30 min,360 nm。结果 5种成分的检测范围分别为绿原酸：0.50~200.09 mg·L^-1（r =0.999 9）、金丝桃苷：0.56~226.32 mg·L^-1（r =0.999 9）、异槲皮苷：0.45~180.60 mg·L^-1（r =0.999 9）、紫云英苷：0.43~173.07 mg·L^-1（r =0.999 9）、山柰酚：0.43~173.28 mg·L^-1（r =0.999 9）;平均回收率（n = 9）分别为 102.0%（RSD=1.56%）,99.0%（RSD=2.90%）,100.1%（RSD=3.19%）,100.2%（RSD=3.00%）,99.3%（RSD=4.25%）。结论 该方法简便、可靠,可用于菟丝子的质量评价,为进一步提高和完善菟丝子质量标准提供参考。     

HPLC法同时测定紫花地丁提取物中绿原酸、秦皮乙素、芦丁、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和木犀草素含量

摘 要 目的：建立同时测定紫花地丁提取物中绿原酸、秦皮乙素、芦丁、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和木犀草素的HPLC法。方法: 采用HPLC法,以Hypersil ODS C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,以0.1%磷酸水(A) 甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长为345 nm,流速为1.0 ml·min^-1,柱温为35℃。结果:绿原酸、秦皮乙素、芦丁、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和木犀草素分别在4.317 5~172.700 0 mg·L^-1、2.7350~109.400 0 mg·L^-1、6.980 0~279.200 0 mg·L^-1、3.720 0~148.800 0 mg·L^-1、4.135 0~165.400 0 mg·L^-1和3.395 0~135.800 0 mg·L^-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.06%,98.84%,98.77%,99.40%,98.53%和98.71%,测得紫花地丁提取物中绿原酸、秦皮乙素、芦丁、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和木犀草素的含量分别为1.629 0 ,1.191 0,4.585 0,2.281 0,3.179 0,1.971 0 mg·g^-1。结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于紫花地丁提取物的质量控制。     

HPLC测定贯叶金丝桃中黄酮的含量

目的建立同时测定贯叶金丝桃中4种黄酮芦丁、金丝桃苷、扁蓄苷和槲皮素的HPLC分析方法。方法C₁₈柱；流动相A：水(磷酸调pH 3.1～3.5)，B：乙腈，梯度洗脱；流速1.0 mL·min^-1；检测波长254 nm。结果线性范围为芦丁1.376～8.256 μg·mL^-1(γ=0.9999)，金丝桃苷3.160～18.960 μg·mL^-1(γ=0.9996)，扁蓄苷0.968～5.808 μg·mL^-1(γ=0.9998)，槲皮素0.776～4.656 μg·mL^-1(γ=0.9993)。平均加样回收率为芦丁97.8%，RSD(n=3) 4.8%；金丝桃苷100.7%，RSD(n=3) 4.1%；扁蓄苷97.3%，RSD(n=3) 0.7%；槲皮素100.5%，RSD(n=3) 4.4%。4个化合物的精密度RSD(n=5)均<2%，重现性RSD(n=5)均<3%。结论本方法简单、有效、可行，可用于贯叶金丝桃黄酮的含量测定。     

水和非水毛细管电泳-电导检测法分离测定水杨酸类药物

目的建立水和非水毛细管电泳-电导法分离水杨酸类药物。方法用未涂层石英毛细管柱(55 cm×50 μm),以10 mmol·L^-1 Tris-30 mmol·L^-1 H₃BO₃(pH 8.0)为运行缓冲液,分离电压为24 kV,进样时间10 s,电导检测法。结果在非水实验条件下,水杨酸(SA)、乙酰水杨酸(ASA)和磺基水杨酸(SSA)得到很好的分离。SA,ASA和SSA的线性范围分别为0.05～100 mg·L^-1,5.0～250 mg·L^-1,0.08～100 mg·L^-1,r均大于0.995。结论应用于阿斯匹林制剂中水杨酸和乙酰水杨酸含量的测定,结果令人满意。与水介质相比,乙醇介质具有更高的灵敏度和分离效率。     

ICU患者万古霉素血药浓度监测及其临床应用

目的 超高效液相测定ICU患者血清中万古霉素,探讨其峰、谷浓度与疗效、安全性的关系。方法 血清用10%高氯酸沉淀,梯度洗脱,流动相为乙腈：0.005 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液。结果 万古霉素不受内源性物质干扰,线性良好,准确度、回收率、精密度、稳定性均符合要求。峰、谷浓度分别为15.42～89.12、7.30～55.46 mg·L^-1,谷浓度与肾毒性有弱相关性（相关系数r= 0.377 2,P<0.05）,谷浓度超过24 mg·L^-1易发生肾毒性。结论 该方法快速、高效,适用于临床血药浓度监测。     

HPLC-ELSD法测定贝母中异甾类生物碱及糖苷类成分的含量

目的建立同时测定贝母中5种异甾类生物碱——peimissine, imperialine, sinpeinine A, imperialine-3β-glucoside和yibeinoside A含量的HPLC分析方法。方法C₁₈柱;流动相:乙腈-水(含0.1%二乙胺);梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测器:Alltech 500蒸发光散射检测器(ELSD)。结果线性范围为peimissine 13.1～288.2 mg·L^-1(r²=0.997 5), imperialine-3β-glucoside 7.7～169.4 mg·L^-1 (r²=0.999 3), yibeinoside A 7.3～160.6 mg·L^-1 (r²=0.999 7), imperialine 16.5～363.0 mg·L^-1 (r²=0.999 2), sinpeinine A 8.7～191.4 mg·L^-1 (r²=0.994 2)。 5个化合物的精密度和重现性RSD均<5%。结论本方法简便、有效、可行,可用于贝母中5种异甾类生物碱的含量测定。     

HPLC法检测人血浆中百草枯的浓度

摘 要 目的:建立检测人血浆百草枯浓度的高效液相色谱方法。方法: 流动相为乙腈-3 mmol·L^-1 SDS-0.2％TFA（35∶28∶37）,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长258 nm,柱温35℃,内标为卡马西平。用乙腈沉淀血浆蛋白处理后,进行高效液相色谱分析。结果:血浆百草枯在0.5～100.0 mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）。高、中、低三个浓度（1.00,10.00,50.00 mg·L^-1 ）的相对回收率分别为（103.06±4.04）％,（100.20±3.00）％和（99.33±2.26）％;日内RSD分别为4.85％,5.97％和4.91％;日间RSD分别为6.60％,5.98％和4.10％。结论:本方法准确可靠,简便快速,适用于百草枯中毒患者的血药浓度检测。     

固相萃取结合HPLC-MS测定人血浆中奥曲肽的浓度及相对生物利用度固相萃取结合HPLC-MS测定人血浆中奥曲肽的浓度及相对生物利用度

目的建立人血浆中奥曲肽浓度的HPLC-MS测定法，研究国产奥曲肽注射剂的人体生物利用度。方法 血浆样品用HPL 1cc固相萃取小柱萃取，经Waters Xetrra C₁₈ MS分离后测定。18名健康志愿受试者采用随机交叉试验设计，分别im奥曲肽试验制剂和参比制剂200 μg，不同时间点采血，比较两者的生物利用度。结果线性范围0.5～40 μg·L^-1，方法回收率为97.1%～100.5%。日内、日间RSD分别为1.1%～1.6%，2.9%～4.8%。单剂量im奥曲肽200 μg后两种制剂的C_max分别为（19±10） μg·L^-1和（19±11） μg·L^-1，t_max分别为（0.50±0.15） h和（0.52±0.20） h；AUC_0～7h分别为（50±25） h·μg·L^-1和（50±25） h·μg·L^-1，t_1/2分别为(1.5±0.8) h 和(1.5±0.8) h。二者之间均无显著性差异，以进口奥曲肽为参比制剂，国产奥曲肽注射液的相对生物利用度为101%±10%。结论该方法灵敏、准确度高，可用于奥曲肽体内过程研究。两注射剂为生物等效性制剂。     

溴泰君(W198)在大鼠和比格狗体内的药代动力学

目的研究溴泰君(W198)在大鼠和比格狗的药代动力学。方法采用HPLC紫外检测方法测定大鼠及比格狗注射W198后血清药物浓度。结果大鼠iv W198 10,20和40 mg·kg^-1 3个剂量的T_1/2β分别为6.60,7.36和6.77 h,AUC_0-24h分别为3.797,7.371和15.192 mg·h·L^-1,V_d分别为7.14,4.33和4.13 L·kg^-1,CL分别为2.83,2.60和2.71 L·(kg·h)^-1。大鼠im W198 20 mg·kg^-1后T_1/2β为11.61 h,AUC_0-24h为4.191 mg·h·L^-1,im的生物利用度为56.9%。比格狗iv W198 5 mg·kg^-1,T_1/2β为11.72 h,AUC_0-24h为12.646 mg·h·L^-1,V_d为0.70 L·kg^-1,CL为0.46 L·(kg·h)^-1。W198与人血浆蛋白的结合率平均为78.0%。结论W198 im的T_1/2β比iv的略长,其生物利用度为56.9%。在10～40 mg·kg^-1剂量内的吸收呈现一级动力学特征。     

基于Keap1/Nrf2/HO-1通路汉黄芩素7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷体外抗氧化应激作用研究

目的 探讨汉黄芩素 7-O-β-D-乙基葡萄糖醛酸苷（WODE）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞（RAW264.7）的抗氧化应激作用及机制。方法 MTS法检测WODE（2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0 μmol·L^-1）对RAW264.7细胞活力的影响；体外培养RAW264.7细胞，WODE（10、20、40 μmol·L^-1）或地塞米松（1 μmol·L^-1，阳性药）预处理1 h，再给予LPS刺激24 h（造模过程不再加药），对照组不加 LPS 和受试物，模型组只给予 LPS 刺激；荧光探针检测胞内活性氧（ROS）水平；Griess反应测定细胞上清液中 NO 生成量；ELISA 检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的分泌；实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）法检测细胞内诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）、环氧化酶-2（COX-2）、白细胞介素-1β（IL-1β）、醌氧化还原酶1（NQO-1）、超氧化物歧化酶-1（SOD-1）的mRNA表达水平；Western blotting法检测细胞核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶-（1 HO-1）蛋白表达水平；免疫荧光染色法检测细胞内Kelch ECH相关蛋白（1 Keap1）表达水平。结果 与对照组比较，WODE浓度小于40 μmol·L^-1时，细胞存活率没有明显变化；浓度大于80 μmol·L^-1时，细胞存活率下降，但未见统计学差异。与模型组比较，WODE 10、20、40 μmol·L^-1组 ROS水平显著降低（P＜0.01）；20、40 μmol·L^-1 组 NO 释放显著降低（P＜0.05、0.01）；40 μmol·L^-1 组 iNOS mRNA 表 达 水 平 显 著 降 低（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1 组 COX-2 和20、40 μmol·L^-1组IL-1β mRNA表达水平显著降低（P＜0.05、0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组TNF-α和IL-6的释放受到显著抑制（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组NQO-1 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01），40 μmol·L^-1组SOD-1 mRNA表达水平显著升高（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组Keap1蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）；10、20、40 μmol·L^-1组HO-1蛋白和mRNA表达水平显著提高（P＜0.05、0.01）；20、40 μmol·L^-1 组 Nrf2 蛋白和 40 μmol·L^-1 组 Nrf2 mRNA 表达水平显著增加（P＜0.01）。结论 WODE 对 LPS 诱导的RAW264.7细胞的氧化应激具有抑制作用，其作用机制可能与调控Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关。     

RP-HPLC法测定红花中黄酮醇的含量

用RP-HPLC法分离并测定了红花中3种黄酮醇类化合物芦丁(I)、槲皮素(I)和山萘酚(II)。以大豆甙元为内标物,分析柱YWG-C₁₈(25cm×4.6mmID,10μm),甲醇—水—磷酸(48.5∶51.5∶0.25,pH3.5)为流动相,流速1.0ml·min^-1,柱温为室温,检测波长360nm,线性范围0.11～0.80μg,相关系数γ=0.9995～0.9998,回收率97.8%～98.9%。本法简便、快速、灵敏。     

毛细管电泳法测定金银花中芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸的含量

目的建立同时测定金银花中的芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸含量的毛细管电泳分析方法。方法未涂层弹性石英毛细管柱（50.0cm×75μm,有效长度40cm）,pH 9.5的20mmol.L-1硼砂溶液为缓冲液,分离电压20kV,柱温25℃,检测波长220nm,阳极压力进样0.5psi×3s。结果芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸在2.5～500μg.mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为103.5%,97.4%,98.7%和102.2%;RSD分别为1.9%,2.3%,1.1%和2.4%。结论该法简便快速,重复性好,各成分分离良好,可用于金银花的质量评价。     

高效毛细管电泳法测定绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量

目的采用高效毛细管电泳法对绞股蓝中的有效成分芦丁和槲皮素同时进行含量测定。方法采用未涂层熔融石英毛细管柱（57 cm×75μm,有效长度50 cm）为分离通道,以12 mmol.L-1硼砂-甲醇（80∶20）为电泳介质,分离电压30 kV,毛细管温度30℃,检测波长360 nm。结果芦丁和槲皮素在20 min内得到很好的分离,分别在0.054~1.070、0.009~0.180 mg.mL-1与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.0%、98.8%。结论方法简便快速、结果准确、重现性好,可用于绞股蓝及其制剂的质量控制。     

HPLC 法同时测定宣木瓜中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量

目的建立宣木瓜药材中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素的含量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.6%磷酸溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速设为1.0 ml.min-1。结果绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮素线性范围分别为0.035～0.56 g·L-1(r=0.997 8),0.003 2～0.051 2 g·L-1(r=0.999 3),0.004 25～0.068 g·L-1(r=0.999 7),0.003 5～0.056 g·L-1(r=0.999 7),平均加样回收率分别为102.9%(RSD=1.04%)、99.3%(RSD=2.28%)和99.2%(RSD=2.33%)、99.5%(RSD=2.52%)。结论该方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于宣木瓜药材的质量控制。     

高效液相色谱-二极管阵列-离子阱质谱法对红花水提物中有效成分群的定性分析

目的建立红花水提物中有效成分群的定性分析方法。方法采用加热回流法获得红花的水溶性总提物,以槲皮素和羟基红花黄色素A为指标进行方法学考察,用高效液相色谱-二极管阵列-离子阱质谱（HPLC-DAD-MSn）法定性分析红花水提物中的有效成分群。结果红花水提物中槲皮素和羟基红花黄色素A含量分别为0.13%和1.14%,定性分析了红花水提物中19种化学成分,其中1种为未知化学成分。结论所用方法专属性强,可作为红花水提物中有效成分群的定性分析方法 。     

顶空毛细管气相色谱法测定盐酸莫雷西嗪中残留溶剂的含量

目的建立顶空气相色谱法测定盐酸莫雷西嗪中甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯7种有机溶剂残留量的方法。方法色谱柱为DB-624石英毛细管柱,柱温采用程序升温,检测器为FID检测器,检测器温度为250℃,进样口温度为150℃,以水为溶解介质。结果甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯的质量浓度的线性范围分别为12.0~240 mg.L-1(r=1.000 0)、10.0~200 mg.L-1(r=0.999 9)、10.0~200 mg.L-1(r=0.999 9)、1.20~24 mg.L-1(r=0.999 9)、10.0~200 mg.L-1(r=0.999 9)、1.44~28.8 mg.L-1(r=0.999 8)、1.78~35.6 mg.L-1(r=0.999 7);平均回收率为98.1%~99.5%(RSD=0.6%~1.7%);定量限为0.22~11.91 mg.L-1;3批样品中7种有机溶剂残留量均符合《中华人民共和国药典》要求。结论本方法简单、准确、灵敏度高、重现性好,可用于该药物中有机溶剂残留量的测定。     

红花多糖对H22荷瘤小鼠的免疫调节和抗氧化功能的影响

目的：探讨红花多糖的抗肿瘤作用及其机制。方法：采用移植H22荷瘤小鼠模型,分别设置阴性对照组、阳性对照组和红花多糖低、中、高三个剂量组（15mg/kg、45mg/kg和135mg/kg）,对模型小鼠进行效果处理,观察各组的抑瘤效果、碳廓清能力、耳肿胀度,并对血清GR、GSH-PX、CAT、SOD和MDA含量等进行检测。结果：红花多糖高剂量可明显抑制小鼠H22实体瘤生长（P<0.05）,抑瘤率为66.8%;高剂量组小鼠血清MDA水平明显降低（P<0.05）,GR、GSH-PX、CAT、SOD活性较阴性对照组明显升高,还可降低肿瘤细胞中ROS水平（P<0.05）。结论：红花多糖可明显增强H22荷瘤小鼠的免疫功能,清除自由基、减轻活性氧造成的损伤,从而起到抗肿瘤的作用。     

HPLC法同时测定桑叶中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量

目的建立晾晒、烘干及鲜桑叶中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,Shim pack ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温35℃,流动相为0.4%磷酸乙腈溶液(A)和0.4%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速设为1.0 ml.min-1。结果三种黄酮类成分在35 min内达到良好分离,芦丁在0.076～1.920 mg.L-1,异槲皮苷在0.086～2.148 mg.L-1,紫云英苷在0.042～2.108 mg.L-1范围内线性关系良好(r>0.999 3,n=6),三种成分平均加样回收率分别为99.7%(RSD=2.5%)9、8.8%(RSD=2.4%)和99.5%(RSD=4.1%)。结论该方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,为评价桑叶药材炮制方法提供了一个很好的依据,同时也可用于桑叶药材的质量控制。     

毛细管电泳法测定白芥子中芥子碱的含量

目的建立毛细管电泳法测定白芥子中芥子碱含量的方法。方法采用未涂层熔融石英毛细管柱(52 cm×100μm ID,有效分离长度42 cm)为分离通道,运行缓冲液为15 mmol.L-1柠檬酸-15mmol.L-1柠檬酸三钠(pH=5.0),操作电压15 kV(恒压),检测波长254 nm,毛细管柱温为25℃,电动进样7 kV×3 s。结果芥子碱硫氰酸盐质量浓度在0.5~20 mg.L-1内线性关系良好(r=0.998 9),平均加样回收率为97.8%(RSD值为2.36%,n=5)。白芥子中芥子碱的平均含量为4.23 mg.g-1,分析时间为5 min。结论用毛细管电泳法测定白芥子中芥子碱含量的方法可行、操作简单、检测快速。     

红花注射液治疗稳定型心绞痛

目的 :观察红花注射液对稳定型心绞痛的疗效及血液流变学影响。方法 :将 6 0例稳定型心绞痛病人 ,随机分 2组。红花组 30例给予红花注射液2 0mL + 5 %葡萄糖注射液 5 0 0mLiv ,gtt ,qd× 10d。丹参组 30例给予丹参注射液 16mL + 5 %葡萄糖注射液 5 0 0mLiv ,gtt ,qd。结果 :对心绞痛症状总有效率红花组为 90 % ,丹参组为 87% (P >0 .0 5 )。对心电图改善总有效率红花组为 6 3% ,丹参组为 37% (P <0 .0 5 )。红花组血液流变学的各项指标与治疗前比较显著下降 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,且改善程度明显优于丹参组 (P <0 .0 5 )。结论 :红花注射液治疗稳定型心绞痛的疗效优于丹参