对大肠埃希菌产生β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶的探讨

目的：探讨大肠埃希菌产β－内酰胺酶和超广谱β－内酰胺酶（ESBL）之间的关系及耐药性。方法：采用纸片扩散法（K－B法）、Nitrocefin法对该字感染标本中分离的108株大肠埃希氏菌分别进行药敏试验、β－内酰胺酶、ESBL的检测。结果：108株大肠埃希氏中60株产β－内酰胺酶（56％）、ESBL发生率为36％（39株），其中产两种酶的有36株，有3株产ESBL而不产β－内酰胺酶。产β－内酰胺酶株对青霉素，一、二代头孢菌素耐药率为62％－100％，对三代头孢菌素的耐药率为39％－40％；产ESBL的菌株，对青霉素类，一、二、三代头孢菌素均耐药。泰能的敏感率为100％，舒普深为95％。结论：常规检测β－内酰胺酶、ESBL，有利于耐药机制的探讨，对指导临床合理用药，控制ESBL菌株的爆发流行有重要价值。     

阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶、诱导酶的检出与耐药相关性的分析

目的：了解阴沟肠杆菌超广谱β－内酰胺酶和诱导酶的产生和分布情况。并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法：用纸片扩散确证法和相邻纸片法对104株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶及诱导酶的检测，用VITEK全自动药敏分析系统和K－B琼脂扩散法检测其对20种抗生素的耐药性。结果：104例阴沟肠杆菌中，检出超广谱β－内酰胺酶阳性株77株，占74％，诱导酶阳性株26株，占25％，13株两种酶同时阳性。超广谱β－内酰胺酶阳性株主要集中在几个病区，诱导酶阳性株则无此倾向，104株菌对多种怀素高度耐药，产超广谱β－内酰胺酶株的耐药率明显高于非产酶株，产诱导酶株的耐药率反而低于非产酶株。结论：阴沟肠杆菌产酶情况和耐药性均十分严重。多重耐药的主要原因是由于菌株产生超广谱β－内酰胺酶，产酶株对三代头孢的体外敏感试验不能正确反映临床的治疗效果。实验室应加强阴肠杆菌产酶情况的检测，治疗产酶阴沟肠杆菌引起的感染，首选亚胺培南，其次为舒普深，任何情况下应避免使用三代头孢。     

肺炎克雷伯菌的耐药性与脉冲凝胶电泳分型

目的 研究临床分离的肺炎克雷柏菌对头孢噻肟的耐药性与超广谱β－内酰胺酶（ＥＳ－ＢＬ）及其与感染性疾病的关系。方法 应用纸片扩散法检测肺炎克雷伯菌对头孢噻肟的耐药性，应用双纸片协同试验检测ＥＳＢＬ；脉冲凝胶电泳（ＰＦＧＥ）对细菌分型。结果 肺炎克雷柏菌对头孢噻肟５６株中介、６２株耐药，双纸片协同试验阳性为９５株，阳性率８１％。应用ＰＦＧＥ法将８８株被测菌株分为２８个不同的分型，其中有些分型中含有多个     

舒巴坦对产β-内酰胺酶菌株的抑酶增效作用

目的 比较哌拉西林、哌拉西林／舒巴坦和氨苄西林／舒巴坦对产β－内酰胺酶细胞的抑酶增效作用。方法 以生物法测定３３株临床分离的革兰生村菌和５株标准菌株产生β－内酰胺酶对抗生素的相对不解率，抑酶保护率，结果 β－内酰胺酶对哌拉西林／舒巴坦各配比的间无统计学意义，用中位数做显著性测试，１：１与４：１配比间差异有显著性，Ｐ〈０．０１。结论舒巴坦与哌拉西林合用提高了哌拉西林对产β－内酰胺酶细菌的抗菌活性，预     

肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶的检测与药敏分析

目的：探讨肺炎克雷伯菌对19种抗生素的耐药性与其产生超广谱β－内酰胺酶（ESBL）的关系,为临床提供可靠的药敏数据。方法：按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的方法。采用纸片扩散法测定19种抗生素的活性,同时比较亚胺培南等19种抗生素对这76株肺炎克雷伯菌的体外,抗菌活性;采用双纸片协同法测定产超广谱β－内酰胺酶株。结果：产超广谱β－内酰胺酶的肺炎克雷伯菌占全部菌株的31．6％,亚胺培南的体外抗菌活性最好,总敏感率100％。可作为治疗严重感染的首先药物,其次为阿米卡星（79％）和头孢西汀（71％）,结论：产超广谱β－内酰胺酶株导致的医院感染已不容忽视,因此常规检测产超广谱β－内酰胺酶株,对指导临床合理选用抗生素,控制其引起的爆发流行有重要意义。     

表型筛选法检测革兰阴性菌AmpC β-内酰胺酶

目的：建立一种简便、快速、准确的检测革兰阴性茵AmpCβ-内酰胺酶的表型筛选法应用于临床实验室，指导合理正确使用抗生素，以控制AmpCβ-内酰胺酶所致耐药性的蔓延。方法：采用表型筛选法对196株革兰阴性茵进行AmpCβ-内酰胺酶检测，并对检测结果进行分析。结果：196株革兰阴性茵表型筛选结果显示，产AmpCβ-内酰胺酶的茵株共22株，占11．2％（22／196），以肠杆菌属及不动杆菌属为主。结论：表型筛选法检测方法简便，结果可靠。易于在临床实验室中推广应用。     

1 070株葡萄球菌的分离鉴定和药敏性分析

目的 了解和调查临床分离出的葡萄球菌的致病性及药敏情况，为有效控制致病性葡萄球菌提供参考方法，指导临床用药。方法 从医院住院病人的标本中分离出来1070株葡萄球菌进行详细检测，并进行MRS检测、β－内酰胺酶试验、药敏试验MIC测定。结果 在1070株葡萄球菌中，共分离出13种细菌，其中凝固酶阳性者占35．2％，凝固酶阴性者占64．8％。β－内酰胺酶试验阳性者占72．5％，β－内酰胺酶试验阴性者占27．5％。综合而看，葡萄球菌的耐药性均比较强，特别是MRSA和MRCNS。但所有葡萄球菌皆对万古霉素敏感。结论 葡萄球菌是造成医院感染的主要病原菌之一，合理使用抗生素对于有效治疗疾病和控制医院感染的发生至关重要，强调葡萄球菌耐药性监测对指导临床用药的必要性。     

鲍曼不动杆菌的β—内酰胺酶与耐药表型分析

分析鲍曼不动杆菌的β－内酰胺酶与对β－内酰胺类抗生素耐药表型的关系。用青霉素及头孢唑啉做底物，分别检测从各种临床样品分离到的８４株鲍曼不动杆菌的青霉素酶和头孢菌素酶；并用Ｋ－Ｂ法，微量肉汤稀释法进行了７种β－内酰胺类抗生素及两种加酶抑制剂的三代头孢药敏试验，其中产酶株对７种抗生素基本耐药，不产酶株对头孢他啶 ，哌拉西林较敏感；８４株对头孢哌酮／舍巴坦均敏感，舒巴坦对酶的抑制作用远优于棒酸，用头孢他     

肠球菌β—内酰胺酶测定及药敏分析

目的：观察临床分离的１０６株肠力的耐药性与产β－内酰胺酶的关系。方法：用纸片扩散法检测５种抗生素的耐药性,用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ法测定产β－内酰胺酶状况。征求谋略对氨基糖苷类抗生素具有高度耐药性,未发现万古栳素的耐药株,对青霉素类抗生素的耐药性,未发现万古霉素的耐药株,对青霉素类抗生素的耐药性,怕菌明显高于烘肠球菌。１０６株中５５株肠球菌β－内胺酶阳性,３２株屎肠球菌中２７株产酶（占８４．４％）,     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌中SHV型β内酰胺酶的分子生物学研究

目的：了解复旦大学附属华山医院临床分离产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中SHV型β内酰胺酶的分布、流行情况以及分子生物学特点。方法：用SHV型β内酰胺酶基因的通用引物进行聚合酶链反应(PCR)检测；编码框以外设计引物、PCR扩增SHV型β内酰胺酶全编码基因并进行克隆表达、序列分析；对产SHV型β内酰胺酶的菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测。结果：58株产ESBLs大肠埃希菌中，只有3株细菌产生SHV型β内酰胺酶(5．2％)，其中1株产生SHV—11(非ESBLs)，另2株产生SHV—12(ESBLs)；3株产SHV型β内酰胺酶菌株的PFGE谱型不同。结论：临床分离产ESBLs大肠埃希菌中，SHV型β内酰胺酶的基因型为SHV—11和SHV—12，SHV型ESBLs不是主要的ESBLs型别。未发现产SHV型β内酰胺酶菌株间克隆传播。     

淋球菌临床分离株青霉素耐药性与β-内酰胺酶基因相关性探讨

目的了解淋球菌临床分离株青霉素耐药性与β-内酰胺酶基因存在的相关性。方法对2003年2～12月分离的128株淋球菌临床分离株用PCR法检测其特异的隐蔽质粒CPPB基因和青霉素耐药菌的β-内酰胺酶基因；用琼脂稀释法测定其对青霉素的最小抑菌浓度(MIC)。结果128株临床分离菌中CPPB基因阳性者125株，占97．7％。其中MIC≥1mg／L的青霉素耐药菌86株，占CPPB基因阳性者的68．8％；MIC≥8mg／L的高耐药菌59株，占耐药菌株总数的68．6％。86株耐药菌中β-内酰胺酶基因PCR扩增阳性者62株，占72．1％，其中58株(67．4％)为高耐药菌。结论研究表明。目前淋球菌临床分离株耐药情况较为严重，如果用青霉素治疗淋病需首先进行耐药检测。用PCR技术扩增CPPB基因有助于淋病的确诊。淋球菌的耐药性与β-内酰胺酶基因存在一定关系。β-内酰胺酶基因的检测对快速判断淋球菌是否高度耐受青霉素有临床指导意义。     

超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性分析

[目的]观察大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的分布情况及其耐药性分布。[方法]采用NCCLS纸片确证试验检测超广谱β-内酰胺酶。[结果]218株大肠埃希菌中有60株超广谱β-内酰胺酶阳性；239株肺炎克雷伯菌中有46株阳性。检出的这些阳性菌株几乎对所有β-内酰胺类抗生素耐药；对氨基糖苷类、氟诺喹酮部分耐药；对亚胺培南全部敏感。[结论]革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶的检测应作为临床微生物实验室的常规应用项目，以利于指导临床用药。     

亚胺培南-EDTA琼脂扩散法检测金属β-内酰胺酶

[目的] 了解金属β-内酰胺酶存耐亚胺培南铜绿似单胞菌的分布：[方法] 采用亚胺培南-EDTA琼脂扩散法检测金属β-内酰胺酶。[结果]67株耐亚胺培南的铜绿似单胞菌检出金属β-内酰胺酶阳性株9株，阳性率为13.4％。[结论] 亚胺培南-EDTA琼脂扩散法可作为金属β-内酰胺酶的初筛试验，筛选出细菌是否产金属β-内酰胺酶，从而为临床指导用药提供依据。     

温州地区嗜血杆菌的检出及耐药性分析

目的 了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考。方法 用嗜血杆菌专用巧克力培养基（ＨＡＥ）进行分离培养,用ＮＨＩ鉴定卡和ＡＴＢＮＨ药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ纸片法测定被试菌的β－内酰胺酶。结果 １１９０例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出１４７株嗜血杆菌,总检出率１２．３５％,其中流感嗜血杆菌３２株（２１．７７％）,副流感嗜血杆菌１１３株（７６．８７％）,杜克雷嗜血杆菌２株（１．３６％）。检测株对头孢噻肟、阿莫西林／克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为６．１２％、１０．８８％、１９．０５％。产β－内酰胺酶的共６４株,产酶率为４３．５４％。结论 本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼     

流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因研究

目的明确我院分离的流感嗜血杆菌（H1）氨苄西林耐药的基因。方法用E试验测定我院上呼吸道感染患儿鼻咽部分离300株HI对氨苄西林耐药情况；以Nitrocdin纸片检测β内酰胺酶；PCR扩增及序列分析确定产酶株的基因型。结果32株氨苄西林耐药株均产β内酰胺酶，占总菌株数11％（32／300），PCR检测出TEM-131株，ROB-11株。结论产β内酰胺酶是H1对氨苄西林耐药的重要机制，TEM-1型是β内酰胺酶主要基因型，ROB-1型β内酰胺酶也首次被检出，值得关注和长期监测。     

木糖葡萄球菌的胞外粘质物和β—内酰胺酶检测

对临床标本和医院环境中分离的５２株木糖葡萄球菌进行了胞内粘质物（ＥＳＳ）β－内酰胺酶（β－ｌａｓｅ）和抗生素敏感性测定，临床分离株ＥＳＳ阳性率（６６．７％）显著高于医院环境株（２９．７％）但β－ｌａｓｅ阳性率无明显差异，ＥＳＳ阳性株多重耐药性较多见，木糖葡萄菌有可能成为院内感染和机会感染的常见菌。     

1998年下半年广州地区肠球菌的耐药性监测

为了解广州地区肠球菌的耐药特征。从广州市１２家医院收集临床标本分离的１６８株肠球菌，用Ｋ－Ｂ纸片法测定其对万古霉素等７种抗生素的敏感性。用浓度梯度法测定其对万古霉素和替考拉宁的最低抑菌浓度（ＭＩＣ值），并用头孢硝基噻吩显色反应法测定其在β－内酰胺酶。Ｋ－Ｂ纸片法测得１６８株肠球菌对万古霉素、氯苄青霉素和青霉素的敏感率分别为９０．５％、８８．１％和７９．２％，对高剂量庆大霉素的敏感率只有３７．５％。     

超广谱β—内酰胺酶检测的临床意义

目的：研究近3临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌的耐药性及产超广谱β－内酰胺酶（ESBL）的比率。方法：应用双纸片协同试验筛选超广谱β－内酰胺酶的细菌，确正实验采用头孢他啶联合克拉维酸纸片扩散法，结果：肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对亚胺培南的敏感率均为1005，其次为头孢他啶分别为71．7％和91．1％，超广谱β－内酰胺酶的比分别为28．3％和8．95。结论：随着头孢三代抗生素等在临床应用的增多，临床分离的革兰阴性杆菌对头孢他啶等三代头孢的耐药性及超广谱β－内酰胺酶的比率呈上升趋势，准确的检测超广谱β－内酰胺酶对临床合理应用抗和 具有指导意义。     

铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的临床调查研究

目的调查临床分离铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶株分布情况及耐药现状，为临床合理应用抗生素提供依据。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌，采用κ—B法筛选对亚胺培南和头孢他啶同时耐药菌株，E—test法检测产金属伊内酰胺酶菌株，最后用最低抑菌浓度（MIC）法测定产金属β-内酰胺酶菌株对8种常用抗菌药物的敏感度。结果300株铜绿假单胞菌中同时耐亚胺培南和头孢他啶者34株，占11．3％（34／300）；其中检出产金属伊内酰胺酶15株，占5．0％（15／300），产酶株分布较为集中，产酶株对亚胺培南和头孢他啶等抗生素高水平耐药，对阿米卡星和环丙沙星部分耐药。结论铜绿假单胞菌产金属伊内酰胺酶检出率升高，产酶株的多重耐药较严重，应高度重视产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的监测与控制。     

肠杆菌科细菌两种β-内酰胺酶测定及耐药性监测

目的对我院及本地区肠杆菌科细菌产β-内酰胺酶及其耐药性的情况进行研究分析。方法将我院分离出的202株肠杆菌科细菌,采用MicroScan autoSCAN-4型全自动细菌鉴定分析仪作细菌鉴定和药敏试验,同时用复合纸片法鉴定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),用头孢西丁三维试验法检测AmpCβ-内酰胺酶(AmpC-BLA)。结果202株肠杆菌科细菌中,高产ESBLs的细菌74株占36.6%,高产AmpC-BLA的细菌39株占19.3%;产β-内酰胺酶菌对18种常用抗菌药物耐药率明显高于非产酶菌株。结论2种β-内酰胺酶菌的耐药性非常严重且各具特点,各临床实验室应重视β-内酰胺酶的检测,这对指导临床合理使用抗生素具有十分重要的意义。