枇杷叶三萜酸对TGF-β_1刺激的人胚肺成纤维细胞转分化及ERK通路的影响

目的研究枇杷叶三萜酸(Triterpene acids of loquat,TAL)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞转分化、胶原合成及ERK通路的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ),MTT比色法测定TAL对HFL-Ⅰ细胞的增殖抑制率。RT-PCR检测每组中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(CⅠ)、Ⅲ型胶原(CⅢ)mRNA的水平,Western blot检测各组细胞中p-ERK1/2和ERK1/2表达水平。结果 TAL呈剂量和时间依赖性抑制HFL-Ⅰ细胞的增殖(P<0.05),并能够降低CⅠ、CⅢ、α-SMA、CTGF的过度表达(P<0.05);Western blot结果显示TAL能降低TGF-β1刺激组p-ERK1/2的表达,而对ERK1/2的表达没有差异。结论 TAL能抑制HFL-Ⅰ的增殖,同时也能使活化后HFL-Ⅰ中的α-SMA生成减少,CTGF、胶原和p-ERK1/2表达降低。     

重组pAd/CMV/V5-DEST-p16质粒的构建

目的构建并鉴定pAd／CMV／V5-DEST-p16重组腺病毒质粒。方法合成人p16-INK4表达基因,构建pENTR1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16cDNA,取代目的质粒pAd／CMV／V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd／CMV／V5-DEST-p16,测序证实质粒含有目的基因。结果构建了p16重组腺病毒质粒,为研究p16-INK4的作用创造了条件。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒质粒稳定、可靠、方便。     

安徽部分医院HBV基因型的分布及其临床意义

目的了解安徽省部分医院乙型肝炎病毒（HBV）基因型的分布及其与临床的相关性。方法选择安徽部分医院HBV DNA阳性的HBV感染者196例,其中急性黄疸型肝炎3例,慢性乙型肝炎107例,肝炎后肝硬化59例,原发性肝癌6例,慢性重型肝炎20例,亚急性重型肝炎1例,采用Caliper-1000微流芯片分析仪分析检测HBV DNA和基因型。结果196份HBV DNA阳性血清标本中,B基因型126例（64．3％）,C基因型59例（30．1％）,BC混合型11例（5．6％）,未发现其他基因型。江淮之间以B基因型占优势,淮河以北以C基因型占优势,分别为68．8％和66、7％;HBVB基因型感染的临床疾病谱以慢性乙型肝炎为主,占62．7％（P〈0．01）,C基因型感染者以肝硬化为主,占44．1％（P〈0．01）,差异有显著性;检测出的HBV基因型与病毒载量、HBeAg阳性表达差异均无显著性;肝硬化患者HBV C基因型的HBeAg阳性表达（68．4％）明显高于B基因型（31．6％）和BC混合型（0）。结论安徽省部分医院HBV基因型存在B、C和BC混合型,B型为该地区的优势基因型。HBVB基因型感染的临床疾病谱以慢性乙型肝炎为主,而HBV C基因型感染以肝硬化为主。     

120例临床真菌感染的分析

目的分析真菌感染的危险因素,为临床预防和减少真菌感染提供参考.方法对2003年1～12月间真菌感染的120份病例进行回顾性调查,同时随机抽取87例同期非真菌感染住院病例作为对照组.结果调查的真菌感染病例中,真菌感染标本来源最多者为呼吸道分泌物,原发基础病也以呼吸系统的疾病为多,占41.7%;患者年龄构成60岁以上者占70%;感染前广谱抗菌素使用超过7 d者占52.5%;各种插管占15%,均明显高于对照组(P＜0.05).结论年龄超过60岁,严重基础疾病、高效广谱抗菌素的应用、插管等侵袭性操作均为临床真菌感染的危险因素.临床应针对上述因素有重点地加以预防.     

痰标本分离革兰阴性杆菌整合子分布及分型研究

目的研究临床痰标本分离革兰阴性杆菌中整合子的分布与分型。方法用Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类3种整合酶基因通用引物扩增398株痰标本分离革兰阴性杆菌的相应基因;用琼脂对倍稀释法检测临床菌株的MIC。结果Ⅰ类整合酶基因总阳性率为48.7%,Ⅱ类整合酶基因总阳性率为2.3%,未检出Ⅲ类整合酶基因阳性菌株,Ⅰ类和Ⅱ类整合子同时阳性率为1.5%。肠杆菌科细菌Ⅰ类整合酶基因阳性率为69%,Ⅱ类整合子阳性率为2.7%;非发酵菌中Ⅰ类整合子阳性率为34%,Ⅱ类整合子阳性率为1.8%。在肠杆菌科细菌中,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株对多种抗菌药物的耐药率均明显高于阴性菌株。结论在痰标本分离的革兰阴性杆菌中,肠杆菌科细菌Ⅰ类整合子的携带率高于非发酵菌,Ⅱ类整合子则无明显区别。     

临床分离阴沟肠杆菌中质粒介导喹诺酮耐药qnrB和qnrS基因的检测

目的了解临床分离阴沟肠杆菌中qnrB和qnrS基因的分布。方法PCR检测qnrB和qnrS基因并将阳性扩增产物进行测序分析;纸片扩散法测定qnrB和qnrS基因阳性菌株对10种抗菌药物的敏感性。结果81株阴沟肠杆菌中,5株qnrB4基因阳性(6.5%)、2株qnrS1基因阳性(2.5%);qnr基因阳性菌株对氯霉素、阿米卡星、头孢西丁、头孢噻肟等显示多重耐药,其中3株对环丙沙星耐药。结论临床分离阴沟肠杆菌中存在qnrB和qnrS基因阳性菌株,为多重耐药菌,临床应加强检测和监测。     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌中SHV型β内酰胺酶的分子生物学研究

目的：了解复旦大学附属华山医院临床分离产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中SHV型β内酰胺酶的分布、流行情况以及分子生物学特点。方法：用SHV型β内酰胺酶基因的通用引物进行聚合酶链反应(PCR)检测；编码框以外设计引物、PCR扩增SHV型β内酰胺酶全编码基因并进行克隆表达、序列分析；对产SHV型β内酰胺酶的菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测。结果：58株产ESBLs大肠埃希菌中，只有3株细菌产生SHV型β内酰胺酶(5．2％)，其中1株产生SHV—11(非ESBLs)，另2株产生SHV—12(ESBLs)；3株产SHV型β内酰胺酶菌株的PFGE谱型不同。结论：临床分离产ESBLs大肠埃希菌中，SHV型β内酰胺酶的基因型为SHV—11和SHV—12，SHV型ESBLs不是主要的ESBLs型别。未发现产SHV型β内酰胺酶菌株间克隆传播。     

TLR接头蛋白SARM研究进展

SARM是最后一个发现的TLR接头蛋白,也是唯一具有抑制作用的接头蛋白,SARM的功能在不同物种和不同研究体系中结果差异较大,本文综述了人和小鼠中SARM的基因定位、基因结构和表达情况,并综述了线虫、鲎、文昌鱼、斑马鱼、小鼠和人等不同物种中SARM功能研究的最新进展。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶检测及同源性分析

目的 了解临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(IRAB)碳青霉烯酶的基因型及同源性.方法 采用MicroScan WalkAway-40微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58组碳青霉烯酶基因型,肠杆菌科重复序列PCR(ERIC-PCR)检测耐药基因阳性菌株的同源性.结果 64株IRAB均为多重耐药菌株,其中10株(15.6%)为泛耐药菌株,51株(79.7%)blaOXA-23阳性,4株(6.3%)blaOXA-58阳性,57株(89.1%)blaOXA-66/blaOXA-51组阳性.ERIC-PCR结果 显示blaOXA-23阳性菌株中47株为同一基因谱.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要机制,菌株间可能存在克隆传播.