尸体供肠快速获取、保存法及临床应用

本文介绍了我国首例同种异体小肠移植的尸体供肠获取及保存方法。采用此方法获取5例尸体供肠，热缺血时间平均为5．4min．获取时间为10.4min，其中1例供肠用于临床小肠移植，其热缺血时间为6min，冷缺时间为9h45min.供肠采用低温（0～4℃）Euro－Collins液保存，未见明显的组织损伤，移植的小肠吸收功能逐渐恢复，组织结构正常。作者认为本方法适用于尸体供肠的获取及保存。     

肝肠联合移植供肠、供肝的获取与保存

目的：探讨自无心搏尸体联合获取和保存肝小肠的方法以及在临床肝、肠联合移植中的应用。方法：采用体内原位灌注、联合获取的方法，将肝、小肠、胰、脾和肾一并获取，移植物经4℃ UW液保存，将获取的小肠和肝联合移植至一短肠综合征合并有淤胆的患者体内。结果：供者热缺血时间2min 30s，移植肠冷缺血6h 40min，移植肝冷缺血8h 7min。结论：自无心搏尸体联合获取的供肠、供肝适合于临床肝肠联合移植。     

152例大鼠原位全小肠移植的外科技术总结

目的:总结大鼠原位全小肠移植的外科手术方法.方法:雄性F344和Lewis大鼠分别为供体和受体.供肠切取范围包括全小肠、门静脉及肠系膜上动脉.供肠肠系膜上动脉与受体肾下腹主动脉端侧吻合采用连续外翻锁边缝合方法,供体的门静脉与受体的左肾静脉端端吻合采用Cuff套管方法,切除受体自体小肠,断端与供体肠吻合重建消化道.供、受体术中均补液4～6 ml.结果:共进行152次移植手术,其中正式实验120次,供体手术时间(60±10) min,受体手术时间(100±15) min,移植肠热缺血时间(30±5) min,78.3%大鼠术后存活超过2周,病理检查证实移植肠病变符合排斥反应特点.结论:供肠获取、血管吻合术、术中血容量维持、保温是大鼠原位全小肠移植术的关键.     

改良三袖套法建立大鼠原位全小肠移植模型

目的 简化大鼠原位全小肠移植术式,建立符合生理条件、稳定的动物模型.方法 取32只封闭群雄性SD大鼠为供、受体,进行同种同基因原位无造瘘全小肠移植,腹主动脉、门静脉的吻合改良为三袖套法.结果 手术成功率为87.5%(28/32),供肠热缺血时间0min,冷缺血时间(32±5)min.术后7d受体存活率100%.结论 改良的大鼠原位全小肠移植三袖套血管吻合法缩短供肠冷缺血时间,吻合口无出血,提高了手术成功率.此方法操作简单,为研究小肠移植后急、慢性排斥反应,移植物抗宿主反应以及肠道功能的良好模型.     

小鼠异位小肠移植手术方式的改进

目的建立良好的小肠移植动物模型,用于进一步作小肠移植免疫及相关研究.方法采用显微外科技术,获取带门静脉和腹主动脉的供体小鼠小肠,移植物腹主动脉离体修剪成带肠系膜上动脉的动脉袖片(Carrel's patch),将移植物门静脉和Carrel's patch分别与受体下腔静脉与腹主动脉作端侧吻合.移植肠的远端与受体近端空肠作端侧吻合,近端结扎封闭.结果实验初期移植成功率为37.9%,后期技术成熟后移植成功率为81.9%,供体手术时间为(60±10)min,移植肠冷保存时间为(20±5)min,受体与移植物血管吻合时间为20～25min.结论采用改进手术方式制作的肠道内引流小鼠小肠移植模型稳定,是研究小鼠同种异体小肠移植免疫有用的实验工具.     

小鼠原位小肠移植模型的建立

目的:探索原住小肠移植的手术技术,为研究移植小肠功能及排斥反应提供良好的动物模型.方法:采用小肠供体的门静脉与受体下腔静脉端侧吻合,供体带主动脉片的肠系膜上动脉与受体腹主动脉端侧吻合,受体相应长度肠管切除,供体近、远端肠管与受体相应肠管切除后近、远端以端端吻合的方式建立原位小肠移植模型.术后禁食4d,不禁饮,每天分2次经皮下分别给予5％葡萄糖生理盐水2 mL,术后不使用抗生素和免疫抑制剂.小鼠存活超过5d认为手术成功.结果:行原位小肠移植30次,术后5d存活率达60％(18/30).手术失败的12例小鼠主要死亡原因为动脉吻合口部位狭窄及吻合口处血栓形成5例,吻合口出血导致出血性休克2例,术后肠瘘导致腹腔内感染5例.供体手术时间(40±4.5)min,热缺血时间约0.5min,供体肠段肠系膜上动脉组织片修整时间约为3min,供体冷保存时间为(30±7.5) min,受体手术时间(95±8.0)min,其中腹主动脉及下腔静脉阻断时间为(38±3.5) min,静脉吻合时间(10±2.0)min,动脉吻合时间(15±3.0)min,成活小鼠受体手术平均出血量约0.2mL.结论:良好的供体肠段的获取、高质量的血管吻合和肠道吻合及供、受体补液是提高小鼠小肠移植手术成功率的关键.     

大鼠移植肠局部CTLA4Ig基因转染的可行性研究

目的：探讨CTLA4Ig基因能否在移植小肠局部转染表达。方法：移植前经肠系膜上动脉给供肠灌注脂质体包裹的CTLA4I异cDNA重组质粒，应用免疫组织学及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)观察移植小肠中CTLA4Ig转基因产物的表达。结果：免疫组织学及RT-PCR结果显示在移植后48h移植小肠中有大量CTLA4Ig转基因产物的表达。结论：经肠系膜上动脉体外灌注脂质体包裹的CTLA4IgcDNA重组质粒可有效转染移植小肠。     

改良三袖套法建立大鼠原位全小肠移植模型

目的简化大鼠原位全小肠移植术式,建立符合生理条件、稳定的动物模型。方法取32只封闭群雄性SD大鼠为供、受体,进行同种同基因原位无造瘘全小肠移植,腹主动脉、门静脉的吻合改良为三袖套法。结果手术成功率为87.5%(28/32),供肠热缺血时间0 min,冷缺血时间(32±5)min。术后7 d受体存活率100%。结论改良的大鼠原位全小肠移植三袖套血管吻合法缩短供肠冷缺血时间,吻合口无出血,提高了手术成功率。此方法操作简单,为研究小肠移植后急、慢性排斥反应,移植物抗宿主反应以及肠道功能的良好模型。     

供鼠营养状态对移植肝脏功能影响的实验研究

目的:探讨供鼠术前营养状态对移植肝脏功能的影响.方法:采用肝脏常温离体循环灌注模型观察术前禁食与否对肝脏功能的影响.保存时限为12,24h,观察再灌注0,30,60,120 min后肝功能指标、胆汁分泌量及组织学的变化.结果:保存12 h组,在再灌注后120 min后ALT、LDH值达到高峰,保存24 h组,高峰提前至再灌注后60min.两实验组相比,未禁食组灌出液中ALT、LDH含量均明显低于禁食组(P＜0.05).随保存时间延长,胆汁分泌量减少.灌注120min胆汁分泌总量,未禁食组明显多于禁食组.组织学变化可见未禁食组肝脏损伤明显较禁食组轻.结论:术前供鼠良好营养状态可减轻肝脏保存损伤,并促进再灌注后功能恢复.     

局部CTLA4Ig转基因治疗大鼠小肠移植排斥

目的 :研究CTLA4Ig基因在小肠局部转染表达及其表达产物对小肠移植物存活的作用。方法 :移植前经肠系膜上动脉供给肠灌注脂质体包裹的CTLA4IgcDNA ,应用免疫组织学及RT PCR观察移植小肠中CTLA4Ig转基因产物的表达。结果 :免疫组织学及RT PCR结果显示在移植后 2 8天内移植小肠中有CTLA4Ig转基因产物的表达 ,18例移植小肠中的 11例在受体内的存活时间超过 90天。结论 :经肠系膜上动脉体外灌注脂质体包裹的CTLA4IgcDNA可有效转染移植小肠 ,转染的移植小肠在受体内可长时间存活