特异性转移因子对人胃癌细胞RNA合成及H-ras癌基因表达的影响

转移因子(TF)对人类肿瘤细胞有无直接效应?作用如何?其可能机理如何?目前尚未见到报道。我们观察了TF对人胃癌细胞RNA合成及Hras癌基因表达的影响,以期为研究TF抗肿瘤机理提供新的实验依据。     

血清抑癌活性的研究

本文研究了正常和患癌小鼠血清在体外对癌细胞及骨髓细胞的抑制作用。结果表明,无论是正常小鼠血清或患癌小鼠血清对癌细胞的DNA生物合成的抑制作用最强,对RNA生物合成的抑制较弱,而对蛋白质的生物合成的抑制最小。上述二种血清对癌细胞DNA生物合成的抑制作用较大,而对骨髓细胞DNA生物合成几无抑制作用。此外,还观察到正常小鼠血清对骨髓RNA生物合成也无明显抑制作用。由此可见,血清的这种抑制作用在代谢上以对DNA的生物合成为最显著,在细胞种类上以对癌细胞为最强烈。 Boland R.P.等报道,正常人血清对小鼠肿瘤细胞有细胞毒性作用。Nobel E.P.等也报道过正常人血清能抑制肿瘤的活性。最近Edwin V.G.等报告,正常成人血清能抑制体外培养初代乳腺癌上皮细胞,但对非恶性乳腺组织,如纤维腺瘤等,并无抑制其生长的作用。现有实验证明,正常小鼠血清及患癌小鼠血清对艾氏腹水癌细胞的DNA生物合成有显著的抑制作用。血清中这种具有抑制癌细胞生长的活性物质,除能抑制癌细胞的DNA生物合成外,在代谢上还有哪些作用?是否对癌细胞的RNA和蛋白质的生物合成也有影响?对正常细胞是否也有影响?为此,本文用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)、氚—尿嘧啶核苷(~3H-UR)及氚—亮氨酸(~3H-Leu)分别进行有关实验,以观察其对艾氏腹水癌细胞抑制的主要代谢途径,并选用小鼠骨髓细胞作为正常细胞的代表,以观察其对不同细胞是否具有相对的选择性。     

小干扰RNA沉默组织因子基因对肝癌侵袭转移能力的影响

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人类肝癌细胞内组织因子(TF)基因表达,从而探讨对其侵袭转移能力的影响。方法 本实验以人类肝癌细胞系HepG2细胞株为实验对象,将携带有针对TF小干扰RNA( siRNA)序列的质粒pGPU6/GFP/Neo-TF siRNA,转染HepG2细胞株,以适当浓度的G418筛选获得阳性克隆,通过RT-PCR和蛋白质印迹法比较转染TF siRNA(+)质粒、转染TF siRNA( -)质粒以及未转染任何质粒的HepG2细胞内源性TF在基因及蛋白质表达水平的差异,进而应用Transwell体外侵袭实验检测三者的侵袭转移能力,探讨TF对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。结果 (1) RT-PCR结果 显示,转染TF siRNA(+)质粒的HepG2细胞其内源性TF表达水平低于转染TF siRNA（-）质粒和未转染质粒的表达水平。(2)蛋白质Western印迹法结果 显示,转染TFsiRNA(+)质粒的HepG2细胞其内源性TF蛋白表达水平低于转染TF siRNA( -)质粒和未转染质粒的表达水平。(3) Transwell体外侵袭实验结果 显示,转染TF siRNA(+)质粒的HepG2穿膜细胞数[(14±10)个]少于转染TF siRNA（-）质粒的HepG2穿膜细胞数[(128±18)个],经t检验比较,两组差异有统计学意义（P＜0.05）。这提示应用RNA干扰技术抑制肿瘤细胞TF表达可以使HepG2细胞侵袭转移能力显著下降。结论 TF与肝癌细胞的侵袭转移能力密切相关,应用RNA干扰技术抑制其表达可以明显降低细胞HepG2体外侵袭转移能力。     

外源性3’,5’环腺苷酸对人肺腺癌细胞系及裸小鼠移植瘤的作用

用外源性3′,5′环腺苷酸(3′,5′cAMP)对人肺腺癌细胞系的连续作用,观察到癌细胞的增殖受到明显抑制,同时观察到在3′,5′cAMP作用下的癌细胞在裸小鼠体内移植瘤生长受到一定的抑制,但7周抑制作用基本消失。     

口腔癌组织中环核苷酸水平的观察

环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)是细胞内主要的信号分子,肿瘤细胞失去正常生长的调控功能与细胞中 cAMP,cGMP 含量变化有密切关系。口腔癌组织中环核苷酸含量的变化,国内未见报道。本研究探讨口腔癌组织中 cAMP,cGMP 含量和 cAMP/cGMP 比值的变化。     

急性白血病周围血白细胞cAMP含量变化与临床观察

环磷酸腺苷(cAMP)作为多肽类激素和某些神经介质的第二信使是众所周知的。cAMP对细胞增殖和分化的调节控制十分重要,最近已有不少评论,其中最引人注意的是肿瘤细胞失去正常生长的调控功能与肿瘤细胞中环核苷酸含量变化有密切关系。 国外对慢性白血病cAMP的研究晚近已     

合成消旋丹参素及其衍生物对血小板聚集性和cAMP含量的影响

合成消旋丹参素(简称合成丹参素)及其衍生物(BLA、BLE)在体外实验和体内静脉注射时,对ADP诱导的家兔和大鼠血小板聚集性均有明显的抑制作用。BLK和BLE有较强的促进血小板解聚作用,而合成丹参素较弱。合成丹参索、BLA和BLE在体外实验时,无升高血小板内cAMP作用,反使其cAMP含量下降。提示合成丹参素及其衍生物对血小板功能的作用,不是通过提高cAMP水平;推测可能和抑制血栓素A_2(TXA_2)合成酶有关。     

复方中药和3′,5′环腺苷酸(cAMP)对小鼠艾氏腹水癌细胞的抑制效果与癌细胞内cAMP含量及cAMP-PDE活性变化关系

本工作用复方白蛇酒及外源性cAMP对小鼠艾氏腹水癌进行比较实验,通过实验观察到该复方制剂和外源性3’,5’-cAMP对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖均有显著的抑制作用,癌细胞增殖受到抑制的同时,癌细胞内3’,5’-cAMP含量显著提高;控制cAMP水平的3’,5’-cAMP磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制。该复方之所以能提高癌细胞内cAMP水平可能是由于细胞内3’,5’-cAMP-PDE.活性受到抑制所致。本工作进一步将该复方组分的两部份(六味中草药和蟾蜍酒)与原复方白蛇洒分别进行实验比较,观察到前两组癌细胞内3’,5’-cAMP水平和3’,5’-cAMP-PDE的活性均未看到显著变化,本工作可为中医临床用药和疗效机理提供一定的理论依据。     

缺位型硅钨酸盐体外抗肿瘤活性研究

目的 用合成的缺位型硅钨酸盐Na10[α-SiW9O34]·18H2O(简称SiW9)探究其体外抗肿瘤活性.方法 通过IR光谱对其结构进行表征,并应用四甲基偶氮唑盐比色法分析SiW9对人肝癌细胞(HepG2)以及人肺癌细胞(A549)的增殖抑制活性.采用光学显微镜观察两种肿瘤细胞在不同浓度药物作用后的形态变化.结果 缺位型硅钨酸盐SiW9对两种肿瘤细胞均有增殖抑制作用,具有药物浓度依赖性,对两种肿瘤细胞的IC50值分别为(2.4±2.8)×10-4 mol/L和(1.8±3.1)×10-4 mol/L.光学显微镜下经药物作用后的肿瘤细胞出现皱缩、变圆、缩小等形态变化.结论 硅钨酸盐SiW9具有体外抗肿瘤活性,能够抑制肿瘤细胞增殖.     

cAMP磷酸酯对艾氏腹水癌细胞DNA聚合酶α活性的影响

本文研究了cAMP,cGMP及cAMP磷酸酯对艾氏腹水癌细胞中DNA聚合酶α活性的影响。实验结果说明这些化合物对无细胞体系中DNA聚合酶α无作用。反之浓度为5×10~(-7)M/ml的cAMP、cAMP-丁酯及cAMP-苄酯能抑制完整腹水癌细胞中DNA聚合酶α的活性,而cAMP-环己酰胺则无此作用,说明这些化合物是通过抑制DNA前身参入DNA而不是直接抑制DNA聚合酶催化的聚合反应。并且此抑制作用与化合物的结构有关。     

8-氯-腺苷抗肿瘤作用机制

cAMP对多种细胞的增殖和分化有重要的影响.长期以来人们寻找对癌细胞增殖和分化有作用的cAMP类似物.现有大量研究表明8-Cl-cAMP及其代谢产物8-氯腺苷(8-Cl-Ado)对肿瘤细胞有抑制作用[1～3],但它的抑癌作用机制尚不清楚.细胞周期的运行受诸如细胞周期蛋白、生长因子、癌基因蛋白等因子的调控.如一些癌基因蛋白(如P16、P21、P53等)的缺失或突变就会引起细胞的癌变.     

人脾转移因子对小鼠脾淋巴细胞内环核苷酸水平的影响

本文观察了人脾TF及其组份对小鼠脾淋巴细胞内环核苷酸水平的影响,以期为阐明TF作用机理提供实验资料。将未经分离的TF称为总转移因子(TFt),用葡聚糖凝胶G-25层析分离TFt所得的三个组份分别称为TF_(Ⅰ)、TF_(Ⅱ)和TF_(Ⅲ)。结果表明,人脾TFt及其三个组份均可改变小鼠脾淋巴细胞内环核苷酸水平,具有免疫增强作用的TFt、TF_(Ⅱ)及TF_(Ⅲ)均可显著增高淋巴细胞内cGMP水平及cGMP/cAMP比值,而对淋巴细胞转化有抑制作用的TF_(Ⅰ),则显著降低cGMP水平及cGMP/cAMP比值。这些结果提示,人TF可能通过影Ⅱ向小鼠淋巴细胞内环核苷酸水平来调节小鼠的细胞免疫反应。     

~(60)Co-γ射线对小鼠十二指肠中环核苷酸含量的影响

前报已证明小鼠~(60)Co—γ射线照射后小肠粘膜及脾DNA合成很快发生抑制,这种抑制是通过什么机制发生的呢?文献报告不一,有人报告X射线照射后大鼠脾重和DNA含量明显减少,而cAMP含量明显升高;夏寿莹等报告DNA合成减少主要是由于TdR激酶的抑制,而TdR激酶的抑制程度与cAMP浓度成正比。本文采用放射免疫方法测定组织中cAMP(环磷酸腺苷)     

中药抗肿瘤作用研究进展

本文就近几年来国内外学者对天然抗肿瘤药物的研究情况作一概述。国外报道从中药中提取的生物碱 ,如汉防己碱 ,华木防己碱 ,小檗碱等能有效地抑制肿瘤细胞的生长 ,使人白血病ＨＬ 60细胞发生凋亡[1] 。中药莪术的提取物榄香烯也能诱导ＨＬ 60细胞凋亡 ,其机制可能是影响细胞周期及有丝分裂 ,抑制肿瘤细胞增殖[2 ] 。刘德军[3] 谢冰芬[4 ] 等报道 ,茶叶中的茶多酚和儿茶素可以对多种癌细胞有直接杀伤作用 ,可以抑制致癌物如亚硝酸胺类在体合成 ,抑制致癌物如菌曲霉素Ｂ1等的致癌作用 ,并抑制癌细胞增长 ,增强机体免疫功能 ,尤其绿茶富含茶多…     

组织因子（TF）和蛋白酶激活受体（PARs）在肿瘤细胞的表达及其作用

目的探讨组织因子（tissue factor,TF）和蛋白酶激活受体（protease-activated receptors,PARs）在肿瘤细胞的表达及其作用。方法采用双抗夹心酶联免疫吸附试验、发色底物法、免疫细胞化学染色法、逆转录PCR等检测SW620、SW480、95 D、LTEP-α-2 BGC803、SGC7901、MGC803等肿瘤细胞株的TF、PAR1和PAR2表达;利用相关的激动剂、拮抗剂及单克隆抗体重点处理SW620细胞,观察TF、PAR1及PAR2对细胞增殖、迁移能力及白细胞介素8（IL-8）分泌的影响作用。结果不同肿瘤细胞株均表达TF,但表达程度有所不同;PAR1和PAR2在肿瘤细胞的表达呈现基因和蛋白水平的不一致;凝血因子Ⅶa、PAR1和PAR2的激动剂均可促进SW 620细胞的增殖、迁移和IL-8的分泌;抗TF抗体、抗PAR2抗体和PAR2拮抗剂均可明显抑制相应刺激物诱导的细胞增殖、迁移及IL-8的分泌。结论TF及PARs（主要为PAR2）在结肠癌细胞株SW620表面大量表达,增强细胞的增殖、迁移能力及IL-8的分泌。TF部分通过细胞表面PAR2影响肿瘤细胞的生物学特性。     

环一磷腺苷对小鼠U_(14)腹水型瘤细胞核、聚核糖体及微管的影响

<正> 环一磷腺苷(cAMP)是生物细胞内普遍存在的一种化学物质,有介导细胞外刺激因子,调节不同类型细胞多种物质代谢和生理功能的作用,如控制细胞生长、抑制细胞运动、增加粘附性、恢复转化细胞的形态和接触抑制等。我们报告过cAMP能抑制U_(14)移植瘤的生长,并引起U_(14)实体瘤细胞粗面内质网表面和胞质内游离的聚核糖体解体,说明cAMP能导致瘤细胞的蛋白合成减少。为了进一进研究cAMP对瘤细胞的作用及其机制,我们观察了cAMP对U_(14)腹水型瘤细胞核、聚核糖体及微管等超微结构的影响。     

新城疫病毒对体外培养人膀胱癌EJ细胞凋亡作用机制研究

目的探讨新城疫病毒(NDV)对体外肿瘤细胞的抑制作用机制。方法以人膀胱癌EJ细胞株为靶细胞,观察NDV对人膀胱癌EJ细胞的作用。结果NDV病毒能作用于体外培养膀胱癌细胞,光镜下细胞的贴壁率和生存率显著下降,电镜下可见到凋亡典型形态结构,TUNEL方法检测膀胱癌细胞有大量凋亡,新城疫病毒作用膀胱癌细胞24h凋亡细胞阳性指数(AI)为9.9%,48h凋亡细胞阳性指数(AI)为17.8%。免疫组化检测膀胱癌细胞有p53、bax、Fas、Fas-L及细胞因子TGFβ1表达增加而原癌基因bcl-2的表达降低从而诱导膀胱癌细胞凋亡。结论NDV病毒是一种有效抗肿瘤细胞的病毒,在体外具有明显的抑制肿瘤细胞作用。     

转移因子调节淋巴细胞mRNA转录生成的研究

作者进一步观察到TF对RNA合成的作用受低浓度α-Amanitin的抑制,其抑制作用发生在淋巴细胞受TF刺激的早期,由于低浓度α-Amanitin的选择性抑制mRNA的合成,因此TF可能主要促进淋巴细胞mRNA的转录过程。进一步探讨表明TF     

咖啡酸苯乙酯抗肿瘤活性的研究进展

咖啡酸苯乙酯(CAPE)是潜在的抗肿瘤活性天然产物,不仅能抑制多种肿瘤细胞的生长,还具有抗乳腺癌、胆管癌、结直肠癌、黑素瘤等癌细胞的活性。在乳腺癌中,CAPE在抑制癌细胞生长的同时对正常乳腺细胞无影响;在胆管癌中,除抗癌细胞增殖外其他器官对其有良好的耐受性。近年又在神经胶质瘤、卵巢癌、鼻咽癌等多种肿瘤细胞中对CAPE进行了分子或动物实验研究,均显示具有较强的肿瘤抑制作用。CAPE主要通过抑制核因子κB,诱导细胞周期阻滞,诱导肿瘤细胞凋亡等抑制肿瘤的生长,其通过多种信号通路实现抗癌作用。     

苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用研究进展

苦参碱和氧化苦参碱具有多方面药理活性。目前国内外关于苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究表明,二者通过抑制肿瘤细胞DNA的合成、影响肿瘤细胞的正常周期来抑制肿瘤细胞的增殖;通过影响与肿瘤细胞相关基因的表达、抑制相关酶的活性等诱导肿瘤细胞发生凋亡。因此,苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究受到了极大的关注。就近年来对苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究进行简要概述,综述其对各种癌细胞的抗肿瘤作用机制。