凝血因子Ⅷ基因内二核苷酸重复序列的云南省傣,彝和汉族 …

研究云南省傣、彝和汉族人凝血因子Ⅷ基因内含子２２（ＣＡ）ｎ二核苷酸重复序列的多态性,获取高多态信息量的分子遗传标志。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＤＮＡ序列分析技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）对该位点的基因频率及多态信息量进行调查。结果发现,傣族和彝族中至少有（ＣＡ）ｎ拷贝数为２４,２５和２６的３种等位基因片段,两民族中的频率分布分别为１．２％－５７．５％和１６．４３％－６３．００％;汉族人群中     

FⅧ基因内二苷酸重复序列在中国人群中多态性的研究与血友病甲…

应用多聚酶以应和ＤＮＡ序列分析技术对中国人群中ＦⅧ基因１３内含子二核苷酸重复序列多态性进行了研究。结果显示，中国人群中该位点存在明显的多态性，共有７种等位片段，ｎ拷贝数分别为１８，１９，２０，２１，２２，２３和２４。频率分布在０．００８－０．４９６，多态信息量为６４．６％。     

FⅧ基因内二核苷酸重复序列在中国人群中多态性的研究与血友病甲基因诊断

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和ＤＮＡ序列分析技术对中国人群中ＦⅧ基因１３内含子（ＣＡ）ｎ二核苷酸重复序列多态性进行了研究。结果显示，中国人群中该位点存在明显的多态性，共有７种等位片段，（ＣＡ）ｎ拷贝数分别为１８，１９，２０，２１，２２，２３和２４。频率分布在０．００８～０．４９６，多态信息量为６４．６％。利用该位点的多态性对１０个甲型血友病家系进行了连锁分析，其中５个家系可用该多态性区分携带者的正常和有缺陷的ＦⅧ基因，诊断率为５０％。     

云南省傣、彝、汉族人FⅧ基因BclⅠ限制性片段长度多态性研究

为确定凝血因子Ⅷ (ＦⅧ )基因ＢｃｌⅠ多态性位点在云南省人群中的多态信息量 (ＰＩＣ)及其在血友病Ａ家系携带者检测及产前诊断中的价值 ,我们应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术对云南省傣、彝、汉族人群进行了ＦⅧ基因ＢｃｌⅠ限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)分析。对象和方法1　研究对象　标本来自云南省三代纯傣族、彝族和汉族不相关正常个体各 5 0名。傣族男 2 0名 ,女 30名 ,共检测 80条Ｘ染色体 ;彝族男 2 2名 ,女 2 8名 ,共检测 78条Ｘ染色体 ;汉族男 2 2名 ,女 2 8名 ,共检测 78条Ｘ染色体。2　基因扩增　参照常规方法稍改进 ,从外…     

汉族人群载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列的遗传多态性

目的:研究汉族人群载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列多态性。方法:采用套式聚合酶链反应结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术,并构建了载脂蛋白CII(ApoCII)基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列等位基因梯阶标准,检测了231例汉族人群健康体检者基因型和等位基因频率分布。同时测定了等位基因28的序列。结果:检出36种(TG)n(AG)m序列基因型、12种等位基因。等位基因为17,18,26-35,其频率分别为0.061,0.011,0.002,0.002,0.054,0.255,0.372,0.084,0.026,0.039,0.052,0.041。检出7种(AG)m序列基因型、4种等位基因。等位基因为6,7,8,9,其频率分别为0.002,0.152,0.812,0.034。与欧洲白种人比较,ApoCII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列等位基因频率分布均具有显著的差异性(χ2=341.47,P<0.01;χ2=56.05,P<0.01)。结论:载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列具有明显的种族差异性,了解汉族人群该序列的遗传特点,是研究其与疾病相关性的基础和前提。     

凝血因子Ⅷ内含子X ba Ⅰ多态位点检测及其在血友病A产前诊断中的应用

目的建立凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22的 Xba Ⅰ多态位点高特异的基因连锁分析法,并应用于血友病 A(HA)家系中孕妇携带者检测及产前基因诊断。方法用长距离 PCR 特异性扩增206个无血缘关系个体中 FⅧ基因内含子226.2 kb 片段并进行Ⅹba Ⅰ酶切,计算Ⅹba Ⅰ多态性位点的基因频率和多态信息量;用内含子22倒位检测及 FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ,Bcl Ⅰ,Hind Ⅲ和(CA)n 二核苷酸重复序列多态性位点和 FⅧ基因外 DXS52多态性位点对20个 HA 家系进行间接基因诊断。结果ⅩbaⅠ多态性位点的基因频率和多态信息量分别是0.5475和0.4955;20个 HA 家系中,7个为内含子22倒位,13个非倒位家系中有6个家系Ⅹha Ⅰ均提供多态信息,其中2个家系只能用Ⅹba Ⅰ作出分子诊断,诊断率达46.15%;两个或两个以上连锁分析方法均提供多态信息的有8个家系。结论改进的 FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ多态位点是一个特异性高,信息量大的分子诊断标志。联合用22内含子倒位及Ⅹba Ⅰ等5种间接检测方法大大地提高了 HA 基因诊断率,是防止患儿出生,阻断致病基因传递的有效措施。     

云南省傣、彝、汉族人FⅧ基因BclⅠ限制性片段长度多态性的研究

为探讨FⅧ基因BcⅠ限制性内切酶多态性位点在云南省人群中的诊断价值,应用PCR技术及PAGE分离技术获得云南省傣、彝、汉族人群的多态信息量(polymorphic informative con-tent,PIC),其中傣族人的PIC为0.6435,明显高于汉族人的PIC 0.4190,显著高于彝族人PIC0.3641,这充分显示了FⅧBclⅠ多态现象的民族差异性及该分子遗传标志的应用价值。     

汉族人群载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列（TG）n（AG）m及（AG）m序列的遗传多态性

目的：研究汉族人群载脂蛋白CⅡ基因二核苷酸串联重复序列(TB)n(AG)m及(AG)m序列多态性。方法：采用套式聚合酶链反应结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术，并构建了载脂蛋白CII(ApoCII)基因二核苷酸串联重复序列(TB)n(Ac)m及(Ac)m序列等位基因梯阶标准，检测了231例汉族人群健康体检者基因型和等位基因频率分布。同时测定了等位基因28的序列。结果：检出36种(TG)n(AG)m序列基因型、12种等位基因。等位基因为17，18，26—35，其频率分别为O．061，O．O11，O．002，O．002．O．054，O．255，O．372，O．084，O．026，O．039，O．052，O．041。检出7种(AG)m序列基因型、4种等位基因。等位基因为6，7，8，9，其频率分别为O．002，O．152，O．812，O．034。与欧洲白种人比较，ApoCII基因二核苷酸串联重复序列(TG)n(AG)m及(AG)m序列等位基因频率分布均具有显著的差异性(χ^2=341.47，P&;lt;O．O1；χ^2=56．05，P&;lt;O．01)。结论：载脂蛋白CII基因二核苷酸串联重复序列(TB)n(AG)m及(AG)m序列具有明显的种族差异性，了解汉族人群该序列的遗传特点，是研究其与疾病相关性的基础和前提。     

凝血因子Ⅷ内含子ⅩbaⅠ多态位点检测及其在血友病A产前诊断中的应用

目的建立凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含子22的Ⅹba Ⅰ多态位点高特异的基因连锁分析法，并应用于血友病A（HA）家系中孕妇携带者检测及产前基因诊断。方法用长距离PCR特异性扩增206个无血缘关系个体中FⅧ基因内含子226．2kb片段并进行Ⅹba Ⅰ酶切，计算Ⅹba Ⅰ多态性位点的基凶频率和多态信息量；用内含子22例位检测及FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ，BclⅠ，HindⅢ和（CA）n二核苷酸重复序列多态性位点和FⅧ基因外DXS52多态性位点对20个HA家系进行间接基因诊断。结果ⅩbaⅠ多态性位点的基因频率和多态信息量分别是0．5475和0．4955；20个HA家系中，7个为内含子22倒位，13个非倒位家系中有6个家系Ⅹba Ⅰ均提供多态信息，其中2个家系只能用Ⅹba Ⅰ作出分子诊断，诊断率达46．15％；两个或两个以上连锁分析方法均提供多态信息的有8个家系。结论改进的FⅧ基因内Ⅹba Ⅰ多态位点是一个特异性高，信息量大的分子诊断标志。联合用22内含子倒位及Ⅹba Ⅰ等5种间接检测方法大大地提高了HA基因诊断率。是防止患儿出生，阻断致病基因传递的有效措施。     

EGFR第一内含子(CA)n多态与非小细胞肺癌EGFR TKIs治疗敏感性的关系

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因第一内含子(CA)n双核苷酸重复序列多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗敏感的相关性。方法用基因测序的方法检测了NSCLC患者274例肿瘤标本、13例血液标本EGFR基因第一内含子(CA)n重复多态,并随访了其中76例患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗情况,统计学分析(CA)n多态性与EGFR-TKIs治疗疗效的相关性。结果 274例NSCLC患者中共检测到12种不同的(CA)n重复多态,包含的CA重复序列数为9~23。118例(43.07%)患者为CA短重复(n≤16),156例(56.93%)为CA长重复(n16)。13例NSCLC患者血液标本,5例(38.46%)为CA短重复(n≤16),8例(61.54%)为CA长重复(n16)。携带短CA重复序列的患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗后的疾病控制率为80.56%,而在长CA重复序列的患者为50%,(CA)n多态性与近期疗效具有显著的相关性(P=0.005)。结论 EGFR基因第一内含子区(CA)n多态性可以应用于临床预测NSCLC患者EGFR酪氨酸激酶抑制剂的近期疗效。     

云南省傣、彝、汉族人FⅦ基因BclI限制性片段长度多态性的研究

为探讨FⅧ基因BclI限制性内切酶多态性住点在云南省人群中的诊断价值，应用PCR技术及PAGE分离技术获得云南省傣、彝、汉族人拜的多态信息量(polymorphic informative con-tent，PIC)，其中傣族人的PIC为O．6435．明显高于汉族人的PIC0．4190，显高于彝族人PIC0．3641，这充分显示了FⅧ BclI多态现象的民族差异性及该分子遗传标志的应用价值。     

DNA修复基因XRCC1单核苷酸多态性与SLE的相关性

目的 分析中国汉族人群SLE患者与健康对照人群中DNA修复基因X线修复交叉互补基因1(XRCC1)的单核苷酸多态性(SNP)分布,探讨其对SLE易感性的影响及与临床表现、实验室指标的关联程度。 方法 用等位基因特异性PCR(AS-PCR)检测39例中国汉族SLE患者和40例中国汉族健康人的XRCC1基因多态位点Arg194Trp、Arg280His和Arg399G1n的SNP型别。 结果 SLE组XRCC1多态位点Arg399G1n等位基因和基因型频率分布与健康人对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。XRCC1多态位点Arg194Trp与SLE患者的血液系统损害及抗SS-A抗体的存在相关(P<0.05)。 结论 XRCC1基因SNP与SLE发生及临床表现和自身抗体可能相关。     

人类低密度脂蛋白受体相关蛋白四核苷酸重复序列(TTTC)n遗传多态性的研究

目的　了解湖北地区汉族人群低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP)四核苷酸重复序列遗传多态性的分布特点。方法　采用聚合酶链反应结合变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术 ,测定了湖北地区汉族人群低密度LRP基因四核苷酸重复序列 (TTTC )n等位基因及基因型频率 ,并比较了不同种族间等位基因和基因型的频率分布。结果　检出了 2种等位基因 ,等位片断长度为 91bp、 95bp ;3种基因型 :91/ 95型、 91/ 91型、 95 / 95型 ,其中 95 / 95型国内未见报道。结论　结果表明 ,人类低密度LRP基因四核苷酸重复序列 (TTTC )n的等位基因及基因型频率 ,在不同的种族之间存在着显著性差异 (P <0 0 1)。     

凝血因子Ⅷ基因内四个短串联重复序列多态性及其在血友病A基因诊断中的应用

目的 调查中国人群凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子1、24、13和22中4个短串联重复序列(short tandern repeat,STR)的多态性,建立单管四重荧光PCR方法以用于血友病A的基因诊断.方法 采用单管四重荧光PCR扩增220名无血缘关系女性FⅧ基因内含子1、24、13和22内的STR片段,用ABI310型基因分析仪进行毛细管电泳分析片段长度,DNA测序检测二核苷酸重复数.用上述方法对96个血友病A家系进行基因诊断.结果 STR1、STR 24、STR13和STR22分别检出7、9、10和7种基因型;多态信息量(polymorphism information contents,PIC)分别为0.3789、0.4055、0.5239和0.4713;杂合度分别为34.55%(76/220)、38.18%(84/220)、49.55%(109/220)和43.64%(96/220).对96个血友病A家系进行基因诊断,STR1、STR24、STR13和STR22的单独可诊断率分别为38.54%(37/96)、38.54%(37/96)、54.17%(52/96)和42.71%(41/96),联合4个位点的可诊断率达79.17%(76/96).结论 采用单管四重荧光PCR同时检测4个STR位点,具有高效、简单快速的特点,是基因连锁分析进行血友病A基因诊断的有效方法.     

云南省傣,彝,汉族人凝血因子ⅧST14（DXS52）VNTR的研究

甲型血友病是凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因缺陷导致的一种遗传性出血性疾病。近年来已发现大量甲型血友病的基因缺陷。我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，分析了云南省傣、彝、汉族人ＳＴ１４（ＤＸＳ５２）可变数目串联重复序列（ＶＮＴＲ）的多态性特点，现报道如下。对象...     

泛素特异性蛋白酶24基因多态性与广东汉族人群散发性帕金森病的关系

目的探讨泛素特异性蛋白酶24(USP24)基因多态性与广东汉族人群散发性帕金森病(PD)的相关性。方法 2006年8月至2014年1月,采用SNa Pshot技术对200例广东汉族人群散发性PD患者(病例组)和200名健康者(对照组)USP24基因内含子区多态性位点rs12138592和rs6671533进行基因型检测。结果病例组rs12138592位点的等位基因和基因型频率分布与对照组有非常显著性差异(P0.01),rs6671533位点等位基因和基因型频率分布与对照组无显著性差异(P0.05)。结论 USP24基因内含子区多态性位点rs12138592与广东汉族人群散发性PD易感性相关,A等位基因可能是PD发病的保护因素。     

MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性研究

目的：探讨中国上海地区汉族人群MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与其冠心病易感性的关系。方法：对300例冠心病患者（冠心病组）及100名健康体检者（健康对照组）的MEF2A基因第11外显子进行PCR扩增DNA直接测序，以检测CAG重复序列多态性，并结合临床资料进行分析。结果：2组均存在杂合性CAG重复序列，CAG重复序列数为4～11。将短CAG重复序列数（n=4～7）定义为等位基因S;长CAG重复数（n=8～11）定义为等位基因L。健康对照组中等位基因S及基因型SL频率均高于冠心病组，差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论：MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性相关，等位基因L可能是中国上海地区汉族人群的冠心病易患因素。     

辽宁汉族人群NFKB1基因启动子区域-94 ins/del ATTG多态性研究

目的探讨辽宁汉族人群NFKB1基因启动子区域-94 insertion/deletion(-94 ins/del ATTG)多态性分布。方法用PCR-毛细管电泳方法,检测205名正常无关个体的NFKB1基因启动子区域-94 ins/del ATTG多态性,并将该结果与已报道的其他人群中该位点多态性分布进行比较。结果辽宁汉族人群NFKB1基因启动子区域-94位点del纯合子、del杂合子以及ins纯合子的基因型频率分别为19.5%、45.9%和34.6%,del和ins等位基因频率分别为42.4%和57.6%。中国辽宁汉族人群该位点基因型的频率分布与中国河北汉族、中国台湾地区和瑞典人群差异有统计学意义(P0.05),等位基因的频率分布与中国台湾和西班牙人群有显著性差异(P0.05)。结论NFKB1基因启动子区域-94 ins/del ATTG多态性分布存在地区和种族差异。     

昆明汉族急性脑梗死患者vWF基因多态性研究

目的阐明vWF基因19内含子MspI多态性在昆明地区人群中的分布;探讨vWF基因19内含子MspI多态性与急性缺血性脑梗死的关系。方法收集119例急性缺血性脑梗死患者(脑梗死组)和117名昆明地区健康人(对照组),应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析vWF基因19内含子MspI多态性。结果昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子M+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分别为0.034、0.470和0.496;M+和M-等位基因频率分别为0.269和0.731。脑梗死组中M+/M+、M+/M-和M-/M-基因型频率分别为0.059、0.286和0.655,M+等位基因和M-等位基因频率分别为0.202和0.798,其M+/M-基因型频率低于对照组,M-/M-基因型频率高于对照组。2组基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论昆明地区汉族人群中vWF基因19内含子MspⅠ酶切位点各基因型的分布与文献报道中的高加索人群差异较大,与中国地区其他民族人群也不尽相同。急性脑梗死的发生可能与vWF基因19内含子MspI多态性有关。     

河南地区遗传性脊髓小脑共济失调3型患者临床特征及分子生物学的研究

目的 探讨河南地区汉族人群中遗传性脊髓小脑共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)患者临床表现与分子生物学的特征.方法 应用聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳和基因测序等技术,检测临床诊断脊髓小脑型共济失调(spinocerebellar ataxia type,SCA)的9个家系55例患者SCA3基因内CAG三核苷酸重复序列,并对异常等位基因片段进行DNA测序.结果 检出2个家系(10例患者)为SCA3,阳性率17.1%,测序证实其异常等位基因的CAG重复数目在70～79次之间,平均重复数(74.2±3.8)次.测序发现SCA3基因在重复起始序列的第3、4、6拷贝位置出现变异,CAG分别由CAA、AAG和CAA替代.SCA3基因中在重复起始序列的第3、4、6拷贝位置出现变异,CAG分别由CAA、AAG和CAA替代.结论 CAG重复数检测是确定患者基因突变的重要证据;CAG重复序列的异常扩增是SCA3患者基因突变的重要原因.