根癌农杆菌介导β—1，4—半乳糖苷转移酶基因转化大豆及其转基因植株再生

以大豆下胚轴为外植体,通过根癌农杆菌介导转化法,建立起良好的转化系统,将人的β-1,4－半乳糖苷转移酶基因（hGT)导入大豆。经转化的外植体在添加100mg/L氨苄青霉素和50mg/L卡那霉素的选择培养基中可诱导出愈伤组织和芽再生,在1／2MS培养基上诱导生根,并培养成再生苗,获得了完整的抗性再生植株。进行Southern blot分子杂交鉴定,证实了外源基因hGT已稳定地整合到植物基因组中。     

细辛组织培养技术研究

目的研究细辛组织培养技术,优化细辛组织培养体系。方法以野生细辛越冬芽为外植体,在不同激素浓度配比的培养基上进行初代培养、不定芽增殖及生根培养,并进行生根苗的移栽。结果细辛组织培养过程中适宜的培养基为：（1）初代培养基,MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1rag／L;（2）不定芽增殖培养基．MS＋6-BA1．5rag／L＋NAA0．2mg／L;（3）生根培养基,1／2MS＋IBA1．0mg／L。结论优化的培养体系适宜细辛的组织培养,可在短期内获得大量优质种苗。     

用组织培养方法繁殖龙胆草

本文报道了由龙胆草萌发芽再生植株的培养条件。实验结果表明:龙胆草不定芽和苗增殖及生长的适宜培养基是MS,附加玉米素0.5毫克/升,蔗糖浓度为3—5％。0.2％二甲基亚砜可加快试管苗的生长。1/2MS培养基附加吲哚丁酸2毫克/升、激动素0.5毫克/升,可诱导生根。关于试管苗移栽成活率和成本问题,有待进一步研究。     

白术的试管繁殖

本文报告白术无菌苗段和单节茎段诱导植株再生的培养条件。试验了培养基种类、不同植物激素浓度与配比,以及培养基基质,对不定芽形成、不定苗生长和根的产生的影响。该研究为白术优良品种的快速繁殖提供了新的途径。     

莫邪菊的离体培养研究初报

目的 为建立莫邪菊的离体培养体系.方法 以成熟果实中的种子为外植体,探讨不同生长调节剂对离体培养中愈伤组织诱导、不定芽的分化和试管苗生根的影响.结果 培养基配方为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA0.2 mg/L时,种子破壳萌发率为70%,胚轴处愈伤组织诱导率为100%;MS+6-BA 2.0 mg/L为合适的丛生芽诱导和增殖培养基配方;培养基为MS0时生根率为95%,生根效果好且配方简单,移栽的试管苗成活率可达95%.结论 该试验建立的离体培养体系可用于莫邪菊的离体培养.     

三七试管苗繁殖技术的研究

以三七4种外植体为材料,研究愈伤组织的诱导、植株的分化、壮苗及生根的情况,探讨获得高分化率的试管苗再生途径,结果表明以MS为基本培养基,选用幼嫩花序为外植体,愈伤组织诱导率及试管苗分化率高;在加入2,4—D的诱导培养基暗条件下可直接诱导出胚状体;愈伤组织在光下分化培养也可发生不定芽;通过胚状体发生途径分化成苗率高。成苗过程中,GA_2与MET分别起到促进胚状体成熟与生根作用。1989年初首次获得试管苗,现共获得植株2 214株,为建立三七试管苗工厂生产研究打下基础。     

荆半夏组织培养及快速繁殖的研究

目的建立荆半夏快速繁殖体系,为抢救性开发荆半夏野生资源提供有力手段。方法用MS+6BA2.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1培养基诱导及分化培养;用MS+6BA0.2mg·L-1+IBA1.0mg·L-1培养基作生根培养。结果诱导培养2周后形成大量愈伤组织,继代培养3周后分化出大量丛生芽。生根培养2周后形成完整植株。结论通过组培快繁荆半夏的繁殖系数由自然栽培时的每年1~2倍提高到每月15倍左右。     

基于植物生长调节剂萘乙酸和6-苄氨基嘌呤组合的红花组织培养体系的优化

目的:建立高效的红花(Carthmus tinctorius L.)离体组织培养体系,为红花的基因操作搭建平台.方法:以萌发6～8d的红花无菌苗子叶为外植体,选用MS基础培养基,应用萘乙酸(1-naphthylacetic acid,NAA)+6-苄氨基嘌呤(6-benzyl amino purine,6-BA)+激动素(kinetin,KT)为组织培养的植物生长调节剂,优化红花的组织培养体系.结果:红花组织培养的最佳植物生长调节剂配方为:NAA 2.0 mg/L+6-BA 4.0 mg/L+KT 20.0 mg/L,添加活性炭(4 g/L)或硝酸银(5 mg/L),光照时间为16 h/d,光照强度9000 lx,培养温度为(25±2)C,平均愈伤组织发生率高达86.4％,而且再生芽生长稳定,重现性高.结论:本研究优化建立了红花的不定芽再生体系,为红花基因操作平台的建立奠定了基础.     

人表皮生长因子在转基因番茄中成功表达

目的以转基因番茄生产人表皮生长因子(hEGF)。方法构建hEGF基因的表达载体pCAM-35S-hEGF,通过电激法转化到农杆菌菌株C58中,采用叶盘法转化番茄品系cg2002-14。结果子叶经发芽及生根诱导培养后得到了再生植株。PCR分析表明,hEGF基因已整合到番茄的基因组中。放射免疫法(RIA)测得hEGF在果实中平均含量为3.78ng·g-1。结论成功构建了hEGF基因的表达载体,获得了表达hEGF的转基因番茄植株。     

高山红景天的组织培养与快速繁殖

分别以高山红景天的幼茎和幼叶作为外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比对高山红景天愈伤组织的诱导、继代、生根的影响,以建立其快速繁殖体系.结果表明,幼茎是最佳的外植体,愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率达83.3％;不定芽诱导和增殖的最佳培养基为MS +6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率和增殖率较高,达72％,且产生的不定芽数量较多,为3～4个;生根培养基以MS+IAA 0.5mg/L为最好,生根率100％,而且幼苗长势旺盛,能够满足高山红景天工厂化快速繁殖的要求.     

粗毛牛膝带腋芽茎段的植株再生研究

目的:研究粗毛牛膝带腋芽茎段植株的再生。方法:以粗毛牛膝带腋芽茎段为外植体诱导腋芽生长,继代诱导生根成完整小植株,考察基本培养基、萘乙酸(NAA)和6-苄基嘌呤(6-BA)浓度3个因素对茎段和腋芽生长的影响。结果:基本培养基MS、6-BA浓度对腋芽的生长有显著影响,最佳的培养基组合为MS+0.1mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA;而在1/2MS+0.5mg·L-1NAA培养基上100%生根。结论:该培养基组合可使粗毛牛膝腋芽诱导生根能力强,且幼根生长健壮,值得推广。     

微生物法测定血清中丁胺卡那霉素的浓度

测定血药浓度的方法有许多种，但仪器法都要经提取分离和采取一些特殊试剂在专门的仪器上测定、微生物法虽选择性和专届性较差但灵敏度则较高，测得的药物浓度能反映临床用药的实际情况，便于基层开展工作。1．实验用品：枯草芽胞杆菌（63501厦门药检所），丁胶卡那霉素标准品（中国药品生物制品检定所），琼脂培养基（PH7．8～8．0）自配。2．操作步对：2．1培养基（PH78～8．0）的制备及保存；2．2菌种的保存及枯草芽胞杆菌混悬液的制备；2．3菌碟制备；将培养基适量加热融化后．冷至60℃左右，在无首条件下加入细菌是液适量（100ml培养…     

黄芩无菌材料的建立及快繁技术的优化

建立和优化黄芩组织培养技术,为工厂化生产提供有效的技术手段。通过一系列筛选实验,确定建立黄芩无菌材料的最佳方法,黄芩快速繁殖的最佳培养基。结果表明,建立黄芩无菌材料的最佳方法是取试验田里的黄芩主芽或侧芽,用升汞杀菌5 min,无菌水冲洗4~5次,接种在MS+NAA 0.4(mg/L)+IAA 0.2(mg/L)的培养基上,成为无菌试管苗。黄芩试管苗在MS+6-BA 0.3(mg/L)+PP3330.5(mg/L)快繁培养基上,芽多,叶绿并且较壮。在1/2MS+NAA 0.2(mg/L)+IAA(0.1 mg/L)生根培养基中,生根率高,达到90%。     

当归Angelica sinesis(Oliv.)Diels组织培养的研究

本文报道了用当归离体根颈即根端的芽和叶柄切段诱导愈伤组织的适宜培养基及激素与温度对器官分化的效应。通过愈伤组织的细胞学观察,判断植株再生方式为胚状体和不定芽(苗)。还应用薄层层析、纸层析法,初步鉴定证明所获得的培养物具有合成与栽培当归根同样成分的挥发油和碳水化合物的能力,进一步证明了一些学者提出的“植物的离体细胞在人工培养下,具有药物生物合成的全能性”。     

当归Angelica sinesis(Oliv.)Diels组织培养的研究

本文报道了用当归离体根颈即根端的芽和叶柄切段诱导愈伤组织的适宜培养基及激素与温度对器官分化的效应。通过愈伤组织的细胞学观察,判断植株再生方式为胚状体和不定芽(苗)。还应用薄层层析、纸层析法,初步鉴定证明所获得的培养物具有合成与栽培当归根同样成分的挥发油和碳水化合物的能力,进一步证明了一些学者提出的“植物的离体细胞在人工培养下,具有药物生物合成的全能性”。     

怀地黄分生组织培养脱病毒及快速繁殖技术的研究

采用茎尖分生组织培养技术,获得了怀地黄的脱病毒试管苗.通过基本培养基和激素配比试验,筛选出最佳的培养基组成,用于脱病毒苗的快速繁殖.建立了怀地黄根尖染色体鉴定的最佳条件.结果表明:诱导丛生芽的最适培养基为:MS 6-卞基腺嘌呤(6-BA)0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)0.1 mg/L 6-糠氨基嘌呤(KT)0.05 mg/L,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求.诱导试管苗生根的最适培养基为:1/2MS 吲哚乙酸(IAA)0.05 mg/L.用电子显微镜进行了反复的病毒检测,证明脱病毒彻底,脱毒试管苗将作为今后提供无病毒优质种苗的种源.染色体鉴定结果表明:怀地黄的染色体为2n=2X=56     

海南广藿香试管内芽分化与愈伤组织诱导研究

目的选择海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基。方法利用海南广藿香的叶柄、茎尖和带节茎段进行组织培养芽分化试验,并对上述材料进行愈伤组织诱导培养基选择试验。结果在芽分化培养基中,MS＋3-吲哚丁酸（IBA）1．0mg／L＋6-苄基腺嘌呤（6-BA）0．6mg／L培养基能够较好地诱导茎尖和带节茎端长出新芽,诱导率分别为94．3％和94．6％;在愈伤组织诱导培养基中,MS＋萘乙酸（NAA）0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L培养基能较好地诱导海南广藿香叶柄和带节茎段产生愈伤组织,诱导率分别为80．0％和100％。结论海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基分别为Ms＋IBA1．0mg／L＋6-BA0．6mg／L和Ms＋NAA0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L。     

林荫银莲花不定芽增殖培养基的优化

为提高林荫银莲花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)不定芽繁殖系数,对其组培快繁体系进行优化。以林荫银莲花无菌苗为外植体,研究了培养基中激素、碳源、添加物和矿质元素钙等组分对其不定芽增殖和生长状况的影响,得出最佳的不定芽增殖培养基配方。以1/2 Ca浓度MS为固体培养基,激素为1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA,蔗糖或食用白糖30 g/L,水解酪蛋白为添加物,浓度为750 mg/L,培养30 d后繁殖系数可达4.01,大幅提高了不定芽的增殖速度和质量,为工厂化生产林荫银莲花种苗奠定了基础。     

过量表达铁蛋白基因的转基因烟草抗Co2＋能力分析

目的：将烟草铁蛋白基因NtFer1的完整cDNA序列克隆到植物表达载体pBI121中,利用农杆菌（Agrobactri-um tumefaciens）介导的叶盘法将NtFer1导入烟草（Nicotiana tobacum L.）基因组。对卡那抗性植株进行PCR-Southern检测,并将进一步经Northern杂交证明NtFer1基因表达量增加的转基因株系进行抗Co2＋分析。结果表明,NtFer1的过量表达提高了转基因植株的抗Co2＋能力。在含150μmol·L-1Co2＋的MS培养基上,转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系;在生理性状上表现为叶绿素含量、POD活性和SOD活性比非转基因株系明显增加,转基因植株MDA含量明显低于非转基因株系。结果表明,NtFer1大量表达能够增强转基因株系抗氧化能力,提高植物抗Co2＋能力。     

地丁草组织培养及无性系建立的研究

目的:为满足人们栽培对种苗的需要,并保护野生资源.方法:以地丁革不同外植体为材料,进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽生根和试管苗生根继代培养研究,建立起地丁革的无性系.结果:MS+ NH4H2PO420 mg·L-1+BA0.2 mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+ NAA 0.8～1.0mg·L-1是愈伤组织继代扩...