免疫性血小板输注无效患者的人类白细胞抗原/人类血小板抗原抗体分布特征及其对交叉配型效果的影响

目的 分析影响免疫性血小板输注无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)患者人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)抗体和人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)抗体产生的因素,HLA和HPA抗体的分布特征、特异性...     

血小板输注无效患者的血小板抗体检测

目的 分析临床血小板输注无效的主要原因,并寻找解决的方法.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA),对213例临床发生血小板输注无效(PTR)的病人进行血小板抗体检测和鉴定.结果 血小板抗体阳性71例(33.33%),其中人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)抗体阳性65例(30.51%);血小板特异性抗原即人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)抗体阳性2例(0.94%);HLA和HPA抗体并存4例(1.88%).结论 HLA抗体是导致PTR的主要免疫因素.对患者进行"适合性血小板榆注",可逆转血小板榆注无效状态,提高血小板输注的安全性和疗效.     

血小板特异性抗体及HLA抗体引起血小板输注无效的研究

目的分析血小板输注无效(PTR)患者血小板同种抗体,并对其HPA及HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型,探讨血小板输注无效与血小板同种抗原/HLA-Ⅰ类抗原相关性。方法应用ELISA方法对17例血小板输注无效患者血清中的血小板抗体进行检测;运用PCR-SSP方法,采用HPA分型试剂盒检测血小板同种抗原7个抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、15,以及HLA分型试剂盒对HLA-A/B抗原进行基因分型。结果6名患者单独表达HLA抗体,4名患者表达血小板特异性糖蛋白抗体,3例HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同表达,其中以GPⅡb/Ⅲa为主。对17例患者HPA系统和HLA-Ⅰ类抗原基因分型,发现HPA-3系统中a的基因频率高达0.676,b为0.324;HLA-A*02、HLA-A*24、HLA-A*11和HLA-B*60、HLA-B*13、HLA-B*46多见。结论HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体表达引起血小板输注无效,了解PTR与HPA/HLA-Ⅰ类抗原的相关性对指导临床血小板配合性输注具有重要意义。     

血小板抗体检测及交叉配型结果分析

目的 通过对血小板抗体检测样本的血小板抗体发生率、患者群体反应性抗体（panel reactive antibody,PRA）水平和血小板交叉配型结果进行分析,为血小板输注提供最佳解决方案。方法 选取2016年1月至2020年12月北京市红十字血液中心进行血小板抗体筛查的患者2 254例,采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）进行血小板抗体筛查,对HLA抗体、人类血小板抗原（human platelet antigen, HPA）抗体和HLA+HPA抗体结果为阳性的样本再采用固相凝集法进行血小板交叉配型。统计其中血小板交叉配型率<20%的样本进行PRA水平检测,分析PRA水平分布情况。结果 2 254例血小板抗体筛查显示,血小板抗体阳性1 257例（55.8%）,其中单一HLA抗体阳性最多,为1 070例（85.1%）,其次是HLA+HPA抗体双阳性107例,单一HPA抗体阳性68例,非特异性抗体12例。对血小板抗体阳性患者血小板交叉配型率<20%的178例样本进行PRA水平分析,发现PRA水平> 76...     

血小板抗体检测及交叉配血结果分析

目的了解血小板抗体检测及交叉配血对血小板在临床输注的意义。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞仪检测技术,对该院98例血小板输注无效(PTR)患者进行血小板抗体检测和鉴定,然后进行血小板交叉配合性输注。结果抗体阳性35例,占检测总数35.7%(35/98),其中人类白细胞抗原(HLA)抗体阳性31例,占检测总数31.6%(31/98),人类血小板特异性抗原(HPA)抗体1例,占检测总数1.0%(1/98),HLA和HPA抗体共存3例,占检测总数3.1%(3/98)。含HLA免疫性抗体者交叉配血需要筛选献血员人数5～10名,含HPA抗体者交叉配血需筛选的献血员人数100名以上,而含HPA和HLA共存抗体者交叉配血需筛选的献血员人数最多达200名以上。结论血小板单一HLA抗体阳性的患者寻找供血员较含HPA抗体容易,单一HPA抗体及HPA和HLA混合抗体配血较难。血小板抗体是PTR的重要因素,为了避免PTR应进行血小板抗体检测和交叉配合性输注。     

维吾尔族血小板抗原1～5、15系统基因多态性分析

目的：调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原（human platelet antigen，HPA）1～5及15系统基因在维吾尔族人群中的遗传多态性；分析民族差异，确定各系统临床意义，从而建立已知基因型血小板供者库。方法：采用聚合酶链一序列特异性引物技术（PCR—SSP）对153例无血缘关系的纯维吾尔族血样进行了HPA基因分型。结果：维吾尔族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0．9118、0．8889、0．5458、0．9935、0．9216、0．4412，维吾尔族HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0．0882、0．1111、0．4542、0．0065、0．0784、0．5588，维吾尔族HPA基因频率与汉族人群相比，HPA-1a，1b、3a、3b、5a、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈0．05）；与西藏藏族人群相比，HPA-3a、3b、5b基因频率差异具有统计学意义（P〈O．05）。结论：维吾尔族人群中HPA1～5、15系统12个等位基因都可以检测到。在不同的个体中它们以纯合子或杂合子状态表达，但未检测到纯合子1b或纯合子4b型个体。HPA-1、2、3、4、5、15系统均具有多态性，其中HPA-3、15系统具有高度多态性，这使免疫暴露的机会增加。维吾尔族人群与汉族人群的HPA-1a、1b、3a、3b、5a、5b基因频率存在明显差异，与藏族人群的HPA-3a、3b、5b基因频率存在明显差异。     

广州汉族配偶人类血小板抗原基因分型的调查

目的调查配偶之间人类血小板抗原(HPA)的不配合率并评估其在新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)中的作用。方法采用SSP法对200对广州汉族配偶进行了HPA-1～-16基因分型。结果配偶双方HPA-1～-6及HPA-15均在同一HPA位点具有不同基因型,HPA-7～-14及HPA-16均为a/a纯合子。得到HPA-1～-16的等位基因频率,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6、HPA-5、HPA-1和HPA-4的不配合率为别为37.42%、37.02%、8.02%、3.84%、2.44%、0.75%和0.24%,其余HPA位点的不配合率为0。结论 HPA-5可能是广州汉族人群NAIT最重要的一个HPA系统,HPA-15、HPA-3、HPA-2、HPA-6和HPA-4也分别具有其免疫学意义,这为HPA的抗体检测以及NAIT的诊断治疗提供了实验依据。     

新疆柯尔克孜族人群血小板抗原1～6、15系统基因多态性分析

目的 探讨新疆柯尔克孜族人群人类血小板抗原HPA1-6,15(Gov)系统多态性,分析HPA基因在柯尔克孜族人群中的遗传多态性.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法105例无血缘关系的新疆柯尔克孜族血样进行HPA基因分型.结果 新疆柯尔克孜族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a基因频率分别是0.900 0、0.923 8、0.576 2、1、0.952 4、1、0.566 7;HPA-1b、2b、3b、4b、5b、6b、15b基因频率分别是0.100 0、0.076 2、0.423 8、0、0.047 6、0、0.433 3,新疆柯尔克孜族HPA基因频率与新疆汉族相比,HPA-1a、1b、2a、2b、15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).与新疆维吾尔族相比,HPA-15a、15b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05).结论 新疆柯尔克孜族人群中HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,其中HPA-3,15系统具有高度多态性,这使免疫暴露的机会增加.     

珠海市机采血小板捐献者血小板特异性抗原遗传多态性的初步调查

目的：了解珠海市机采血小板捐献者血小板特异性抗原（HPA）遗传多态性,以研究HPA同种免疫在进行随机血小板输注中的意义。方法：应用PCR—SSP方法对48名机采血小板捐献者的HPA1～5和15进行基因分型。结果：48名机采血小板捐献者HPA等位基因频率分别是：HPA—1a、-4a、-5a皆为1．000,HPA-1b、-4b、-5b皆为0．000,HPA-2a为0．9895,HPA一2b为0．0104,HPA-3a为0．6562,HPA-3b为0．3438,HPA-15a为0．5313,HPA-15b为0．4687。结论：中国人HPA-1a、2a-4a、-5a的基因频率很高,血小板随机输注时同种免疫概率较低,但同种免疫一旦发生,配合性输注的供者很少;而HPA-3和15却具有较高的遗传多态性,血小板随机输注时,HPA-3和15的错配概率为0．35和0．37,因此HPA基因分型在血小板配型和配合性输注中具有重要意义。     

血小板输注无效患者血小板抗体的检测

目的:观察引起血小板输注无效患者血浆中血小板抗体分类及其比率.方法:多次输血或(和)血小板输注无效100例,采用富血小板血浆,经多次离心洗涤,用试剂盒ELISA方法检测.结果:PTR患者血小板抗体阳性率仅为16%,免疫性因素引起的PTR主要是HLA抗体.结论:PTR多数由非免疫性原因所致,免疫性原因所致主要是HLA抗体.     

血小板抗原谱细胞的建立在血小板同种抗体检测及鉴定中的应用

目的：建立血小板抗原谱细胞并应用于血小板同种抗体检测及鉴定。方法采用 PCR-SSP方法对南宁地区1500名无偿献血员做HPA 1-16基因分型,根据结果挑选O型血小板建立一组血小板抗原谱细胞,并用第14届ISBT血小板免疫学研讨会参比血清验证该组血小板抗原谱细胞的表型。后应用于临床血小板同种抗体检测及第14～15届 ISBT血小板免疫学研讨会样本检测。结果挑选了6个表型与基因型一致、覆盖 HPA 1-5和15系统的血小板建成血小板抗原谱细胞并成功应用于临床、科研样本检测及鉴定工作。结论成功建立血小板抗原谱细胞,为血小板同种免疫异常性疾病的诊断和研究提供了实验依据。     

Antibodies against human platelet alloantigens and human leucocyte antigen class 1 in Saudi Arabian multiparous women and multi-transfused patients

Objectives:

To determine the frequency of alloimmunization against human platelet antigens (HPAs) and human leucocyte antigen class 1 (HLA1) in multiparous women and multi-transfused patients.

Methods:

This prospective study was conducted between January and August 2013, on 50 multiparous women with no history of previous blood transfusion recruited from the Obstetrics and Gynecology Clinic, and 50 patients, who received multiple platelet transfusions, recruited from the Hematology/Oncology Ward, King Khalid University Hospital, Riyadh, Saudi Arabia.

Results:

The frequency of alloimmunization among multiparous pregnant women was 76%, as follows: 16% against HLA1 only, 8% against HPAs only, 52% against both HPAs and HLA1 antigens. In multi-transfused patients, the rate of alloimmunization was 42% as follows: 2% against HLA1 only, 22% against HPAs only, 18% against both HPAs and HLA1 antigens. The frequency of alloimmunization increases with the number of pregnancies, but not with the number of platelet transfusions.

Conclusion:

Alloimmunization against HPAs and HLA1 is very common among Saudi multiparous women and multi-transfused patients, which encourages the search for the extent of the possible complications in the fetus and newborn and in multitransfused patients and how to prevent their occurrence.Alloimmunization against human platelet antigens (HPAs) and human leucocyte antigens class 1 (HLA1) results in the development of platelet reactive antibodies, which occur mostly in multi-transfused patients,1 and as a result of pregnancy.2 Detection of these antibodies and recognizing their specificities will help in safeguarding effective transfusion therapy as well as the prediction of the severity of thrombocytopenia, feto-maternal allo-immune thrombocytopenia (FMAIT), and its management. Another problem associated with these antibodies is passive alloimmune thrombocytopenia in recipients of blood collected from female blood donors immunized as a result of previous pregnancies.3 The detection of these antibodies in such recipients may also falsely indicate the production of platelet specific antibodies.4 In hemato-oncology patients receiving multiple transfusions, the production of these antiplatelet antibodies will result in shortening the survival of donated platelets and render the patient refractory to platelet transfusions.5,6 Information on these areas is lacking in our population and, in view of the genetic variations that exist within and between ethnic groups and the current practice of random selection and transfusion of platelet products, it is of interest to find out the extent of alloimmunization to these antigens. Therefore, the main aim of this study is to determine the frequency of antibodies to HPAs and HLA1 in multiparous women and multi-transfused patients from Saudi Arabia.     

人类血小板抗原-1系统基因分型方法的建立及初步应用

目的建立人类血小板抗原-1系统的基因分型方法,并对本地区献血小板者进行血小板抗原-1基因分型。方法以人类基因组DNA为模板,设计特异性引物,扩增目的基因,用琼脂糖凝胶电泳观察;同时将PCR产物纯化后进行测序,将其结果进行同源性比较;再用已建立的方法对本地区的献血小板者进行人类血小板抗原-1基因分型。结果成功建立了人类血小板抗原-1基因分型方法;本地区的HPA-1a、HPA-1b基因频率分别为97.7%、2.3%。结论构建的人类血小板抗原系统-1基因分型方法结果准确,操作简单,为建立血小板血型库奠定基础。     

人血小板T细胞活化抗原PTA1基因探针的制备及初步鉴定

制备地高辛标记的ＰＴＡ１基因探针，以用于ＰＴＡ１表达及功能的研究。方法根据新克隆的人ＰＴＡ１基因序列，设计针对ＰＴＡ１分子不同结构域的引物，通过ＰＣＲ扩增，地高辛标记的方法制备基因探针。结果；细胞原位杂交方法证实这种探针具有较高的敏感性的和特异性。     

孕期血小板抗原抗体检测的研究进展

大量研究发现妊娠与血小板抗体的产生有着密切的关系,孕妇孕期可能由于同种免疫性因素或自身免疫性因素产生抗血小板抗体,这些抗体可以通过胎盘屏障进入胎儿血液循环,与胎儿血小板结合发生抗原抗体反应,导致胎儿出现一系列血小板减少性出血性疾病,最终使孕妇出现早期流产、复发性流产或新生儿出现免疫性血小板减少症。新生儿同种免疫性血小板减少症是由于同种免疫性因素引发的新生儿出血性疾病,该病在高加索人群中的发病率约为0.1%,在日本人群中的发病率约为0.15%,但在我国目前尚没有这方面的统计数据,该病发病较急,可出现全身皮肤和脏器的广泛出血,严重者会出现颅内出血甚至死亡。因此孕期进行血小板抗原抗体检测有着重要的意义,它能够有效地探讨反复流产的病因、早期预测及预防新生儿同种免疫性血小板减少症的发生。目前血小板抗原抗体的检测技术主要包括血清学和分子生物学检测技术,国内外也相继出现了一系列更为先进的检测技术。本文从血小板抗原抗体的分类、血小板抗体的产生及致病机制、最新的血小板抗原抗体检测方法以及新生儿同种免疫性血小板减少症研究状况等多方面阐述了最新的研究进展,以便引起临床医生及孕妇的重视,为血小板抗原抗体检测在孕妇日常产检中的推广提供重要的参考依据。      

低收入家庭学龄前儿童的超重与甜饮料消费间的关系

目的：观察学龄前儿童的超重与甜饮料消费间的关系。方法：采用回顾性研究观察学龄前儿童的超重与甜饮料消费的关系。于1999年1月至2001年12月对10904名2～3岁儿童进行随访，收集其身高、体重、哈佛食物频率问卷的数据，并在1年后再收集身高和体重的数据。甜饮料包括含维生素C的果汁、其他果汁、果汁饮料及哈佛食物频率问卷中所列的苏打水。logistic回归分析用于对年龄、性别、种族、出生体重、高脂饮食和甜食的摄入、总卡路里等进行校正，结果按体重指数（BMI）基线进行分层。     

血小板抗原基因分型在随机血小板输注中的意义

目的对海南岛黎族人群血小板-1-6、15抗原系统进行基因分型,探讨血小板抗原分布与随机血小板输注的关系以及血小板抗原分布与疾病的相关性。为黎族人群临床血小板输注提供实验依据。方法采用PCR—SSP方法对180名黎族人进行HPA-1—6、15抗原进行基因分型。结果本研究揭示了海南岛黎族人HPA-1～6、15抗原基因频率分布概况,证实黎族人HPA-2、-3、-5、-6、-15系统具有多态性。结论研究结果提示黎族人在随机血小板输注中,供受者HPA-3系统不配合的机会为37．49％,HPA-15系统不配合的机会为36．93％,是随机血小板输注的关注重点。HPA-5系统不配合的机会为6．23％,HPA-2、-6系统不配合的机会只有0．56％。而HPA-1、-4抗原未检出相应HPA—b基因。同种免疫发生的危险性会非常低。