肿节风对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响

目的:探讨中药肿节风溶液对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响.方法 采用细胞培养的方法,用不同浓度的肿节风溶液作用于DU-145细胞48h,用MTT法检测肿节风溶液对DU-145细胞增殖的影响,用RT-PCR检测用药后细胞PI3K、Akt、mTOR和P70(S6K)的基因表达情况.结果:肿节风溶液作用48h后,DU-145细胞增殖受到抑制,并表现为量效关系;DU-145细胞的PI3K、Akt、mTOR和P70(S6K)的表达均呈不同程度的抑制,但不表现为量效关系.结论:肿节风溶液能抑制人前列腺癌DU-145细胞增殖,其抑制细胞增殖的机制与其抑制了细胞的PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的作用有关.     

信号通路在肝细胞癌发展中的作用

目的 探讨EGFR信号通路、MAPK信号通路、IKB/NF-κB信号通路、PI3K/Akt信号通路、WNT/β-catenin信号通路和Hedgehog信号通路在肝细胞癌发展中的作用。方法 采用文献复习的方法,对信号通路在肝细胞癌发展中作用的相关文献进行综述。结果 在肝癌的发生发展过程中,EGFR、MAPK、IKB/NF-κB、PI3K/Akt、WNT/β-catenin、Hedgehog等信号通路之间复杂交织和相互作用,并且可能存在一些肿瘤标志物、抑癌基因、原癌基因和miRNA的协同作用。结论 分子信号通路的异常改变是肿瘤发生及发展的必要条件,并且信号通路在肝细胞癌发病中有着复杂的交叉和冗余。     

大黄素对胆管癌QBC939细胞生长及磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路表达的影响

目的 观察大黄素在体外对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用及其对磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的影响.方法 用大黄素作为干预因素,时间效应组以含大黄素的培养液分别培养QBC939细胞不同时间,剂量效应组分别用不同浓度大黄素的培养液与QBC939细胞共培养;检测细胞增殖,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中B淋巴细胞/白血病-2 (bcl-2) mRNA表达,Western blot检测细胞中bcl-2、Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、核因子(NF)-κB、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)、mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白质的表达.结果 10、20、40、80 μmol/L大黄素对QBC939细胞增殖抑制率分别为17.3％、28.6％、46.5％和66.4％ (P ＜0.05),bcl-2、p-Akt、NF-κB、p-NF-κB、mTOR、p-mTOR表达明显下降,Akt表达无变化.结论 大黄素抑制QBC939细胞增殖,可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号转导途径.     

米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡过程中PKB/Akt激酶的调控作用

目的 观察米非司酮在体外诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制以及Akt激酶在前列腺癌生长过程中的作用.方法 采用Western blot方法检测不同前列腺癌细胞株癌细胞以及米非司酮作用后PC-3细胞中Akt蛋白磷酸化后蛋白含量,以及相关蛋白的表达量.结果 前列腺癌PC-3细胞中Akt磷酸化后蛋白即[p-Akt(Thr308)和p-Akt(Ser473)]的含量明显高于激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞中的蛋白表达量,其表达量分别为0.27±0.05和0.22±0.07;0.46±0.09和0.37±0.10(P＜0.05).10 μmol/L米非司酮作用于PC-3细胞后p-Akt(Th308邶)和p-Akt(Ser473)磷酸化蛋白的含量均明显下降,但其中p-Akt(Thr308)蛋白表达量变化尤为显著,4～24h4个时间组蛋白含量分别为0.24±0.08、0.11±0.03、0.05±0.01和0.01±0.00;其蛋白表达量下降速度较p-Akt(Ser473)快且显著,p-Akt(Ser473)磷酸化蛋白4～24 h 4个时间组蛋白含量分别为0.56±0.17、0.42±0.11、0.28±0.09和0.12 ±0.05.米非司酮作用于PC-3细胞后使Caspase-9、Caspase-3被激活裂解出有活性的激活片段.结论 Akt激酶在前列腺癌生长、发展以及激素依赖性向激素非依赖性的转变过程中起着重要作用.p-Akt(Thr308)蛋白磷酸化水平在Akt磷酸化激活过程中占主导地位,是Akt激活的必要过程.米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其可能是通过抑制Akt信号转导通路,从而激活Caspase.     

蛋白磷酸酶2A抑制剂通过核因子-KB通路诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡

目的 探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)抑制剂斑蝥素和冈田酸通过激活核因子-κB(NF-κB)通路诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的作用机制.方法 PP2A抑制剂处理胰腺癌细胞后,噻唑蓝(MTr)检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡水平,Western blot检测NF-κB通路的激活水平.结果 PP2A抑制剂显著抑制胰腺癌细胞活力,呈剂量和时间依赖性,并可诱导细胞凋亡;PP2A抑制剂激活NF-κB通路的上游激酶IKKα,导致IκBα磷酸化并降解,并释放p65入核,从而激活NF-κB通路;阻断NF-κB通路,可削弱PP2A抑制剂的细胞毒性作用.结论 PP2A抑制剂通过NF-κB通路依赖性机制诱导胰腺癌细胞凋亡,有望用于胰腺癌治疗.     

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路在甲状腺癌中的研究进展

目的 了解磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路在甲状腺癌中的研究现状以及在甲状腺癌的发生、细胞分化、侵袭和转移中的作用，以寻找甲状腺癌治疗的潜在靶点。方法 检索关于PI3K/AKT信号通路在甲状腺癌中研究的相关文献并进行分析及总结。结果 PI3K/AKT信号通路在甲状腺癌中直接或间接地被异常活化，导致细胞凋亡受抑制、恶性增殖、周期进展加速、侵袭、转移等，从而促进甲状腺癌的发生及发展；同时也有一些抑癌基因、微小RNA、长链非编码RNA等间接抑制PI3K/AKT信号通路的激活或直接作用于PI3K/AKT信号通路并抑制其活性，从而抑制甲状腺癌的发生和发展。结论 在甲状腺癌中，有不少蛋白、基因、微小RNA和长链非编码RNA通过不同的靶点直接或间接地激活PI3K/AKT信号通路，促进甲状腺癌的发生与发展；同时也有许多靶点抑制PI3K/AKT信号通路的激活，从而抑制甲状腺癌的恶性增殖、侵袭与转移。目前已有研究者尝试将PI3K/AKT信号通路作为治疗甲状腺癌的切入点，深入探究PI3K...     

牛蒡甙元在人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞生长与凋亡中的影响

目的人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(RAFLS)已被证实在类风湿性关节炎发生和发展过程中具有至关重要的作用。本实验目的在于研究牛蒡甙元对RAFLS增殖和凋亡的影响。方法 RAFLS经过牛蒡甙元处理后,通过噻唑蓝和膜联蛋白V/碘化丙啶分析细胞的活性和凋亡,用免疫印迹分析检测细胞凋亡相关基因的变化情况。结果 RAFLS在经过10、20、30μM牛蒡甙(RAFLS)已被证实在类风湿性关节炎发生和发展过程中具有至关重要的作用。本实验元处理后细胞活性分别降低了23%、30%、38%,半数抑制浓度为38μM;同时诱导细胞凋亡分别为9%、15%、21%,凋亡原因为线粒体膜电位减低,细胞色素C释放至胞质,促凋亡蛋白Bax上调,以及抗凋亡蛋白Bcl-2下调。在经过牛蒡甙元处理的RAFLS中,线粒体通路的激活诱导了胱解酶9、胱解酶3和ADP核糖聚合酶(PARP)的分解。此外,牛蒡甙元还能抑制P65的核转位、减少IκBα的降解、降低Akt的磷酸化。结论研究结果显示,牛蒡甙元在RAFLS中通过调节NF-κB和Akt信号通路,能够抑制细胞增殖,并诱导线粒体凋亡。     

γ-氨基丁酸B型受体对结肠癌HCT116细胞周期的影响

目的利用人结肠癌细胞株HCT116细胞为研究模型,探究γ-氨基丁酸B型受体（GABABR）/糖原合成激酶3β（GSK-3β）/核转录因子（NF-κB）信号通路对结肠肿瘤细胞HCT116周期的影响,明确GABABR调控结肠癌细胞增殖的机制。 方法使用人结肠癌细胞株HCT116细胞为模型,构建针对GABABR的shRNA,流式细胞仪检测不同刺激条件下HCT116细胞周期分布,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）法检测细胞的增殖能力变化。 结果GABABR可调控HCT116细胞的增殖。GABABR激动剂巴氯芬将HCT116细胞滞留在G1期,GSK-3β激动剂wort能逆转巴氯芬对结肠癌的该作用;GSK-3β抑制剂SB216763处理后,HCT116细胞增殖得到抑制,而NF-κB激动剂PMA可以阻断此作用;NF-κB激动剂PDTC能够回救敲低GABABR所引起的HCT116细胞增殖抑制,Akt抑制剂MK-2206 2HCl能逆转巴氯芬、SB216763对HCT116细胞增殖的抑制作用。 结论GABABR/GSK-3β/NF-κB信号通路可以调控结肠癌细胞增殖,通过抑制GSK-3β的活性,抑制NF-κB信号通路的激活,将HCT116细胞滞留在G1期。GABABR/GSK-3β/NF-κB信号通路可以作为临床预防和治疗结肠癌的潜在药物靶点之一。     

异硫氰酸苯己酯对前列腺癌PC3细胞组蛋白乙酰化及Akt信号转导通路的影响

目的 研究异硫氰酸苯己酯(PHI)对前列腺癌PC3细胞株组蛋白乙酰化及Akt信号转导通路的影响,阐述其诱导细胞凋亡机制. 方法 采用TUNEL法检测PHI对PC3细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法观察PC3细胞组蛋白H3、H4乙酰化水平及Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K表达的变化. 结果 PHI 0、10、20、40 μmol/L作用7 h后,PC3细胞凋亡率分别为(1.55±0.78)%、(14.30±4.32)%、(49.45±5.63)%、(76.35±6.21)%,呈浓度依赖性(P＜0.05).与对照组比较,PHI 10、20、40 μmol/L处理3 h后,H3乙酰化水平分别增加1.22、2.13、3.46倍,7 h后分别增加2.30、3.53、7.64倍;不同浓度PHI处理3 h后,H4乙酰化分别增加1.09、1.45、2.02倍,7 h后分别增加2.52、2.87、3.50倍.Akt、mTOR、p70S6K表达无变化,p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K表达均下降.结论 PHI可使PC3细胞株组蛋白H3、H4乙酰化表达增加,且可通过去磷酸化抑制Akt信号转导通路,从而参与了PHI抑制PC3细胞的增殖、诱导凋亡的过程.     

PI3K/AKT/FOXO1信号通路参与复方中药CFF-1诱导的前列腺癌细胞凋亡和周期阻滞

目的:研究复方中药CFF-1诱导前列腺癌细胞的凋亡作用及其相关分子机制的探讨。方法:通过形态学观察、噻唑蓝(MTT)比色实验、CCK-8实验测定前列腺癌细胞的存活能力;采用DAPI染色法测定细胞核凝缩破裂;运用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定前列腺癌细胞的凋亡率。再通过PI单染流式细胞术测定前列腺癌细胞的周期变化;以及采用蛋白质免疫印迹实验检测PI3K/AKT/FOXO1信号通路以及其下游凋亡相关蛋白和周期相关蛋白的表达。结果:复方中药CFF-1使前列腺癌细胞周期阻滞在G1期,并呈浓度依赖性降低细胞的存活能力、增加细胞核凝缩破裂以及核小体的形成,显著提高前列腺癌细胞的凋亡率。在分子机制上,CFF-1呈现浓度依赖性下调PI3K/AKT活性,降低FOXO1磷酸化水平,进而上调FOXO1的转录活性,最终影响凋亡相关基因和周期相关基因的表达。结论:CFF-1对前列腺癌细胞的生长有显著的抑制作用,并且通过PI3K/AKT/FOXO1信号通路诱导前列腺癌细胞周期阻滞并发生凋亡,对治疗前列腺癌具有潜在的临床应用价值。     

PI3K/Akt信号传导通路与雄激素非依赖性前列腺癌关系的进展

近年来研究表明,雄激素依赖性前列腺癌转化成雄激素非依赖性前列腺癌过程中,PI3K/Akt信号传导通路发挥了重要作用。活化AKt有促进细胞增殖及抗细胞凋亡的作用。雄激素非依赖性前列腺癌目前没有有效的药物治疗,随着PI3K/AKt信号通路和雄激素非依赖性前列腺癌发生、发展的研究不断深入,PI3K/Akt信号通路研究对诊断、预防和治疗雄激素非依赖性前列腺癌及有效药物的开发应用具有十分重要价值。     

姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌抑制效应及其机制

目的 检测姜黄素在体外对雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3)生物学行为的影响,并探讨其机制.方法 分别采用CFSE染色、Annexin V-PI染色和PI染色法,使用流式细胞仪分析姜黄素对PC-3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响.然后采用荧光素酶报告基因系统检测姜黄素在体外对核因子-κB(NF-κB)、激活蛋白-1(AP-1)和p53三个信号通路的影响.结果 50μmol/L的姜黄素作用后,PC-3细胞的增殖指数从7.08±0.20降到4.38±0.19(P＜0.05);凋亡率从(5.34±0.96)%提高到(21.53±2.87)%(P＜0.05);G2/M期细胞比例由(34.27±1.87)%上升到(57.29±1.91)%(P＜0.05).荧光素酶活性检测结果显示,姜黄素能在体外抑制NF-κB和AP-1信号通路活性(P＜0.05).结论 姜黄素能在体外显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡并导致细胞周期的阻滞.姜黄素可能通过抑制NF-κB和AP-1信号通路发挥抑癌效应.     

重组人促红细胞生成素在体外抑制H2O2诱导的骨髓间充质干细胞凋亡

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对H2O2诱导的人骨髓间充质干细胞(MSC)凋亡的影响及其机制.方法 体外培养MSC,培养至第6代,分为5组.rhEPO+ Ly294002组、rhEPO+U0126组和rhEPO+ anisomycin组分别使用Ly294002、U0126和anisomycin处理后,换用含rhEPO的培养基培养;rhEPO组始终用含rhEPO的培养基培养;对照组使用普通培养基培养.一部分MSC在培养1h后,用H2O2处理,然后在显微镜下观察细胞形态,用流式细胞术检测细胞凋亡情况;一部分MSC继续用含rhEPO的完全培养基培养,用蛋白质印迹法检测各组rhEPO作用前后MSC中细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)及磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路蛋白的表达情况.结果 rhEPO可使MSC的PI3K/Akt通路磷酸化水平升高,抑制p38MAPK通路磷酸化水平,但对MSC的ERK通路和总Akt、总p38MAPK水平无明显影响.rhEPO组中凋亡细胞所占百分率低于对照组(P＜0.01),rhEPO+ anisomycin组凋亡细胞所占百分率也低于对照组(P＜0.01);但rhEPO+ Ly294002组凋亡细胞所占百分率高于rhEPO组(P＜0.01).结论 rhEPO可激活人骨髓间充质干细胞的PI3K/Akt通路,并抑制p38MAPK通路,具有抑制H2O2诱导的人骨髓间充质干细胞凋亡作用.PI3K/Akt通路的激活参与了其抗凋亡作用的调控.     

BMS-345541通过抑制IκB激酶/核因子-κB信号通路诱导人脑胶质瘤细胞凋亡

目的 观察IκB激酶(IKK)高度选择性抑制剂BMS-345541对胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制.方法 不同浓度BMS-345541作用于人脑胶质瘤细胞株U87MG后,采用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,荧光素酶核因子-κB(NF-κB)报告基因法检测NF-κB活性,免疫印迹法检测bcl-2、Caspase-3和NF-κB胞核定位.结果 终质量浓度1、10、20 μmol/L BMS-345541作用U87MG细胞24 h后,细胞凋亡率分别为(18.2±2.2)%、(49.3±3.6)%、(73.3±8.9)%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).BMS-345541处理U87MG细胞后,bcl-2蛋白表达减少、Caspase-3被激活;NF-κB转录启动子的活性下降(66.2±5.1)%(P＜0.01),NF-κB p65亚单位核移位被抑制.结论 BMS-345541可通过抑制IKK/NF-κB信号通路诱导人胶质瘤细胞凋亡.     

三氧化二砷诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡P_(38)信号通路的研究

目的:探讨P38信号通路在三氧化二砷(As2O3)诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡中的作用。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0.312 5、0.625、1.25、2.5、5、10、20μmol/L)As2O3作用PC-3细胞24、48、72 h后的细胞生长抑制情况。Western印迹检测As2O3作用PC-3细胞后P38信号转导通路的表达。Annexin V/PI双染色法检测As2O3作用PC-3细胞后细胞凋亡,同时检测应用P38通路高选择抑制剂SB203580干扰P38信号通路后As2O3诱导PC-3细胞凋亡的变化。结果:As2O3诱导PC-3细胞凋亡呈现时间、剂量依赖性。As2O3可以使P38信号通路蛋白快速磷酸化,激活P38信号通路。2、10、20μmol/L As2O3作用PC-3细胞24 h后,PC-3细胞凋亡率分别为(18.9±0.43)%、(24.7±0.29)%和(49.7±1.79)%。应用P38信号通路高选择抑制剂SB203580干扰P38信号通路后,PC-3细胞凋亡率分别降低为(14.8±0.81)%、(22.1±0.51)%和(39.6±1.74)%,抑制P38信号通路可以显著降低As2O3诱导PC-3细胞的凋亡(P<0.05)。结论:P38信号通路在As2O3诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡中有表达,干扰P38信号通路可影响As2O3诱导PC-3细胞凋亡,提示P38信号通路参与了As2O3诱导的PC-3细胞凋亡。     

TSP-1-CD_(47)激活氧化应激与肾脏损伤

正氧化应激是指机体接触各种有害刺激时,体内产生大量的高活性分子,即活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)[1]。大量产生的ROS通过脂质过氧化、损伤DNA和破坏蛋白质等诱发细胞凋亡发生,激活炎症因子、核因子-κB(NF-κB)、TGF-β1等细胞因子和PI3K/Akt、p38、MAPK等信号通路共同损伤肾小球、肾小管间质和血管组织,导致肾小球滤过率增加,     

PI3K/Akt途径在前列腺癌中的治疗前景

磷脂酰肌醇-3羟基激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路是肿瘤、炎症等发生发展过程中一条重要的信号通路。研究发现,在许多肿瘤组织中,PI3K/Akt信号通路的活化和过度表达与肿瘤的发生发展密切相关。在前列腺癌中,这种途径的激活似乎是许多侵袭性前列腺癌的特征。该途径的生物标志物将其与疾病进展风险相关联。本文回顾了PI3K/Akt途径的共同靶向方法的基本原理和相关性,以期通过更好地了解前列腺癌中PI3K/Akt途径的生物学特征,相关生物标志物和联合治疗来优化该靶向途径,从而改善侵袭性前列腺癌患者的结局。     

胰岛素样生长因子1对结肠癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-I)通过磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI-3K/Akt)信号通路对结肠癌细胞株SW480凋亡率的影响及凋亡抑制蛋白survivin表达水平的变化。方法在培养结肠癌SW480细胞株时,采用不同浓度的IGF-I不同时间作用于SW480细胞,然后采用Western blot检测凋亡抑制蛋白survivin表达变化。100 ng/mL IGF-I作用于SW480细胞2 h内,Westernblot检测Akt的磷酸化表达变化;Akt特异性抑制剂LY294002处理前后,利用Western blot检测Akt磷酸化表达的变化,Western blot及细胞免疫荧光检测survivin表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果IGF-I能上调SW480细胞的survivin表达,且其表达水平与IGF-I的作用时间、浓度呈依赖性(IGF-I作用SW480细胞不同时间后,survivin蛋白表达显著升高,并在12 h时达到峰值,所有实验组survivin蛋白的表达均显著高于对照组;IGF-I浓度为100 ng/mL时,survivin蛋白的表达达到顶峰);IGF-I快速激活SW480细胞中PI-3K/Akt信号通路(IGF-I作用SW480细胞15,30 min后,p-Akt蛋白的表达达到高峰);IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路上调SW480细胞survivin的表达;IGF-I能通过PI-3K/Akt信号通路抑制SW480细胞凋亡[利用流式细胞术检测空白组、刺激组、阻断组各组SW480细胞的凋亡率,分别为(5.18±0.415)%,(0.85±0.052)%,(3.15±0.411)%,各组之间差异有统计学意义(P0.05)]。结论IGF-I可通过PI-3K/Akt通路诱导survivin表达,从而抑制结肠癌细胞SW480的凋亡。     

肿瘤相关巨噬细胞通过PI3K/Akt途径促进胰腺癌浸润迁移的研究

目的研究PI3K/Akt信号通路对胰腺癌细胞PANC-1浸润迁移能力的影响,进一步探讨肿瘤相关巨噬细胞促进胰腺癌发生发展的分子机制。 方法通过密度梯度离心法从健康成人外周血中分离单个核细胞,用IL-4体外诱导选择性激活的巨噬细胞(M2)。采用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测胰腺癌PANC-1细胞PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平的变化,利用Transwell侵袭实验与划痕实验观察细胞浸润迁移能力的变化。 结果体外模拟胰腺癌微环境,将胰腺癌PANC-1细胞与不同激活状态的巨噬细胞共培养,证明M2可显著上调胰腺癌PANC-1细胞PI3K、Akt的mRNA和蛋白水平,共培养20 h后可明显促进胰腺癌PANC-1细胞的浸润与迁移能力。 结论肿瘤相关巨噬细胞可通过PI3K/Akt信号通路促进胰腺癌细胞的浸润与迁移。     

金雀异黄素通过抑制NF-κB信号通路延缓甲状旁腺素诱导的肾间质纤维化

目的 探讨金雀异黄素（Gen）对甲状旁腺素（PTH）引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子（CTGF）的调控作用。 方法 应用实时定量PCR、Western印迹、报告基因等技术,观察Gen对PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF表达的影响。采用凝胶迁移实验（EMSA）技术检测PTH刺激HK-2细胞后NF-κB的DNA结合能力;使用信号通路抑制剂阻断信号通路以明确Gen发挥作用的机制。 结果 HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白表达,PTH刺激后其表达量显著增加（均P ＜ 0.05）,Gen能下调PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达。10-10 mol/L PTH作用12 h后,荧光素酶活性较对照组显著升高（1.89±0.08比0.99±0.03,P ＜ 0.01）。正常情况下,胞核内NF-κB处于无活性状态,PTH刺激HK-2细胞后NF-κB的DNA结合能力明显增强,10-10 mol/L PTH作用30 min时NF-κB活性达到高峰。NF-κB通路抑制剂PDTC预处理HK-2细胞后,PTH诱导细胞CTGF表达较PTH组明显下降（P ＜ 0.01）。Gen抑制PTH所致的HK-2细胞NF-κB活化。 结论 Gen通过阻断NF-κB信号通路抑制PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达从而延缓肾间质纤维化。