rhIFNγ对人胚胎胰岛分泌IL-6及对胰岛分泌功能的影响

目的探讨重组人γ干扰素（ｒｈＩＦＮγ）对人胚胎胰岛分泌白细胞介素６（ＩＬ６）以及对胰岛分泌功能的影响，为ＩＦＮγ和ＩＬ６在１型糖尿病中的可能作用提供依据。方法采用胶原酶Ｖ型消化方法分离人胚胎胰岛，并对其进行原代培养，加入不同浓度的ｒｈＩＦＮγ培养４８小时收获上清，进行ＩＬ６、胰岛素、胰升血糖素活性检测和ＩＬ６单抗中和试验，对ｒｈＩＦＮγ刺激和对照组胰岛ＲＮＡ进行ＩＬ６ＲＮＡ斑点杂交。结果（１）ｒｈＩＦＮγ刺激后胰岛培养上清ＩＬ６含量显著升高，当ｒｈＩＦＮγ浓度在１００ｕ／ｍｌ时ＩＬ６含量最高；（２）ＩＬ６单抗对ｒｈＩＦＮγ刺激的胰岛培养上清中ＩＬ６有很强的中和效应；（３）斑点杂交结果显示ｒｈＩＦＮγ刺激的胰岛ＲＮＡ中ＩＬ６ｍＲＮＡ含量高于对照组；（４）人胚胎胰岛受ｒｈＩＦＮγ刺激后培养上清胰岛素降低不明显；（５）人胚胎胰岛受ｒｈＩＦＮγ刺激后培养上清胰升血糖素分泌能力明显升高，分泌趋势与ＩＬ６相似。结论ｒｈＩＦＮγ可以促进胰岛分泌ＩＬ６，而ＩＬ６的过度分泌可以加重１型糖尿病的进程。     

病毒性肝炎患者血清白细胞介素-4、12及干扰素-γ水平的观察

主要组织相容性复合体(ＭＨＣ)Ⅱ类抗原限制性的辅助性(Ｔｈ)细胞根据其分泌细胞因子的功能不同,可分为Ｔｈ1和Ｔｈ2。Ｔｈ1以分泌干扰素γ(ＩＦＮγ)为主并介导细胞免疫,而Ｔｈ2以分泌白细胞介素4(ＩＬ4)等为主并介导体液免疫。检测ＩＦＮγ和ＩＬ4水平可大体了解Ｔｈ1/Ｔｈ2功能。白细胞介素12(ＩＬ12)主要由抗原提呈细胞中的树突状细胞(ＤＣ)产生,它能增强Ｔｈ1分泌ＩＦＮγ的功能,因而具有抗病毒作用[1,2]。为研究这三种细胞因子在病毒性肝炎中的变化及其意义,我们检测不同临床类型病毒性肝炎患者血清ＩＬ12、ＩＦＮγ、ＩＬ4水平,并对…     

白细胞介素12和慢性病毒性肝炎治疗

新近研究表明,Ｔ辅助细胞(Ｔｈ)并不是一个均质的群体。根据功能及分泌细胞因子的不同可分为Ｔｈ1和Ｔｈ2亚群。Ｔｈ1细胞产生γ干扰素(ＩＦＮγ)、白细胞介素(ＩＬ)2,促进细胞免疫反应和某些具有免疫调理作用的ＩｇＧ亚类抗体的产生;Ｔｈ2细胞产生ＩＬ4、ＩＬ5和ＩＬ10,增强Ｉ     

炎性细胞因子刺激对人胚胎胰岛分泌功能的影响

目的 研究炎性细胞因子刺激对人胚胎胰岛分泌功能的影响。方法 采用常规消化法分离人胚胎胰岛并进行原代培养,分别加入ｒｈＴＮＦα,ｒｈＩＬ－１β,ｒｈＩＦＮγ或同时加入２种和３种细胞因子,培养２４和４８小时取其上清测定胰岛素,胰升糖素含量。结果 ３种细胞因子单独或联合应用均可不同程度地抑制胰岛素的分泌,联合应用对抑制胰岛素分泌有协同作用;对胰升糖素的分泌则有明显的促进作用,但联合应用的作用因胰岛培养时     

酰基化Ghrelin在体外拮抗巨噬细胞介导的炎症反应对胰岛β细胞功能影响的研究

目的 采用Transwell小室构建的小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7共培养系统,探讨酰基化Ghrelin能否保护胰岛β细胞免遭巨噬细胞介导的炎症损伤. 方法 实验分为单独RAW264.7巨噬细胞组、单独MIN6胰岛细胞组、共培养组和Ghrelin干预组.RT-PCR和Western blot 检测巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β、TNF-α的浓度,以及葡萄糖刺激后MIN6细胞上清液的胰岛素浓度. 结果 (1)共培养系统中,巨噬细胞TLR4[mRNA及蛋白水平分别为(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±o.01)]的表达],细胞上清液IL-1β[(10.47±1.11) pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09) pg/ml]蛋白水平较单独RAW264.7巨噬细胞组高(P＜0.05);(2)高糖刺激下,共培养系统中胰岛β细胞的胰岛素分泌水平较单独MIN6胰岛细胞组低(P＜0.05);(3)与共培养组比较,酰基化Ghrelin干预后共培养,巨噬细胞TLR4表达水平和TNF-α均降低(P＜0.05),且呈剂量依赖性,但胰岛β细胞的胰岛素分泌水平与共培养组比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,炎症通路活化,炎症因子释放,胰岛β细胞的胰岛素分泌功能受损;酰基化Ghrelin可剂量依赖性削弱巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,但不能完全阻止胰岛β细胞胰岛素分泌功能的降低.     

氨基胍对白细胞介素－1β所致胰岛损伤的保护作用

白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对胰岛β细胞具有细胞毒效应。本实验采用离体培养的新生大鼠胰岛，观察ＩＬ－１β对胰岛素分泌、ＤＮＡ合成和一氧化氮（ＮＯ）生成的影响及氨基胍对胰岛功能的保护作用。结果：①ＩＬ－１β（１０、２０、４０Ｕ／ｍｌ）孵育胰岛２４小时后，可抑制急性高浓度葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛３Ｈ－ＴｄＲ掺入量，具有明显的剂量依赖性，且其抑制程度与亚硝酸盐的生成量密切相关。②氨基胍（０．１、０．２、０．４ｍｍｏｌ／Ｌ）抑制亚硝酸盐的生成，同时减轻或完全阻断ＩＬ－１β对胰岛素分泌和３Ｈ－ＴｄＲ掺入的影响，呈剂量依赖性。实验结果表明：ＩＬ－１β对胰岛β细胞的细胞毒效应由ＮＯ介导，氨基胍通过抑制ＮＯ的合成阻断了ＩＬ－１β的胰岛损伤效应。     

1型糖尿病胰β细胞破坏的机制

Ｔ淋巴细胞是１型糖尿病发生时胰岛的主要细胞,可直接或间接地杀伤β细胞。由Ｔ淋巴细胞、巨噬细胞等分泌产生的Ⅰ型因子（ＩＦＮγ,ＩＬ－２,ＴＮＦβ）和炎症前因子（ＩＬ－１α,ＬＩ－１β,ＴＮＦα等）对胰岛β细胞有破坏作用。也有证据表明氮氧自由基可作为细胞因子诱发β细胞破坏的中介者。     

环磷酸腺苷对大鼠胰岛素分泌作用及机制的研究

目的研究环磷酸腺苷(cAMP)在大鼠胰岛素分泌中发挥的作用及机制,为研究促胰岛素分泌药物提供理论依据。方法雄性SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化,使用Histopaque 1077梯度离心后,分离纯化取得胰岛。用胰岛素分泌实验来验证胰岛活性与功能,并且通过cAMP检测实验、膜片钳技术记录电压依赖性钾通道(KV)电流,研究c AMP促进大鼠胰岛素分泌的作用机制。结果经过分离纯化得到的胰岛在2.8 mmol/L、8.3 mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖情况下胰岛素分泌的标化值分别为(1.00±0.38)μIU/m L、(2.33±0.52)μIU/m L、(5.55±0.12)μIU/m L。在8.3 mmol/L葡萄糖作用的基础上,Forskolin进一步促进了cAMP的生成,胰岛素的分泌,抑制了KV电流,在同样条件下,SQ22536对cAMP的生成、胰岛素分泌、KV电流均没有影响,但是相同条件下,应用Forskolin+SQ22536,则可以减少Forskolin促进cAMP生成的作用、削弱了Forskolin对KV电流的抑制作用。结论采用胶原酶P消化法及Histopaque 1077分离液离心分得的胰岛活性、功能良好。在胰岛β细胞内,cAMP合成增加可促进胰岛素分泌,其机制与抑制KV电流相关。     

胰腺衍生因子的研究进展

胰腺衍生因子(pancreatic derived factor,PANDER)是2002年新发现的细胞因子,主要表达于胰腺β细胞和α细胞.在β细胞内,PANDER与胰岛素共同定位于胰岛素分泌颗粒中.葡萄糖、转录因子及细胞因子可调节PANDER mRNA的表达,葡萄糖及胰岛素促分泌剂可促进PANDER的分泌.PANDE...     

一氧化氮介导的细胞因子对大鼠胰岛素分泌的影响

目的观察白细胞介素１β（ＩＬ１β）、白细胞介素６（ＩＬ６）对胰岛细胞一氧化氮（ＮＯ）生成、胰岛素分泌的影响。方法在体外单层培养的大鼠胰岛细胞上，分别应用分光光度法、放免双抗体法检测ＩＬ１β、ＩＬ６及其联合对胰岛细胞ＮＯ生成、胰岛素分泌的影响，并进一步观察一氧化氮合酶抑制剂ＮＧ单甲基Ｌ精氨酸（ＬＮＭＭＡ）的作用。结果ＩＬ１β能诱导大鼠胰岛细胞ＮＯ的生成，同时显著抑制胰岛素基础分泌及葡萄糖刺激的胰岛素释放。ＬＮＭＭＡ能阻断这些作用（Ｐ值均＜０．００１）。ＩＬ６不能诱导胰岛细胞的ＮＯ生成（Ｐ值＞０．０５），对胰岛素分泌有促进作用，但对葡萄糖刺激的胰岛素释放有明显的抑制作用（Ｐ值＜０．００１）。ＩＬ６与ＩＬ１β联合作用时，不能影响ＩＬ１β对胰岛素释放的抑制作用及其诱导的ＮＯ生成（Ｐ值均＞０．０５）。结论ＩＬ１诱导的胰岛细胞损害可能由ＮＯ介导。ＩＬ６诱导胰岛细胞功能改变的作用方式与ＩＬ１β不同，可能与其不能诱导ＮＯ生成有关。