红景天苷靶向VEGF/HIF-1α信号通路调控缺氧介导的大鼠肺动脉高压

目的 观察红景天苷对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠的干预效果,并初步探讨其可能机制.方法 选取90只Wistar大鼠并将其随机分为对照组、模型组、红景天苷干预组,每组30只.将模型组和红景天苷干预组大鼠放于低压低氧舱,建立HPH大鼠模型,同时分别给予腹腔注射生理盐水、红景天苷;将对照组大鼠置于常压常氧环境饲养,未给予任何干预.4周后检测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数,并检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的mRNA和蛋白表达水平.结果 模型组大鼠的RVSP、右心室肥厚指数、mPAP均高于对照组,而红景天苷干预组大鼠以上指标均较模型组下降(均P<0.05).与对照组相比,模型组大鼠肺组织VEGF、HIF-1αmRNA和蛋白的相对表达水平均升高(均P<0.05);与模型组相比,红景天苷干预组大鼠肺组织VEGF mRNA和蛋白、HIF-1α 蛋白的相对表达水平均降低(均P<0.05).结论 红景天苷可能通过下调VEGF和HIF-1α 的表达,从而干预HPH的发展.     

肝硬化门静脉高压模型犬舌下络脉形态和舌下组织血管内皮生长因子及低氧诱导因子1α的表达

目的：观察肝硬化门静脉高压犬舌下络脉变化及舌下组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α）的表达情况。 方法：将12只Beagle犬随机分为正常组和模型组。用二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine,DMN）诱导肝硬化门静脉高压,观察Beagle犬舌下络脉形态、颜色;生物电记录系统测定其门静脉压力;免疫组织化学EnVision法检测犬舌下组织VEGF及HIF-1α蛋白的表达。 结果：模型组Beagle犬舌下血管形态学和颜色较正常组有明显改变。免疫组织化学结果显示,正常对照组犬舌下血管VEGF、HIF-1α几乎无表达;模型组犬舌下组织VEGF、HIF-1α蛋白表达显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。 结论：门静脉压力变化可能是肝硬化门静脉高压模型犬异常舌下络脉形成的一个重要因素,舌下血管VEGF和HIF-1α蛋白表达增加可能参与了这一过程。     

大株红景天注射液对大鼠脑缺血再灌注后血管内皮损伤的影响

目的观察大株红景天注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮损伤的影响,并探讨其作用机制。方法 Sprague Dawley大鼠80只,其中24只未造模型大鼠作为对照组;另56只大鼠采用线栓阻塞大脑中动脉法建立脑缺血再灌注损伤模型,术后选择其中造模成功的48只大鼠随机分为模型组和观察组,每组24只。观察组大鼠经尾静脉注射大株红景天注射液2 m L·kg~(-1),每日1次;对照组及模型组大鼠经尾静脉注射等量生理盐水。14 d后断头处死各组大鼠,每组取8只大鼠采用酶联免疫吸附试验检测脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、受体胎肝激酶-1(FLK-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白,另取8只大鼠采用反转录聚合酶链反应测定其脑组织VEGF mRNA、FLK-1mRNA、HIF-1αmRNA表达,余下8只大鼠采用氯化三苯基四氮唑染色法测定脑缺血梗死区比例。结果对照组、模型组、观察组大鼠全脑质量比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组大鼠脑组织无缺血梗死;模型组、观察组大鼠的脑缺血梗死区质量及梗死比例均显著高于对照组(P<0.05);观察组大鼠脑缺血梗死区质量及梗死比例均显著低于模型组(P<0.05)。模型组和观察组大鼠脑组织VEGF、FLK-1、HIF-1α蛋白及其m RNA表达与对照组比较均显著增高(P<0.05);观察组大鼠脑组织VEGF、FLK-1、HIF-1α蛋白及其m RNA表达与模型组比较均显著增高(P<0.05)。结论大株红景天注射液可以升高大鼠缺血脑组织VEGF、FLK-1、HIF-1α蛋白及其m RNA表达,有助于诱导缺血部位血管内皮分化与再生,促进脑缺血区动脉侧支循环重建,维持成熟血管的完整性,增加脑组织供血,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

腺病毒介导的HIF-1α基因在急性心梗后缺血区心肌的表达和意义

目的研究腺病毒介导的低氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其下游基因血管内皮生长因子（VEGF）在急性心肌梗死（AMI）后的缺血心肌不同时间点的表达，为I临床应用HIF-1α转基因治疗心肌缺血提供实验依据。方法建立兔AMI模型（120只），随机分为4组（每组30只），分别于心肌内注入腺病毒介导的HIF-1α基因（Ad-HIF-1α）、不含HIF-1α基因腺病毒颗粒（Ad-Blank）、HIF-1α核酶基因（Rz-HIF-1α），假手术组（Sham）为对照，透射电镜及光镜观察心肌组织超微结构变化，免疫组化和免疫印迹（Westernblot）法检测HIF-1α、VEGF及CD31的蛋白表达。结果透射电镜及光镜结果证实载体注射、取材部位是AMI边缘缺血心肌。HIF-1α蛋白定位于缺血心肌细胞胞浆和胞核中，VEGF蛋白则定位于胞浆中。AMI后1d外源性HIF-1α蛋白及VEGF蛋白表达开始升高，7d达高峰，14、28d逐渐下降，56d时外源性HIF-1α蛋白已无表达，而VEGF蛋白56d仍有表达。结论腺病毒介导的HIF-1α基因在缺血心肌能被有效转染，并促使缺血区VEGF生成增多，促进血管新生。     

红景天苷对大鼠心肌缺血预处理后血管内皮生长因子表达的影响

目的观察红景天苷对大鼠心肌缺血/再灌注预处理后血管内皮生长因子表达的影响。方法选取16只健康大鼠,随机分为缺血/再灌注组、红景天苷预处理组,其中缺血/再灌注组、红景天苷预处理组经尾静脉注射垂体后叶素制作大鼠急性心肌缺血模型,另设8只为空白对照组。红景天苷预处理组经尾静脉注射1%红景天苷2 m L/(kg·d),每天1次,连续7 d,空白对照组和缺血/再灌注组给予等体积生理盐水预处理。于缺血预处理前及缺血预处理7 d后经眶静脉取血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠血清受体胎肝激酶1(FLK-1)及FLK-1 m RNA,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及HIF-1αm RNA,心肌血管内皮生长因子(VEGF)及m RNA表达;采用测试药盒测定心肌组织中丙二醛(MDA)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性等指标。结果红景天苷预处理组在缺血预处理7 d后FLK-1及FLK-1 m RNA、HIF-1α及HIF-1αm RNA、VEGF蛋白质及VEGF m RNA的表达均明显增强,与空白对照组、缺血/再灌注组、预处理前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时,红景天苷预处理组CAT、SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,与缺血/再灌注组及缺血预处理前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论红景天苷预处理急性心肌缺血大鼠,可减轻其血管内皮炎症反应及损伤程度,促使大鼠缺血心肌血管内皮新生,增强组织对自由基清除酶活性,抑制脂质过氧化反应,对急性心肌缺血再灌注损伤模型大鼠有保护作用。     

红景天苷改善血管内皮舒缩功能实验研究

目的:研究低氧环境下红景天苷对血管内皮细胞舒缩功能的影响及其机制。方法:空白对照组内皮细胞暴露正常氧环境,低氧组、低氧和红景天苷干预组血管内皮细胞暴露于低氧环境,检测血管内皮细胞HIF-1α、内皮素-1、血管内皮NO合成酶基因的表达变化。同时检测采用siRNA干扰HIF-1α后内皮舒缩因子表达变化。结果:与空白对照组比较,低氧组血管内皮细胞HIF-1α、内皮素-1表达显著增加(P<0.05),而血管内皮NO合成酶表达下降(P<0.05);与低氧组比较,低氧及红景天苷干预组血管内皮细胞内皮细胞HIF-1α、内皮素-1表达受抑制(P<0.05),而血管内皮NO合成酶表达增加(P<0.05)。siRNA干扰HIF-1α显示,红景天苷通过调控HIF-1α调节内皮细胞舒缩功能(P<0.05)。结论:红景天苷通过抑制HIF-1α基因表达,抑制血管内皮收缩因子表达及促进血管内皮舒张因子表达,从而改善血管内皮舒缩功能。     

大鼠心肌缺血再灌注后不同时间点心脏及肝脏中HIF-1、VEGF的表达

目的:探讨大鼠心肌缺血再灌注后不同时间点心脏和肝脏中缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的变化?方法:结扎雄性成年SD大鼠冠状动脉左前降支,缺血30 min,再灌注6 h(I30minR6h)或24 h(I30minR24h),real-time PCR法检测心肌组织中HIF-1α和VEGF的mRNA水平,Western blot法检测心肌以及肝脏组织中HIF-1α?HIF-1β 和VEGF蛋白表达的改变?结果:与假手术组相比,I30minR6h组心肌中 HIF-1α和VEGF mRNA和蛋白水平明显增加,但I30minR24h组无明显变化?心肌组织中HIF-1β蛋白水平及肝脏中HIF-1α?HIF-1β 和VEGF蛋白水平在不同再灌注时间点无明显改变?结论:心肌缺血再灌注影响心肌HIF-1和VEGF的表达,但对肝脏中HIF-1和VEGF的表达无影响,且其对心肌HIF-1和VEGF表达的影响与再灌注时间相关?     

人参三七组方对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2和缺氧诱导因子1α表达的影响

目的：探讨人参三七组方对急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2）和缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）表达的影响。 方法：100只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、美托洛尔（商品名倍他乐克）组和高、低剂量人参三七组方组。除正常对照组大鼠外,结扎各组大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型,并于造模后予相应药物治疗12 d。治疗结束后,检测缺血心肌微血管密度（microvessel density,MVD）,蛋白免疫印迹法检测缺血心肌的血管内皮生长因子受体VEGFR-2和HIF-1α的蛋白表达,实时聚合酶链式反应法检测缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α mRNA表达。 结果：模型组缺血心肌MVD较正常对照组及假手术组显著增加（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组MVD较模型组显著增加,差异均有统计学意义（P〈0.01）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。模型组VEGFR-2、HIF-1α的蛋白和mRNA表达上调,与正常对照组及假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组VEGFR-2、HIF-1α蛋白和mRNA表达均显著高于模型组（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。 结论：人参三七组方能够促进缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α表达,提高缺血心肌毛细血管密度,从而改善心肌缺血,促进侧支循环的形成。     

电针内关穴对缺氧诱导心肌损伤SD大鼠HIF-1α及VEGF的影响

目的探讨电针内关穴对缺氧诱导心肌损伤SD大鼠HIF-1α及VEGF的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、内关组各20只。模型组和内关组持续吸入低氧混合气体制备缺氧模型,正常对照组吸入空气。内关组在造模后进行电针,每日1次,每次30 min,连续5 d。运用实时定量PCR法检测各组大鼠心肌组织HIF-1α、VEGF mRNA的表达量,运用ELISA法检测大鼠心肌组织VEGF蛋白的表达量。结果模型组和内关组大鼠在造模后HIF-1α、VEGF mRNA及VEGF蛋白的表达量明显提高（P<0.01）,以内关组提高程度最为明显（P<0.01）。结论电针内关穴可以通过调节对HIF-1α、VEGF的mRNA的表达,从而增加血管生成,提高机体对缺氧的耐受性,对缺氧诱导的心肌损伤具有保护作用。     

高糖联合低氧对体外培养的人视网膜色素上皮细胞HIF-1α及VEGF表达的影响

目的探讨高糖及高糖联合低氧对体外培养的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial，RPE）细胞低氧诱导因子1α（hypoxia—inducible factor-1α，HIF-1α）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达的影响。方法通过使用化学低氧诱导剂CoCl2模拟RPE细胞低氧环境，研究RPE细胞分别在5．56mmol／L葡萄糖（对照组）、5．56mmol／L葡萄糖＋150μmol／L CoCl2（低氧组）、25mmol／L葡萄糖（高糖组）以及25mmol／L葡萄糖＋150μmol／L CoCl2（联合组）的培养条件下，通过反转录PCR检测HIF-1α及VEGF mRNA的表达，Western blot分析检测HIF-1α及VEGF蛋白水平。结果与对照组比较，高糖组RPE细胞HIF-1α mRNA表达无显著性差异，而高糖组可检测出微量的HIF-1α蛋白，对照组未能检测出HIF-1α蛋白；且高糖组VEGF mRNA表达和蛋白合成均增加（均P〈0．05）。与低氧组比较，联合组RPE细胞HIF-1α mRNA表达无显著性差异，但HIF-1α蛋白水平明显高于低氧组（P〈0．05）；同时VEGF mRNA表达和蛋白合成也均明显增加（均P〈0．05）。结论高糖对体外培养的人RPE细胞HIF-1α的影响是促进蛋白的合成，且对HIF-1α蛋白有一定的稳定作用，在联合低氧条件下高糖促进合成的HIF-1α蛋白更加稳定，同时也促进VEGF的表达增加。     

红景天苷保肝作用及相关机制的研究进展

红景天苷是红景天属植物中广泛存在的一种酚类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理活性,是红景天的药效物质基础。近年来研究发现,红景天苷对多种类型的肝损伤均具有保护作用,如化学性肝损伤、酒精性肝损伤、肝脏缺血再灌注损伤、非酒精性脂肪肝、自身免疫性肝炎、肝纤维化、肝脏恶性肿瘤等,其保肝机制涉及多靶点、多通路,与减轻肝脏氧化应激和炎症反应、抑制肝细胞凋亡与自噬等相关。     

黄连溶液对大鼠早期压疮缺血再灌注损伤中HIF-1α与VEGF的影响

目的:探讨黄连溶液对早期(Ⅰ、Ⅱ期)压疮缺血再灌注损伤中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)含量变化的影响。方法:SD大鼠40只随机分为4组,正常组、模型组、酒精组、黄连溶液组,每组10只。正常组大鼠备皮后不做任何处理,余各组采用埋置铁片外加磁铁施压的方法复制压疮模型;酒精组、黄连溶液组给予相应药物外涂。5 d后处死大鼠,取压疮创面皮肤肌肉组织,观察病理组织学变化,检测组织中HIF-1α、VEGF因子的表达。结果:病理组织学观察发现,模型组肌纤维萎缩,肌间隙间水肿明显,伴有大量炎性细胞浸润;酒精组镜下变化与模型组相似,而黄连溶液组细胞及组织水肿较模型组减轻、炎症细胞明显减少。组织中HIF-1α、VEGF表达显示,模型组较正常组增多,黄连溶液组干预后HIF-1α、VEGF表达较模型组进一步升高(P0.05),而酒精组与模型组无明显差异(P0.05)。结论:黄连溶液具有减轻早期压疮缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与通过促进创伤组织HIF-1α及其下游因子VEGF的表达有关。     

HIF-1α、VEGF在CIA大鼠模型中的表达与意义

目的制备牛Ⅱ型胶原诱导性大鼠关节炎(collagen Ⅱ-induced arthritis,CIA)模型,探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在类风湿关节炎发病中的作用。方法50只SD大鼠,随机分为对照组与模型组。建立CIA模型,动态观察各项关节炎活动指标,于造模第21、28、35、42天取踝关节行HE染色及HIF-1α、VEGF免疫组化染色,分析两者在CIA中的相关性及与关节炎活动指标、滑膜病理学评分之间的关系。结果CIA大鼠关节滑膜层和滑膜下层均表达HIF-1α、VEGF二者呈明显正相关,r为0.75(P<0.01),第21天阳性表达量最高,随病程进展,表达逐渐下降,与滑膜病理学评分、滑膜增生评分及血管生成评分呈显著正相关,r分别为0.4、0.48、0.50(P<0.05),与炎症浸润评分无明显相关r为0.30(P<0.05)。结论HIF-1α可能通过调控一系列下游靶基因,如VEGF等,促进滑膜增生及血管生成,影响类风湿性关节炎(rheumatoi...     

子宫内膜腺癌组织Livin、HIF-1α和VEGF表达及意义

目的观察凋亡抑制蛋白Livin、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜腺癌组织中的表达、相关性及其意义。方法采用免疫组织化学方法观察40例子宫内膜腺癌、22例子宫内膜不典型增生、16例正常子宫内膜组织中Livin、HIF-1α和VEGF的表达。结果 Livin、HIF-1α和VEGF在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌组织中的阳性表达率依次升高,组间比较差异有显著性(χ2=8.09~18.62,P<0.01、0.001),且Livin、HIF-1α和VEGF在子宫内膜癌组织中的表达与癌组织分化程度相关(χ2=7.16~13.70,P<0.05),但与淋巴结转移无关(P>0.05)。HIF-1α和VEGF表达与手术病理分期相关(χ2=10.58、10.81,P<0.05)。Livin和HIF-1α的表达与VEGF蛋白表达呈正相关(γ=0.389、0.472,P<0.05)。结论 Livin、HIF-1α和VEGF蛋白表达可能参与子宫内膜癌的发生和发展。Livin和HIF-1α可能通过上调VEGF蛋白的表达,抑制肿瘤细胞凋亡、促进肿瘤血管生成进而促进子宫内膜癌的发生及发展。     

HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2在稽留流产患者绒毛组织中的表达

目的：探讨低氧诱导因子( HIF-1α)、血管内皮生长因子( VEGF)及VEGF受体( VEGFR-1、VEGFR-2)在稽留流产( MA)绒毛组织中的表达及临床意义,探究MA发生中低氧对脑血管生成的影响。方法免疫组化SP法检测35例MA患者(研究组)以及32例正常早孕行人工流产者(对照组)绒毛组织的HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2的表达水平,并对结果进行统计分析。结果研究组与对照组绒毛组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2均有表达。研究组中HIF-1α表达高于对照组( P <0．05), VEGF、VEGFR-2表达明显低于对照组( P <0．05)。对照组中 HIF-1α与VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2表达呈正相关性( P<0．05),研究组中 HIF-1α与 VEGF、VEGFR-2表达呈负相关性( P <0．05),与VEGFR-1表达无相关性。结论 HIF-1α在MA绒毛组织中表达上升,通过调节VEGF、VEGFR-2基因的转录,胎盘绒毛血管的生成减少,可能是MA发生的重要原因。     

巨噬细胞金属弹力酶 缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的：探讨巨噬细胞金属弹力酶( HME)、缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)及血管内皮生长因子( VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测胃癌及癌旁组织各30个标本中HME、HIF-1α及VEGF的表达情况。结果①HME、HIF-1α和VEGF在胃癌组织中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义( P<0．05)。②HME的表达与胃癌的血管浸润和分化程度有相关性, HIF-1α的表达与肿瘤的组织学类型、淋巴结转移及TNM分期有相关性,VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有相关性。③VEGF分别与HME和HIF-1α在胃癌组织中的表达存在密切的相关性。结论胃癌中 HME、HIF-1α及VEGF的高表达可能为肿瘤侵袭转移的机制之一,且这些指标的检测对于胃癌的早期判断、干预治疗及预测肿瘤的转移预后有重要的临床意义。     

益气化瘀中药对糖尿病皮肤溃疡大鼠缺氧诱导因子-1α和血管内皮细胞生长因子的影响

目的:探讨益气化瘀中药对糖尿病皮肤溃疡气虚血瘀证大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法:72只清洁级雄性SD大鼠,除8只作正常对照组外,其他大鼠在背部全层皮肤缺损开放性创面的基础上加造气虚血瘀证糖尿病模型后,随机分为模型组、贝复济组、益气化瘀组、益气组和化瘀组。应用免疫组织化学、图像分析等技术,观察各组大鼠创面肉芽组织中HIF-1α和VEGF水平的变化。结果:模型组HIF-1α水平高于正常对照组(P<0.01),VEGF浓度明显低于正常对照组(P<0.01)。各用药组HIF-1α表达水平明显低于模型组(P<0.01),VEGF表达水平明显高于模型组(P<0.01)。益气化瘀组HIF-1α表达水平明显低于贝复济组、益气组和化瘀组(P<0.05或P<0.01),VEGF表达水平明显高于贝复济组(P<0.01)。益气组与化瘀组HIF-1α和VEGF的表达水平相似,它们与贝复济组之间无明显差异。结论:益气化瘀中药能明显促进糖尿病皮肤溃疡气虚血瘀证大鼠的创面愈合,其机制与下调HIF-1α水平、上调VEGF的表达水平和改善局部缺血缺氧状态有关。     

黄芪注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生及HIF-1α/VEGF信号转导通路的影响

目的:探究黄芪注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生及缺氧诱导生长因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)/血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号转导通路的影响.方法:72只大鼠随机分为对照组、模型组和黄芪注射液组,每组24只,线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,评价术前、术后、给药7 d后的神经功能评分,免疫组化法检测脑缺血再灌注损伤皮质微血管密度,RT-PCR 法检测脑缺血再灌注损伤皮质 HIF-1α mRNA 和 VEGF mRNA,Western Blotting法检测脑缺血再灌注损伤皮质HIF-1α和VEGF的蛋白表达.结果:给药7d后黄芪注射液组神经功能评分明显低于模型组(P<0.01),微血管密度、HIF-1α mRNA和VEGF mRNA表达水平、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平均高于模型组(P<0.01).结论:黄芪注射液促进脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生,其作用机制可能为激活HIF-1α/VEGF信号转导通路.     

汉黄芩苷通过上调SIRT1表达减轻糖尿病视网膜病变引起的细胞和组织损伤

目的 探究汉黄芩苷对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞（hRMECs）功能障碍的作用和对链脲佐菌素（STZ）诱导的大鼠糖尿病视网膜的损伤的影响及潜在的分子机制。方法 hRMECs常规培养，实验分为对照组（5 mmol/L葡萄糖）、渗透对照组（5 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇）、高糖组（30 mmol/L葡萄糖）、给药组（30 mmol/L葡萄糖+10、20、30、40 μmol/L汉黄芩苷）。通过CCK-8与Transwell实验分别检测细胞增殖和迁移能力，小管形成与单层细胞膜通透性实验分别检测细胞成管能力和细胞膜通透性，ROS、NO、GSH-ST试剂盒检测细胞氧化应激水平，qRT-PCR和ELISA试剂盒分别检测IL-1β、IL-6的表达水平和含量，Western blot检测VEGF、HIF-1α和SIRT1蛋白表达。选取40只SPF级雄性SD大鼠，随机分为对照组（Sham组）、模型组（STZ组）、汉黄芩苷组（Wog组）和汉黄芩苷治疗组（STZ+Wog 组），10只/组。模型组和汉黄芩苷治疗组腹腔注射0.1 mol/L柠檬酸缓冲液（pH=4.5）溶解的STZ，剂量为60 mg/kg建立糖尿病大鼠模型，对照组与单独的汉黄芩苷组给予等剂量的柠檬酸缓冲液。糖尿病大鼠模型建立 1 周后给予汉黄芩苷治疗，对照组、模型组予等量生理盐水注射，连续 6 周。比较4组大鼠视网膜组织损伤、HIF-1-α 、ROS、VEGF、TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及sirt1蛋白表达情况。结果 与对照组相比，高糖诱导hRMECs异常增殖和迁移，提高了hRMECs小管形成能力及细胞膜通透性（P<0.05），同时高糖诱导的hRMECs炎症水平和氧化应激水平上升（P<0.05）。而与高糖组相比，汉黄芩苷可浓度依赖性抑制高糖诱导的hRMECs细胞增殖、迁移、小管形成及细胞膜通透性的增加（P<0.05），此外汉黄芩苷可降低高糖诱导的hRMECs的炎症和氧化应激水平（P<0.05）。SIRT1在高糖诱导的hRMECs中低表达，30 μmol/L剂量汉黄芩苷处理后高糖诱导的低SIRT1表达部分恢复（P<0.01），干扰SIRT1表达可逆转汉黄芩苷对高糖诱导hRMECs异常增殖、迁移、小管形成、细胞膜通透性、炎症及氧化应激的抑制作用。动物实验显示，与对照组相比，STZ组视网膜组织厚度增加（P<0.05），而汉黄芩苷治疗后能缓解糖尿病引起的大鼠视网膜增厚（P<0.05）。同时STZ处理提高了VEGF、HIF-1α、IL-1β、IL-6 和 ROS 的水平（P<0.001），汉黄芩苷的处理降低了 STZ 诱导的大鼠视网膜损伤且上调了 SIRT1 的表达（P<0.001）。结论 汉黄芩苷通过上调SIRT1的表达缓解糖尿病视网膜病变引起的损伤。