非小细胞肺癌患者血浆miRNA-145和miRNA-221表达与临床特征及术后复发的相关性研究

目的探讨血浆微小RNA(microRNA,miRNA)-145和miRNA-221表达在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)术后复发中的诊断价值。方法选取2016年4月～2018年4月期间在陕西中医药大学附属医院和陕西省核工业二一五医院胸外科行手术切除的55例原发性非小细胞肺癌患者的临床资料进行回顾性分析,依据术后是否复发分为复发组和未复发组.同时选取50例同期体检健康者作为对照组.采用实时聚合酶联反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测NSCLC患者血浆miRNA-145和miRNA-221的表达,采用电化学发光方法检测血清细胞角蛋白片断21-1(CYFRA21-1)和癌胚抗原(CEA)水平,比较分析以上标志物的变化与NSCLC患者术后复发的关系。结果在对照组、未复发组和复发组中,血浆miRNA-145和miRNA-221的表达分别为0.97±0.27,0.35±0.15,0.17±0.09和0.20±0.11,0.39±0.17,1.06±0.31。未复发组的miRNA-221表达显著高于对照组,而显著低于复发组;未复发组的miRNA-145表达显著低于对照组,而显著高于复发组;以上比较的差异均有统计学意义(F=118.73～123.72,均P0.01)。在对照组、未复发组和复发组中,血清CYFRA21-1(ng/ml)和CEA(ng/ml)水平分别为3.02±1.17,9.05±3.43,47.68±16.72和2.31±2.03,7.37±3.29,29.37±12.49。复发组和未复发组的CYFRA21-1和CEA水平与对照组比较显著增高;复发组两肿瘤标志物水平与未复发组比较显著增高;以上比较差异均有统计学意义(F=87.46～96.83,均P0.01)。在复发组中,血浆miRNA-145和miRNA-221表达具有负相关性(r~2=0.772,P0.01)。miRNA-145表达分别与CYFRA21-1和CEA水平有负相关性(r~2=0.772～0.794,均P0.01),而miRNA-221表达分别与CYFRA21-1和CEA水平有正相关性(r~2=0.663～0.687,均P0.01)。血浆miRNA-221和miRNA-145表达在鳞癌中的异常率高于腺癌,在TNMⅢ期中的异常率高于Ⅰ-Ⅱ期(χ~2=0.012～0.039,均P0.05);两标志物与患者年龄、肿瘤大小和吸烟无明显相关性(χ~2=0.301～1.000,均P0.05)。结论血浆miRNA-145和miRNA-221的差异表达与NSCLC的病变进展有关,检测血浆miRNA-145和miRNA-221表达可用于监测NSCLC术后的复发。     

血清miRNA-21,miRNA-126表达在诊断PCI术后冠状动脉再狭窄的临床应用价值

目的研究血清miRNA-21,miRNA-126检测在诊断经皮冠状动脉介入术(PCI)术后冠状动脉再狭窄(ISR)的临床应用。方法收集82例在泾阳县医院和陕西中医药大学附属医院接受PCI治疗的急性冠脉综合征(ACS)患者(狭窄组30例,未狭窄组52例)及33例体验健康者(对照组)的血清及临床资料,采用real-time qPCR技术检测血清中miRNA-21和miRNA-126的相对表达量,比较分析其在各组中的变化。应用血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)来评价PCI术后再狭窄的发生。结果血清miRNA-21和miRNA-126在对照组、未狭窄组和狭窄组中的表达量分别为(0.22±0.03,0.43±0.08,0.92±0.17)和(0.87±0.15,0.49±0.10,0.23±0.04)。与对照组比较,血清miRNA-21在狭窄组与未狭窄组的表达量明显增高,而miRNA-126表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P=0.000)。狭窄组与未狭窄组比较miRNA-21表达水平明显增高,而miRNA-126表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P=0.000)。IVUS结果显示,狭窄组的斑块面积(PLA)与未狭窄组比较显著增高,而最小管腔面积(MLA)显著降低,其差异均有统计学意义(P=0.000)。两标志物在狭窄组的表达量具有负相关性(r=-0.919,P0.01)。狭窄组中miRNA-126和miRNA-21水平分别与PLA和MLA具有相关性(r=-0.945,0.926,P0.01)和(r=0.933,-0.917,P0.01)。结论血清miRNA-21和miRNA-126水平检测可用于急性冠脉综合征疾病PCI术后冠状动脉再狭窄的诊断以及预测,可能作为该疾病时的基因检测指标之一。     

miRNA-21-5P在食管鳞癌患者中的鉴别诊断价值

目的检测食管癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平,探讨miRNA-21-5P对食管癌患者的鉴别诊断价值。方法选取2019年12月至2020年3月于朝阳市中心医院就诊的食管鳞癌患者50名(疾病组)及食管炎患者20名(相关疾病对照组),采集食管炎患者血清样本及组织样本,以及食管鳞癌患者治疗前血清样本、术中食管鳞癌组织及癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组血清及组织样本中miRNA-21-5P的表达水平,分析miRNA-21-5P表达水平与食管鳞癌患者临床病理参数的关系,采用ROC曲线评估其对食管鳞癌的鉴别诊断价值。结果食管鳞癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平(3.60±0.09)显著高于食管炎患者(1.01±0.05),差异有统计学意义(t=24.43,P0.05);食管鳞癌患者癌组织中miRNA-21-5P的表达水平(4.36±0.29)显著高于癌旁组织(1.31±0.16),差异亦具有统计学意义(t=20.10,P0.05);而食管癌患者组织中miRNA-21-5P的表达水平显著高于食管炎患者组织(t=20.100,P0.05)。ROC曲线分析结果显示,组织中miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.767(95%CI:0.650,0.859),当cut-off值为0.39时,其敏感性88%,特异性为75%。血清miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的AUC~(ROC)为0.671(95%CI:0.549,0.779),当cut-off值为0.63时,其敏感性为80%,特异性为66%。结论 miRNA-21-5P在食管鳞癌血清中的诊断价值与组织相当,或可用于对食管鳞癌的鉴别诊断。     

颈动脉粥样硬化斑块性质与患者血清miRNA-126,miRNA-155水平的相关性研究

目的探讨血清miRNA-126,miRNA-155检测在评价颈动脉粥样硬化(carotid athero sclerosis,CAS)斑块性质中的临床应用价值。方法选择2015年5月~2017年5月在咸阳市中心医院和石泉县中医医院就诊的CAS患者75例作为研究对象,依据颈部增强CT检测结果分为易损斑块组(35例)和稳定斑块组(40例)。同时选取39例同期体检健康者作为对照组。采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组血清miRNA-126,miRNA-155表达水平。采用颈部增强CT检测各组颈动脉最大斑块厚度(MAPT)及内中膜厚度(IMT)。结果颈动脉MAPT及IMT在易损斑块组的检测结果为3.27±1.01mm,1.93±0.51mm;在稳定斑块组的检测结果为2.50±0.79mm,1.60±0.26mm。易损斑块组的颈动脉MAPT及IMT高于稳定斑块组,差异均有统计学意义(t=9.76,7.86,P0.01)。血清miRNA-126和miRNA-155在易损斑块组中的表达量为0.22±0.06和0.87±0.18;在稳定斑块组的表达量为0.50±0.12和0.47±0.10;在对照组的表达量为0.90±0.19和0.19±0.05。稳定斑块组和易损斑块组血清miRNA-155表达水平显著高于对照组,而miRNA-126表达水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(F=119.3,102.9,均P0.01)。易损斑块组miRNA-155表达水平显著高于稳定斑块组,而miRNA-126表达水平显著低于稳定斑块组,差异均有统计学意义(F=119.3,102.9,P0.01)。易损斑块组miRNA-126与miRNA-155表达水平呈负相关性(r=-0.912,P0.01);在该组中miRNA-126表达水平与MAPT及IMT呈负相关(r=-0.913,-0.893,P0.01),而miRNA-155表达水平与颈动脉两项指标则呈正相关(r=0.899,0.907,P0.01)。结论血清miRNA-126,miRNA-155检测可应用于颈动脉粥样硬化斑块破裂的预测,并可能成为缺血性脑卒中事件发生的有效预警标志物。     

中重度颅脑损伤并发脑梗死患者血清miRNA-124与miRNA-210表达的临床意义

目的探讨血清微小RNA(microRNA,miRNA)-124和miRNA-210表达在中重度颅脑损伤并发外伤性脑梗死中的临床应用价值。方法收集商洛市中心医院和西安市第八医院住院治疗的57例中重度颅脑损伤患者的血清及临床资料,依据是否发生外伤性脑梗死分为梗死组22例,未梗死组35例,并设立对照组(24例),采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time-PCR,RT-PCR)技术检测血清miRNA-124和miRNA-210的表达。比较分析血清miRNA-124和miRNA-210的变化与外伤性脑梗死的关系。结果血清miRNA-124和miRNA-210在梗死组、未梗死组和对照组的表达分别为(0.90±0.18,0.39±0.07,0.18±0.03)和(0.95±0.20,0.42±0.10,0.21±0.04)。与对照组比较,血清miRNA-124和miRNA-210在未梗死组和梗死组的表达显著上调,差异均有统计学意义(t=22.99,23.67,均P0.01;t=35.37,36.93,均P0.01)。两标志物在梗死组的表达显著高于未梗死组,差异均有统计学意义(t=23.27,25.12,均P0.01)。大脑前动脉(ACA)、大脑中动脉(MCA)及大脑后动脉(PCA)在梗死组、未梗死组和对照组的平均流速分别为(36.9±7.6,45.3±8.6,33.9±5.5)cm/s,(60.3±7.9,79.2±12.7,49.6±7.2)cm/s,(51.3±7.7,70.5±11.9,43.1±6.9)cm/s.ACA,MCA及PCA在未梗死组的平均流速与对照组比较明显增快,差异有统计学意义(t=12.23,13.10,13.16,均P0.01)。ACA,MCA和PCA在梗死组的平均流速分别与未梗死组及对照组比较明显减慢,差异有统计学意义[(t=11.30,12.67,12.09,均P0.01),(t=11.37,11.52,11.09,均P0.01)]。miRNA-124和miRNA-210在梗死组的表达具有正相关性(r=0.629,均P0.01),它们分别与梗死组ACA,MCA和PCA的平均流速具有负相关性[(r=-0.653,-0.620,-0.613,均P0.01),(r=-0.679,-0.656,-0.637,均P0.01)],而与未梗死组ACA,MCA和PCA的平均流速则具有正相关性[(r=0.640,0.596,0.607,均P0.01),(r=0.676,0.625,0.638,均P0.01)]。结论检测血清miRNA-124和miRNA-210的表达可预测外伤性脑梗死的发生及判断其危险程度,估计病情的发展状况。     

心房颤动患者血浆miRNA-1和miRNA-155检测在复律后复发预测的应用研究

目的探讨血浆miRNA-1和miRNA-155检测在心房颤动患者复律后复发预测中的临床应用价值。方法收集2015年10月~2017年11月于西安市第八医院和咸阳市中心医院心内科住院治疗的110例房颤患者的血液及临床资料(复律组110例,复发组30例,未复发组80例),比较分析三组患者血浆miRNA-1和miRNA-155表达水平的变化与房颤复发的关系。两标志物的表达采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测。应用心动超声仪评价患者的左房内径及左心室射血分数。采用罗氏MODULARP800全自动生化分析仪检测患者的空腹血糖及总胆固醇水平。建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价miRNA-1和miRNA-155在房颤复发中的临床意义。结果血浆miRNA-1和miRNA-155在未复发组、复律组和复发组的水平分别为0.38±0.09,0.39±0.08,0.82±0.15和0.87±0.17,0.85±0.18,0.21±0.05。它们在复发组的表达与未复发组和复律组分别比较明显上调、下调(t=21.37,20.57,均P0.01;t=18.77,11.71,均P0.01),而在未复发组与复律组的表达比较差异无统计学意义(t=0.67,0.54,均P0.05)。房颤患者的收缩压、血清总胆固醇水平(TC)、左房内径、空腹血糖水平(FBG)和左室射血分数(EF)分别在未复发组、复律组和复发组的检测结果为(133±7mmHg,3.87±0.73mmol/L,44.97±6.82mm,4.13±0.57mmol/L,61.20%±7.38%),(134±6mmHg,3.98±0.70mmol/L,45.50±6.72mm,4.17±0.46mmol/L,61.07%±7.19%),(145±7mmHg,4.03±0.71mmol/L,58.97±7.33mm,4.20±0.50mmol/L,60.30%±7.21%)。复发组的左心房内径和收缩压分别与复律组和未复发组比较显著增高(t=6.69,10.23,P0.01;t=8.42,15.53,P0.01);而复律组的两项指标分别与未复发组比较差异均无统计学意义(t=0.73,0.27,均P0.05);各组间的TC,FBG和EF比较,差异均无统计学意义(t=0.58,0.61,0.52,均P0.05;t=0.65,0.58,0.41,均P0.05;t=0.61,0.41,0.52,均P0.05)。在复发组中,miRNA-1和miRNA-155表达具有负相关(r=-0.673,P0.01),且它们分别与左心房内径、收缩压也具有相关性(r=0.528,-0.537),均P0.01。ROC曲线的分析中,复发组分别以复律组和未复发组为参照,血浆miRNA-1的AUC分别为0.743(95%CI:0.627~0.839),P0.01;0.730(95%CI:0.21~0.826),P0.01,血浆miRNA-155的AUC分别为0.703(95%CI:0.628~0.837),P0.01;0.685(95%CI:0.603~0.813),P0.01。结论血浆miRNA-1和miRNA-155检测可应用于房颤患者复律后复发的预测,并成为房颤复发有效的预警标志物和干预靶点。     

多发性骨髓瘤患者骨髓液中miRNA-21、miRNA-15a和miRNA-16的表达及其临床意义分析

目的观察和分析多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓液中微小RNA(miRNA)-21、miRNA-15a和miRNA-16的表达及其临床意义。方法选取50例MM患者作为病例组,根据治疗效果将其分为初治组(19例)、难治组(18例)和缓解组(13例),选取20例非恶性血液疾病患者作为对照组。对各组患者骨髓液中的miRNA-21、miRNA-15a和miRNA-16表达水平和血清β2微球蛋白(β2-MG)水平进行检测和比较。结果各组患者骨髓液中miRNA-21、miRNA-15a、miRNA-16表达水平的差异均有统计学意义(F=37.839、419.707、445.998,P0.05)。其中,难治组患者骨髓液中miRNA-21表达水平显著高于其他三组,miRNA-15a、miRNA-16表达水平显著低于其他三组,初治组患者骨髓液中miRNA-21表达水平显著高于缓解组或对照组,miRNA-15a、miRNA-16表达水平显著低于缓解组或对照组,以上差异均有统计学意义(P0.05);直线相关分析显示,MM患者血清β2-MG水平与骨髓液中miRNA-21表达水平呈正相关关系(r=0.599,P0.05),与miRNA-15a表达水平(r=-0.829)、miRNA-16表达水平(r=-0.698)呈负相关关系(P0.05),多元线性回归分析结果显示,MM患者的血清β2-MG水平与骨髓液中miRNA-15a表达水平呈负相关关系(标化相关系数=-0.976,t=-5.838,P0.05)。结论 MM患者骨髓液中的miRNA-15a、miRNA-16和miRNA-21表达水平与患者对化疗的反应性和肿瘤负荷具有相关性,可用于评价患者病情的进展、预测治疗效果和患者的预后。     

miRNA-10b与乳腺癌相关肿瘤标志物在早期乳腺癌中诊断效能比较

目的探讨微小核糖核酸-10b(miRNA-10b)与肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原199(CA199)和糖类抗原125(CA125)在早期乳腺癌诊断中的价值。方法选取2015年7月至2017年12月该院诊治的乳腺疾病女性患者92例,其中乳腺恶性肿瘤患者50例(早期乳腺癌30例、晚期乳腺癌20例)、乳腺良性疾病患者42例,另选健康对照者50例。采用电化学发光法分别检测乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者和健康对照者血清中CEA、CA153、CA199和CA125的水平。采用荧光定量PCR法检测外周血中miRNA-10b水平。结果CEA、CA199及CA125在乳腺癌良性疾病组患者血清中表达水平略升高,但与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。早期乳腺癌组患者血清中仅CA153、miRNA-10b表达水平明显升高(P<0.05)。晚期乳腺癌组患者血清CEA、CA153、CA199、CA125和miRNA-10b水平均升高(P<0.05)。miRNA-10b和CA153的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)、灵敏度和特异度均优于CEA、CA199和CA125。结论CA153和miRNA-10b可作为早期乳腺癌筛查的血清学指标,诊断准确率高。CEA、CA125和CA199不可用于早期乳腺癌肿瘤筛查。     

miRNA-145和miRNA-143在川崎病患儿血浆中的表达及意义

目的 探讨miRNA-145和miRNA-143在儿童川崎病(kawasaki disease,KD)中表达水平及其辅助诊断价值。方法 共纳入45例确诊为川崎病的患儿,并依据心超结果分为:伴有冠状动脉损伤组(CAL组)19例,无冠状动脉损伤组(NCAL组)26例。同期匹配30例健康儿童作为对照组(NC组)。采用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-145和miRNA-143在川崎病患儿发病急性期和治疗缓解期及正常儿童血浆中的表达水平。应用ROC曲线及AUC(95%CI)评估其作为诊断指标的效能。结果 miRNA-145及miRNA-143在CAL组患儿急性期的相对表达量为2.33±1.26和1.64±0.50,高于正常对照组,差异具有统计学意义(t=5.108,5.072,P<0.01); miRNA-145在CAL组缓解期相对表达量为1.55±0.49,高于NC组,差异具有统计学意义(t=3.837,P<0.01); miRNA-143在CAL组缓解期相对表达量为1.17±0.33,与NC组相比,差异无统计学意义(t=1.033,P>0.05); NCAL组急性期miRNA-145和miRNA-143的相对表达量分别为2.02±1.00和1.63±0.50,与NC组相比差异有统计学意义(t=4.746,5.261,P<0.01),缓解期两者表达量分别为1.07±0.18和1.12±0.16,与NC组相比,差异均无统计学意义(t=0.264 9,0.584 9,P>0.05)。miRNA-145用于KD急性期诊断的最佳临界值为1.697,敏感度为64.44%,特异度为90%,AUC为0.773 3,95%CI为0.667 0～0.879 7; miRNA-143的最佳临界值为1.361,敏感度为64.44%,特异度为86.67%,AUC为0.816 3,95%CI为0.722 5～0.910 0。结论 该研究表明,miRNA-145和miRNA-143可作为儿童川崎病急性期诊断的辅助指标。     

miRNA-203联合TSGF、CEA检测在胃癌诊断中的应用

目的分析微小核糖核酸-203(miRNA-203)联合肿瘤生长因子(TSGF)、癌胚抗原(CEA)检测在胃癌诊断中的应用。方法选择2015年7月至2016年7月来该院就诊的40例胃癌患者为观察组,选择同期30例健康志愿者为对照组,分析研究对象的外周血清CEA、miRNA-203、TSGF水平。结果观察组患者miRNA-203相对表达量为(0.26±0.16)U/mL,明显低于对照组的(0.84±0.09)U/mL(P0.05);观察组TSGF、CEA表达水平及阳性率明显高于对照组(P0.05)。miRNA-203相对表达量随分期递增而减少(F=5.60,P=0.007 5)。TSGF、CEA表达水平随分期递增而增加(P0.05);不同分期CEA阳性率比较差异有统计学意义(P0.05),而不同分期TSGF阳性率差异无统计学意义(P0.05)。miRNA-203联合TSGF、CEA检测的敏感度为95.00%,明显高于单项检测或者2项指标联合检测结果,差异有统计学意义(P0.05)。miRNA-203联合TSGF、CEA检测的诊断符合率为97.50%,特异度为90.00%,优于单项或者两项联合结果(P0.05)。结论采用miRNA-203联合TSGF、CEA检测,可以及时准确诊断胃癌,具有较高的特异度与诊断符合率,在临床上有较高的诊断价值。     

血浆miRNA-155和miRNA-625测定诊断非小细胞肺癌的临床评价

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中血浆miRNA-155、miRNA-625测定的临床价值。方法采用回顾性分析,研究对象为2018年1月至2020年1月首都医科大学附属北京世纪坛医院收治的98例NSCLC患者与110例肺部良性疾病患者,分别设定为研究组与对照组。比较2组血浆miRNA-155、miRNA-625表达水平与血清癌胚抗原水平,分析研究组患者血浆miRNA-155、miRNA-625表达与临床病理特征(性别、年龄、TNM分期、分化程度、组织学类型、吸烟)相关性,并比较miRNA-155、miRNA-625、血清癌胚抗原诊断NSCLC的准确性、阴性预测值、阳性预测值、特异度及敏感度。结果研究组血浆miRNA-155、血清癌胚抗原水平为(5.76±3.81)、(6.62±5.41)μg/L,高于对照组[(1.98±1.71)、(3.94±1.53)μg/L],血浆miRNA-625(0.53±0.43)水平低于对照组(1.08±0.61),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ、Ⅱ期患者的血浆miRNA-155表达水平(4.87±3.46)显著低于Ⅲ、Ⅳ期患者(8.52±3.70)(P<0.05);研究组男性患者的血浆miRNA-625表达水平(0.58±0.48)显著高于女性患者(0.34±0.20),且Ⅰ、Ⅱ期患者的血浆miRNA-625表达水平(0.83±0.40)显著高于Ⅲ、Ⅳ期患者(0.45±0.47),差异均有统计学意义(P<0.05)。血浆miRNA-155、miRNA-625诊断NSCLC的敏感度(75.51%、73.47%)显著高于血清癌胚抗原(46.94%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NSCLC诊断中血浆miRNA-155、miRNA-625测定具有较高的临床价值。     

miRNA-132、miRNA-125b、miRNA-143和miRNA-145表达对多发性骨髓瘤细胞自噬及凋亡的影响

目的:探讨多发性骨髓瘤细胞miRNA-132、miRNA-125b、miRNA-143和miRNA-145表达与自噬和凋亡的关系。方法:选取人骨髓瘤细胞株U266及正常CD138+浆细胞为研究对象,临床研究对象分为骨髓瘤组45例,健康对照组40例。实时定量PCR测定细胞中miRNA-132、miRNA-125b、miRNA-143和miRNA-145表达水平,Western blot测定自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ,LC3-Ⅰ、P62、Beclin-1)表达量,凋亡相关分子(cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase7、BCL-2、BAX)表达量;流式细胞术测定细胞凋亡率。分析miRNA表达水平与临床相关指标包括M蛋白、血红蛋白、β2-MG、乳酸脱氢酶、白蛋白、肌酐、血清钙的相关性。结果:与正常浆细胞对比,骨髓瘤细胞的miRNA-132和miRNA-125b表达显著增加(P 0.05),miRNA-143,miRNA-145表达显著降低(P 0.05);LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著增加(P 0.05),Beclin-1表达显著增加(P 0.05),P62表达显著降低(P 0.05);BAX、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase7表达显著降低(P 0.05),BCL-2表达显著增加(P0.05);细胞凋亡率降低(P 0.05)。阳离子脂质体转染miRNA-125b mimic和miRNA-143 inhibitor后,正常浆细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著增高(P 0.05),Beclin-1表达显著增高(P 0.05),P62表达也显著增加(P 0.05),细胞凋亡率降低(P 0.05);上述反应体系加入自噬抑制剂3-MA后,细胞凋亡率则无明显改变(P 0.05)。miRNA-132、miRNA-125b、miRNA-143和miRNA-145表达在不同DS与ISS分期组,染色体核型异常组与正常核型组间均有显著性差异(P 0.05)。miRNA-125b和miRNA-143与β2-MG、白蛋白、血红蛋白水平均有显著相关性(P 0.05)。结论:miRNA-132、 miRNA-125b、 miRNA-143和miRNA-145表达与多发性骨髓瘤患者临床特征密切相关,miRNA-125b过表达和miRNA-143表达下调通过上调自噬水平抑制骨髓瘤细胞凋亡。     

血清miRNA-146、miRNA-195检测在糖尿病视网膜病变中的临床应用

目的探讨血清微小RNA(miRNA)-146、miRNA-195检测在糖尿病视网膜病变(DR)中的临床应用价值。方法收集91例糖尿病视网膜病变患者的血清及临床资料,并从正常人群中随机抽取45例志愿者。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测血清miRNA-146、miRNA-195的表达。将糖尿病视网膜病变患者分为非增殖性糖尿病视网膜病变组(NPDR)和增殖性糖尿病视网膜病变组(PDR),与对照组比较,观察血清miRNA-146、miRNA-195表达水平的变化与DR之间的关系。结果病例组血清miRNA-146、miRNA-195表达与对照组比较分别上调和下调,差异均有统计学意义(P0.01);miRNA-146在NPDR组的表达水平低于PDR组(P0.01),miRNA-195的表达水平则高于PDR组(P0.01)。NPDR组和PDR组miRNA-146、miRNA-195表达均呈负相关(r=-0.687,-0.692,P0.01)。NPDR组和PDR组中miRNA-146、miRNA-195的表达水平分别和糖化血红蛋白(Hb Alc)、尿白蛋白/肌酐及空腹血糖(FPG)水平具有相关性(r=0.532,0.610,0.587,P0.01);(r=-0.538,-0.627,-0.567,P0.01)。结论检测血清miRNA-146、-195表达可预测DR的发生及判断其危险程度,估计病情的发展状况。     

胃癌患者血浆纤维蛋白原含量与临床分期和转移的关系

目的 通过检测胃癌患者血浆纤维蛋白原(FIB)含量,探讨其水平变化与胃癌临床分期和转移的关系.方法 选择临床明确诊断的胃癌112例(胃癌组)、同期收治的胃良性疾病38例(胃良性疾病组)及健康体检者32例(健康对照组),检测FIB含量及超敏C反应蛋白(SCRP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原19-9(CA19-9)、癌抗原72-4(CA72-4)、组织多肽特异抗原(TPS)水平,并进行对照分析.结果 胃癌组FIB水平与胃良性疾病组和健康对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);胃良性疾病组和健康对照组FIB水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者与Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者FIB水平比较差异有统计学意义(P＜0.01);胃癌患者发生淋巴结转移者与无淋巴结转移者FIB水平比较差异有统计学意义(P＜0.01).SCRP与胃癌临床分期和转移无关.血浆FIB水平与CEA、CA72-4、TPS水平具有相关性(P=0.012、P=0.027、P=0.035).结论 FIB与胃癌转移密切相关,对判断预后有重要意义.     

宫颈癌患者血浆miRNA-10b的表达及其临床意义

目的 探讨血浆微小核糖核酸-10b(miRNA-10b)在宫颈癌患者中的表达及其临床意义。方法 采用RT-PCR检测168例宫颈癌患者,68例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者(CIN组)和45例健康女性(对照组)血浆miRNA-10b,鳞癌抗原(SCCA)及癌胚抗原(CEA)表达水平,分析miRNA-10b表达与宫颈癌临床病理特征的关系。应用ROC曲线评价miRNA-10b,SCCA及CEA对宫颈癌诊断的灵敏度和特异度,多元Logistic回归模型分析三项指标与宫颈癌的关系。Pearson相关分析宫颈癌患者血浆miRNA-10b与SCCA和CEA的相关性。结果 宫颈癌组血浆miRNA-10b,SCCA及CEA表达水平均明显高于CIN组和对照组[miRNA-10b(2^-ΔΔCt):5.83±1.84 vs 2.64±0.92和2.38±0.75; SCCA(ng/ml):8.74±2.26 vs 1.97±0.62和0.61±0.15; CEA(ng/ml):5.71±2.15 vs 1.56±0.58和1.34±0.16,F=17.842,13.614,8.273,均P<0.01]。宫颈癌患者血浆miRNA-10b表达水平与临床分期、淋巴结转移、浸润深度及SCCA水平相关(t/F值=19.287,21.528,5.672,5.284,均P<0.05)。血浆miRNA-10b,SCCA,CEA及三项联合诊断宫颈癌的AUC(95%CI)分别为0.836(0.752～0.924),0.795(0.722～0.875),0.664(0.596～0.738)和0.882(0.794～0.958),其最佳截值分别为4.26,6.58 ng/ml和4.05 ng/ml。Logistic回归分析显示,血浆miRNA-10b和SCCA水平升高是宫颈癌发生的独立危险因素[OR(95%CI)=1.816(1.629～2.483),1.427(1.206～1.975)]。宫颈癌患者血浆miRNA-10b与SCCA呈正相关(r=0.637,P<0.01)。结论 血浆miRNA-10b有望作为早期诊断宫颈癌的分子标志物,与SCCA和CEA联合应用可提高宫颈癌诊断的准确性。     

血清miRNA-182检测在结直肠癌中的诊断价值研究

目的探讨血清miRNA-182作为结直肠癌(CRC)潜在标志物的诊断价值。方法运用荧光定量PCR法检测53例CRC患者血清miRNA-182相对表达量,并与肠良性病变患者及健康体检者进行比较分析。结果 CRC患者血清miRNA-182相对表达量明显高于肠良性病变组及对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。ROC曲线显示血清miRNA-182诊断CRC的曲线下面积为0.846,95%置信区间为0.768~0.925;诊断灵敏度为77.1%,特异度为81.1%。血清miRNA-182相对表达量与CRC患者TNM分期(P=0.011)及远距离转移(P=0.002)有关;而与其他临床特征无关。CRC患者术后血清miRNA-182相对表达量明显低于术前水平(P0.01);而术后出现复发/转移的患者血清miRNA-182相对表达量又明显升高(P=0.019)。结论 CRC患者血清miRNA-182相对表达量明显升高,并与病情及恶性进展密切相关,血清miRNA-182可作为CRC潜在标志物用于临床诊断及病情评估。     

miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移及SIRT1表达的调控

目的观察前列腺癌PC-3细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)-221和miRNA-222对细胞增殖和迁移的作用,以及对沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响。方法设立无处理细胞组(简称control组)、转染空载质粒pEX-5组(简称pEX-5组)、转染miRNA-221反义抑制质粒组(简称miRNA-221抑制组)、转染miRNA-222反义抑制质粒组(简称miRNA-222抑制组),应用细胞计数试剂盒(CCK-8法)检测miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞增殖的影响;采用细胞划痕修复实验检测miRNA-221和miRNA-222对细胞迁移能力的影响;采用免疫印迹法和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测SIRT1在蛋白水平和mRNA水平的变化;采用miRNAanda靶标进行预测分析。结果在成功抑制了PC-3细胞中miRNA-221或miRNA-222的表达后,连续7 d检测细胞活性,miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的细胞活性(A450 nm值)较pEX-5组降低1.5~2.0倍,自第3天起两组之间即有明显差异(t=6.7,P0.01;t=5.3,P0.01);划痕实验显示,miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的迁移能力明显低于pEX-5组。miRNA-221抑制组、miRNA-222抑制组中SIRT1蛋白的相对表达量分别为(0.26±0.021)、(0.21±0.005 8),与pEX-5组(0.14±0.017)比较差异均有统计学意义(t值分别为6.3、6.4,P均0.05);而SIRT1 mRNA的表达水平3组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-221和miRNA-222能促进前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移能力,影响SIRT1蛋白的表达。     

基于乳头溢液标志物的乳腺良恶性疾病鉴别诊断模型的建立及价值评估

目的:检测CA125,CA153,CA199,CA724和CEA在乳腺癌和乳腺良性疾病患者乳头溢液中的表达,探讨其在乳腺良恶性疾病中的鉴别诊断价值。方法:回顾性分析73例乳腺癌和189例乳腺良性疾病患者的乳头溢液中CA125,CA153,CA199,CA724和CEA的表达,上述标志物的检测均采用采用罗氏电化学发光方法。t检验统计分析上述标志物在乳腺癌组和良性疾病组的表达差异;ROC曲线评价CEA和CA153的鉴别诊断价值,并结合患者年龄、CEA和CA153建立鉴别诊断模型;采用Pearson8t检验分析CEA和CA153在乳头溢液和血清中的相关性。结果:乳腺癌组乳头溢液中CEA(1430.09±259.29)和CA153(4058.82±119.4)的表达显著高于乳腺良性疾病组(141.33±296.34,1402.28±306.04)(P<0.001,P<0.01),但CA125,CA724,CA199在乳腺癌患者组与良性乳腺疾病组之间无显著性差异(P=0.28,0.84,0.58);CEA和CA153对乳腺良恶性疾病鉴别诊断的最佳Cut-off值分别为230.88ng/ml和639.68U/ml。CEA的曲线下面积为0.828,显著优于CA153(0.709,P=0.0004)。将年龄、CEA和CA153联合应用建立鉴别诊断模型,得到公式:-4.525+0.060*年龄+0.056*CEA+0.002*CA153,以0.73为Cut-off值,其敏感性和特异性分别为100%和95.2%;CEA在乳头溢液和血清中的表达呈正相关(r=0.9690,P<0.0001),而CA153在乳头溢液和血清中的表达无相关性(r=0.01577,P=0.95)。结论:乳头溢液CEA和CA153是较好的乳腺良恶性疾病鉴别诊断标志物,与年龄联合建立鉴别诊断模型具有更优的价值。     

miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222与脑胶质瘤发生发展的相关性

目的:研究miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222与脑胶质瘤发生发展的相关性,为脑胶质瘤的早期诊断提供相关依据。方法:选取2011年4月至2015年4月第四军医大学第一附属医院西京医院收治的60例经病理证实为胶质瘤的患者作为实验组,分为低级别组(经检查肿瘤级别为I级和II级)和高级别组(经检查肿瘤级别为III级和IV级)。另选取15例经体检证实为健康人作为对照组。使用RT-q PCR检测3组血清miRNA-21、miRNA-221和miRNA-222含量,并且进行比较。结果:3组血清miRNA-21(F=5.497,P=0.006)、miRNA-221(F=7.615,P=0.001)和miRNA-222(F=6.304,P=0.003)含量差异有统计学意义;血清miRNA-21、miRNA-221含量在对照组最低,在高级别组最高,差异有统计学意义(P0.05);血清miRNA-222含量高级别组高于对照组(P0.05),而低级别组与对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论:脑胶质瘤患者的血清miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222都呈高表达状态,提示其与脑胶质瘤的形成和发展有密切联系;监测血清miRNA-21、miRNA-221、miRNA-222的含量可以对脑胶质瘤患者的早期诊断、分级和预后评估等提供重要依据。     

血清CEA、CA19-9、CA724联合检测对胃癌的诊断价值

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原724(CA724)联合检测对胃癌的诊断价值。方法选择胃癌患者、胃部良性疾病患者和健康体检者,各40例,分别设为胃癌组、良性组和对照组。应用放射免疫分析法检测3组患者血清CEA、CA19-9、CA724水平。结果胃癌组血清CEA、CA19-9、CA724水平均显著高于良性组和对照组(P0.01);胃癌组CEA、CA19-9、CA724联合检测阳性检出率显著高于任何一种标志物单独检测(P0.05或P0.01);联合检测的灵敏度高于血清CEA、CA19-9、CA724单独检测,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论血清CEA、CA19-9、CA724水平对于胃癌的诊断具有重要意义,联合检测可提高诊断灵敏度。