LRP的表达与非小细胞肺癌耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因LRP和蛋白的表达,对比分析非小细胞肺癌的多药耐药性与LRP的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行LRP表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。LRP在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为53.8%鳞癌和腺癌相比LRP的表达无显著性差异(P>0.05)。且LRP的表达与三种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间也有显著差异性(P<0.05)。结论LRP在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并参与介导了非小细胞肺癌固有多药耐药机制。     

非小细胞肺癌组织Bcl-2蛋白的表达和多药耐药检测

目的:观察非小细胞肺癌组织(NSCLC)中Bcl-2蛋白的表达及其化疗耐药性.方法:应用MTT法,观测91例未经化疗的NSCLC组织对环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶3种用药方案的药物敏感性.用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中Bcl-2蛋白的表达,并将其表达情况与化疗耐药性进行相关分析.结果:91例中53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药.其中,19例(20.9%)对3种用药均敏感,27例(29.8%)对3种用药均耐药.91例中Bcl-2蛋白总的阳性表达率为52.7%,其表达与组织学类型和分化程度无关(P＞0.05),但与3种化疗用药方案耐药性均有关(P＜0.05).结论:NSCLC存在固有的化疗耐药性,Bcl-2蛋白参与介导了NSCLC化疗耐药的机制.     

c-erbB-2的表达与非小细胞肺癌多药耐药的关系

目的探讨c-erbB-2基因表达和非小细胞肺癌的化疗耐药性的关系,初步明确c-erbB-2基因在介导非小细胞肺癌(NSCLC)耐药机制中的作用。方法应用MTT法对54例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂+氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况;用免疫组织化学方法检测c-erbB-2基因的表达,并对其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果54例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:32例(59.3%)对环磷酰胺耐药,31例(57.4%)对阿霉素耐药,25例(46.3%)对顺铂+氟尿嘧啶耐药。其中,11例(20.4%)对3种用药均敏感,16例(29.6%)对3种用药均耐药,其耐药性与组织学类型和分化程度无关(P>0.05)。c-erbB-2在54例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为53.7%,其中鳞癌和腺癌相比c-erbB-2的表达无显著性差异(P>0.05)。c-erbB-2的表达与3种化疗用药的耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间也有显著差异性(P<0.05)。结论c-erbB-2在非小细胞肺癌中有较高的阳性表达,其参与介导了NSCLC固有化疗耐药的机制。     

mdr1、MRP和GST-π在非小细胞肺癌多药耐药机制中的作用

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白mdrl、MRP、GST-π的表达，对比分析非小细胞肺癌的化疗耐药性与耐药相关基因表达的关系，明确各耐药相关基因在介导非小细胞肺癌耐药机制中的作用。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试，观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂＋氟尿嘧啶3种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况，并用免疫组织化学方法对其进行3种耐药相关基因（mdr1、MRP以及GST-π）表达的检测，并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示：53例（58．2％）对环磷酰胺耐药，51例（56．0％）对阿霉素耐药，42例（46．2％）对顺铂＋氟尿嘧啶耐药。其中，19例（20．9％）对3种用药均敏感，27例（29．8％）对3种用药均耐药，其耐药性与组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）。P—gp、MRP和GST-π在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率分别为：58．2％、73．6％和64．8％。鳞癌和腺癌相比P—gP、MRP、和GST-π的表达差异无显著性（P〉0．05）。P—gP、MRP和GST-π的表达与对3种化疗用药的耐药性均呈显著正相关（P〈0．05），并且不同表达程度问差异也有显著性（P〈0．05）。结论P—gp、MRP和GST-π在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并共同介导参与了非小细胞肺癌固有化疗耐药的机制。     

mdrl的表达在非小细胞肺癌多耐药机制中的意义

目的探讨非小细胞肺癌的化疗耐药性和mdrl基因表达的关系,明确mdrl在非小细胞肺癌耐药中的作用。方法应用肿瘤细胞体外培养和MTT法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物(环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶)敏感性测试,并用免疫组化方法进行mdrl表达的检测,并进行相关分析。结果化疗敏感性:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药。mdrl在91例中总的阳性表达率为58.2%。鳞癌和腺癌相比mdrl的表达差异无统计学意义(P>0.05),而且mdrl与耐药性均呈显著正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论mdrl参与介导了非小细胞肺癌固有化疗耐药的机制。     

p53蛋白与非小细胞肺癌多药耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)的化疗耐药性与p53蛋白表达的关系。方法对43例未经化疗的NSCLC组织进行体外化疗药物敏感性实验,观察细胞分别对紫杉醇、阿霉素、顺铂+吉西他滨3种用药方案的耐药情况,用免疫组织化学方法进行p53蛋白表达的检测,并将p53表达情况与化疗耐药性进行相关分析。结果43例中,22例(51.16%)对紫杉醇耐药,23例(53.49%)对阿霉素耐药,13例(30.23%)对顺铂+吉西他滨耐药,9例(20.93%)对3种用药均敏感,13例(30.23%)对3种用药均耐药。43例NSCLC p53蛋白阳性表达33例,阳性表达率76.74%,此表达与3种用药方案耐药性成正相关(P<0.05),且在鳞癌中的表达明显高于腺癌(P<0.05),但与分化程度无关(P>0.05)。结论p53蛋白在NSCLC细胞中过表达参与并介导了NSCLC化疗耐药的机制。     

Topo-Ⅱ蛋白与p53蛋白在非小细胞肺癌耐药性中的表达

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中Topo-II蛋白与p53蛋白的表达,分析NSCLC化学治疗耐药性与二者表达的关系,探讨Topo-II蛋白与p53蛋白在介导NSCLC耐药中的意义。方法应用单核细胞直接细胞毒性测定法对40例NSCLC组织进行体外药物敏感试验,观察对紫杉醇、阿霉素、顺铂+吉西他滨3种用药方案的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行Topo-II蛋白和p53蛋白表达的检测,并将其表达情况与对应的化学治疗耐药性进行相关性分析。结果 21例(52.5%)对紫杉醇耐药,23例(57.5%)对阿霉素耐药,12例(30.0%)对顺铂+吉西他滨耐药。其中7例(17.5%)对3种用药均敏感,11例(27.5%)对3种用药均耐药。Topo-II蛋白和p53蛋白阳性表达与分化程度无关(P>0.05);Topo-II蛋白阳性表达与组织学类型无关(P>0.05),p53蛋白在腺癌中的阳性表达高于其他组织学类型(P<0.05);Topo-II蛋白表达与3种用药方案耐药性负相关(P<0.05);p53蛋白表达与3种用药方案耐药性正相关(P<0.05);NSCLC中p53蛋白表达与Topo-II蛋白表达正相关(P<0.05)。结论 Topo-II蛋白与p53蛋白均介导了NSCLC多药耐药。     

MRP1及TopoⅡ的表达与肺癌耐药性的关系

目的探讨肺癌耐药机制及明确耐药基因与化疗药物耐药性的相关性研究。方法应用MTT法对顺铂(Cisplatin),吉西他滨(Gemcitabine),长春瑞滨(Vinorelbine),紫杉醇(Paclitaxel),异环磷酰胺(Iphospamide)5种化疗药物针对肺癌细胞悬液进行药敏检测;应用免疫组化进行MRP1(多药耐药相关蛋白1)及TopoⅡ(拓扑异构酶Ⅱ)表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果①MRP1、TopoⅡ在肺癌中总的阳性表达率分别为:72.5%、50.0%。鳞癌和腺癌MRP1、TopoⅡ相比的表达差异无统计学意义(P>0.05),但鳞癌或腺癌和小细胞肺癌在MRP1、TopoⅡ表达相比差异有统计学意义(P<0.05);②MRP1的表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨的耐药性均呈显著的正相关(P<0.05),其表达与紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性差异无统计学意义(P>0.05);TopoⅡ的表达与顺铂、吉西他滨、紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性均呈显著的正相关(P<0.05),其表达与长春瑞滨的耐药性差异无统计学意义(P>0.05)。结论①MRP1较高表达及TopoⅡ的较低表达共同介导参与了肺癌耐药的机制,且与检测的化疗药物有不同程度的相关性。②应用肿瘤细胞体外培养、进行体外药敏检测,并明确耐药基因的表达情况,对于识别可能的耐药个体,选择合理有效的化疗药物,可能将会最大限度地避免无效化疗和提高化疗疗效。     

非小细胞肺癌患者肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的 检测肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况.并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的92例肺癌组织标本并以20常肺组织作为对照进行了多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达的检测.并对病理类型、分化程度、临床分期、预后等进行统计学分析.结果 （1）92例肺癌组织中MRP、LRP及其两者共表达的阳性率分别为53%、52%和45%,均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）.（2）MRP、LRP蛋白表达在不同病理类型、不同分化程度之间具有统计学差异（P〈0.05）,而在不同年龄、性别、临床分期、淋巴结转移情况等均无明显差异.另外,MRP、LRP蛋白的表达与患者预后密切相关,且随着耐药蛋白表达种类的增加,生存曲线水平下降.结论 NSCLC中MRP、LRP的表达可能在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,检测NSCLC中MRP、LRP在判断患者预后.指导肿瘤化疗方面具有重要的临床意义.     

肺癌原代细胞耐药基因的表达和化疗敏感性的研究

目的探讨ATRA与VD3逆转肺癌细胞多药耐药，提高肺癌细胞化疗敏感性的机制。方法应用原代细胞培养、MTT比色、RT—PCR等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及MRP、LRP表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关。结论MRP、LRP在肺癌尤其非小细胞肺癌中高表达，可反应肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD3可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，从而提高肺腺癌的化疗敏感性。     

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gP）、多药耐药相关蛋白（muhidrug resistance-associated protein,MRP）的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法：应用免疫组化法检测P-gP及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果：在48例胃癌中,P-gP及MRP阳性率分别为41．7％、29．2％,共同表达率为25．0％。癌旁组织与癌组织的P-gP、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP-16）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCVF）、甲氨蝶呤（MTX）中,ADM、VP-16、HCVF耐药组P-gP、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论：胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gP、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素．     

非小细胞肺癌中神经内分泌分化和多药耐药性的关系研究

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中神经内分泌(NE)分化与多药耐药(MDR)的相关性。方法:采用链霉亲和素过氧化酶连接(SP)免疫组化法检测113例NSCLC中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYN)和嗜铬素A(CgA)的表达,采用原位分子杂交对同一病例中多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因mRNA的表达进行检测,并对相关数据进行统计学处理。结果:①NSCLC中NSE、SYN、CgA的阳性率分别为53.1%,26.6%和6.2%。至少有2种NE标记物表达者有24例(21.2%),其表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05);②MDR1和MRPmRNA在NSCLC组织中的阳性表达率分别为51.3%,80.5%,二者表达与肿瘤组织类型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期等无关,二者在NSCLC中的表达存在明显相关(P<0.01);③2种MDR相关基因mRNA在具有NE分化的NSCLC中的表达均较不伴NE分化者为低(P<0.05)。结论:NE分化可能与NSCLC多药耐药性的产生有密切关系。     

肺鳞癌、腺癌中多药耐药基因相关蛋白的表达及意义

目的 检测P-糖蛋白（P-gp）、肺癌耐药蛋白（LRP）、多药耐药相关蛋白（MRP）在肺鳞癌、腺癌组织中的表达，以探讨其临床意义。方法 采用S-P免疫组织化学方法，检测105例术前未做化疗的肺鳞癌、腺癌组织中P-gp，LRP，MRP的表达水平。结果 P-gp在肺鳞癌，腺癌组织中表达阳性率为腺癌78．26％，鳞癌47．46％（P〈0．05）；LRP表达阳性率为腺癌89．13％，鳞癌44．07％（P〈0．01）；MRP在不同癌组织中的表达，差异无显著性（P〉0．05）。在腺癌、鳞癌组织中同时有两种或两种以上耐药基因产物表达阳性率分别为：89．13％，49．15％，两种类型问比较差异有显著性（P〈0．01）。结论 肺鳞癌，腺癌存在不同程度的耐药性，检测P-gp，LRP，MRP的协同表达对于指导临床化疗方案的实施有重要意义。     

携反义mrp和mdr1双耐药基因的重组腺相关病毒载体的构建与鉴定

目的构建携带反义多药耐药相关蛋白基因(m rp)和反义多药耐药基因(m dr1)双耐药基因的重组腺相关病毒载体,以用于逆转肝细胞癌(HCC)多药耐药(M DR)的研究。方法将m rp基因cDNA 5′端500 bp的基因片段与m dr1基因cDNA 5′端600 bp的基因片段,用基因片段重叠法连接成为新的基因片段(m rp m dr1),并反向克隆到重组腺相关病毒载体系统(AAV H e lper-F ree System)表达质粒pAAV-IRES-hrGFP的多克隆位点,构建出重组表达质粒pAAV-IRES-hrGFP-(m rp m dr1)AS;再将pAAV-IRES-hrGFP-(m rp m dr1)AS与AAV H e lper-F ree System中的控制质粒pAAV-RC和辅助质粒pH e lper用脂质体转染法共转染293细胞,生成新型重组腺相关病毒载体rAAV 2-(m rp m dr1)AS。结果成功构建并包装出新型重组腺相关病毒载体rAAV 2-(m rp m dr1)AS,病毒滴度达2.5×108efu/m l。结论构建的rAAV 2-(m rp m dr1)AS可望能将反义m rp和m dr1基因片段导入HCC耐药细胞株。