食管癌的诊断及治疗：食管早癌的诊断技术及治疗原则

近年来,消化内镜技术的发展使食管早癌的诊断率明显提高,同时也促进了胃镜下黏膜切除术（EMR）和胃镜下黏膜剥离术（ESD）产生和发展.     

组蛋白去乙酰化酶4和血管内皮生长因子受体-1对肝癌细胞株HepG2侵袭黏附的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶4(histone deacetylase 4,HDAC4)和血管内皮生长因子受体-1(vascular endo-thelial growth factor receptor-1,VEGFR-1)在肝癌细胞株HepG2中的表达,观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histonedeacetylase inhibitors,HDACI)苯丁酸钠(sodium phenylbutyrate,SPB)作用于肝癌细胞株HepG2后,HDAC4、VEG-FR-1之间的变化及对肝癌细胞株HepG2侵袭、黏附作用的影响。方法体外培养肝癌细胞株HepG2,分为对照组、实验组,对照组常规培养,实验组加入苯丁酸钠。分别以免疫细胞化学及Western-blotting检测HDAC4、VEG-FR-1蛋白的表达及蛋白表达变化;应用Transwell小室观察SPB对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响,应用MTT方法测定SPB对HepG2黏附作用的影响。结果体外培养人肝癌细胞株HepG2,免疫细胞化学试验及Western-blot-ting显示HepG2细胞株表达HDAC4和VEGFR-1;Western-blotting显示,实验组SPB抑制HDAC4、VEGFR-1的表达,并呈现时间及剂量依赖关系;应用Transwell小室观察经SPB作用后,实验组、对照组细胞的穿膜细胞数分别为161.80±46.80、329.20±55.99,抑制率达到50.85%,有统计学意义(P<0.01);MTT方法测定黏附作用显示SPB实验组细胞的黏附率较对照组明显下降(P<0.01)。结论 HDAC4、VEGFR-1在肝癌细胞株HepG2中表达,SPB对HDAC4、VEGFR-1的表达有抑制作用;并对HepG2细胞株有抑制其侵袭及黏附的作用。     

颈肩部疼痛胸闷憋气转氨酶极度升高

1 病例简介 患者，女，20岁，学生。主诉“间断头晕5d，颈背部疼痛伴胸闷、憋气3d”。5d前患者打30min篮球后感到头晕，为间断性，口服藿香正气片4片后不缓解；第3天右肩部出现疼痛，后左肩部及颈部相继出现疼痛，伴轻度乏力、出汗，无发热、恶心、呕吐，无咳嗽、咳痰等。在当地诊所服去痛片6片，疼痛未缓解。第4天颈部出现剧烈的疼痛，伴胸闷、憋气、双上肢轻度酸痛，尿呈酱油色。在当地医院检查示：丙氨酸氨基转移酶（ALT）372U／L、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）2140U／L、总胆红素（TBiL）5．12mmol／L，血脂生化指标正常；尿常规：隐血（＋＋＋）、蛋白（＋＋＋）；     

组蛋白去乙酰化酶4在人肝癌细胞Bel7402中的表达及其意义

目的：研究组蛋白去乙酰化酶4（histone deacetyase4，HDAC4）在人肝癌细胞株Bel-7402中的表达，及其对Bel-7402细胞增殖和分化的调控作用。方法：培养Bel-7402细胞，以组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠（sodium phenylbutyrate，SPB）作用于Bel-7402，RT—PCR检测用药前后HDAC4 mRNA的表达水平，倒置相差显微镜观察细胞形态改变，MTT比色法观察SPB对Bel-7402生长的抑制作用，流式细胞术分析细胞周期，免疫组化法观察Bel-7402细胞P27蛋白的表达水平。结果：SPB处理后Bel-7402中HDAC4mRNA的表达水平降低（0．88±0．13，0．12±0．04，P〈0．05）；SPB处理后Bel-7402细胞生长受到明显抑制，且与SPB剂量和作用时间相关；同时细胞形态出现成纤维细胞样改变；细胞周期阻滞于G。期[（50．6±4．0）％，（78．8±3．6）％，P〈0．05）]；P27蛋白表达水平增强（23±11，61±7，P〈0．05）。结论：SPB降低HDAC4在人肝癌细胞中的表达，从而诱导部分人肝癌细胞分化，该作用与P27蛋白水平变化有关。     

自分泌一氧化氮在氟尿嘧啶诱导人肝癌细胞凋亡中的作用研究

目的 :观察肝细胞Bel74 0 2自分泌一氧化氮 (NO)在 5 -氟尿嘧啶 (5 FU)诱导人肝癌细胞凋亡过程中的作用 ,进一步揭示 5 FU的作用机理 ,同时寻找提高 5 FU的临床疗效的辅剂。方法 :人肝癌细胞Bel74 0 2按常规条件培养于含 10 %小牛血清的无L 精氨酸 (L Arg)的DMEM (dulbecco’smodifiedeagle’smedium)培养液中。在 5 FU作用下 ,采用免疫组化法观察诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)的表达情况 ,并在其底物L Arg存在的前提下 ,采用酶法测定硝酸盐 /亚硝酸盐 ,反映NO的生成 ,并证明其作用。用电镜观察凋亡细胞的形态 ,流式细胞仪进行凋亡细胞的定量。用L Arg的竞争性拮抗剂L NAME(Nω nitro l argininemethylester)对研究结果进行验证。应用病理彩色图文分析系统对免疫组化结果进行光密度定量分析。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果 :在 5 FU的作用下 ,iNOS表达增强 ,5 FU组 (0 1687± 0 0 1968) ,对照组 (0 10 4 9± 0 0 12 66) ,P <0 0 5 ,在其底物L Arg存在的前提下 ,内源性NO的浓度为 (73 0± 10 2 ) μmol/L(P <0 0 5 ) ,有显著性提高 ;人肝癌Bel74 0 2细胞株的凋亡率显著性增高为 (17 85± 0 78) % ,细胞坏死率和残渣率显著减少分别为 (32 99± 0 83) %、(3 18± 1 0 1) %。L NAME     

5-氟尿嘧啶联合L-精氨酸治疗裸鼠人肝癌移植瘤的研究

目的观察5氟尿嘧啶联合L精氨酸对裸鼠人肝癌移植瘤的作用并探讨其作用机制。方法采用BEL7402细胞株建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,分别给裸鼠腹腔注射生理盐水,5氟尿嘧啶,5氟尿嘧啶+L精氨酸,观察各组药物对肿瘤的抑制作用,病理学观察移植瘤的坏死程度和范围,免疫组化测定移植瘤组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。化学比色法检测诱导型一氧化氮合酶的活性。硝酸还原酶法检测瘤组织内的一氧化氮的浓度,统计分析采用SPSS10.0软件进行onewayANOVA,Bonferroni,KruskalWallisH检验。结果5氟尿嘧啶联合L精氨酸能明显增加对肿瘤生长的抑制作用,病理显示肿瘤的坏死范围增大,iNOS表达和活性增强,NO生成增加。结论5氟尿嘧啶联合L精氨酸能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能与诱导iNOS表达和活性增强,NO生成增加有关。     

紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性调节的关系

目的;研究紫杉醇对人SGC－7901胃癌细胞的诱导凋亡作用及对端粒酶活性调节的关系。方法：0．001－1μM的紫杉醇处理SGC－7901细胞后,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率,甲苯胺蓝染色后光镜下观察细胞凋亡形态变化,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及bcl-2水平,半定量TRAP－银染法测定端粒酶活性变化。结果：0．01－1μM的紫杉醇对胃癌细胞均有明显抑制作用。抑制作用首先表现为G2／M期阻滞,继而出现细胞凋亡,且呈时间依赖性及剂量依赖性。对端粒酶活性的同步检测结果显示,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且抑制作用逐渐增强,24小时酶活性开始受抑制,72小时变为阴性。在这一过程中,bcl-2表达水平下降。结论：紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一,bcl-2参与了紫杉醇诱导的胃癌细胞凋亡过程中端粒酶活性的调控。     

电子超声内镜在食管黏膜层及黏膜下病变诊疗中的作用

目的探讨电子超声内镜(endoscopic ultrasonography,EUS)结合内镜下黏膜切除术(endoscopic mucosalresection,EMR)、内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)、内镜黏膜下挖除术(endoscopicsubmucosal excavation,ESE)及外科手术在食管黏膜层及黏膜下病变诊断和治疗中的作用。方法对2010年1月至2012年1月常规电子内镜检查发现食管黏膜层及黏膜下病变行EUS检查患者118例共120处病灶。将EUS拟诊诊断与内镜下手术及外科手术术后病理结果(包括病理类型、起源)进行统计分析,分析其符合率。结果黏膜层病变术后病理与EUS拟诊符合率为100%(16/16),分层诊断准确率为93.75%(15/16);黏膜下病变术后病理与EUS拟诊符合率为88.5%(92/104),分层诊断准确率为97.1%(101/104);本研究中,所有病变术后病理与EUS拟诊的总体符合率为90%(108/120),总体分层诊断准确率为96.7%(116/120)。结论 EUS能准确地显示食管各层结构、判断肿瘤的起源,较准确地估计肿瘤的性质。对于食管肿瘤治疗方式的选择、扩大内镜下手术治疗适应证、指导外科手术治疗,均能起到较好的作用,应在治疗前常规应用。对黏膜下病变,提倡在EUS的指导下进行早期干预。     

原发性肝细胞癌中iNOS与p16、Bax的表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨在原发性肝细胞癌（HCC）中一氧化氮化酶（iNOS）的表达对p16、Bax表达的影响凋亡的关系。方法采用免疫组化的方法对HBsAg均阳性的49例HCC患者的iNOS、p16、Bax表达进行定位和半定量分析。采用TUNEL法测检测细胞凋亡。结果iNOS和Bax以棕黄色颗粒着色于细胞质和（或）细胞膜中，细胞核阴性，间质细胞着色不明显。p16以棕黄色着色于细胞核中，细胞中偶见。细胞凋亡细胞核着色，细胞阴性。p16、Bax的表达及细胞的凋亡与iNOS的表达有关。结论iNOS表达可诱导抑癌基因p16、Bax的表达和细胞凋亡的发生，从而影响HCC的分化，故在诱导HCC中iNOS的表达，有望提高肝细胞癌的临床治疗效果。