葡萄球菌耐消毒剂基因qacA／B检测及临床意义

目的 了解临床分离的葡萄球菌mecA基因及耐消毒剂基因qacA/B的存在状况.方法 临床分离的40株葡萄球菌,分别用头孢西丁(30 μg)筛查法和聚合酶链反应(PCR)法检测mecA基因,同时采用PCR法检测其耐消毒剂基因qacA/B.结果 40株葡萄球菌中36株mecA基因阳性,占90.0%(36/40);11株检出qacA/B基因者均为mecA阳性葡萄球菌,其中10株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),1株为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),qacA/B阳性率为27.5%(11/40).结论 含qacA/B基因的葡萄球菌全部为mecA基因阳性,提示对临床常用消毒剂耐药的金黄色葡萄球菌同时也对甲氧西林耐药.因此检测葡萄球菌耐消毒剂基因,对合理选用消毒剂,控制葡萄球菌感染传播具有临床意义.     

新生儿感染耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因的研究

为了解新生儿败血症中分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）对消毒剂和抗菌药物的耐药基因状况,我们收集了40株新生儿血液感染的MRCNS进行了β内酰胺类耐药相关基因mecA、红霉素耐药相关基因ermA/B/C、消毒剂耐药相关基因qacA/B等基因检测.     

聚合酶链反应检测mecA和mecI及其对葡萄球菌甲氧西林耐药的影响

目的了解葡萄球菌甲氧西林耐药基因mecA和调节基因mecR中的抑制基因mecI在葡萄球菌中的分布,探讨mecA、mecI和β-内酰胺酶对甲氧西林耐药性的影响。方法琼脂稀释法测定158株葡萄球菌苯唑西林MIC;聚合酶链反应检测mecA和mecI;用内切酶TrulⅠ进行mecI酶切分型。结果 158株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌(SA)66株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)92株,葡萄球菌对苯唑西林的总耐药率达44.3%(70/158)。158株葡萄球菌中,检出mecA阳性70株,其中SA 8株,CNS 62株。70株mecA阳性葡萄球菌中,检出mecI阳性12株,其中SA7株,CNS 5株;88株mecA阴性葡萄球菌中未检出mecI。对mecA阴性、苯唑西林MIC≥4μg/mL的菌株进行抑制实验后,再测定苯唑西林MIC,抑制后MIC下降8倍以上。结论耐甲氧西林葡萄球菌以mecA为其主要的甲氧西林耐药决定子;β-内酰胺酶和mecI基因对葡萄球菌甲氧西林耐药有一定的影响。     

应用双重PCR技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 应用敏感、快速的双重聚合酶链反应（PCR）技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法 临床分离得葡萄球菌,挑取单个菌落,用碱煮沸法制备DNA模板,进行双重PCR反应,以扩增femA基因和mecA基因。结果 100株葡萄球菌中,38株凝固酶阳性的葡萄球菌,其femA基因均为阳性,而mecA基因阳性者为30株,占78．9％（30,38）,mecA基因阴性8株,占21．1％（8／38）。62株凝固酶阴性的葡萄球菌femA基因均为阴性,mecA基因阳性48株,占77．4％（48／62）,mecA基因阴性14株,占22．6％（14／62）。结论 应用双重PCR技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是一种敏感敏感、快速、特异的实验诊断方法,可防止临界MRSA漏检为MSSA。     

新生儿血培养耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定及耐药性分析

为了解我院新生儿耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）血液感染及耐药情况，现对我院新生儿败血症血培养分离到的113株MRCNS的种类及耐药性作回顾性分析，报告如下。     

多重PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的建立一种直接、快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重PCR方法。方法设计3对引物,在同一反应管中同时扩增检测mecA、femA和IS431基因,扩增产物经凝胶成像系统分析。结果9株MRSA菌株mecA、fe-mA和IS431均阳性,5株凝固酶阴性的耐甲氧西林的葡萄球菌mecA和IS431阳性,7株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌femA和IS431阳性,11株甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌IS431阳性,而大肠杆菌、肺炎链球菌等非葡萄球菌mecA、femA和IS431均阴性;当MRSA茵浓度达102CFU／ml时就可检出。结论通过同时扩增mecA、femA和IS431基因的多重PCR技术,能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌。     

头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林葡萄球菌

目的:评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的方法.方法:采用2004年NCCLS推荐的30μg/片头孢西丁纸片法检测MRS,以PCR方法检测mecA基因为"金标准".结果:在60株临床分离的葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌36株,凝固酶阴性葡萄球菌24株.用PCR方法检测mecA基因阳性43株(金黄色葡萄球菌25株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),阴性17株(金黄色葡萄球菌11株,凝固酶阴性葡萄球菌6株);用头孢西丁纸片法筛查MRS耐药(+)41株(金黄色葡萄球菌23株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),敏感(-)19株(金黄色葡萄球菌13株,凝固酶阴性葡萄球菌6株).以PCR检测mecA基因法为"金标准",头孢西丁纸片法的敏感度和特异度分别为95.3%(41/43)、100%(17/17).准确度为96.7%(58/60).结论:头孢西丁纸片法筛查MRS与mecA基因检测法具有很好的一致性,该方法适合在临床微生物实验室中推广使用.     

新生儿血培养凝固酶阴性葡萄球菌菌种分布及耐药监测

目的探讨凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)致新生儿败血症的病原学及耐药性现状,以指导临床合理选择有效的抗生素。方法从288例新生儿血培养阳性瓶中分离出204株CNS,共分离出11个菌种。应用纸片扩散法测定了CNS对青霉素等12种抗生素的耐药性。结果共分离出细菌288株,阳性率为14%(288/2057),CNS 204株,占总分离菌株的70.8%,其中溶血葡萄球菌87株,占42.6%;表皮葡萄球菌61株,占29.9%;腐生葡萄球菌34株,占16.7%;其他葡萄球菌22株,占10.8%。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)176株,分离率为86.3%;MRCNS药敏结果显示多重耐药。结论 CNS已成为新生儿血液感染居第1位的病原菌,MRCNS检出率高且呈多重耐药。万古霉素是目前治疗耐甲氧西林葡萄球菌全身感染最敏感的药物,但不能随便使用,临床医生应根据CNS感染的种类和药敏结果合理使用抗生素。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用评价

目的用PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为参比方法,评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的临床应用价值。方法临床分离的163株葡萄球菌,分别用头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法、PCR法检测mecA基因,以PCR扩增法检测mecA基因作为参比方法进行比较。结果163株临床分离的葡萄球菌经PCR法检测mecA基因,阳性率为81.0%,其中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为74.1%和83.8%。头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法用于检测MRSA与PCR法检测mecA基因有很好的一致性,其敏感性和特异性均为100.0%,而对于凝固酶阴性葡萄球菌,头孢西丁纸片扩散法比苯唑西林纸片扩散法检测MRS的敏感性和特异性高,敏感性分别为100.0%和94.3%,特异性分别为96.0%和88.0%。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度,但对于mecA基因阴性的凝固酶阴性葡萄球菌,用头孢西丁纸片法检测,约有5%菌株要误报为MRCNS。由于头孢西丁纸片扩散法操作简单,较苯唑西林纸片扩散法检出MRS的敏感度和特异性高,结果与PCR法检测mecA基因有很好的相关性,不需特殊仪器设备,可在临床微生物实验室常规开展。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁（FOX）纸片扩散法（K-B）检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的139株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,并与苯唑西林（OXA）纸片扩散法、mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的109株CNS对FOX显示耐药,而对OXA则只有97株显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致,苯唑西林纸片扩散法则存在一定的差异,临床实验室应用FOX取代OXA来检测MRCNS。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁（FOX）纸片扩散法（K-B）检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的139株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,并与苯唑西林（OXA）纸片扩散法、mecA基因检测进行比较。结果mecA基因阳性的109株CNS对FOX显示耐药,而对OXA则只有97株显示耐药。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致,苯唑西林纸片扩散法则存在一定的差异,临床实验室应用FOX取代OXA来检测MRCNS。     

病原生物学检验与临床

889份痰标本涂片与培养结果分析；分子水平快速诊断败血症致病菌的研究；头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；基因多态性分析在凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定中的应用；表皮葡萄球菌携带甲氧西林等五类抗生素耐药基因分析[编者按]     

医院感染MRSA的mecA基因和耐消毒剂基因qacA的流行病学研究

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因和耐消毒剂基因qacA携带情况。方法采用全自动微生物分析系统VITEK2-COMPACT及配套鉴定卡、药敏卡对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验．并用WHONET5．6软件进行数据统计分析;用PCR扩增mecA基因和qacA基因,并对阳性基因进行测序分析。结果2009年1月至12月共分离金黄色葡萄球菌260株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）140株f53．8％1．对其中50株进行mecA基因和qacA基因检测,发现mecA基因阳性50株,阳性率为100％。未检出qacA基因。结论50株MRSA菌株均携带meCA基因,均未检测到耐消毒剂基风ⅡacA。     

一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的推荐美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)关于6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板(以下简称盐平板法)检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共894株。结果(1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为84．2％(538／639)，盐平板法的检出率为86．4％(552／639)，而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率2种方法分别为82．0(209／255)、90．6％(231／255)；(2)有14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和22株纸片法检测为甲氧西林敏感(MS)的凝固酶阴性葡萄球菌，盐平板检测均为甲氧西林耐药(MR)，经聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因结果均为阳性，显示PCR检测与盐平板检测结果一致；(3)随机取上述纸片法和盐平板2种方法检测均为MS者9株、MR者15株，同时进行mecA基因的PCR检测，结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的6ug／ml苯唑西林 4％NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测，以供临床诊断和选用抗生素。     

一种简单的筛选耐甲氧西林葡萄球菌方法

目的　推荐美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)关于 6 μg/ml苯唑西林 +4%NaCl盐平板 (以下简称盐平板法 )检测甲氧西林耐药葡萄球菌。方法　使用NCCLS推荐的盐平板法检测华山医院临床分离的葡萄球菌共 894株。结果　 (1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)苯唑西林纸片法的检出率为 84 .2 % (5 38/6 39) ,盐平板法的检出率为 86 .4 % (5 5 2 / 6 39) ,而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)的检出率 2种方法分别为 82 .0 (2 0 9/ 2 5 5 )、90 .6 % (2 31/ 2 5 5 ) ;(2 )有 14株纸片法测定为中介的金黄色葡萄球菌和 2 2株纸片法检测为甲氧西林敏感 (MS)的凝固酶阴性葡萄球菌 ,盐平板检测均为甲氧西林耐药 (MR) ,经聚合酶链反应 (PCR)检测mecA基因结果均为阳性 ,显示PCR检测与盐平板检测结果一致 ;(3)随机取上述纸片法和盐平板 2种方法检测均为MS者 9株、MR者 15株 ,同时进行mecA基因的PCR检测 ,结果显示全部与盐平板法和苯唑西林纸片法检测结果符合。结论　在临床微生物实验室应该采用NCCLS推荐的 6 μg/ml苯唑西林 +4%NaCl盐平板对MRSA和MRCNS进行检测 ,以供临床诊断和选用抗生素。     

新生儿耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌败血症120例分析

目的探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)在新生儿败血症中的分布及耐药特点,为临床治疗提供参考。方法应用全自动血培养系统(BACTEC-9120),VITEK-AMS细菌鉴定仪,对120例MRCNS感染新生儿败血症血培养进行细菌鉴定,采用K-B纸片扩散法测定MRCNS对青霉素等18种抗生素的耐药性。结果120株MRCNS中表皮葡萄球菌56株占46.7%,溶血葡萄球菌30株占25%,人葡萄球菌12株占10%,沃氏葡萄球菌9株占7.5%,其它葡萄球菌13株占10.8%。药敏结果显示MRCNS多重耐药。结论凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)已成为新生儿血培养的第一检出菌,主要为表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌,MRCNS占主导地位,成为新生儿院内感染的主要致病菌,药敏显示MRCNS为多重耐药,治疗可选用糖肽类和碳青霉烯类。MRCNS所致的院内感染值得引起关注。     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌药敏和耐药基因检测

为了解鄂尔多斯市及周边地区耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)生物学特征 ,我们对 55株MRCNS菌做了药敏和β内酰胺类药物耐药基因TEM、mecA ;糖肽类药物耐药基因vanA、vanB、vanC检测 ,报道如下。一、材料和方法1.菌株来源 :55株MRCNS菌均来自我院感染者的多种标本。其中伤口分泌物分离到 2 1株 ,尿液 12株 ,血液 1株 ,痰液 10株 ,前列腺液 9株 ,脑脊液 2株。2 .试剂 :血琼脂培养基购自天津金章公司 ,mueller hinton(MH)琼脂采用英国OXOID公司产品。苯唑西林及其他药敏纸片购自北京天坛药品鉴定所 ,血浆凝固酶试剂(兔血浆 …     

门诊男性泌尿生殖道葡萄球菌感染的临床监测分析

目的了解门诊男性泌尿道凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌菌种分布及蓟敏情况。方法回顾2004.11～2006.11门诊男性泌尿道分离的葡萄球菌菌种鉴定和K-B法药敏实验结果。结果耐甲氧西林葡萄球曲(MRS)为39株(28.5%),凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)109株占(79.6%)金黄色葡萄球菌(SAU)28株(20.4%),耐甲氧西林葡萄球菌存在严重交叉耐药。耐甲氧西林葡萄球菌和非耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素100%敏感,对利福平和呋喃妥因敏感率分别为92.3～95.9%,87.2～92.9%。结论凝固酶阴性的葡萄球菌为主要致病菌,万古霉素,利福平和呋喃妥因为治疗泌尿道葡萄球菌感染的首选药物。     

新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症47例

目的 :了解凝固酶阴性葡萄球菌 (CNS)流行状况 ,探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)新生儿败血症的防治对策。方法 :按稀释法药物敏感试验 (MIC法 )测定细菌对抗菌药的敏感度。结果 :4 7例患儿中 39例细菌侵入途径与呼吸道、消化道、皮肤和脐部感染有关。 19例早发型与 2 8例晚发型新生儿败血症异常分娩发生率比较 χ2 =4 .6 4 5 ,P <0 .0 5。血培养获 5 1株CNS ,其中 34株耐甲氧西林。经广谱青霉素类、头孢菌素类、万古霉素治疗 ,4 5例治愈或好转。结论 :加强围生期与哺乳期保健是预防和减少新生儿败血症的重要措施。β内酰胺类抗生素可用于治疗CNS新生儿败血症 ,对甲氧西林耐药菌株引起的感染可采用万古霉素     

西安地区血培养标本分离的MRSA mecA与qacA/B基因检测

目的了解西安地区血培养标本中分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mecA和qacA/B基因携带情况,以便推测其抗药性。方法采用细菌培养鉴定技术和基因扩增方法,对收集2008年1月-2010年2月期间西安地区多家住院与门诊患者血培养标本进行了分离和检测。结果在2年内从西安地区3所医院血培养标本中分离鉴定出56株MRSA,mecA基因均为阳性,携带率为100%;有7株MRSA检出qacA/B基因阳性,携带率为12.5%。结论西安地区部分医院血培养标本分离的MRSA检测出qacA/B基因阳性率为12.5%,携带率较低。