热敏灸对脑缺血再灌注损伤大鼠SOD、MDA的影响

目的 观察热敏灸对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠超氧化物歧化酶 （SOD） 的活性、 表达和丙二醛（MDA） 含量的影响， 以阐明热敏灸减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 雄性SD大鼠36只， 分为假手术组、 模型组、 艾灸组和热敏灸组。采用线栓法闭塞大脑中动脉2 h后进行再灌注， 制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型； 比色法测定SOD活性和MDA含量； Western blot技术检测大鼠大脑皮质SOD2蛋白的表达。结果 热敏灸组大鼠血清和大脑皮质SOD活性 （22.78±1.31） U/mL、（4 909.6±1 345.6） U/g均高于模型组 （20.17±1.12） U/mL、（2 602.0±1 515.5） U/g， 血清和大脑皮质MDA含量 （3.78±2.00） μmol/L、（1 226.5±38.4） nmol/g均低于模型组 （16.82±6.70） μmol/L、（1 905.6±478.6） nmol/g； 大脑皮质SOD2蛋白表达量 （0.974±0.166） 高于模型组的 （0.702±0.040）。结论 热敏灸具有减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用， 提高SOD活性和表达、 降低氧自由基含量可能是其作用机制之一。     

吗啡对大鼠脑缺血再灌注后脑含水量及S100β的影响

目的：探讨吗啡预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑含水量及脑脊液S100β的影响。方法：Pusinelli方法建立四动脉阻断全脑缺血模型：成年雄性大鼠36只,随机分为假手术组（n=12）、脑缺血再灌注组（n=12）、吗啡预处理组（n=12）。脑缺血8min,再灌注48h后,每组取6只大鼠断头取脑制作石蜡切片,HE染色观察海马区组织病理学改变;另取剩余6只大鼠于枕骨大孔抽脑脊液后立即断头取脑,干湿称重法测量脑含水量,酶联免疫吸附法检测脑脊液中S100β蛋白含量。结果：吗啡预处理组细胞受损的病理学改变显著轻于脑缺血再灌注组。吗啡预处理组脑含水量及S100β蛋白含量明显低于脑缺血再灌注组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：吗啡预处理可减轻缺血性脑损伤,提高脑缺血耐受性。     

CA-074Me对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨CA-074Me对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用。方法将90只SD大鼠随机分为假手术组(n=10),脑缺血再灌注模型组(n=40),CA-074Me治疗组(n=40)。线栓法制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型,TTC染色检测脑梗死体积,TUNEL法原位检测神经细胞凋亡。结果模型组大鼠脑缺血再灌注后1 h后TTC染色即可显示梗死灶,同时神经细胞凋亡计数明显增多(P<0.05),CA-074Me 治疗可明显减少大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积(P<0.05),及其神经细胞凋亡计数(P<0.05)。结论 CA-074Me 治疗能减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

抑肽酶对脑缺血再灌注大鼠脑组织CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表达的影响

目的:探讨抑肽酶在细胞免疫应答的干预下对脑缺血再灌注后继发性脑损伤的保护作用。方法:105只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑肽酶组(n=35),采用大鼠大脑中动脉闭塞法制作局灶性脑缺血再灌注模型。抑肽酶组在大鼠脑缺血前24h及再灌注即刻、24h、4d、6d、8d、10d、12d、14d分别尾静脉给予抑肽酶,其余组给予生理盐水。应用免疫组织化学方法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间段CD4+、CD8+T淋巴细胞的浸润情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠在缺血再灌注损伤后各时间点脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数均明显增加,10d达高峰;与模型组比较,抑肽酶组大鼠脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数在缺血再灌注损伤后各时间点均更低(P<0.05),8d达高峰。结论:抑肽酶可能通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞在缺血再灌注损伤后脑组织内的浸润而减少细胞免疫应答介导的神经元凋亡,从而减轻脑组织继发性损伤。     

艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和 CD11b表达的影响

目的 观察艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和CD11b表达的影响。方法 出生7 d 新生ICR小鼠,随机分为3组：假手术组（n=20）、模型组（n=24）和艾灸组（n=20）。假手术组只做颈部手术,不闭合颈 总动脉,不缺氧;模型组行颈总动脉闭合术,并给予缺氧处理;艾灸组在模型组的基础上给予艾灸治疗,每日1次,35 min/次。采用TTC染色检测小鼠脑梗死的面积;HE染色观察小鼠脑组织形态结构和炎症细胞浸润;组织免疫荧光染 色检测脑组织CD11b表达。结果 与假手术组相比,模型组小鼠的脑梗死面积增大,患侧脑组织大量细胞坏死脱 落,并伴有大量炎症细胞浸润,CD11b阳性细胞数明显增多;与模型组相比,艾灸组小鼠的脑梗死面积缩小,患侧脑组 织细胞排列较致密、整齐,炎症细胞较少,CD11b阳性细胞数明显减少。结论 艾灸具有减轻新生小鼠缺氧缺血性脑 损伤的作用,这可能与其减少脑组织小胶质细胞浸润、减轻炎症反应有关。     

丙泊酚对脑缺血-再灌注大鼠认知功能障碍与皮质TrkB/Akt通路的影响

目的研究丙泊酚对脑缺血 再灌注大鼠认知功能障碍的影响及其机制。方法利用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血 再灌注损伤致认知功能障碍模型,采用避暗实验和Y型迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,免疫组织化学法及Western Blot观察丙泊酚对皮质神经生长因子受体TrkB/Akt通路的影响。结果模型组避暗实验潜伏期［（121.98±15.56）s］较假手术组［（210.78±26.71）s］明显缩短（P＜0.01）,Y型迷宫实验累计电击次数［（119.36±13.15）］较假手术组明显增加［（42.78±5.22）］（P＜0.01）。丙泊酚各剂量组认知功能障碍相关指标均明显改善;丙泊酚能诱导皮质TrkB表达上调及Akt活化。结论丙泊酚能改善脑缺血 再灌注大鼠认知功能障碍,其作用机制可能与通过活化TrkB/Akt通路有关。     

抑肽酶对脑缺血再灌注大鼠c-Jun氨基末端激酶信号转导通路的影响

目的探讨抑肽酶对脑缺血再灌注大鼠c—Jun氨基末端激酶（c-Jun NH2 terminal kinases,JNK）信号转导通路的影响。方法将30只健康雄性SD大鼠完全随机分为假手术组、模型组、抑肽酶组,每组10只。采用4-VO法建立大鼠全脑缺血模型,在预定时间行灌注、固定、取脑、石蜡包埋切片;免疫组化法检测p-JNK的表达,DNA断端末端标记法检测CA1区凋亡细胞。结果p-JNK在模型组大鼠海马CA1区大量表达（239．17±2．74）,抑肽酶组p-JNK则无明显表达（176．53±O．36）,2组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;抑肽酶组细胞凋亡指数（27．06±3．16）明显低于模型组（62．13±1．04）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论JNK信号通路在大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用,抑肽酶能够抑制JNK信号转导通路的激活,对脑缺血再灌注损伤导致的细胞损伤起到保护作用。     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤脑组织ERK信号转导通路影响的研究

目的探讨DADLE对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK信号转导通路的影响及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性SD大鼠50只（1800220g）随机分为5组：假手术组（Sham,n=10）：只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组（I／R,n=10）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后再灌注120min;DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A,n=10）、DADLE3mg／kg组（B,n=10）和DADLE5mg／kg组（C,n=10）：在FR组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。HE染色观察各组海马CAl区神经元病理变化情况,westernblot测其脑组织内非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P-ERK）的表达状况。结果Sham组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P〈0．05）;DADLE处理组与I／R组相比,ERK、P-ERK蛋白的表达水平上调（P〈0．05）,其中B组、C组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著高于A组（P〈0．05）,而B组、C组之间ERK、P-ERK表达则无显著性差异（P〉0．05）。结论在急性大鼠全脑缺血再灌注损伤中,ERK信号转导通路的活性明显上调,DADLE可以通过增加ERK的活化而达到降低神经元细胞的损伤,发挥脑保护的作用;同时,该作用呈剂量相关性和有“天花板效应”。     

洋川芎内酯A对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的：探讨洋川芎内酯A对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：将60只雄性健康SD大鼠随机分为4组,分别为：假手术组（Sham,n=15）,模型组（CTL,n=15）,洋川芎内酯A低剂量组（ASE-L,n=15）和洋川芎内酯A高剂量组（ASE-H,n=15）,大鼠脑缺血90min后恢复血流,于大脑中动脉阻断（MCAO）后24h将大鼠处死,对各组脑组织中IL-1β、IL-6、MDA水平以及SOD活性进行测定,并对各组的缺血侧脑水肿指数、脑梗死体积以及神经功能评分进行比较。结果：与CTL组比较,给药组大鼠的脑水肿指数、脑梗死体积以及神经功能评分明显改善,高剂量组（ASE-H）明显优于低剂量组（ASE-L）,差异均具有统计学意义（P<0.05）;同时,给药组大鼠脑组织中IL-1β、IL-6、MDA水平明显降低,SOD活性明显提高,差异也具有统计学意义（P<0.05）。结论：围术期采用洋川芎内酯A预处理可明显减轻脑组织的氧化应激反应,抑制促炎因子释放,对于脑缺血再灌注引起的中枢神经系统损伤具有明显保护作用。     

苯海索对局灶性脑缺血-再灌注大鼠大脑皮质Ca2+含量、海马c-fos、c-sis基因表达的影响

目的观察苯海索对大鼠局灶脑缺血-再灌注损伤后大脑皮质Ca2 含量、海马c-fos、c-sis基因表达的影响.方法选用高血压大鼠制成大脑中动脉闭塞再灌注模型,大鼠于缺血1 h再灌注2 h断头取脑,用原位杂交技术观察海马c-fos、c-sis基因表达及荧光法测量大脑皮质钙离子的变化.结果苯海索可显著降低模型大鼠大脑皮质Ca2 含量,海马c-fos、c-sis基因表达.结论苯海索对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显保护作用.     

糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织脑源性神经生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的表达及意义

目的探讨糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织脑源性神经生长因子(brain-drived neurotropic factor,BDNF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达及意义。方法41只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注组(DIR),用链脲佐菌素腹腔注射和线栓法分别诱发大鼠糖尿病和复制大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测再灌注6h和24h脑组织BDNF和bFGF蛋白表达。结果大鼠脑缺血再灌注后BDNF主要在梗死区表达,bFGF主要在梗死灶周边区表达,NIR组BDNF和bFGF的表达在再灌注6h组和24h组均较假手术组和正常对照组明显增加(P<0.05);DIR组BDNF和bFGF的表达在再灌注6h组和24h组较NIR组明显下降(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注后脑组织BDNF和bFGF表达增加可能是内源性保护机制;糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织BDNF和bFGF表达降低可能是糖尿病加重缺血损伤的机制之一。     

The apparent hyperalgesic effect of a serotonin antagonist in the tail flick test is mainly due to increased tail skin temperature

It has been suggested that reduced activity in raphe-spinal serotonergic systems induces hyperalgesia. In rats, the serotonin antagonist metergoline (0.5 mg/kg intraperitoneally) reduced tail flick latency by 0.92 sec (p less than 0.001) and increased tail skin temperature by 2.4 degrees C (p less than 0.001) when measured 50 min after injection. Multiple regression analysis with tail flick latency as dependent variable and tail skin temperature and metergoline/vehicle as independent variables revealed a highly significant effect of tail temperature on tail flick latency. The increase of tail skin temperature explained a reduction of tail flick latency of 0.64 of the 0.92 sec observed [B = -0.267 +/- 0.034, t(37)= -7.75, p less than 0.0001]. When the effect on tail skin temperature was taken into account, metergoline reduced tail flick latency by 0.28 sec [B = -0.284 +/- 0.114, t(37) = -2.50, p less than 0.05]. Metergoline (0.5 and 2.0 mg/kg) did not significantly alter plantar paw skin temperature or the response temperature in the increasing temperature hot plate test. Thus, the observed effect of metergoline on tail flick latency is primarily due to an effect on tail skin temperature. The possibility exists that the remaining effect of metergoline may be due to inadequate correction for the skin temperature change, and it is concluded that the study provide no clear evidence for a tonic inhibition of nociception by serotonergic systems.     

Attenuation of reperfusion hyperalgesia in the rat by systemic administration of benzodiazepines.

1. An investigation into whether reperfusion hyperalgesia is modulated by prior systemic administration of two benzodiazepine agonists (diazepam and chlordiazepoxide), and an antagonist (flumazenil) was conducted. 2. Transient ischaemia was induced in conscious rats by applying an inflatable tourniquet to the base of the tail; when the rats exhibited a co-ordinated escape response, the tourniquet was deflated and reperfusion of the tail was allowed. Reperfusion hyperalgesia manifested as a decrease in tail flick latency, following tail immersion in 49 degrees C water, after the release of the tourniquet. 3. Intraperitoneal administration of diazepam, chlordiazepoxide and flumazenil had no effect on the co-ordinated escape to the noxious ischaemic stimulus nor on tail flick latency after application of a sham tourniquet. 4. The hyperalgesia evident during reperfusion, was abolished by diazepam (1 and 5 mg kg-1) and chlordiazepoxide (5 and 25 mg kg-1). The antihyperalgesic effects of both diazepam (5 mg kg-1) and chlordiazepoxide (25 mg kg-1) were inhibited by flumazenil (1 mg kg-1). 5. Rotarod performance was impaired in rats given diazepam and chlordiazepoxide at the same doses at which the benzodiazepines were antihyperalgesic. The impairment to motor function did not extend to the motor systems involved in the tail flick response. 6. In conclusion, benzodiazepines have antinociceptive properties during hyperalgesia.     

甘草酸对缺血再灌注犬脑线粒体ATP酶活性的影响

研究甘草酸对完全性缺血再灌注犬脑线粒体ＡＴＰ酶、脑组织乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、脑水含量和神经功能的影响。采用犬心脏停跳再复苏模型，１６只家犬随机分成３组：非缺血对照组（ｎ＝４）；缺血再灌注组（ｎ＝６）；甘草酸治疗组（ｎ＝６）。结果显示：甘草酸明显提高再灌注犬脑ＡＴＰ酶和ＬＤＨ活性，减轻脑水肿，改善神经功能。表明甘草酸通过提高线粒体ＡＴＰ酶和组织ＬＤＨ活性，改善能量代谢，减轻犬脑再灌注损伤，促进脑功能恢复。     

卡巴胆碱对急诊创伤后肠屏障功能障碍者心肌损伤的影响

目的 探讨卡巴胆碱对急诊创伤后肠屏障功能障碍患者心肌的保护作用.方法 选择70例急诊创伤后肠屏障功能障碍综合征的患者完全随机分为卡巴胆碱组（37例）和莫沙必利组（33例）,监测患者第1、7天外周血二胺氧化酶活性、嗜中性多形核粒细胞CD11b＋/CD18的表达率、左心室射血分数及肌酸激酶同工酶峰值,观察临床疗效.结果 治疗后7d,卡巴胆碱组有效26例（70.3％）,死亡7例（18.9％）;莫沙必利组有效15例（45.5％）,死亡13例（39.4％）.卡巴胆碱组有效率优于莫沙必利组,差异有统计学意义（Х^2=4.43,P＜ 0.05）.卡巴胆碱组治疗第1天血二胺氧化酶、CD11b＋和CD18分别为（4.8±0.5）kU/L、（30.6±3.6）％、（75.8±3.6）％,第7天分别为（3.2±0.5） kU/L、（14.9±2.2）％、（53.7±2.4）％;莫沙必利组治疗第1天血二胺氧化酶、CD11b＋和CD18分别为（4.7±0.3）kU/L、（31.1±2.9）％、（74.6±2.7）％,第7天分别为（3.9±0.5）kU/L、（28.9±1.6）％、（72.5±4.1）％,治疗第7天卡巴胆碱组患者血二胺氧化酶水平、嗜中性多形核粒细胞CD11b及CD18阳性表达率均低于入组第1天及莫沙必利组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.2组患者入组时肌酸激酶同工酶差异无统计学意义,而卡巴胆碱组肌酸激酶同工酶峰值明显低于莫沙必利组[（60±19） U/L比（79±18） U/L],差异有统计学意义（P＜0.05）;2组患者入组时左心室射血分数差异无统计学意义,卡巴胆碱组左心室射血分数峰值高于莫沙必利组[（60±7）％比（55±7）％],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 卡巴胆碱通过降低急诊创伤后肠屏障功能障碍患者肠道缺血再灌注损伤、减少活性炎症介质释放、促进肠蠕动,从而减轻心肌损伤,保护远隔脏器-心脏的功能.     

全反式维甲酸对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响

摘要目的观察全反式维甲酸（ATRA）对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶（PI）染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为（0.5±0.6） cm3,对照组为（1.9±1.7） cm3（P＜0.05）;体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为（27.3±3.2）%,对照组（5.1±3.2）%（P＜0.01）;ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期（G0/G1期）细胞比例为（57.6±1.5）%,对照组（43.0±2.0）%（P＜0.01）。结论ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。     

血管内皮祖细胞-血管再生在缺血再灌注损伤中的作用探讨

摘要： 目的 探讨血管内皮祖细胞 （EPCs） -血管再生途径在血红素结合蛋白 （HPX） 改善大鼠脑缺血再灌注 （I/R）后认知功能障碍中的作用。方法 SD 雄性大鼠依处理方式不同分为假手术（Sham）组 31 只、 局灶性 I/R（MCAO,0.9%生理盐水 10 μL）组 30 只、 MCAO+叠氮钠（Vehicle, 0.1% Vehicle 10 μL）组 30 只、 MCAO+ HPX（1.86 g/L 的 HPX10 μL）组 30 只。采用改良的神经功能缺损评分（mNSS）评价大鼠 I/R 后神经功能缺损程度,Morris 水迷宫（MWM）实验检测大鼠 I/R 后的学习记忆能力改变; 流式细胞技术 （FCM）结合 CD34/CD133 双抗体标记技术检测大鼠 I/R 后外周血中 EPCs 数量变化; 免疫组织化学技术结合 CD31/vWF 免疫荧光显色技术检测大鼠 I/R 后缺血半暗带皮质区新生血管数量。 结果 与 Sham 组相比, MCAO 组大鼠 I/R 后 mNSS 升高, 逃避潜伏期延长, 目标象限时间百分比减少, 外周血中 EPCs 数量增加, 缺血半暗带皮质区血管数量增加（均 P < 0.05）; MCAO+Vehicle 组大鼠与 MCAO 组相比, I/R 后 mNSS、 逃避潜伏期、 目标象限时间百分比、 外周血中 EPCs 数量和缺血半暗带皮质区血管数量均无明显变化 （均 P > 0.05）; MCAO+HPX 组大鼠与 MCAO 组、 MCAO+Vehicle 组相比, I/R 后 mNSS 显著降低, 逃避潜伏期显著缩短, 在目标象限时间百分比明显增加, 外周血中 EPCs 计数显著增加, 缺血半暗带皮质区血管数量明显增加（均 P <0.05）。结论 EPCs-血管再生机制在 HPX 改善大鼠局灶性 I/R 后认知功能障碍中发挥积极的作用。