巴戟天寡糖促治疗性血管新生机制的探讨

目的：通过观察巴戟天寡糖（Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO）对AMI后大鼠心室重构（Ventricular Remodeling）的干预及缺血心肌组织局部血小板源性生长因子-B（Platelet Derived Endothelial Growfla Factor-B．PDGF-B）及血管内皮细胞生长因子受体1（Fins-like Tyrosine Ki2nase-1,Flt-1）的蛋白表达变化,进一步探讨MOO促进治疗性血管新生作用的机制,为心脏组织工程学的临床应用提供实验依据。方法：60只雄性Wistar大鼠,除假结扎组10只开胸分离冠脉后只穿线不结扎外,其余50只均结扎冠状动脉左前降支,制成AMI模型,随机分为模型组,麝香能心丸（30mg·kg^-1·d^-1）阳性药对照组,MOO小、中、大（0．7g·kg^-1·d^-1、1．4g·kg^-1·d^-1、2．8g·kg^-1·d^-1）剂量组,每组10只。各组均于手术后24h内开始给药,模型组及假结扎组每d用与药物组等容积的蒸馏水灌胃,给药6w后处死。心肌取材进行心脏大体及一般组织形态学观察,测定大鼠左心室质量指数（Left Ventricular MassIndex,LVMI）,观察药物干预后各组大鼠心率变化（Changing Rate of HeartRate,CROHR）,应用免疫组织化学SP法检测各组大鼠缺血心肌细胞PDGF-B、Fit-1蛋白表达的情况,用病理图像分析系统测定生长因子蛋白表达光密度值（Optical Density Value,ODV）,并进行半定量分析。     

6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注的保护作用

目的：观察6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：SPF级Wistar大鼠36只,随机分为6组,每组6只。除假手术组,余5组（分别为丁基苯酞组、模型对照组和6-氟基丁基苯酞80,40,20mg／kg组）均以改良的线拴法制作急性大鼠中动脉脑缺血再灌注损伤模型。丁基苯酞组、昏氟基丁基苯酞80,40,20mg／kg组于缺血2小时灌胃给药,再灌注4小时后断头取脑,观察药物对脑梗塞体积以及抗脂质过氧化和病理保护的研究,并进行神经行为评分。结果：与模型组大鼠相比,6-氟基丁基苯酞80,40mg／kg组和丁基苯酞组大鼠神经运动功能障碍均明显改善（P〈0．01）,但昏氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异;与模型组大鼠相比,6．氟基丁基苯酞80,40mg／kg组和丁基苯酞组大鼠能明显缩小脑梗塞体积（P〈0．01;P〈0．05）;但6-氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异;与模型组大鼠相比,6-氟基丁基苯酞80,40mg／kg组和丁基苯酞组能显著提高神经细胞成活率（P〈0．01;P〈0．05）;但6-氟基丁基苯酞20mg／kg与模型组相比无显著性差异;作用机制可能与能够提高SOD活性有关（P〈0．01;P〈0．05）。与丁基苯酞组相比,6-氟基丁基苯酞80mg／kg缩小梗塞体积优于丁基苯酞组（40mg／kg）（P〈0．05）,显著提高细胞成活率（P〈0．05）。结论：6-氟基丁基苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

巴戟天寡糖对成肌细胞增殖及分化的影响

目的：观察巴戟天寡糖（Morinda Officinalis How Oligosacchalide,MOO）对成肌细胞增殖分化的影响。方法：采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,制成浓度为1×10^5／mm3的成肌细胞悬液,接种到25ml培养瓶中培养。实验分为5组：空白对照组5．氮杂胞苷（5-Aza）（10μmol／mL）对照组;MOO小、中、大剂量（100μg／ml、300μg／ml、500μg／m1）组;并检测以下指标：1．成肌细胞形态学变化。2．免疫细胞化学法鉴定结蛋白（Desmin）。3．免疫细胞化学法测定转化生长因子β1（TGF—β1）和增殖细胞核抗原（PCNA）。4．四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测巴戟天寡糖对成肌细胞增殖的影响。5．绘制生长曲线。结果：1．倒置显微镜下,成肌细胞培养24h后,可见大量折光率强的圆形细胞贴壁,且有极少量细胞有小突起;48h后,细胞呈梭形并出现单个细胞核;72h后,成肌细胞变得细长,并相互拉网,从单核期进入合体细胞阶段;继续培养,成肌细胞相互融合,形成多核性长管状初生肌管;培养第5天后,可观察到分化状态较好的肌管有自发性搏动的收缩;用desmin抗体对分裂增殖4～5天的成肌细胞进行间接免疫酶染色,细胞核外周及胞浆呈棕黄色的desmin阳性反应,表明培养的细胞为成肌细胞;成肌细胞生长曲线显示原代成肌细胞生长培养48h后开始增生,早期增殖较快,倍增时间为5d,6～7d进入平稳期。     

阿斯匹林与尼莫地平合用对兔体外血小板聚集的影响

目的：观察阿斯匹林与尼莫地平合用对兔体外血小板聚集的影响。方法：比浊法。结果：两药合用后均可显著提高对三种诱导剂诱导的血小板聚集的抑制作用，合用后ｑ值均大于１。结论：两药合用后可协同抑制体外血小板聚集。     

藻酸双酯钠对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用

目的 :观察藻酸双酯钠 (PSS)对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用。方法 :体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞 ,加入谷氨酸观察谷氨酸对神经细胞的兴奋毒性及PSS的保护作用。结果 :PSS 5 0 ,1 0 0 ,1 5 0mg·L-1能显著减少细胞死亡 ,降低乳酸脱氢酶(LDH)漏出量 ,一氧化氮 (NO)含量及丙二醛 (MDA)生成 ,提高超氧歧化酶 (SOD)活性。结论 :PSS对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性具有显著的保护作用 ,其机制可能与PSS抗脂质过氧化作用有关。     

巴戟天寡糖对转化生长因子β信号传导的影响

目的：细胞移植技术的探索，为急性心肌梗死患者坏死区的心肌细胞重建及衰竭心脏的功能恢复，可能是-种极具前途的临床治疗手段。我们前期的研究初步证实巴戟天寡糖（Morinda officinalis How oligosaccha rides，MOO）具有明显促进成肌细胞的增殖和分化的作用保护心脏作用的研究。方法：采用离体纯化培养乳鼠双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法，以5-氮杂2’-脱氧胞苷（5-Aza—dc）为阳性药对照组、并设立MOO中剂量＋5-Aza—dc联合用药组，应用免疫组化、蛋白免疫痕迹技术进-步观察了MOO促成肌细胞向心肌样细胞分化时对TGF-β2受体及信号传导的影响。结果：（1）与空白对照组相比，各组TGF-β2表达水平均上调，差异显著（P〈0．05）；与阳性对照组相比，MOO各剂量组TGF—β2表达水平随剂量增加而增强，联合用药组TGF-β2表达水平显著高于阳性对照组（P〈0．05）。（2）与空白对照组相比，各用药组Smad4表达水平均显著上调（P〈0．05），各用药组间Smad4表达水平无明显差异。（3）与空白对照组相比，MOO小剂量组及联合用药组Smad2／3表达轻微上调、MOO中、大剂量组及阳性组均下调Smad2／3的表达。（4）与空白对照组相比，各组Smad7的表达差异显著（P〈0．05），其中MOO小剂量组、阳性组和联合组均抑制Smad7表达，MOO中、大剂量组逐渐增强Smad7的表达。结论：（1）MOO可促进TGF-β2的表达，并随着剂量的增加表达增强。     

巴戟天寡糖对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的:探讨巴戟天寡糖(MOO)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)心功能的影响.方法:将48只Wistar大鼠随机分为假结扎组、IRI模型组、阳性对照组和MOO高、中,低剂量组,每组8只.阳性对照组给予地奥心血康0.7 g/kg,MOO 3个剂量组分别给予2.8、1.4及0.7 g/kg的MOO灌胃,假手术组和模型组按10 mL/kg给予蒸馏水灌胃,均1次/d,共7 d.末次给药1 h后,除假结扎组不结扎外,其他各组均结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注90 min.观察心功能、心肌Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶及肌酸激酶(CK)等的变化.结果:6组大鼠左室收缩压、左室舒张期末压、左室内压最大变化速率及心肌酶谱比较差异均有统计学意义(P均＜0.001).与模型组相比,MOO各剂量组心功能均明湿改善,心肌组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶活性升高,而CK含量则降低(P＜0.001).结论:MOO有预防心肌IRI作用,其机制主要与防止钙超载有关.     

早搏宁冲剂的抗实验性心律失常作用

目的：观察早搏宁冲剂对实验性心律失常的影响。方法：采用Wistar大鼠，豚鼠，家兔，观察早搏宁冲剂对乌头碱诱发大鼠心律失常和哇巴因诱发豚鼠心律失常的影响，以及早搏宁冲剂对电刺激家兔室颤阈及结扎大鼠冠状动脉诱发心律失常的影响。结果：早搏宁冲剂可增加乌头碱及哇巴因诱发心律失常的用量，提高电刺激家兔室颤阈值，延迟结扎大鼠冠状动脉心律失常出现时间，减少早搏次数及室速持续时间。结论：早搏宁冲剂具有抗实验性心律失常作用，且有一定的量效关系。