碱性成纤维细胞生长因子共聚物缓释微球与兔跨区轴型皮瓣的成活

背景：研究表明使用生长因子直接或间接刺激新生血管形成可以促进皮瓣远端缺血部分的成活。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物缓释微球对家兔侧腹制作跨区轴型皮瓣成活的影响。方法：取24只健康家兔制作侧腹壁跨区轴型皮瓣,随机分组：实验组术前5d皮内注入碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球,对照组术前5d皮内注入碱性成纤维细胞生长因子＋空微球悬浊液,空白对照组术前5d皮内注入生理盐水。5d后掀起皮瓣原位缝合。结果与结论：①皮瓣成活率：实验组显著高于对照组和空白对照组（P〈0.01）,②皮瓣组织学变化：实验组新生血管增生明显,以毛细血管为主。③CD34＋免疫组织化学结果：实验组新生血管大量形成,平均血管数目高于对照组和空白对照组（P〈0.05）。表明术前5d局部注射碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物缓释球可促进皮瓣新生血管形成,增加皮瓣血运,促进皮瓣成活。     

高频超声与血清VEGF 和bFGF 水平检测联合对糖尿病患者肌肉减少症的诊断价值分析

目的 探讨高频超声联合血清血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）诊断糖尿病肌肉减少症的价值。方法 选择2018 年6 月～ 2019 年12月鄂东医疗集团黄石市妇幼保健院收治的103 例T2DM 并发肌肉减少症患者（观察组）和100 例门诊体检健康志愿者（对照组）。根据肌肉减少症分期将观察组分为肌肉减少症前期（简称前期,38 例）、肌肉减少症期（简称减少期,34 例）和重度肌肉减少症期（简称重度期,31 例）。高频超声测量尺骨前肌、股外侧肌厚度和质量,应用酶联免疫吸附试验检测血清VEGF和bFGF 水平。Pearson 相关性分析尺骨前肌、股外侧肌质量、VEGF和bFGF 与四肢骨骼肌质量指数（relativeappendicular skeletal muscle mass,RASM）、握力和步速相关性。受试者工作特征曲线（receiver operating characteristiccurve,ROC）分析尺骨前肌、股外侧肌质量、VEGF 和bFGF 诊断T2DM 患者肌肉减少症的价值。结果 观察组尺骨前肌质量（14.32±3.59）、股外侧肌质量（21.01±3.89）、血清VEGF（185.24±20.13 ng/L）和bFGF（11.35±4.52 ng/L）水平均低于对照组（17.45±4.13,25.12±4.25, 236.42±36.49 ng/L,17.64±6.95 ng/L）, 差异有统计学意义（t=5.768 ～ 12.557,均P ＜ 0.001）。重度期、减少期患者尺骨前肌质量（11.25±0.42,14.35±2.51）、股外侧肌质量（18.46±0.61,21.34±3.26）、血清VEGF（171.25±3.65 ng/L,178.25±10.43 ng/L） 和bFGF（7.42±0.54 ng/L,12.05±2.17 ng/L）水平均低于前期组（16.80±1.03, 22.80±1.25,202.91±2.65ng/L, 13.93±1.77 ng/L), 差异有统计学意义（t=2.560 ～ 41.695,均P ＜ 0.001）。重度期尺骨前肌质量、股外侧肌质量、血清VEGF 和bFGF 水平低于减少期,差异有统计学意义（t=3.542 ～ 11.551,均P ＜ 0.001）。血清VEGF 和bFGF 水平与尺骨前肌质量、股外侧肌质量、RASM,握力和步速呈正相关（r=0.402 ～ 0.698,均P ＜ 0.05）,尺骨前肌质量、股外侧肌质量与RASM,握力和步速呈正相关（r=0.369 ～ 0.719,均P ＜ 0.001）。尺骨前肌质量、股外侧肌质量、VEGF 和bFGF 诊断T2DM 患者肌肉减少症的曲线下面积（AUC）分别为0.661,0.755,0.832 和0.744,联合诊断AUC 为0.911,高于单独检测（P ＜ 0.05）。结论 T2DM 肌肉减少症患者尺骨前肌质量、股外侧肌质量与血清VEGF 和bFGF 水平明显降低,且与肌肉减少症病情程度有关,可以作为肌肉减少症辅助诊断的指标。     

沙利度胺治疗急性白血病的临床疗效及抗血管形成的观察

目的:观察沙利度胺联合化疗治疗急性白血病临床疗效及对血浆血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、骨髓微血管密度(MVD)的影响.方法:急性白血病36 例,分为实验组及对照组各18 例.每组均常规化疗,实验组同时口服沙利度胺100 mg/d.治疗前及治疗后8 周采集外周血双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆VEGF、VEGFR、bFGF 及MVD 测定.结果:实验组与对照组治疗的有效率分别为88.9%(16/18)、77.8%(14/18),差异有统计学意义(P ＜ 0.05).实验组与对照组治疗后血浆VEGF、VEGFR、MVD [(211.74 ± 36.72)pg /mL vs.(288.02 ± 31.77)pg /mL;[(1 359.71 ±390.24)pg/mL vs.(1 753.89 ± 337.04)pg/mL;(8.30 ± 4.57)n/HP vs.(14.78 ± 2.76)n/HP]相比差异有统计学意义(均P ＜ 0.05),血浆[bFGF(2.09 ± 0.17)ng/mL vs.(2.11 ± 0.31)ng/mL]相比差异无统计学意义(P ＞ 0.05).结论:沙利度胺联合化疗可提高急性白血病的缓解率,可能通过抑制血浆VEGF 及其受体表达、减少MVD而发挥抗白血病作用.     

血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和内皮抑素在肝硬化中的表达及意义

目的 探究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）和内皮抑素（endostatin）在肝硬化中的表达情况。方法 收集从2015年1月至2016年6月河北医科大学第二医院肝胆外科收治的肝硬化患者22例,记为实验组;另选同期10例正常肝脏组织作为正常组。分别用HE和Masson三色染色观察两组标本;用免疫组织化学和酶联免疫吸附方法(ELISA)检测两组中VEGF,bFGF,Endostatin蛋白表达。结果 ①HE染色和Masson三色染色结果显示：与正常组相比,实验组镜下肝脏组织中纤维条索明显增多,有明显的假小叶生成,其间广泛分布炎性细胞,汇管区结构明显消失,肝细胞有不同程度地坏死,纤维增生也更加明显;②免疫组织化学：正常组VEGF,bFGF和Endostatin的蛋白相对灰度值分别为0.06±0.03,0.08±0.05和0.07±0.02;实验组VEGF,bFGF和Endostatin的相对灰度值分别为0.16±0.02,0.14±0.03和0.14±0.01;与正常组相比,实验组VEGF,bFGF和Endostatin表达明显上调,且差异均有统计学意义（P<0.05）。③ ELISA试验：正常组VEGF,bFGF和Endostatin的吸光度（OD值）分别为283.05±14.32,30.03±2.11和4 350.63±636.66;实验组VEGF,bFGF和Endostatin的OD值分别为539.63±160.28,63.99±33.28和8 194.75±1 319.28;与正常组相比,实验组VEGF,bFGF和Endostatin表达均明显上调,且差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 肝硬化患者VEGF,bFGF和Endostatin蛋白表达均明显上调,这些蛋白的表达与肝硬化发生发展密切相关。     

低频超声联合微泡影响前列腺癌DU145细胞血管内皮细胞生长因子表达的实验研究

目的探讨低频超声联合微泡对前列腺癌DUl45细胞血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养前列腺癌DUl45细胞,细胞呈对数生长时分为4组进行实验：对照组（细胞悬液1ml）、单纯微泡组（800μl细胞悬液加入200μl微泡剂SonoVue）、单纯低频超声组（1ml细胞悬液以频率80kHz、声强0．45W／cm2超声辐照30S）、低频超声联合微泡组（800μl细胞悬液加入200μl微泡剂SonoVue后立即以频率80kHz、声强0．45W／cm2超声辐照30s）。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率,Western印迹法检测细胞VEGF蛋白的表达。采用单因素方差分析比较对照组、单纯微泡组、单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞存活率、凋亡率、VEGF蛋白表达量差异,进一步组间两两比较采用SNK-q检验。结果对照组、单纯微泡组、单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞存活率分别为100％、（96．50±12．49）％、（93．20±5.31）％、（81．30±9．32）％;凋亡率分别为（1．10±0．26）％、（1．78±0．63）％、（5．85±0．45）％、（9．36±0．90）％;VEGF蛋白表达量分别为0．81±0．05、0．79±0．06、0．58±0．04、0．38±0．05。单纯微泡组、单纯低频超声组细胞存活率与对照组比较差异均无统计学意义,低频超声联合微泡组细胞存活率较对照组降低,且差异有统计学意义（q=5．88,P〈0．05）。单纯微泡组细胞凋亡率、VEGF蛋白表达量与对照组比较差异均无统计学意义;单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞凋亡率均高于对照组,VEGF蛋白表达量均低于对照组,且差异均有统计学意义（q=14．09、24．51、8．06、14．89,P均〈0．05）。低频超声联合微泡组细胞凋亡率高于而VEGF蛋白表达量低于单纯低频超声组,且差异亦均有统计学意义（q=10．42、6．83,P均〈0．05）。结论微泡能增强低频超声抑制前列腺癌DUl45细胞增殖及促进凋亡,其机制可能与其下调前列腺癌DUl45细胞VEGF表达有关。     

EGFR、VEGF及Ki-67在肺浸润性腺癌和微浸润性腺癌及浸润前病变组织中的表达及意义

目的：探讨EGFR、VEGF及Ki-67在肺浸润性腺癌、微浸润性腺癌及浸润前病变组织中的表达,及其与临床病理特征之间的相关性。方法按照2011年IASLC/ATS/ERS多学科肺腺癌新分类方案,对2004年1月至2010年12月间日照市人民医院常规病理诊断中确诊为肺腺癌、细支气管肺泡癌和不典型腺瘤样增生的病例,使用和整合病理组织学、免疫组化TTF-1和P63[或（和）CK5/6]及临床、影像学多学科知识,重新诊断、分类,应用免疫组织化学S-P法检测128例浸润性肺腺癌、28例微浸润性腺癌、46例浸润前病变（29例原位腺癌AIS、17例不典型腺瘤样增生）病理组织中EGFR、VEGF及Ki-67蛋白的表达,以30例癌旁组织、30例正常肺脏组织作对照,并结合临床病理特征进行相关性分析,比较EGFR、VEGF及 Ki-67：（1）在浸润性腺癌、微浸润性腺癌及浸润前病变三种不同组织中表达差异,及其与正常黏膜组织差异;（2）三者在28例微浸润性腺癌中微浸润灶与原位腺癌两种成分中表达的差异;（3）三者的表达与肿瘤大小、分化程度、浸润程度、淋巴结转移等临床病理因素的关系;（4）EGFR、VEGF及Ki-67三者在浸润性腺癌中表达的相关性。结果（1）EGFR、VEGF及Ki-67的表达在浸润前病变、微浸润性腺癌及浸润性肺腺癌组织中的表达依次增高,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）EGFR、VEGF及Ki-67在微浸润性腺癌微浸润与原位两种成分中表达的差异无统计学意义（P＞0.05）;与浸润性腺癌比较,Ki-67表达差异有统计学意义（P＜0.05）,EGFR、VEGF的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）肿瘤大小≤2 cm组与＞2 cm且＜3 cm组间比较,EGFR、VEGF及Ki-67表达差异有统计学意义（P＜0.05）;肿瘤大小＞2 cm且＜3 cm组与≥3 cm组比较,VEGF表达差异有统计学意义（P＜0.05）,EGFR及Ki-67表达无明显差异（P＞0.05）。（4）EGFR、VEGF及Ki-67表达与组织学类型（鳞屑样、腺泡样、乳头状、实性）无关（P＞0.05）;EGFR 高表达与组织学分级低分化、淋巴结转移及肿瘤高分期有关（P＜0.05）;VEGF与组织学分级、淋巴结转移及肿瘤高分期均无关（P＞0.05）;Ki-67只与淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与组织学分级、肿瘤高分期无关（P＞0.05）。EGFR、VEGF 及 Ki-67三者表达正相关（P＜0.05）。结论本组显示原位腺癌大小以2 cm为界更能较好地显示生物学行为;EGFR、VEGF及Ki-67高表达与肺腺癌发生、浸润、转移密切相关,早期联合检测能辅助预测肺腺癌的生物学行为、评估预后和指导治疗。     

构建靶向毒素血管内皮生长因子抗体-白喉毒素突变体

目的 探讨以血管内皮生长因子（VEGF）抗体为导向,白喉毒素突变体（CRM9）作效应部分,构建靶向毒素VEGF抗体-CRM9,为直接杀伤肿瘤细胞寻找新的药物.方法 应用异型双功能连接剂甲基丙烯酸甲酯丁二烯苯乙烯三元共聚物（MBS）连接兔抗人VEGF多抗和CRM9,制备成新的构建蛋白,Sephacryl S-300分离纯化后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳证明二者的结合情况.对构建蛋白抗体活性采用酶联免疫法检测,生物毒性应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）方法检测.结果 构建蛋白通过分离并电泳后,出现明显增粗的分子量为116 000新条带,位于CRM9和VEGF条带前方.构建的蛋白结合体中抗体活性检测,VEGF抗体与CRM9按1：1制备的蛋白结合体,抗体活性与VEGF抗体对照差异无统计学意义（P＞0.05）,按1：5和1：8两种比例制备的蛋白结合体,抗体活性降低与VEGF抗体对照差异有统计学意义（P＜0.01）.构建的蛋白结合体中CRM9毒性检测,VEGF与CRM9按1：1比例制备蛋白结合体杀伤效果与空白对照组差异有统计学意义（P＜0.01）,与CRM9组差异无统计学意义（P＞0.05）,CRM9组杀伤效果与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 MBS能将VEGF抗体与CRM9连接构建成新的蛋白结合体,结合体中CRM9生物毒性和VEGF抗体活性不变.这将为进一步的免疫毒素抗肿瘤的各项研究奠定了基础.     

不同类型炎症中生长因子水平差异及其意义

目的 研究感染性和自身免疫性两类炎症中血小板源生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的异常变化及变化持续时间方面的差异.方法 应用ELISA法于不同时间检测149例两类炎症患者血清各因子含量值共7次,比较各因子变化情况及变化持续时间.结果 PDGF:治疗前感染组(6.32±2.54)μg/ml,免疫组(2.57±1.65)μg/ml,差异有统计学意义(P<0.05).其组间、组内不同时间点及各组间对应时点差异均有统计学意义(P均<0.05).VEGF:治疗前感染组(179.5±53.30)ng/ml,免疫组(221.4±70.04)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05).其组间、组内不同时间点及各组间对应时点差异均有统计学意义(P均<0.05).2组生长因子水平达峰值时间[PDGF:感染组(2.6±1.1)d,免疫组(5.4±3.3)d;VEGF:感染组(2.4±0.7)d,免疫组(7.2±3.3)d],差异均有统计学意义(P<0.05).异常变化持续时间PDGF:感染组(6.7±3.1)d,免疫组(15.4±6.1)d.VEGF:感染组(8.1±3.4)d,免疫组(16.7±7.2)d,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 两类炎症中两种细胞因子异常变化水平及异常变化持续时间均有显著差异,这种差异与炎症的性质及结局可能有内在因果关系.     

碱性成纤维细胞生长因子及血小板源性生长因子在人股骨颈骨折中的表达及相互关系

目的 研究股骨颈骨折后不同时期碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及血小板源性生长因子(PDGF)的表达及分布特点.方法 应用免疫组化PV超敏法对36例人股骨颈骨折标本中bFGF、PDGF蛋白进行检测,应用CMIAS真彩色医学图像分析系统对各组免疫组化结果进行吸光度(A)检测及分析,同时对bFGF、PDGF表达进行相关性分析.结果 ①伤后1周组9例,bFGF蛋白在骨折处间充质细胞、单核细胞、血管内皮细胞表达最为显著,A为(0.4076 ±0.0902);PDGF蛋白在间充质细胞内呈弱阳性表达,而在血管内皮细胞内呈强阳性表达,A为(0.2261 ±0.0636).伤后2周组9例,bFGF、PDGF表达于成纤维细胞、血管内皮细胞、新生的软骨细胞及基质、成骨细胞中,A分别为(0.6404±0.0920)和(0.7457±0.0756),与伤后1周比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).伤后3周组9例,bFGF及PDGF蛋白表达的OD分别为(0.7168 ±0.1346)和(0.8033.±0.0491),与伤后2周相比差异无统计学意义(P均＞0.05).伤后4周组9例,成熟的骨组织、软骨组织中bFGF、PDGF蛋白均呈弱阳性或阴性反应,但幼稚骨组织、软骨组织中则呈阳性表达,OD分别为(0.5374 ±0.1210)和(0.7068±0.1255),但表达程度低于伤后3周(P均＜0.05).②股骨颈骨折后1、2、3、4周bFGF与PDGF蛋白表达均成正相关(r分别为0.792、0.834、0.880、0.766,P均＜0.05).结论 ①bFGF在骨折愈合早期能诱导间充质细胞、成骨细胞、软骨细胞及血管内皮等细胞的分裂、增殖,促进新生血管及新骨的生成.②PDGF是骨细胞调节剂,可刺激软骨细胞和成骨细胞的增殖、分化并可间接地诱导血管内皮细胞增殖与新生血管生成.③bFGF及PDGF均为骨性生长因子,二者互相促进,共同调节成骨细胞及血管增殖和分化,最终完成骨折修复过程.     

肝细胞生长因子和血管内皮生长因子在急性髓系白血病中的表达以及与血管新生的关系

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病(AML)中的表达及与AML血管新生的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定AML 25例初发未治、17例完全缓解、16例未缓解、12例复发患者血清中HGF和VEGF的浓度,并与正常对照组比较.结果 血清HGF的浓度:AML初发未治组[(1357.29±358.64) ng/L]、未缓解组[(1175.93±306.71)ng/L]、复发组[(1261.21±340.83) ng/L]患者均明显高于正常对照组[(232.62±99.13) ng/L]和缓解组[ (256.65 ±94.32) ng/L](F=78.35,P＜0.01);血清VEGF的浓度:AML初发未治组[(253.84±49.14) ng/L]、未缓解组[(245.87±54.68) ng/L]、复发组[(264.75 ±62.52) ng/L]患者均明显高于正常对照组[ (97.61±16.19) ng/L]和缓解组[(99.76±15.93) ng/L](F=68.65,P＜0.01);缓解组患者血清HGF和VEGF的浓度与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).HGF和VEGF在AML中呈正相关(r=0.49,P＜0.05).结论 HGF和VEGF与AML的发生、发展密切相关,通过阻抗HGF治疗白血病有望成为新的治疗方法.     

碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球的体外释药规律：具有促进兔静脉皮瓣成活的作用？

背景：与正常生理性皮瓣相比,静脉皮瓣的主要优点在于摆脱了动脉血管分布区域对传统轴型皮瓣的供区与受区的限制,但其成活率不稳定。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物（bFGF-polylactic-co-glycolicacid,bFGF-PLGA）缓释微球对兔静脉皮瓣成活的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-05/10在南华大学完成。材料：健康新西兰大白兔24只,随机分为3组：bFGF-PLGA缓释微球组、空微球组、空白对照组,8只/组。方法：应用正交设计试验进一步优化碱性成纤维细胞生长因子微球的制备工艺,采用优化处方制备bFGF-PLGA微球。3组兔均制作侧腹壁静脉皮瓣,术前5d,bFGF-PLGA缓释微球组向皮瓣皮内注射28.85g/L优化处方后的bFGF-PLGA微球3mL（含碱性成纤维细胞生长因子20μg）,空微球组同法注射同等质量空微球＋等量碱性成纤维细胞生长因子混合溶液,空白对照组注射等量生理盐水。主要观察指标：考察bFGF-PLGA微球外观形态和粒径分布,检测其载药量、包封率、体外释药性质。术后7d检测皮瓣成活率,取兔皮肤标本行CD34＋免疫组化染色,检测CD34＋的表达及皮瓣内微血管密度。结果：所制微球表面光滑圆整,球体均匀度好,无粘连现象;微球粒径98%分布在12.50～43.49μm,平均粒径26.93μm,径距0.611±6.60;载药量为[（23.11±0.44）×10-3]%,包封率为（86.51±0.83）%;突释期内微球的体外释放度为27.78%,30d后体外累积释放度高达81.56%,微球的体外释药规律符合Higuichi方程（r=0.997）。空微球组、空白对照组的静脉皮瓣成活率及皮瓣内微血管密度基本相似（P=0.597,P=0.336）,但均明显低于bFGF-PLGA缓释微球组（P=0.000）。免疫组化染色结果显示,bFGF-PLGA能够促进皮瓣与周围建立血供关系,改善皮瓣的成活,并表达较为丰富的CD34＋。结论：应用W/O/W复乳-干燥法可成功制备表征良好、载药量和包封率高的bFGF-PLGA微球,该微球通过较长时间地持续释放活性碱性成纤维细胞生长因子,可明显促进兔静脉皮瓣的存活。     

Transplantation of adipose stromal cells promotes neovascularization of random skin flaps

The delivery of bone marrow-derived mononulear cells (BM-MNCs) has been proved to be effective at promoting neovascularization of ischemic skin flaps. However, the limited source of BM-MNCs restricts their clinical application. Stromal vascular fraction (SVF) contains a group of heterogeneous cells in the adipose tissue, including adipose tissue-derived stem cells, and it has abundant reserve in human body. In this study, we evaluated the therapeutic potential of SVF to promote neovascularization of random skin flaps. Female Wistar rats were randomly devided into three groups with 8 in each group and received allogeneic SVF, BM-MNCs and phosphate-buffered saline (PBS), respectively, before surgery. Two days after cell administration, a 10 × 3 cm random skin flap was elevated. Flap survival, blood flow perfusion and capillary density were examined 7 days after surgery, and the relevant mechanism was also explored. Results showed that SVF group and BM-MNCs group had higher survival percentage (72.2 ± 2.0% and 76.4 ± 3.1%, respectively) as compared with the control group (56.8 ± 4.6%, P < 0.05). Blood flow perfusion and capillary density of flap tissues in SVF and BM-MNCs groups were both improved. The expression levels of vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) were increased in flap tissues of SVF and BM-MNCs groups detected by ELISA. These results indicate that SVF could promote vascularization and increase flap survival probably by secreting VEGF and bFGF. The effect of transplantation of SVF on therapeutic angiogenesis of skin flaps is equivalent to that of BM-MNCs.     

复制缺陷型腺病毒载体介导人血管内皮细胞生长因子cDNA促进静脉分叶皮瓣的成活

背景：静脉分叶皮瓣可修复多个手指皮肤软组织缺损,但静脉皮瓣普遍存在成活率不稳定,限制了其在临床上的应用。目的：观察以复制缺陷型腺病毒介导血管内皮细胞生长因子165基因（cDNA）局部应用对兔静脉分叶皮瓣成活的影响。方法：用新西兰大白兔制作侧腹壁双蒂轴型静脉分叶皮瓣,分别皮下注射介导血管内皮细胞生长因子165基因（Ad-VEGF）的复制缺陷型腺病毒、携带β半乳糖苷酶基因的腺病毒（Ad-Gal）和生理盐水。术后7d对3组兔进行皮瓣存活率、免疫组织化学、新生血管计数和常规组织切片的检测。结果与结论：术后7d,Ad-VEGF165组皮瓣成活率和平均血管数目显著高于Ad-Gal组和生理盐水组（P〈0.01）,皮瓣中血管内皮细胞及毛囊旁细胞中有大量VEGF蛋白阳性表达细胞,皮瓣中出现肉芽组织增生,新生血管大量形成。结果证实,以复制缺陷型腺病毒为载体介导的人VEGFcDNA能促进新生血管的形成并提高静脉分叶皮瓣的成活率。     

湿性愈合疗法联合高压氧治疗糖尿病足溃疡的效果

目的 探讨湿性愈合疗法联合高压氧治疗糖尿病足溃疡的应用.方法 通过在临床实践中以传统换药为基础,再使用湿性愈合疗法联合高压氧治疗糖尿病足溃疡,评价患者对该疗法的满意度、切口愈合率、愈合时间、换药次数,并与单独使用传统换药相比较,进行两者之间的差异分析.结果 实验组显效18例（85.7％）,有效3例（14.3％）,对照组显效10例（47.6％）,有效6例（28.6％）,无效5例（23.8％）,两组比较差异有统计学意义（x2=5.68,P＜0.05）;愈合时间实验组需要（27.8±3.75）d,对照组需要（38.6±3.81）d,两组比较差异有统计学意义（t=9.2,P＜0.05）;换药次数实验组需要（15.6±3.45）次,对照组需要（24.8±3.62）次,两组比较差异有统计学意义（t=8.4,P＜0.05）;患者满意度实验组为95.4％优于对照组的68.9％,两组比较差异有统计学意义（t=5.15,P＜0.05）.结论 采用以传统换药为基础,再使用湿性愈合疗法联合高压氧治疗糖尿病足溃疡能明显提高创面愈合率,减少换药次数,减轻护士工作量,其结果可为合理应用该疗法促进糖尿病足溃疡愈合又可减少患者的痛苦提供临床依据.     

血管内皮生长因子、肝细胞生长因子在虹膜新生血管大鼠房水中的含量变化

目的：探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）在虹膜新生血管（neovascularization of the iris,NVI）大鼠模型房水中的含量变化。方法将清洁级健康10周龄Wistar大鼠随机分为4组,每组20只（40眼）,乙醚吸入法全身麻醉大鼠,实验1组：经尾部静脉注射孟加拉玫瑰红光敏剂;实验2组：尾部静脉注射孟加拉玫瑰红光敏剂＋氪激光光凝Wistar大鼠全部视网膜分支静脉;实验3组：氪激光光凝Wistar大鼠全部视网膜分支静脉;实验4组：空白对照组（未经任何处理）。利用虹膜荧光造影（iris fluorescence angiography,IFA）对各实验组大鼠进行鉴定,对NVI动物模型复制成功的大鼠采用Miller方法进行分级,对大鼠NVI形成前1天及模型复制后3、7、10、14、21、30 d分别抽取房水,采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测房水中VEGF、HGF的含量。采用SPSS 13.0统计软件分析实验组及对照组之间不同时间组房水中VEGF、HGF 含量变化,并分析两种因子的相关性。结果单纯应用孟加拉玫瑰红尾部静脉注射和单纯激光的方法不能使大鼠产生视网膜缺血,用尾部静脉注射孟加拉玫瑰红光敏剂＋氪激光光凝法可诱导大鼠视网膜静脉阻塞,成功制作NVI动物模型。 NVI模型复制前1 d房水中VEGF和HGF的浓度分别为（15.58±5.85）pg/ml和（22.84±6.75）pg/ml,复制后3、7、10、14、21、30 d二者浓度分别为（17.30±4.80）、（31.83±9.90）、（36.89±11.73）、（57.34±18.55）、（112.03±46.41）、（106.93±52.89）pg/ml和（24.58±7.18）、（36.47±11.28）、（46.27±13.11）、（59.25±15.47）、（90.71±29.91）、（102.08±34.82）pg/ml;VEGF和HGF与NVI形成呈正相关,但二者浓度无相关性。结论大鼠虹膜新生血管的形成与其房水中VEGF、HGF含量成正相关,二者在虹膜新生血管形成中可能扮演重要角色。     

天然、重组水蛭素对随意皮瓣淤血模型血管内皮细胞生长因子的影响

背景：随意皮瓣移植后易发生皮瓣静脉淤血,甚至坏死,临床与动物实验证明水蛭素能够提高淤血皮瓣的成活率。目的：观察水蛭素对大鼠随意皮瓣淤血模型成活保护作用。方法：Wistar大鼠30只背部设计随意皮瓣10cm×3cm制成淤血模型,随机分为天然水蛭素组、重组水蛭素组和对照组,分别于皮下注射5U天然水蛭素、5U重组水蛭素和生理盐水。术后测定血管内皮细胞生长因子含量及血管内皮细胞生长因子mRNA表达量,计算皮瓣成活率。结果与结论：天然水蛭素组与重组水蛭素组皮瓣成活率比对照组高（P〈0.05）。天然水蛭素组与重组水蛭素组比对照组新生毛细血管血管内皮细胞生长因子表达多（P〈0.05）,且天然水蛭素组最多。提示天然、重组水蛭素均能够促进随意皮瓣血管内皮细胞生长因子表达,有利于新生血管的生成,能够提高随意皮瓣的成活率,且天然水蛭素效果优于重组水蛭素。     

高压氧对超长随意皮瓣成活率及其血液流变性影响的实验研究

目的探讨高压氧对超长随意皮瓣移植术后的成活情况以及皮瓣皿液流变性的影响。方法制作大鼠背部随意皮瓣动物模型,长宽比为3：1,随机分为三组,A组为高剂量高压氧组,B组为低剂量高压氧组,C组为对照组。分别于术后1,3,5,7d检测各组动物皮瓣血流速度并取蒂部全血,检测全血粘度（高切、低切）,红细胞聚集指数和血沉。术后第7d观察各组皮瓣成活而积并计算皮瓣成活率。结果 三组皮瓣成活率及血液流变性比较,A组与B组均优于C组,皮瓣成活率明显提高,血液流变性明显改善。A,B两组之间无明冠差异。结论高压氧能够改善皮瓣血液流变性。提高皮瓣成活率。     

碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球的体外释药规律:具有促进兔静脉皮辦成活的作用?

背景:与正常生理性皮辦相比,静脉皮辦的主要优点在于摆脱了动脉血管分布区域对传统轴型皮辦的供区与受区的限制,但其成活率不稳定.目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(bFGF-polylactic-co-glycolic acid.bFGF-PLGA)缓释微球对兔静脉皮辦成活的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/10在南华大学完成.材料:健康新西兰大白兔24只,随机分为3组:bFGF-PLGA缓释微球组、空微球组、空白对照组,8只/组.方法:应用正交设计试验进一步优化碱性成纤维细胞生长因子微球的制备工艺,采用优化处方制备bFGF-PLGA微球.3组兔均制作侧腹壁静脉皮辦,术前5 d,bFGF-PLGA缓释微球组向皮辦皮内注射28.85 g/L优化处方后的bFGF-PLGA微球3 mL(含碱性成纤维细胞生长因子20 μg),空微球组同法注射同等质量空微球+等量碱性成纤维细胞生长因子混合溶液,空白对照组注射等量生理盐水.主要观察指标:考察bFGF-PLGA微球外观形态和粒径分布,检测其载药量、包封率、体外释药性质.术后7 d检测皮辦成活率,取兔皮肤标本行CD34~+免疫组化染色,检测CD34~+的表达及皮辦内微血管密度.结果:所制微球表面光滑圆整,球体均匀度好,无粘连现象;微球粒径98%分布在12.50~43.49μm,平均粒径26.93μm,径距0.611+6.60,载药量为[(23.11±0.44)×10~(-3)]%,包封率为(86.51±0.83)%;突释期内微球的体外释放度为27.78%,30d后体外累积释放度高达81.56%,微球的体外释药规律符合Higuichi方程(r=0.997).空微球组、空白对照组的静脉皮辦成活率及皮辦内微血管密度基本相似(P=0.597,P=0.336),但均明显低于bFGF-PLGA缓释微球组(P=0.000).免疫组化染色结果显示,bFGF-PLGA能够促进皮辦与周围建立血供关系,改善皮辦的成活,并表达较为丰富的CD34~+.结论:应用W/O/W复乳.干燥法可成功制备表征良好、载药量和包封率高的bFGF-PLGA微球,该微球通过较长时间地持续释放活性碱性成纤维细胞生长因子,可明显促进兔静脉皮辦的存活.     

选择性iNOS抑制剂1400W对缺氧培养人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达的影响

目的探讨选择性诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）抑制剂1400W对缺氧条件培养的人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法实验组分别加入选择性iNOS抑制剂1400W 50（50μmol/L组）、100（100μmol/L组）、200（200μmol/L组）μmol/L的培养液培养;对照组不加选择性iNOS抑制剂1400W培养液培养,缺氧条件下培养24 h后,采用硝酸还原酶法检测细胞培养上清液NO含量;RT-PCR检测iNOSmRNA和VEGFmRNA水平。结果50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L组NO含量分别为（28.77±2.1）、（21.63±3.0）、（17.23±2.4）μmol/L,均明显低于对照组[（43.68±4.3）μmol/L]（P均〈0.01）;50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L iNOSmRNA水平分别为0.212±0.009、0.169±0.012、0.136±0.006,均明显低于对照组0.246±0.009（P〈0.05或P〈0.01）;50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L VEGFmRNA水平分别为0.429±0.038、0.309±0.022、0.249±0.014,均明显低于对照组0.598±0.040（P〈0.05或P〈0.01）。结论选择性iNOS抑制剂1400W可抑制缺氧条件下培养的人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达。提示选择性iNOS抑制剂1400W对肝癌新生血管的形成具有预防和潜在的治疗价值。