深圳市599株副溶血性弧菌血清学鉴定结果分析

目的了解南山区副溶血性弧菌血清群分布及流行趋势。方法依据GB/T4789.7-2003方法,对食物中毒病人肛拭样本及日常临测的食品和水产品样品进行副溶血性弧菌分离、培养及血清学鉴定,数据进行统计及分析。结果共分离到分离副溶血性弧菌599株,分属11个血清群,主要为O3、O1、O4、O5血清群,共占78.62%。其中食物中毒病人分离454株,主要血清群为O3占61.67%（280/454）,O1占12.33%（56/454）,O4占9.69%（44/454）;食品和水产品样品分离145株,主要血清群为O3占24.83%（36/145）,O1占12.41%（18/145）,O4占10.34%（15/145）,O5占8.97%（13/145）。结论食物中毒病人肛拭样本分离的副溶血性弧菌与食品和水产品样品分离的副溶血性弧菌血清群都以O3,O1,O4为主,食物中毒病人分离株血清分群缺少O7,O9,O10三个血清群,但食品和水产品样品分离株血清群O1～O11都有,更具血清分群多样化特点。     

一起由两种罕见血清型副溶血性弧菌引起食物中毒事件分析

目的 分析一起由两种罕见血清型混合感染引起的副溶血性弧菌食物中毒病原学的检测结果,为食物中毒病原学检查途径提供依据。方法 对一起在龙门县人民医院就诊食物中毒事件的9例患者采集其肛拭子样本,参照《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》( GB 4789.7—2013) 等标准进行病原学分析鉴定。结果 本次事件出现临床症状者9例,其中≤20岁2例,20~<40岁1例,40~<60岁4例,≥60岁2例;9份肛拭子样本检出8株副溶血性弧菌,血清分型O2:K28构成比占25.00%(2/8);O8:K21构成比占75.00%(6/8);经PFGE分子分型,2株O2∶K28血清型(VP18171、VP18175)相似度为66.7%;3株O8∶K21血清型(VP18172、VP18173、VP18176)相似度为100.0%,与另外3株O8∶K21血清型(VP18177、VP18174、VP18170)相似度为88.4%~95.2%;药敏试验结果显示,除有1株菌株对氨苄西林、头孢唑林二重耐药、1株菌株对氨苄西林耐药、3株菌株对头孢唑林耐药外,其它菌株对所有测试药物均敏感,无多重耐药现象。结论 此次食物中毒是由O2:K28和O8:K21这两种罕见血清型的副溶血性弧菌混合感染引起的。     

辽宁省阜新市副溶血性弧菌的生物学特征、毒力基因、耐药特征及分子溯源

目的 了解2016—2020年辽宁省阜新市副溶血性弧菌的生物学特征、毒力基因、耐药特征及MLST分型情况。方法 对2016—2020年分离到的42株副溶血性弧菌,采用PCR方法扩增其毒力基因和7个管家基因,PCR扩增测序后采用DNAstar和Bioedit等软件,对本次研究的42株副溶血弧菌进行MLST同源性分析。采用Kirby-Bauer纸片法检测抗生素的耐药性。结果 42株副溶血性弧菌均扩增出tlh基因,临床株以tlh+tdh+VPaI-1+VPaI-7+T3SS1+T3SS2+毒力基因型为主（53.8%,7/13）,而食品株以仅含有tlh+毒力基因型为主（37.9%,11/29）,13株临床株中均含有tdh或/和trh,仅有1株临床株为tdh和trh双阳性。42株菌共分为 22种ST型,其中ST3型10株,本研究中的42株菌株,PHYLOViZ软件分析显示是以ST345型副溶血性弧菌为起源,形成ST162、ST1413和ST2 3个克隆群。菌株对氨苄西林和青霉素100.0%耐药,对头孢呋辛、羧苄西林和多西四环素的耐药率分别达到88.0%、83.3%和81.0%,对庆大霉素和头孢哌酮的敏感性较高,耐药率分别为21.4%和35.7%。结论 本研究表明,阜新市存在较为严重的副溶血性弧菌污染,临床株携带的副溶血性弧菌毒力基因多于食品株,且对抗生素存在较为严重的耐药性,提示应加强副溶血性弧菌的病原学和分子流行病学监测,需重视流通环节海产品的监督管理,防止食物中毒事件发生。     

一起O8∶K21副溶血性弧菌食物中毒调查

目的了解并掌握2018年10月广州市一起由副溶血性弧菌引起的食物中毒的血清分型及耐药性,为食品安全控制及临床治疗提供依据。方法根据GB 4789.7-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》和WS/T 81-1996《副溶血性弧菌食物中毒诊断标准及处理原则》,对5株副溶血性弧菌分离株进行生化鉴定、血清分型及药敏试验。结果 5株副溶血性弧菌生化表现一致,血清型均为O8∶K21,药敏分析对14种抗生素反应大致相同,其中对氨苄西林100%耐药。结论经过流行病学调查和实验室检测,最终确认该起食物中毒为一起同血清型副溶血性弧菌引起的食物中毒事件。     

副溶血性弧菌耐药检测和分子生物学分型

目的 了解福州市副溶血性弧菌耐药情况及PFGE分型,为副溶血性弧菌污染引起的食物中毒防控提供科学依据。方法 收集福州市2018—2020年分离自福州市超市的海产品、养殖场所的水产品、养殖水、闽江水及食源性疾病暴发事件病例的副溶血性弧菌150株,采用Not I限制性内切酶对进行副溶血性弧菌酶切,以脉冲场凝胶电泳进行PFGE分型,并对对其中128株副溶血性弧菌进行耐药检测。结果 128株副溶血性弧菌对氨苄西林和头孢唑啉耐药率分别为82.6%和3.1%,对大部分抗生素敏感。150株副溶血性弧菌经酶切电泳后形成分子量在20~1 100 kb不同的12~18个条带,显示明显的遗传多样性,以85%相似度为标准,共分成120种PFGE型别。5起食源性疾病暴发事件菌株之间相似率在84.8%~97.2%,1起找到中毒食品,4起未找到。分离自同一养殖场同一池塘白鲢鱼和养殖场水2株副溶血性弧菌同源性达97.8%。结论 福州市副溶血性弧菌对于氨苄西林耐药率高,对大部分抗生素敏感,显示福州市沿海及江河湖抗生素污染可能较低。福州市同一起暴发病例菌株间具有同源性,不同海产品和海产品和闽江水之间环境分离菌株相似率低,亲缘关系相对较远, 可能和样品采集数量和质量有关,提示在暴发事件流行病学调查中应采集更多的环境样本,以准确找到病原菌污染源头。     

河北省唐山市2017年双壳贝类海产品中致病因子监测结果分析

目的通过对唐山市市售双壳贝类海产品中致病因子监测结果进行分析,了解唐山市市售双壳贝类海产品弧菌的污染状况,及时发现食品安全隐患,预防食源性疾病。方法根据GB 4789. 7-2013对副溶血性弧菌进行分离、鉴定和血清分型;霍乱弧菌依据《霍乱防治手册》(第六版)分离、鉴定和血清分型;创伤弧菌和溶藻弧菌均依据《2017国家食品污染和有害因素风险工作手册》检验;用PCR荧光检测技术检测副溶血性弧菌、霍乱弧菌菌株的毒力基因;对全部菌株进行耐药性试验。结果 4种弧菌均有检出,以副溶血性弧菌检出率最高,为51. 25%(41/80)。41株副溶血性弧菌分离株分属于9个血清群,其中以O1∶K32占比最高;全部菌株种属特异基因tlh阳性、tdh和trh基因均阴性; 4株霍乱弧菌血清型均为非O1非O139血清群,毒力基因检测结果为Ctx AB阴性。药敏结果显示,41株副溶血性弧菌对氨苄西林(68. 29%)、头孢唑林(92. 68%)耐药率较高,4株霍乱弧菌对氨苄西林(100. 00%)、头孢他啶(75. 00%)耐药率较高,3株创伤弧菌和1株溶藻弧菌均对氨苄西林(100. 00%)、头孢唑林(100. 00%)耐药。结论唐山市市售双壳贝类海产品弧菌污染较严重。副溶血性弧菌为主要致病菌,每种弧菌均存在一定程度的耐药情况,应加强对海产品的监控和抗生素的使用管理。     

广东省茂名市副溶血弧菌涉水产品分离株病原学特征

目的 了解茂名市涉水产品中副溶血弧菌分离株的病原学特征。方法 对茂名市食品安全风险监测中分离到的副溶血弧菌进行血清分型、抗生素敏感性实验、毒力基因检测、脉冲场凝胶电泳( PFGE) 分子分型和多位点序列分型（MLST）。结果 2017—2018年共分离到涉水产品中副溶血弧菌分离株44株,O型共分7个血清型,无明显优势血清型。44株分离株除对氨苄西林和头孢唑林表现出高度的耐药性外,对其它抗生素均敏感,未发现有分离株携带tdh和trh基因。44株分离株分成44种不同的PFGE带型,MLST分型发现有30个新的ST型,呈现一定的遗传多样性。结论 广东省茂名市涉水产品中副溶血弧菌分离株血清型别多样,对大部分的抗生素敏感,均未发现携带tdh和trh 基因,且呈现一定的遗传多态性,需要继续加大监测的力度和范围。     

市售海产品副溶血性弧菌污染状况调查

目的了解本地区海产品副溶血性弧菌的污染情况，为预防由海产品引起的细菌性食物中毒及溯源工作提供参考，对结果作统计分析。方法随机抽取市售海产品200份按国家标准GB／T-4789—2003及《卫生防疫细菌检验》闭操作规程进行副溶血性孤菌分离培养及鉴定。结果在200份样品中检出105株副溶血性弧菌，检出率为52．5％。其中鱼类检出率67％，虾类捡出率60％，贝类检出率16％。检出副溶血性弧菌的血清学分型（群），以O3群居多，占19．0％（20／105），其次为O4、O11、O1群，未定群有32株占30．5％，K抗原未栓出细菌性食物中毒常见的O3：K6型流行株。结论本地区海产品副溶血性孤菌存在着严重污染，以O3群居多。     

25株副溶血性弧菌食物中毒株的血清学分型、毒力基因及耐药分析

目的对广州萝岗区食物中毒来源的副溶血性弧菌进行实验室病原学分析,为疫情防控提供科学依据。方法收集2014-2015年3宗副溶血性弧菌食物中毒分离株,对其进行血清学分型、毒力基因检测及药敏试验。结果共分离到副溶血性弧菌食物中毒株25株,其中病人株22株,可分为2个血清型,O3:K6型21株(95.5%),O11:K22型1株(4.5%),TDH基因携带率为100.0%,TRH基因携带率为13.6%;3株食物株可分为2个血清型,O3:K6型2株(66.7%),O2:K51型1株(33.3%),TDH基因携带率为100.0%,未检出TRH基因。耐药谱分析结果显示:菌株对青霉素类抗生素氨苄西林耐药率为96.0%,1株食物株对氨苄西林、甲氨苄啶和磺胺甲恶唑多重耐药。结论广州萝岗区副溶血性弧菌食物中毒分离株以携带TDH毒力基因的O3:K6型菌株为主,菌株普遍对青霉素类抗生素氨苄西林有较强耐药性,少数菌株出现多重耐药。     

一起多型别副溶血性弧菌引起的食物中毒病原学研究

目的对一起由多种血清型副溶血性弧菌引起的食物中毒病原菌进行毒力基因及分子分型研究。方法参照国家标准方法对事件中可疑样品进行病原菌分离鉴定,对分离的副溶血性弧菌进行血清学试验,采用荧光定量PCR检测菌株的毒力基因耐热直接溶血素基因（tdh）、耐热直接溶血素相关溶血素基因（trh）与不耐热溶血素基因（tlh）,并用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对分离到的菌株进行分子分型。结果从24份病人标本和1份剩余食品中检出副溶血性弧菌25株;血清型分布为O4：K8 4株,O3：K6 19株,O4：KUT 1株和O3：KUT 1株;分离到的25株副溶血性弧菌毒力基因检测均为tdh＋tlh＋trh-;PFGE聚类分析显示,不同血清型菌株分为不同的簇,同一血清型菌株的PFGE条带型间存在1~2个条带的差异,菌株间存在关联。结论这是一起由多种血清型副溶血性弧菌引起的食物中毒。     

冻虾中副溶血性弧菌血清分群及耐药分析

目的对近年收集的从冻虾中分离出的副溶血性弧菌菌株进行分析,确定地区的优势血清群及耐药性。方法对2008和2009年从冻虾中分离出的副溶血性孤菌菌株进行复苏,采用玻片凝集试验进行血清分群试验,采用K—B法进行药敏试验。结果22株副溶血性弧菌共分4个血清群,0,群（18．2％）,0,群（50％）,0。群（13．6％）。O6群（9．09％）。庆大霉素、氯霉素、复方新诺明耐药率为0％;氨苄西林耐药率高达72．7％,磺胺嘧啶耐药率45．5％。结论2008和2009年海南水产品中的副溶血性弧菌的O3群（50％）为优势血清群,庆大霉素、氯霉素、复方新诺明是首选的抗生素。     

深圳市2010年食品中副溶血弧菌检测分析

目的了解深圳地区2010年食品中副溶血弧菌血清型及在食品中的分布状况、生物学特征。方法对食品中检出的159株副溶血弧菌进行血清学分型,并对14株O4群副溶血弧菌进行脉冲场凝胶电泳分子分型和毒力基因TLH、TDH、TRH检测。结果 159株副溶血弧菌共分46个血清型,血清型以O2：K28最多,占6.67%,14株O4群副溶血弧菌分子分型相似性均在80%以下,菌株谱型差异较大。其毒力基因TLH＋、TDH-、TRH-。结论食品中分离出的副溶血弧菌菌型非常分散,食品之间存在严重交叉污染,应加强食品卫生监督及流通环节的规范化管理。     

深圳市副溶血性弧菌血清型及毒力基因特征研究

目的了解从深圳市食源性疾病患者和环境中分离的副溶血性孤菌的血清型和毒力基因特征。方法2006-2008年从食源性疾病患者和海水、海产品等外环境分离到133株副溶血性孤菌,按GB／T4789．7-2008进行血清学鉴定。用PCR技术检测耐热直接溶血素基因（tdh）和耐热直接溶血素相关溶血素基因（trh）。结果133株副溶血性弧菌中,以03（43．6％）、01（16．5％）、04（16．5％）群为主。84．4％（76／90）的食源性疾病样本分离株携带毒力基因tdh,无单独携带trh基因的菌株;79．1％（34／43）的环境样本分离株不携带tdh和trh毒力基因,无同时携带两种基因的菌株。结论近年来引起深圳市食源性疾病的副溶血性孤菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,在外环境中检出的绝大多数副溶血性弧菌tdh基因和tdh基因均为阴性;O3仍为主要的流行群。     

广东省中山市2018—2019年沙门菌血清型分布、耐药性及分子分型

目的 了解中山市沙门菌的血清型分布、分子分型特征以及对抗生素的耐药情况。方法 对2018—2019年中山市哨点医院以及食物中毒事件采集检出的沙门菌进行血清型分型,采用微量肉汤稀释法（MIC）对15种药物进行药物敏感试验,应用脉冲场凝胶电泳法（pulse-field gel electrophoresis, PFGE）对3种优势血清型沙门菌进行分子分型。结果 509株沙门菌共鉴定出44种血清型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌单相变种（173/509,34.0%）、鼠伤寒沙门菌（107/509,21.0%）、肠炎沙门菌（93/509,18.3%）和斯坦利沙门菌（21/509,4.1%）。179株沙门菌中耐药菌株占93.9%（168/179）,多重耐药菌株占85.5%（153/179）。共产生82种耐药谱,最常见的耐药谱为AMP-AMS-TET-CHL-SXT-CFZ-Sul和AMP-TET-CHL-SXT-Sul。暂未检出对亚胺培南耐药的菌株,对其余14种试验药物均存在耐药现象,其中对氨苄西林、四环素、磺胺异噁唑、氯霉素、复方新诺明耐药率均超过60%。耐受10种及以上抗生素的菌株有22株,占12.3%（22/179）。42株鼠伤寒沙门菌单相变种分出40个PFGE带型,各型别相似度为52.2%~100.0%;32株鼠伤寒沙门菌分出24个PFGE带型,各型别相似度为48.9%~100.0%;21株肠炎沙门菌分出9个PFGE带型,各型别相似度为55.5%~100.0%。结论 中山市沙门菌血清型主要为鼠伤寒沙门菌单相变种、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌,多重耐药现象严重,PFGE分子分型结果呈多样性。