金属硫蛋白在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用

目的:探讨金属硫蛋白(MT)在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用机制。方法:建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,检测心肌细胞预缺氧24 h后MT及丙二醛(MDA)含量,Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶活性的变化以及用MT抗体阻断后的相应变化。结果:缺氧预处理组MT含量及Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶活性显著高于对照组及缺氧/复氧组(P＜0.05),MDA含量显著低于缺氧/复氧组(P＜0.01);使用MT抗体后,酶活性则显著降低,而MDA含量显著高于未加抗体和对照组(P＜0.01)。结论:缺氧预处理产生大量MT,后者可能通过减少MDA及促进Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶的活性升高起到保护心肌的作用。     

SHR心肌细胞内钙离子浓度改变与左室肥厚和功能的关系

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞内钙离子浓度的动态演变规律及其与左室肥厚和功能的相互关系。方法:应用Ca²⁺荧光指示剂Fura-2/AM分别测定了10周龄、22周龄、34周龄SHR心肌细胞内Ca²⁺浓度以及导管法测定了大鼠心功能,并以同龄京都-Wistar(WKY)大鼠作对照。结果:各周龄SHR收缩压(SBP)、心肌细胞内Ca²⁺浓度([Ca⁺]_i)、左室重量/体重(LVM/BW)均明显高于同龄正常血压WKY大鼠,22周龄SHR左室压力最大下降速率(-dp/dt_max)低于、左室松弛时间常数(τ)长于同龄WKY大鼠,34周龄SHR±dp／dt_max和左室收缩指数均显著低于同龄WKY大鼠,τ进一步延长;心肌细胞内[Ca⁺]_i与大鼠LVM/BW、SBP-dp／dt_max、τ呈显著正相关(r=0.47-0.83,P＜0.01),与dp／dt_max和收缩指数呈显著负相关(r=-0.46,P<0.05和-0.81,P<0.01)。结论:SHR心肌细胞内钙离子超负荷不仅介导了心肌肥厚的形成,还导致了心肌的收缩和舒张功能障碍。     

高胆红素血症新生兔脑组织中氨基酸含量的变化及意义

目的:探讨兴奋性氨基酸的兴奋性神经毒性作用是否有助于高胆红素血症的新生兔脑损伤的演变。方法:采用新生兔复制高胆红素血症动物模型,测定脑组织中Na⁺-K⁺-ATP酶活性及递质性和非递质性氨基酸的含量。结果:模型组血清胆红素浓度显著高于对照组(P＜0.01);脑组织匀浆及神经细胞膜Na⁺-K⁺-ATP酶活力显著低于对照组(P＜0.01);脑组织中谷氨酸(P＜0.05)和门冬氨酸(P＜0.01)含量也显著低于对照组;而抑制性氨基酸(γ-氨基丁酸)含量显著高于对照组(P＜0.01);非递质性氨基酸水平高于对照组(P<0.05)。结论:胆红素对新生兔脑组织能量代谢及钠泵的显著抑制可引起神经细胞外间隙兴奋性氨基酸的异常积聚,导致神经细胞的兴奋性毒性损伤,提示此种机制有助于新生动物胆红素诱导的脑损伤的发生。     

PTSD样情感行为异常大鼠海马ATP酶活性与Ca2+/CaM改变

目的:探讨创伤后应激障碍(PTSD)精神与行为异常的病理生理基础。方法:通过频率25Hz、波宽1ms、串长10s、串隔7min、强度100μA的恒流、单向方波, 建立海马惊厥阈下电刺激PTSD动物模型;采用神经生化、流式细胞仪、荧光标记术及Westernblotting等方法, 定量观测了实验动物海马Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性, 细胞内Ca²⁺含量与钙调素(CaM)相对活性平均通道荧光及海马组织总CaM表达的动态变化规律。结果:电刺激停止后48h内实验动物海马细胞线粒体Na⁺-K⁺-ATP酶活性明显下降, 72h内Ca²⁺-ATP酶活性显著降低;海马细胞[Ca²⁺]i于电刺激停止后72h内明显增高, 游离CaM平均通道荧光则同步降低, 而海马组织总CaM表达则于电刺激停止后48h内明显增多。结论:海马细胞[Ca²⁺]i持续增高、结合CaM含量明显增加及线粒体钠钾泵与钙泵功能受损, 可能是实验动物长时程PTSD样情感行为异常的重要病理生理基础之一。     

苯那普利对自发性高血压大鼠心肌缺血-再灌注心功能、氧自由基和肌浆网Ca2+-ATP酶的影响

目的:探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌缺血-再灌注心功能、氧自由基和肌浆网Ca²⁺-ATP酶的影响。方法:30只10周龄雌性SHR分为2组,SHR对照组(SHR)、SHR+B组(每日10mg/kg苯那普利);另15只同周龄、同性别Wistar大鼠作为对照组(Wistar)。治疗12周后,每组大鼠结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注30min,观察血流动力学参数,左室心肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物岐化酶(SOD)活性及肌浆网(SR)Ca²⁺-ATP酶活性。结果:与Wistar组比较,SHR组血压、左心室重/体重较高,左心功能损害程度较重,心肌MDA含量较高,SOD活性和SRCa²⁺-ATP酶活性较低;SHR+B组血压、左心室重/体重、左心功能损害程度,SRCa²⁺-ATP酶活性无显著性差异,但心肌MDA含量较低,SOD活性较高。结论:苯那普利可逆转SHR左室肥厚,促进缺血-再灌注心肌SRCa²⁺-ATP酶活性的恢复和减少氧自由基损害,从而减轻缺血-再灌注心功能损伤。     

β-淀粉样蛋白对D-半乳糖致衰大鼠海马线粒体膜流动性的影响

目的:研究β-淀粉样蛋白(β-AP)对衰老大鼠海马线粒体膜流动性的影响。方法:用D-半乳糖(D-gal)建立衰老动物模型,并且海马内微注射β-AP;检测各组大鼠学习记忆行为;以DPH为荧光探针,测定大鼠海马线粒体膜粘滞系数,同时测定海马Na⁺-K⁺ATP酶活性的变化。结果:D+A组大鼠Na⁺-K⁺ATP酶活性明显低于D组和A组(P＜0.05),与N组比较有显著差异(P＜0.01);海马线粒体膜流动性显著低于N组(P＜0.01),与D组和A组比较也有显著差异(P＜0.05)。结论:β-AP与D-gal联合可导致脑海马自由基损伤效应加重,海马线粒体膜流动性显著降低,Na⁺-K⁺ATP酶活性明显降低。     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:结扎冠状动脉左前降支10min再灌15min复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型,描记标准肢体Ⅱ导联心电图,测定心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性及丙二醛(MDA)含量,电镜观察心肌线粒体改变。结果:参麦注射液使再灌注性心律失常的发生率低于模型组、持续时间较短,心肌组织匀浆中SOD、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性高于模型组,MDA的含量低于模型组,心肌线粒体损伤轻于模型组。结论:参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有明显的防治作用,其机制与减轻氧自由基及钙超载损伤有关。     

不同剂量缬沙坦单用或与苯那普利钠联合应用对SHR血压和左室心肌肥厚的影响

目的:评价不同剂量AT₁受体拮抗剂valsartan单用和与benazepril联合应用对SHR的降压疗效、逆转心肌肥厚作用和对RAAS、内洋地黄素水平的影响。方法:30只14周龄雄性SHR随机分成空白对照组、benazepril组、小剂量valsartan组、大剂量valsartan组和小剂量valsartan与benazepril联用组,另设WKY正常对照组,分别给予生理盐水、benazepril 1 mg·kg^-1、valsartan 8 mg·kg^-1、valsartan 24 mg·kg^-1、valsartan 8 mg·kg^-1+benazepril 1 mg·kg^-1,每日1次灌胃给药,持续8周。结果:药物干预各组SHR动脉收缩压(SBP)水平明显下降,尤以大剂量valsartan组和联合用药组SBP下降最显著;药物干预各组血浆和心肌组织肾素活性均明显升高;benazepril组和小剂量valsartan与benazepril组血浆和心肌组织AngⅡ水平降低;大、小剂量valsartan组血浆和心肌组织AngⅡ水平均明显升高,valsartan剂量越大,血浆和心肌组织AngⅡ水平升高越明显;随SBP水平的降低,心肌组织Na⁺-,K⁺-ATP酶活性明显升高,而内洋地黄素水平则明显下降;药物干预各组LVM/BW、TDM均明显减低,尤以联合用药组改变最为显著。结论:不同剂量AT₁拮抗剂valsartan和benazepril单用或联用均有明显的降低SHR的SBP作用,能明显抑制左室肥厚进展;联合用药效果最为显著,并能有效防止单用AT₁拮抗剂所致血浆和心肌组织AngII水平的升高的副作用。     

应激状态下大鼠胃壁细胞H+-K+-ATP酶活性测定及电镜酶细胞化学研究

目的：探讨应激状态下大鼠胃壁细胞H⁺-K⁺-ATP酶活性及电镜酶细胞化学染色的变化。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、应激组和应激+奥美拉唑（OM）组，采用水浸-束缚应激（WRS）动物模型，检测胃粘膜溃疡指数（UI）和壁细胞H⁺-K⁺-ATP酶活性，观察壁细胞超微结构变化及H⁺-K⁺-ATP酶细胞化学染色结果。结果:应激组胃粘膜UI和壁细胞H⁺-K⁺-ATP酶活性明显高于对照组（P<0.01和P<0.05），而应激+OM组UI和H⁺-K⁺-ATP酶活性明显低于应激组（P<0.01）；电镜下对照组壁细胞呈静息状态，应激组壁细胞内分泌小管密集呈激活状态，而应激+OM组分泌小管明显扩张，绒毛稀少；酶细胞化学染色显示对照组壁细胞的分泌小管和顶部质膜有少量黑色点状酶反应产物沉积，应激组壁细胞的分泌小管可见多量的、密集分布的黑色点状酶反应产物，而应激+OM组分泌小管上几乎无反应产物沉积。结论:应激状态下大鼠胃壁细胞H⁺-K⁺-ATP酶活性升高，且与壁细胞超微结构改变相一致，提示胃酸是应激性溃疡发生的重要因素之一。     

缺血预处理快速效应对兔急性缺血脊髓的保护作用

目的:探讨缺血预处理快速相对兔腹主动脉短暂阻断致缺血脊髓的保护作用。方法:36只雄性新西兰兔随机分成3组(n=12):即缺血再灌注损伤组(IR组)、缺血预处理组(IPC+IR组)及假手术组(Sham组)。IR组阻闭兔腹主动脉肾下段20min,复制兔脊髓缺血损伤模型;IPC+IR组预先阻闭腹主动脉肾下段6min,再灌注30min后再次阻闭腹主动脉肾下段20min;Sham组除不夹闭腹主动脉外,其余处理同IR组。再灌注后8h、12h、24h和48h分别对动物神经功能评分,然后,处死动物取脊髓(L_5-7),分别行组织病理学观察及测定脊髓组织中Na⁺,K⁺-ATP酶的活性。结果:Sham组及IPC+IR组神经功能评分各时点均明显高于IR组(P＜0.01);Sham组及IPC+IR组脊髓前角正常神经细胞数明显多于IR组(P＜0.01);Sham组及IPC+IR组脊髓组织中Na⁺,K⁺-ATP酶的活性明显高于IR组(P＜0.01)。结论:缺血预处理快速相对兔急性缺血脊髓有显著的保护作用,这种保护作用可能与稳定Na⁺,K⁺-ATP酶的活性有关。     

长期摄取高钠盐饮食引发的高血压

目的:探讨高钠盐引发的高血压发病机制。方法:雄性SD大鼠40只,分为对照(NC)组、高盐(HS)组、高盐+L-精氨酸(HS+Arg)组、高盐+依那普利(HS+En)组和高盐+特拉唑嗪(HS+Ter)组,每组8只。各组饲料相同。NC组饮去离子水;HS组饮1.5%氯化钠溶液;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组分别饮用1.5%氯化钠溶液配制的L-精氨酸(4g·kg^-1·d^-1)、依那普利(30mg·kg^-1·d^-1)和盐酸特拉唑嗪(4mg·kg^-1·d^-1)。第8周末,大鼠在戊巴比妥钠麻醉下,直接测量颈总动脉血压,开腹抽取下腔静脉血及剖取肾脏、肾上腺。测定前海葱苷原A样物质(PLC)水平,Na^＋-K^＋-ATP酶活性,NO(x)、内皮素(ET)及血管紧张素II(AngII)水平。结果:HS组大鼠血压显著高于NC组,血浆PLC、ET及肾上腺AngII水平皆显著高于NC组;血浆和肾组织NO(x)和AngII水平、肾脏Na^＋-K^＋-ATP酶活性皆明显低于NC组;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组大鼠血压和血浆PLC水平皆显著低于HS组,血浆和肾组织NO(x)水平及Na^＋-K^＋-ATP酶活性皆明显高于HS组;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组肾上腺AngII水平及HS+Arg组血浆ET水平明显低于HS组,并与NC组相近。结论:在高钠盐引发的高血压发病机制中,除钠泵抑制因子释放增加致细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性减低外,内皮功能损害致NO释放减少也可能起重要作用。     

败血症休克肝细胞线粒体损伤机制的实验研究

目的:探讨败血症休克肝细胞线粒体损伤的机制。方法:30只SD大鼠随机分为3组,假手术组,12h手术组,16h手术组。采用盲肠结扎穿孔术(cecalligationandpuncture)制作败血症休克模型,比较手术前后肝细胞线粒体呼吸功能和氧化磷酸化功能的变化及线粒体膜ATP酶的活性改变与大鼠死亡率和血压变化的关系。结果:12h手术组平均动脉压(9.54±1.26)kPa明显低于假手术组(14.58±1.32)kPa(P<0.05),死亡率明显高于假手术组(P<0.05),12h手术组肝细胞线粒体Ⅲ态(1.28±0.25)、P/O比值(1.67±0.34)、呼吸控制率(1.27±0.25)、线粒体膜Ca²⁺-ATP酶(58.00±2.43)、Na⁺-K⁺-ATP酶(40.80±3.45)、Mg²⁺-ATP酶(78.30±4.16)、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶(2.70±2.25)活性与假手术组相比较,具有显著差异(P<0.05)。术后16h组更低于12h组,与大鼠死亡率增加呈显著正相关。结论:肝细胞线粒体摄氧功能和氧化磷酸化功能减弱,膜流动性降低,能量代谢功能障碍,线粒体内钙镁平衡紊乱是败血症休克肝细胞线粒体损伤的主要机制。     

舒张性心力衰竭兔Ca2+调控蛋白mRNA和蛋白质的表达

目的:探讨心肌细胞内Ca²⁺超负荷以及Ca²⁺调控蛋白在舒张性心力衰竭(DHF)发生中的作用。方法:采用RT-PCR和Westernblot技术测定实验兔Ca²⁺调控蛋白mRNA和蛋白质表达的变化。结果:⑴DHF兔心肌细胞内Ca²⁺含量显著高于假手术组(P＜0.01);⑵DHF兔SRCa²⁺-ATPase活性明显低于假手术组(P＜0.01);⑶DHF兔SRCa²⁺-ATPase和细胞膜L型Ca²⁺通道的mRNA水平明显低于假手术组(P＜0.05),而磷酸受纳蛋白、兰尼碱受体和肌集钙蛋白的mRNA转录无明显差异(P＞0.05);⑷DHF兔SRCa²⁺-ATPase的蛋白质表达明显低于假手术组(P＜0.05);磷酸受纳蛋白的相对含量与假手术组无明显差异(P＞0.05)。结论:SRCa²⁺-ATPase的mRNA和蛋白质表达减低以及细胞膜L型Ca²⁺通道mRNA转录减低是导致心肌细胞内Ca²⁺超负荷及DHF发生的重要因素。     

衰老大鼠急性肺损伤诱导肾功能受损

目的:观察衰老大鼠的急性肺损伤(ALI)是否可进一步诱导肾功能受损。方法:Wistar雄性大鼠40只, 复制成衰老模型, 然后再随机分成对照组(静脉注射生理盐水), ALI组(静脉注射脂多糖, LPS)及LPS组(左心室内注射LPS), 后两组再分2h及6h组。每组8只。注LPS后2h或6h收集血并取肺、肾。制备肺、肾组织匀浆待测。结果:ALI组在注LPS后仅至6h时血中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量才有显著升高(均P＜0.01)。而LPS组Cr、BUN含量均无显著升高。ALI组血中乳酸(LD)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量在注LPS后2h时均显著升高(P＜0.05, P＜0.01);而肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)及Na⁺-K⁺-ATPase活性均显著下降(均P＜0.01);上述变化持续至观察的6h时。ALI组在注LPS后仅至6h时, 肾组织中MDA、NO含量才有显著升高(均P＜0.01)及GSH-P_X、Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.01)。而在LPS组, 除注LPS后2h时的血中和2h、6h的肺组织中NO含量显著升高(均P＜0.05)及2h时的肺组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性显著下降(P＜0.05)外, 其它均无显著变化。结论:给衰老大鼠静脉内注射5mg/kg的LPS可致ALI, 并可进一步诱导肾功能受损。     

Losartan抗高血压左室肥厚的细胞学机制研究

目的:探讨细胞增殖与细胞凋亡在高血压左室肥厚中的作用及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT₁受体)拮抗剂在体干预对其影响。方法:选用成年12及24周龄SHR和WKY大鼠,干预组SHR自12周龄起每日胃管灌饲losartan(15mg·kg^-1·d^-1)至24周龄止。称重法测量左室肥厚指数,免疫组化法检测PCNA的蛋白表达,TUNEL法原位检测细胞凋亡,半定量RT－PCR法检测fas mRNA表达。结果:SHR左室肥厚指数、心肌细胞凋亡率显著多于同龄WKY(P＜0.01),心肌成纤维细胞凋亡率显著低于同龄WKY(P＜0.05)。12周龄SHR心肌细胞PCNA阳性率显著高于同龄WKY(P＜0.05),心肌成纤维细胞阳性率在两组间无显著差异。24周龄WKY和干预组SHR无PCNA阳性细胞检出,24周龄SHR偶见阳性心肌细胞。干预组左室肥厚指数、心肌细胞凋亡率显著低于同龄SHR组,成纤维细胞凋亡率显著高于同龄SHR组。各组大鼠心肌组织中fasmRNA表达量与细胞凋亡率呈正相关(r=0.52,P＜0.05)。结论:成年SHR左室肥厚的细胞学变化表现为心肌细胞的增殖/凋亡的失衡,以及心肌成纤维细胞凋亡的减少。losartan抗成年SHR左室肥厚的机制可能与改变这种异常的细胞群体变化及调节fas基因的表达有关。     

Evidence for a Na+/Ca2+ exchange mechanism in frog skin epithelium

 In the present study we investigated the possible existence of a Na⁺/Ca²⁺ exchange mechanism in the basolateral membrane of the frog skin epithelium and whether such a mechanism plays a role in the regulation of transepithelial Na⁺ transport. Cytosolic calcium ([Ca²⁺]_i) was measured with the probe fura-2 in a set-up in which pieces of tissue were mounted on the stage of an epifluorescence microscope. Na⁺ transport was measured as the amiloride-sensitive short-circuit current (I _sc) using a conventional voltage clamp. Basal [Ca²⁺]_i was 65±6 nM (n=15). Removal of Na⁺ from the mucosal solution had no effect on [Ca²⁺]_i. When Na⁺ was removed from the serosal solution, [Ca²⁺]_i increased biphasically to a peak of 220±38 nM (n=8, P=0.006). Readdition of Na⁺ to the serosal solution returned [Ca²⁺]_i to control level. The serosal Na⁺ gradient and changes in [Ca²⁺]_i were closely correlated; stepwise changes in serosal Na⁺ were followed by stepwise changes in [Ca²⁺]_i. These observations indicate the existence of a Na⁺/Ca²⁺ exchange mechanism in the basolateral membrane of the frog skin epithelium. The transepithelial Na⁺ transport decreased from 13.2±1.8 to 9.2±1.5 μA cm^–2 (n=8, P=0.049) when Na⁺ was omitted from the serosal solution. When this protocol was repeated in the absence of serosal Ca²⁺, Na⁺ transport decreased similarly from 16.7±1.7 to 11.6 ±1.8 μA cm^–2 (n=6, P=0.004). We conclude that it is unlikely that the observed decrease in I _sc after removal of serosal Na⁺ is due to an increase in [Ca²⁺]_i per se. Received: 10 July 1998 / Received after revision: 23 September 1998 / Accepted: 25 September 1998     

Sodium-sensitive, calcium-independent potassium conductance in the leech giant glial cell

 We have measured membrane current, membrane potential and intracellular Na⁺ and Ca²⁺ concentrations, [Na⁺]_i and [Ca²⁺]_i, of the giant glial cell in the nervous system of the leech Hirudo medicinalis using conventional microelectrodes and the fluorescent dyes sodium-binding benzofuran isophthalate (SBFI) and fura-2. When the Na⁺ was removed from the saline, the membrane conductance increased twofold from 1.29±0.1 μS to 2.57±0.18 μS (mean ± SEM; n=27). The rise in membrane conductance was accompanied by a current, which reversed around –74 mV, and the amplitude of K⁺-induced depolarizations or currents increased during Na⁺ removal, suggesting an increase in the K⁺ conductance of the glial membrane. We also monitored [Ca²⁺]_i when removing external Na⁺ in the presence and absence of external Ca²⁺, and during injection of the Ca²⁺-chelator BAPTA into the cells. Our results indicate that Na⁺ modulates a K⁺ conductance of these glial cells, independent of intra- and extracellular Ca²⁺. Received: 1 April 1998 / Received after revision and accepted: 22 May 1998     

甲状腺功能减退对新生仔鼠心肌肌浆网钙转运蛋白表达的影响

目的: 探讨甲状腺功能减退(甲减)对新生仔鼠心肌肌浆网钙转运蛋白肌浆网Ca²⁺-ATP酶(SERCA2a)、磷酸受纳蛋白(PLB) mRNA表达以及肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性的影响,并观察左旋甲状腺素(L-T₄)替代治疗后以上指标的改变。方法: SD孕鼠自孕15 d起每天予丙基硫氧嘧啶(PTU)(50mg/d)灌胃至仔鼠出生并持续整个哺乳期,制成围生期甲减模型,并对部分甲减仔鼠自出生当天起每天腹腔注射L-T₄(20 μg /kg)。收集甲减、治疗及对照组出生3、5、7日龄的仔鼠心室肌组织(每组10只),应用实时荧光定量PCR方法检测SERCA2a及PLB mRNA含量,并同时采用荧光分光光度计法测定心肌细胞内游离钙(MyoCa²⁺)浓度,无机磷酸根法检测心肌肌浆网钙泵活性。结果: 实时荧光定量PCR结果显示甲减组新生仔鼠心肌SERCA2a mRNA水平下降(P<0.05),PLB mRNA水平升高(P<0.01),SERCA2a/PLB下降(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠SERCA2a mRNA水平较甲减组上升(P<0.05),PLB mRNA水平下降(P<0.05),SERCA2a/PLB上升(P<0.01)。心肌细胞内游离钙浓度检测结果显示甲减组心肌细胞MyoCa²⁺浓度较同日龄对照组升高(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠心肌细胞MyoCa²⁺浓度低于同日龄甲减组仔鼠(P<0.05)。酶活性检测结果显示甲减组仔鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性低于同日龄对照组(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性较同日龄甲减组仔鼠升高(P<0.05)。结论: 甲状腺激素缺乏可使新生大鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性降低,并下调SERCA2a表达,上调PLB表达;肌浆网钙转运蛋白SERCA2a与PLB参与调控围生期甲减诱发的新生仔鼠心功能下降。     

Activation of Ca2+-sensitive Cl– current by reverse mode Na+/Ca2+ exchange in rabbit ventricular myocytes

 We investigated how Ca²⁺-sensitive transient outward current, I _to(Ca), is activated in rabbit ventricular myocytes in the presence of intracellular Na⁺ (Na⁺ _i) using the whole-cell patch-clamp technique at 36°C. In cells dialysed with Na⁺-free solutions,the application of nicardipine (5 μM) to block L-type Ca²⁺ current (I _Ca) completely inhibited I _to(Ca). In cells dialysed with a [Na⁺]_i≥5 mM, however, I _to(Ca) could be observed after blockade of I _Ca, indicating the activity of an I _Ca-independent component. The amplitude of I _Ca-independent I _to(Ca) increased with voltage in a [Na⁺]_i-dependent manner. The block of Ca²⁺ release from the sarcoplasmic reticulum by caffeine, ryanodine or thapsigargin blocked I _Ca-independent I _to(Ca). In Ca²⁺-free bath solution I _to(Ca) was completely abolished. The application of 2 mM Ni²⁺ or the newly synthesized compound KBR7943, a selective blocker of the reverse mode of Na⁺/Ca²⁺ exchange, or perfusion with pipette solution containing XIP (10 μM), a selective blocker of the exchanger, blocked I _Ca-independent I _to(Ca). From these results we conclude that, in the presence of Na⁺ _i, I _to(Ca) can be activated via Ca²⁺-induced Ca²⁺ release triggered by Na⁺/Ca²⁺ exchange operating in the reverse mode after blockade of I _Ca. Received: 20 January 1998 / Received after revision: 6 July 1998 / Accepted: 25 July 1998     

老龄大鼠脑缺血再灌注ATP酶和自由基代谢变化及其意义

目的:从ATP酶活性变化和自由基损伤方面研究老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。方法:青年(5月龄)和老龄(20月龄以上)大鼠均分为模型组和正常对照组,观察大鼠全脑缺血30min再灌注60min后ATP酶和SOD活性及MDA、Ca^2＋、Na^＋、K^＋含量。结果:老龄模型组Ca^2＋水平高于青年模型组和老龄对照组。老龄对照组脑组织Na^＋-K^＋-ATP酶低于青年对照组,老龄模型组低于青年模型组。老龄对照组Ca^2＋-ATP酶低于青年对照组,老龄模型组低于青年模型组但高于老龄对照组。老龄对照组血清和脑组织中SOD活性低于青年对照组,老龄模型组低于青年模型组。老龄模型组血清和脑组织MDA/SOD比值高于老龄对照组。结论:脑缺血再灌注损伤与钙超载和自由基损伤有关,但由于老龄大鼠脑组织ATP酶和钙含量及自由基代谢的增龄变化,使脑缺血再灌注后这些病理改变较青年大鼠更为明显并具有一定特点。