鹿角方吸收成分对乳鼠心肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

目的:观察鹿角方吸收成分对培养乳鼠心肌细胞胞浆游离钙的作用,探讨其强心机制。方法:采用血清药理学方法,使用钙荧光探针Fura-Z/AM观察鹿角方药物血清对乳鼠心肌细胞胞浆游离钙的影响。结果:鹿角方药物血清可升高培养乳鼠心肌细胞胞浆游离钙浓度,其作用依赖于细胞外钙存在。结论:鹿角方吸收成分可促进细胞外Ca~(2 )内流,升高心肌细胞胞浆游离钙浓度,这与其增强心肌收缩有关。     

新生大鼠心肌细胞原代培养分离方法的改进

目的 探索并改进乳鼠的心肌细胞原代培养方法。方法 以混合消化酶（0．08％胰蛋白酶加0．04％～0．06％Ⅱ型胶原酶等量加入的混合液）消化心肌组织,差速贴壁分离纯化后,加入5-溴脱氧尿嘧啶抑制成纤维细胞分裂增殖。结果 本方法培养的心肌细胞12h后即出现单个细胞搏动,2d～5d可见明显搏动的心肌细胞和心肌细胞团,成纤维细胞无明显增殖。结论 本方法是一种较为理想的乳鼠心肌细胞原代培养方法。     

参附青注射液对培养心肌细胞搏动的影响(摘要)

参附青注射液由人参、附子、青皮三味中药的提取物混合而成,本药已在临床和动物实验中获得了明显的升压、抗休克、改善微循环等作用。在这基础上,我们观察了参附青注射液对体外培养的乳鼠心肌细胞搏动的影响。分析在不受神经体液干扰下,对心肌细胞的直接作用及探讨该药的作用机制,摘要报告如下。材料和方法取新生的 Wistar 种乳鼠,生后3～     

人参芦头总皂甙对乳鼠原代培养心肌细胞的作用

此实验通过原代培养的乳鼠心肌细胞,观察了人参芦头总皂甙对心肌细胞正常DNA合成和对缺糖缺氧损伤性培养的心肌细胞的保护作用。结果表明:参芦总皂甙对体外培养心肌细胞DNA合成有促进影响;对缺糖缺氧损伤性培养的心肌细胞有一定的保护作用。     

四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞细胞凋亡的影响,探讨其心肌细胞保护作用。方法采用胰蛋白和胶原酶联合消化的方法原代培养的SD乳鼠心肌细胞,利用高纯氮气建立心肌细胞缺氧／复氧模型。实验分为正常组、模型组和药物干预组（予四妙勇安汤合生脉饮）。采用流式细胞术AnnexinV-FITC／PI双染法检测心肌细胞凋亡率。结果与正常组比较,模型组及药物干预组心肌细胞凋亡率均升高（P〈0．05）。与模型组比较,药物干预组心肌细胞凋亡率下降（P〈0．05）。结论四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧后心肌细胞凋亡有保护作用。     

脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达

目的通过体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,研究脂联素受体1（AdipoR1）、脂联素受体2（AdipoR2）及T-钙黏蛋白（Tcadherin）三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达。方法采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,通过a-肌动蛋白免疫荧光法对原代培养的心肌细胞进行鉴定,并在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。选用原代培养96h的单层心肌细胞进行实验,使用RT—PCR和细胞免疫组织化学方法检测AdipoR1、AdipoR2、Tcadherin的mRNA和蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T—cadherin的mRNA和蛋白表达,其中以AdipoR1和Tcadherin的mRNA和蛋白表达量高,与AdipoR2的表达量相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脂联素受体1、脂联素受体2和T钙黏蛋白,三种脂联素受体在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均有表达,并以脂联素受体1和T-钙黏蛋白的表达为主,脂联素受体2表达量较少。     

刺五加叶皂苷单体Sc3对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

目的：观察刺五加皂苷单体Ｓｃ３（ＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘＳｅｎｔｉｃｏｓｉｄｅＣ３）对培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位电参数的影响。方法：将５０～８００μｇ／ｍｌＳｃ３，分别加入到培养４～６ｄ后的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞的培养液中，依次记录加药前、后自发性搏动及动作电位电参数的变化。结果：Ｓｃ３可剂量依赖性地抑制被培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心肌细胞的自发性搏动及动作电位的电参数，其作用与０．４μｇ／ｍｌ尼莫地平相似，而该作用被８０μｇ／ｍｌＣａ２＋所反转。结论：Ｓｃ３能够阻滞Ｃａ２＋通道     

参苏汤对培养乳鼠心肌细胞耗氧量影响的实验研究

观察了《温病条辨》参苏汤对培养乳鼠心肌细胞耗氧量的影响。实验结果表明参苏汤对体外培养乳鼠心肌细胞耗氧量有明显降低作用,与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05)。     

当归补血汤对培养乳鼠心肌细胞缺糖缺氧损伤保护作用的超微结构研究

实验研究当归补血汤对培养乳鼠心肌细胞缺糖缺氧性损伤保护作用。经电子显微镜观察表明,缺糖缺氧对培养大鼠心肌细胞的超微结构有明显的改变,但当归补血汤对缺氧缺糖性培养大鼠乳鼠心肌细胞的超微结构与缺糖缺氧对照组比较有明显的改善,其形态结构特征,接近有糖有氧对照组,说明当归补血汤对缺糖缺氧性损伤的培养乳鼠心肌细胞有肯定的保护作用。     

黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导的乳鼠心肌细胞肥大的保护作用研究

目的:分析研究黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导的乳鼠心肌细胞肥大的保护作用。方法:分离乳鼠心肌细胞进行原代培养,以异丙肾上腺素诱导,构造乳鼠心肌细胞肥大模型,分为5组,分别为空白对照组、黄芪多糖高、中、低剂量组和阳性对照组,以黄芪多糖处理,培养后进行心肌细胞蛋白质含量的测定和心肌细胞体积的测定,分析黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导的乳鼠心肌细胞肥大的保护作用。结果:经Iso处理可成功诱导乳鼠心肌细胞肥大;高、中、低剂量组比较来看,低剂量组与阳性对照组最为接近,低剂量浓度抑制效果更佳,即黄芪多糖0.1 mg/L能有效对抗心肌的肥厚性改变。结论:黄芪多糖对异丙肾上腺素诱导的肥大心肌细胞具有较好的保护作用,其机制可能与抑制TLR4活化、阻断NF-KB及Ca MKⅡ信号通路的激活,减少炎症反应有关。     

薯蓣皂苷对缺氧/复氧所致乳鼠心肌细胞凋亡的保护作用

目的:研究薯蓣皂苷对缺氧/复氧所致乳鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制。方法:体外原代培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,以不同剂量的薯蓣皂苷进行干预。实验分为5组:空白对照组、缺氧/复氧组、薯蓣皂苷低、中、高剂量(10,20,40μmol/ml)干预组。MTT法检测心肌细胞存活率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡百分率;Fluo-3负载激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内[Ca2+]i的变化;硝酸还原酶法测定心肌细胞培养液中一氧化氮(NO)浓度。结果:与缺氧/复氧组比较,薯蓣皂苷各剂量干预组心肌细胞存活率明显升高,细胞凋亡率明显降低,心肌细胞[Ca2+]i荧光强度明显减弱,心肌细胞培养液中NO浓度降低。结论:薯蓣皂苷能有效抑制缺氧/复氧导致的乳鼠心肌细胞的凋亡,其可能与减轻细胞内钙超载,抑制受损心肌细胞NO升高,减轻过量NO的细胞毒性作用有关。     

参黄注射液对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本实验是在细胞水平上观察参黄液是否对培养的乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤有保护作用,同时这些观察有助于对其作用机理的进一步探讨。材料和方法一、实验药品:参黄注射液由黑龙江中医学院药理教研室提供。药品为水溶性,无菌。每毫升相当于生药1.0克。为人参、黄精、山楂所组成。二、心肌细胞培养:心肌细胞培养按常规法,用新生wigtar大鼠的乳鼠,在无菌的条件下取其心室,剪成1mm~3小碎块,用0.1％的胰蛋白酶消化。用MEM培养基制     

广枣总黄酮对CVB3病毒引起细胞凋亡的影响

目的:建立病毒性心肌炎的体外模型,用新的化学方法提取到含量较高的广枣总黄酮,研究广枣总黄酮抗病毒的效果.方法:化学法提取广枣总黄酮,高效液相法测定其含量.培养HeLa细胞和乳鼠心肌细胞,在HeLa细胞和心肌细胞水平上对柯萨奇B3病毒进行毒力滴定,并测定广枣总黄酮的药物毒性,建立体外病毒性心肌炎模型,通过细胞病变抑制实验...     

柯萨奇病毒性心肌炎感染模型的建立

从细胞水平介绍了新生乳鼠感染柯萨奇病毒性心肌炎的模型制备,分别从心肌细胞培养、毒株的选择、病毒的分离和毒力滴定、评价造模成功的指标等方面阐述,分析了现有的实验观察,对模型的制备方法加以总结。     

冠心平对H_2O_2致乳大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察冠心平对过氧化氢(H2O2)所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法:原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果:损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低(与对照组相比,P0.01),心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高(P0.01,P0.05),心肌细胞形态学变化减轻。结论:冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。     

刺五加叶皂苷单体Sc3对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

 目的：观察刺五加皂苷单体Sc₃(Acanthopanax Senticoside C₃)对培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位电参数的影响。方法：将50～800μｇ／ml Sc₃，分别加入到培养4～6d后的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞的培养液中，依次记录加药前、后自发性搏动及动作电位电参数的变化。结果：Sc₃可剂量依赖性地抑制被培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞的自发性搏动及动作电位的电参数，其作用与0.4μｇ／ml尼莫地平相似，而该作用被80μｇ／ml Ca^２+所反转。结论：Sc₃能够阻滞Ca^２+通道。     

提高新生大鼠原代心肌细胞纯度方法的探讨

目的:探讨提高新生大鼠原代心肌细胞纯度的方法。方法:应用0.08%心肌细胞消化液重复消化出生第1-3天乳鼠的心肌组织多次;收集的细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基中和。用差速贴壁分离法分离后,加入红细胞裂解液,以除去红细胞,加入溴脱氧尿嘧啶(Brdu)纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育2天,无血清同步化1天。结果:分离1只乳鼠获得的心肌细胞产量约为1.2×106个,有活力心肌细胞占90%以上,心肌细胞纯度>90%,3-4天后心肌细胞融合成片,并出现自发性节律性搏动。结论:该方法在保证心肌细胞产量和心肌细胞活性的同时,能大幅度提高心肌细胞纯度。     

乳鼠心肌细胞的培养

目的：原代培养乳鼠心肌细胞及进行形态学观察。方法：胰蛋白酶和Ⅱ型胶原分离消化心肌组织，差速贴壁和化学方法纯化心肌细胞。结果：12h心肌细胞基本贴壁，1—3天形成细胞簇，并出现同步搏动。结论：胰蛋白酶和胶原酶混合使用可以分离出数量较多、状态良好的心肌细胞。     

芳香新塔花黄酮抗氧化活性及对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的 探讨芳香新塔花黄酮(ZCF)的抗氧化活性,以及对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的影响.方法 采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH自由基)清除法测定ZCF的自由基捕获清除能力.体外培养原代SD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧-复氧损伤模型,用MTT法测定药物对心肌细胞存活率的影响,测定给药后丙二醛(MDA)的变化.结果...     

川芎内酯A预处理对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:观察川芎内酯A预处理对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的保护作用。方法:单纯低氧/再给氧为心肌细胞低氧2小时、复氧1小时。低氧预处理为心肌细胞低氧25min/复氧30min后,再低氧2小时、复氧1小时。川芎内酯A预处理为心肌细胞经药物孵育55min后,低氧2小时,复氧1小时。实验结束后取上清液测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);β液体闪烁计数仪测心肌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性。结果:川芎内酯A预处理可使上清液中LDH漏出明显减少,MDA含量降低,SOD活性提高。还可降低心肌细胞内MAPK活性与H/R组比较。结论:川芎内酯A预处理对体外培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,MAPK信号传导途径可能参与这一保护作用。