氢对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌梗死面积和血流动力学的影响

目的观察氢及饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌梗死面积和血流动力学的影响。方法随机将40只家兔分为4组,每组10只。正常组开胸后冠状动脉穿线不结扎;模型组开胸并结扎冠状动脉前降支60min,松解后静脉泵入生理盐水10mL/kg或腹腔空气10mL/kg;静脉氢盐水组给予静脉氢盐水10mL/kg,10min内注入;腹腔氢气组结扎冠状动脉前降支60min,松解后给予腹腔内氢气10mL/kg,10min内注入。应用依文氏兰和氯化三苯基四氮唑染色确定心肌梗死面积并分阶段测定左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和正负等容收缩期左室压上升或下降速率(±dp/dt max)等。结果静脉氢盐水组和腹腔氢气组心肌梗死面积均明显小于模型组(P 0.01);静脉氢盐水组和腹腔氢气组心脏血流动力学指标LVSP、LVEDP和±dp/dt max均优于模型组(P 0.01)。结论静脉氢盐水和腹腔氢气均能减少缺血再灌注损伤心肌梗死面积,同时具有较好的血流动力学效应。     

腹腔氢气和饱和氢盐水对家兔心肌缺血再灌注损伤及超微结构的影响

目的探讨腹腔氢气和静脉饱和氢盐水对家兔心肌缺血/再灌注损伤及心肌超微结构的影响。方法将40只家兔麻醉开胸随机分为假手术组(A组)、模型对照组(B组)、腹腔氢气组(C组)和饱和氢盐水组(B组)各10只。假手术组冠脉穿线不结扎,余3组冠脉结扎60min后再灌注同时,B组5只腹腔氧气10mL/kg一次性注入,5只静脉生理盐水10mL/kg10min泵入,C组腹腔氢气10mL/kg10min注入;D组静脉饱和氢盐水10mL/kg泵入。B组、C组D组均再灌480min。结果 A组、C组、D组超氧化物歧化酶(SOD)明显高于B组,但A组、C组、D组间两两比较差异无统计学意义(P0.05);A组、C组、D组抑制羟自由基能力明显大于B组。电镜和Tunnul监测显示:A组、C组、D组细胞凋亡数明显少于B组,心肌结构相对完整,线粒体细胞核损伤较小,仅见少量溶酶体无自噬体,而B组心肌组织破坏严重细胞膜线粒体脊融合断裂较重,形成空泡部分溶酶体空泡形成,可见多个自噬体。结论两种给氢方法均能保护缺血再灌注损伤,这种保护作用与H_2清除自由基抗炎、抗凋亡有关。腹腔氢气较静脉氢盐水应用方便效果更佳。     

含氢饱和生理盐水对急性一氧化碳中毒性迟发性脑病的神经保护作用

目的 研究含氢饱和生理盐水对急性一氧化碳(CO)中毒迟发性脑病的神经保护作用及可能机制.方法 雄性SD成年大鼠随机分为空白对照组、CO+生理盐水组、CO+氢生理盐水组.制备一氧化碳中毒模型,含氢饱和生理盐水或者生理盐水以10 mg/kg剂量间隔8h连续给药6次,观察一氧化碳中毒后5天内神经元凋亡指数,检测脑组织内Caspase-3活性、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、8-羟基脱氧鸟嘌呤水平.结果 饱和氢生理盐水明显减少细胞凋亡,降低丙二醛、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及8-羟基脱氧鸟嘌呤含量,抑制Caspase-3及超氧化物歧化酶活性.结论 饱和氢生理盐水通过抗凋亡、抗炎及抗氧化作用降低急性一氧化碳中毒迟发性脑损伤.     

富氢生理盐水对烟雾吸入所致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 观察富氢生理盐水对烟雾吸入所致大鼠急性肺损伤的保护作用.方法 雄性Sprague-Dawlay大鼠72只,随机分为空白对照组18只,损伤对照组18只,生理盐水组（NS组）18只和富氢生理盐水组（HS组）18只.损伤对照组、NS组、HS组制作烟雾吸入性急性肺损伤模型,空白对照组不做特殊处理.造模成功后,损伤对照组不注射任何药物,NS组、HS组分别于造模后2、6、12 h各取6只大鼠腹腔注射5 mL/kg生理盐水和富氢生理盐水.造模24h后检测各组大鼠血清TNF-α,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中的NF-κB p65,原位末端标记法（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况,计算凋亡指数（AI）.光镜下观察大鼠肺组织病理改变,透射电子显微镜观察肺组织亚细胞结构改变.结果 大鼠血清TNF-α水平、肺组织中NF-κB p65阳性表达率、肺细胞AI在损伤对照组、NS组及HS组均高于空白对照组,HS组低于相应时点的NS组（P均＜0.05）;HS组造模后2h肺细胞AI＜造模后6h＜造模后12h（P均＜0.05）,光镜及电镜观察结果与之一致.结论 富氢生理盐水对大鼠烟雾吸入性急性肺损伤的肺组织有保护作用,应用越早,效果越好.     

急性胰腺炎与氧化应激

氧化应激是在机体内活性氧生成和抗氧化物质失衡状态下,直接或间接通过信号转导通路引起细胞的损伤,是许多疾病的病因,同时又是许多疾病发生、发展的结果.研究表明,氧化应激在急性胰腺炎的发病中发挥重要作用,还与胰腺炎时胰腺外器官,如心、肝、肺、肾、消化道等的损伤有密切联系.氧化应激产生大量的活性氧和活性氮,引起炎症反应及微循环障碍,通过不同途径引起细胞坏死或凋亡,造成胰腺及其他脏器的功能障碍甚至衰竭.抗氧化剂可减少氧自由基的产生或直接清除机体产生的氧自由基,并增强机体的抗氧化能力,对急性胰腺炎具有较好的治疗作用.     

急性心肌梗塞期间呼气中高戊烷浓度的意义

急性心梗(AMI)再灌注期间,组织损伤的原因之一是氧自由基的有害作用。氧自由基通过脂质过氧化反应攻击细胞的脂质成份,造成细胞膜及细胞其他成份的损伤或死亡。脂质过氧化反应过程中产生的戊烷可随呼吸排出体外,目前认为呼气中戊烷浓度是一种敏感和直接反映脂质过氧化反应程度的指标。为了观察心肌缺血后再灌注期间由氧自由基介导的细胞脂质过氧化反应性损伤,作者测定10例健康人(正常对照组)、10例拟诊AMI而心电图没有相应表现者(病人对照     

线粒体复合物Ⅲ在大鼠急性心肌梗死后氢盐水药物后适应中的作用

目的探讨线粒体复合物Ⅲ在大鼠急性心肌梗死后氢盐水药物后适应中的作用。方法选择SD大鼠96只,随机分为假手术组、模型组、后适应组及抗霉素A组,每组24只。假手术组:开胸,在左心室前壁注射生理盐水60μl。模型组、后适应组及抗霉素A组在急性心肌缺血45min后,分别给予生理盐水、氢饱和盐水、氢饱和盐水+抗霉素A。检测各组磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)等相对表达水平及心肌梗死面积。结果假手术组无心肌缺血梗死,其他3组缺血面积比例比较,无统计学差异(50.01%～53.67%,P0.05)。与后适应组比较,抗霉素A组羟自由基、丙二醛、肌钙蛋白T和肌酸激酶同工酶水平升高,P-ERK、P-Akt水平降低,差异有统计学意义(P0.05),且心肌梗死面积增大[(14.22±2.61)%vs(10.01±1.21)%,P0.05]。结论线粒体复合物Ⅲ在氢盐水药物后适应发挥重要保护作用,但并非全部保护作用与其相关。     

胡黄连苷Ⅱ对H2O2损伤L-02细胞的保护作用

目的:探讨胡黄连苷Ⅱ(picroside Ⅱ)对氧化应激损伤L-02细胞的保护作用.方法:H2O2损伤的L-02细胞作为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖状况,膜联蛋白(Annexin-Ⅴ)和碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡,罗丹明123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial potential membrane,△Ψm),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量.结果:0.6 mmol/L H2O2可诱导L-02细胞凋亡.细胞内ROS浓度增加,细胞线粒体跨膜电位明显下降.预先经过0.05,0.5,5 mmol/L浓度的胡黄连苷Ⅱ处理后,H2O2诱导的L-02细胞凋亡明显减少(30.8%±9.09%,10.2%±9.82%,8.2%±7.10%vs 42.8%±8.28%,均P＜0.01),同时明显减弱H2O2对细胞内ROS浓度和线粒体跨膜电位的影响.结论:胡黄连苷Ⅱ对氧化应激损伤L-02细胞具有保护作用,其机制可能与降低细胞内ROS含量,进而抑制△Ψm的降低有关.     

α-生育酚清除神经元细胞内外氧自由基作用观察

目的 观察α-生育酚对神经元细胞内外氧自由基的清除作用。方法 培养SD胎鼠皮层神经元细胞，将神经元细胞分为正常对照组、单纯氧自由基损伤组和α-生育酚保护组。用Fenton反应造成神经元细胞损伤，用激光共聚焦显微镜观察各组神经元DCFH—DA染色情况，确定神经元细胞内氧自由基浓度，并用ESR法检测各组神经元细胞外液中的氧自由基浓度。结果 α-生育酚保护组神经元细胞内氧自由基浓度在不同时间点均低于单纯氧自由基损伤组（P均〈0．05），神经元细胞外氧自由基浓度在不同时间点亦均低于单纯氧自由基损伤组（P均〈0．05）。结论 α-生育酚可以有效清除神经元细胞内外的氧自由基。     

饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌细胞线粒体损伤的影响

目的探讨饱和氢盐水对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌细胞蛋白激酶C(PKC)/热休克蛋白90(HSP90)信号通路和线粒体损伤的影响。方法选取18月龄健康老年清洁级雄性SD大鼠150只,采用随机数字表法分为5组:空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、饱和氢盐水组、生理盐水组,每组30只。HE染色观察心肌病理学。透射电镜观察线粒体超微结构。蛋白质印迹法和RT-PCR法检测心肌细胞PKC、HSP90、缝隙连接蛋白43(Cx43)、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达。结果与空白对照组和假手术组比较,缺血再灌注组、饱和氢盐水组和生理盐水组大鼠心肌缺血再灌注后12h和24h心肌细胞线粒体损伤程度评分明显升高,PKC、HSP90、Cx43、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。与缺血再灌注组和生理盐水组比较,饱和氢盐水组大鼠心肌缺血再灌注后12h和24h心肌细胞线粒体损伤程度评分明显降低[(1.34±0.12)分vs(2.54±0.28)分、(2.61±0.29)分,(1.27±0.13)分vs(2.57±0.27)分、(2.64±0.28)分,P0.05],PKC、HSP90、Cx43、Cx45蛋白及PKC、HSP90、Cx43、Cx45mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论饱和氢盐水可减轻线粒体损伤,从而减轻老年大鼠心肌再灌注损伤。     

氧自由基对肺血管内皮细胞及其血管紧张素Ⅱ分泌的影响

通过肺动脉内皮细胞对氧自由基刺激的反应探索氧自由基对肺血管的损伤和引起肺动脉高压的机理。以黄嘌呤氧化酶作用于次黄嘌呤而产生氧自由基，观察其对体外培养小母牛肺动脉内皮细胞（CPAE）的增殖和分泌血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）的影响。结果：揭示氧自由基不但可抑制CPAE细胞生长，可导致细胞的损伤，而且可刺激其分泌ATⅡ。在含0．1mmol/L次黄嘌呤的细胞培养液中加入0．05U/ml黄嘌呤氧化酶的相同条件下，氧自由基的上述作用与细胞接触时间呈正相关。刺激15min时，即可见CPAE分泌ATⅡ水平升高，为对照水平的2～3倍。刺激30min时，ATⅡ的分泌达高峰，而刺激60min时，ATⅡ的分泌能力反而减弱，细胞形态也发生改变，表明细胞的明显损伤。结果提示氧自由基、黄嘌呤氧化酶可能通过刺激ATⅡ的分泌而参与急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）时肺动脉高压的形成。     

抗氧化营养素对NaF致大鼠肾细胞DNA损伤的干预性实验研究

目的研究不同浓度NaF对体外培养大鼠肾细胞DNA的损伤作用及不同抗氧化营养素对氟的干预性影响.方法体外分离培养大鼠肾细胞,分别施加不同浓度的NaF,一定浓度的VC、VE、Se和GSH,采用单细胞凝胶电泳方法,研究NaF对肾细胞DNA的影响及这些抗氧化营养素的干预性作用.结果当NaF为0.25mmol/L时,对大鼠肾细胞DNA有明显的损伤作用;一定浓度的VC、VE、Se和GSH均能拮抗0.25 mmol/L的NaF对肾细胞DNA产生的损伤作用.结论一定浓度的VC、VE、Se和GSH能拮抗一定浓度的NaF对大鼠肾细胞造成的DNA损伤作用.     

胞二磷胆碱对帕金森病模型中多巴胺能神经元的保护作用

目的 探讨胞二磷胆碱（citicoline,CC）对6-OHDA诱导的帕金森病体外细胞模型的神经保护作用机制.方法 MTT法检测细胞活力;采用Fluo3/AM通过流式细胞仪检测细胞内[Ca^2＋]i,采用罗丹明123检测线粒体膜电位（△ψm）.结果 2、1和0.1 mmol/L浓度的胞二磷胆碱,细胞活力与对照组比较明显增高（P＜0.01）,0.1 mmol/L组（P＜0.05）;1、0.1、0.01和0.001 mmol/L胞二磷胆碱能对抗由6-OHDA引起的多巴胺能神经元的损害,细胞活力高于6-OHDA组（P＜0.01）;胞二磷胆碱能对抗6-OHDA造成的细胞内[Ca^2＋]i增高及△ψm的下降（P＜0.01）;1 mmol/L胞二磷胆碱＋6-OHDA组△ψm高于对照组（P＜0.01）.结论 胞二磷胆碱通过保护神经元细胞膜,降低细胞内[Ca^2＋]i,提高线粒体膜电位,增强细胞活力,发挥其对多巴胺能神经元的保护作用.     

氢气对结肠损伤的保护作用

氢气是一种具有治疗作用的医学气体,研究表明其具有抗氧化、抗炎和抗细胞凋亡效应,可选择性清除细胞毒性氧自由基,在缺血再灌注损伤、炎症性疾病、代谢综合征等多种疾病中发挥保护作用。本文就氢气的生物学效应、对结肠损伤的保护作用及其临床应用潜力作一综述。     

莫沙比利通过p38/MAPK通路保护氯吡格雷所致胃黏膜上皮细胞损伤

目的:探讨莫沙比利对氯吡格雷所致人胃黏膜上皮细胞(gastric mucosal epithelium cells,GES-1)损伤的保护作用及其机制.方法:建立GES-1单层细胞模型,将细胞分为阴性对照组、氯吡格雷IC50浓度(0.36mmol/L)损伤组及不同浓度莫沙比利(0.4、0.5、0.6μmol/L)联合氯吡格雷IC50浓度组,噻唑蓝比色法(MTT)和流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡情况;采用Western blot检测各细胞组p-P38以及紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达量.结果:莫沙比利对氯吡格雷致GES-1细胞损伤有抑制作用(P<0.05);与阴性对照组相比,氯吡格雷损伤组p-P38表达显著增加,而莫沙比利组p-P38表达量较氯吡格雷损伤组减少(P<0.05);同时随着p-P38表达量的减少,Occludin、ZO-1表达量逐渐增加.结论:莫沙比利能够抑制氯吡格雷所致GES-1细胞损伤,可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化、上调紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达,从而达到保护胃黏膜的作用.     

用0.6%低渗盐水治疗高渗性糖尿病昏迷

我们试用0.6％低渗盐水治疗4例高渗性糖尿病昏迷,获得良好的效果,现报告如下。 例1,男,53岁。入院时患者呈昏迷状态,血压测不到。实验室检查:血糖29.5mml/L,尿糖( ),尿酮体(-),血钾5.5mmol/L、钠155mmol/L,BUN19.3mmol/L,CO_2CP15mmol/L,血浆渗透压344mmol/L。诊断为高渗性糖尿病昏迷及感染性休克。经给静脉滴注生理盐水加胰岛     

别嘌呤醇对高糖诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞的保护作用

目的探讨别嘌呤醇对高糖损伤后的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制。方法以HUVEC为研究对象,体外培养至第三代,分为：①20mmol／L高糖损伤对照组;②别嘌呤醇保护组（浓度分别为0．1mmol／L、0．2mmol／L、0．3mmol／L）;③维生素C阳性对照组（浓度为100mg／L）。不同浓度别嘌呤醇及维生素C先与HUVEC孵育24h,再加入20mmol／L高糖诱导损伤48h,测定各组细胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）含量及细胞凋亡率。结果别嘌呤醇（0．1mmol／L、0．2mmol／L、0．3mmol／L）药物保护组的细胞凋亡率低于20mmol／L高糖组,其中以0．3mmol／L更为明显（P〈0．01）;细胞培养液中SOD、NO的量均较20mmol／L高糖组增高,其中以0．3mmd／L别嘌呤醇组更为明显（P〈0．01）。药物保护组细胞培养液中合成MDA、ICAM-1较波动性高糖组降低,且在一定浓度范围内（0．05-49．30mmol／L）呈浓度依赖性（P〈0．05）。结论①别嘌呤醇对高糖体外诱导的HUVEC损伤有保护作用,呈浓度依赖性。②别嘌呤醇对高糖体外诱导HUVEC损伤保护作用的机制包括抑制氧化应激、炎症反应及细胞凋亡。     

富含氢气生理盐水抑制血管损伤后内膜增殖的作用及机制

目的:探讨富含氢气生理盐水对血管损伤后内膜增殖的影响及其机制。方法:采用高压下制备氢气饱和的生理盐水(HRSS),对颈动脉球囊损伤的大鼠进行注射[10ml/(kg·d)],采用HE染色,计算内膜厚度,面积及管腔丢失比例,检测其治疗效果。同时,DHE染色检测1周,2周血管活性氧含量,     

氢气医学研究中给氢方式选择及研究进展

氢气(H2)是一种常温下惰性气体,具有一定还原性,还通过清除氧自由基及调控多种信号转导通路等机制来对多种疾病起到治疗作用。相关研究中所采用的给氢方式包括吸入H2、腹腔注射富氢液体或促进内生H2等,给氢方式的选择还取决于具体研究目的。本文对H2医学研究给氢方式的选择及相关研究进展作一综述。H2医学研究的发展沿革早在1975年,《科学》杂志上最早发表高压H2用于治疗无毛白化病大鼠皮肤癌模型[1],该文提出H2能清除羟基自由基。但是由于高压H2实验难以重复,未见后续研究报道。Ohsawa等[2]于2007年提出H2可通过清除羟自由基,减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,开启了H2医学研究和应用领域的新篇章。     

氢饱和盐水对阿尔茨海默病模型大鼠氧化应激损伤的影响

目的探索氢饱和盐水对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠氧化应激的影响。方法选用280³20 g Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为模型组、假手术组、氢饱和盐水治疗组;利用立体定向技术侧脑室注射Aβ1320 g Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为模型组、假手术组、氢饱和盐水治疗组;利用立体定向技术侧脑室注射Aβ1⁴2建立AD模型大鼠,腹腔注射氢饱和盐水。给药14 d后采用生物化学法检测各组大鼠的脑海马组织匀浆的MDA含量,利用免疫组织化学法检测各组大鼠脑海马组织氧化应激标志物HNE及8-OH-d G蛋白的表达。结果模型组大鼠脑组织MDA含量为(6.65±1.07)nmol/mgprotein,与假手术组相比显著升高(P=0.000),而氢饱和盐水治疗组大鼠脑组织的MDA含量较模型组大鼠显著降低(P=0.016)。模型组大鼠海马齿状回显现较多的HNE阳性细胞,假手术组大鼠鲜见HNE阳性细胞,而氢饱和盐水治疗组大鼠海马齿状回HNE阳性细胞较模型组大鼠显著减少(P=0.011)。海马齿状回呈现棕黄色8-OH-d G染色阳性细胞,与假手术组大鼠相比,模型组大鼠海马齿状回出现明显增多的8-OH-d G染色阳性细胞(P=0.000),而经氢饱和盐水治疗后的模型大鼠海马齿状回8-OH-d G染色阳性细胞明显减少(P=0.000)。顶叶皮层呈现棕黄色8-OH-d G染色阳性细胞,与假手术组大鼠相比,模型组大鼠顶叶皮层出现明显增多的8-OH-d G染色阳性细胞(P=0.000),而经氢饱和盐水治疗后的模型大鼠顶叶皮层8-OH-d G染色阳性细胞明显减少(P=0.000)。结论氢饱和盐水可显著减少Aβ诱导的氧化应激损伤蛋白及核酸标志物的表达。