致敏树突状细胞抗乳腺癌作用的实验研究

目的 探讨负载肿瘤抗原DC诱导的CTLs对乳腺癌细胞的杀伤作用.方法 以负载肿瘤细胞抗原的DCs体外诱导CTLs,用ELISA法检测IFN-γ和IL-12的表达水平,用LDH法检测CTL对乳腺癌细胞的杀伤作用.结果 负载肿瘤抗原DC组IFN-γ和IL-12的浓度高于未致敏DC组、抗原组及单核细胞对照组(P＜0.05),且负载抗原DC组所刺激的CTLs的杀伤作用也强于未致敏DC组、抗原组及单个核细胞组(P＜0.01)及对照的HT-29组(P＜0.01).结论 采用乳腺癌细胞冻融抗原体外致敏DC,诱导产生肿瘤抗原特异性CTLs具有显著的抑瘤效应,实验证明致敏DC治疗乳腺癌是一种有效的方法 ,有望成为乳腺癌免疫治疗的新疗法.     

白花蛇舌草诱导骨髓瘤8226细胞凋亡的研究

目的:通过对白花蛇舌草(hedyotis diffusa,HD)在体外抑制骨髓瘤细胞株RPMI8226的增殖作用的观察,探讨HD治疗骨髓瘤患者的作用机制。方法:以多发性骨髓瘤细胞株(RPMI8226)为研究对象,应用MTT法观察不同浓度HD对RPMI8226细胞增殖的影响作用,用AV/PI流式细胞检测术观察细胞凋亡,Hoechst染色观察形态学改变。结果:HD在1~4mg/mL浓度范围内对RPMI8226细胞有明显的增殖抑制作用,最高抑制率达到了92.68%,呈时间、剂量依赖关系。以1、2、3mg/mL的HD分别作用RPMI8226细胞24h后,AV/PI流式细胞仪分析结果显示早期凋亡率分别为:22.52%、62.31%、69.94%,高于空白对照组8.93%。HD诱导RPMI8226细胞凋亡时,细胞核可见凋亡小体,且凋亡小体数量随HD浓度增加而增加。结论:HD在一定浓度下可抑制骨髓瘤细胞增殖,其作用机理可能是诱导细胞凋亡。此实验研究结果为HD作为治疗多发性骨髓瘤的辅助药物提供实验依据。     

斑蝥素对HL—60细胞和QGY7703细胞的作用研究

采用MTT法和流氏细胞仪技术,研究了斑蝥素对HL－60细胞和QGY7703细胞的存活率和细胞周期分布影响。结果表明,斑蝥素对HL－60细胞的IC50是15．34μmol/L,对QGY7703细胞的IC50是18．54μmol/L。按蝥素处理HL－60细胞和QGY7703细胞24h后,G2－M期细胞分布都有所增加,G0－G1期细胞分布都有所降低;斑蝥素处理HL－60细胞24h后,G0－G1期峰前有亚二倍体峰出现,说明斑蝥素在所用剂量下降够诱导HL－60细胞发生凋亡。     

小檗碱对高糖诱导的小鼠足细胞凋亡的影响

目的观察高糖对体外培养小鼠足细胞活力、凋亡的影响以及小檗碱的保护效果。方法通过温度条件培养方法诱导永生代小鼠足细胞株分化成熟,分为正常糖对照组(NG,5 mmol/L)、甘露醇高渗对照组(MA,30 mmol/L)、高糖模型组(HG,30 mmol/L)、高糖(30 mmol/L)+小檗碱治疗组(BBR,1.25μmol/L),干预24 h、48 h、72 h后收集细胞,采用MTT法检测足细胞活力,用流式细胞仪分析细胞凋亡率,并用Q-PCR法检测podocin和nephrin的mRNA表达水平。结果 NG对照组和MA对照组之间的细胞活力、凋亡率和凋亡相关分子的mRNA表达水平差异无统计学意义(P0.05);与NG对照组比较,HG模型组足细胞活力和足细胞凋亡率差异有统计学意义(P0.01),对podocin和nephrin的mRNA表达有明显的抑制作用(P0.01),并且这种高糖刺激作用可随着作用时间的延长而增强;与HG模型组比较,BBR治疗组足细胞活力和凋亡率差异有统计学意义(P0.01),podocin和nephrin的mRNA表达水平明显增加(P0.01)。结论高糖环境可诱导小鼠足细胞凋亡,且这种诱导凋亡作用与高渗环境无关;小檗碱对高糖诱导的足细胞凋亡有保护作用。     

蒙药玉簪花中支托皂苷元及其三个皂苷的体外细胞毒活性研究

目的对玉簪花中分离得到的4个单体化合物进行体外细胞毒作用研究。方法采用MTT实验考察四个化合物对狗肾细胞MDCK的细胞毒性和对人慢性髓源性白血病细胞K562、小鼠淋巴瘤细胞YAC-1、人肝癌细胞SMMC-7721的体外增殖抑制作用。结果玉簪花中四个单体化合物对四个细胞株均表现出不同程度的生长抑制作用。化合物1和化合物2对MDCK细胞株的IC_(50)值分别为287.38μg/ml,5.12μg/ml。化合物1对三个肿瘤细胞株K562、YAC-1、SMMC-7721的IC_(50)值分别为0.17μg/ml、5.38μg/ml、2.84μg/ml,化合物2对K562、YAC-1、SMMC-7721亦呈现明显的增殖抑制作用。结论化合物1对癌细胞具有良好的选择性,化合物2对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,但对正常细胞毒性很强。化合物1和2可作为玉簪花药材的质量标志物。     

用蒌叶提取物治疗髓细胞样白血病

US2005089585-A1蒌叶Piper betel L.提取物或冻干的蒌叶提取物或含有蒌叶提取物的复方可用来治疗包括人在内的动物髓细胞样白血病,降低单核细胞水平。将蒌叶切成小片,与极性溶媒混匀后,提取、过滤,收集滤液,冻干得半固体,经HPLC分离,最后用制备性HPLC在流速12mL/min下,测出280n     

天花粉蛋白对结肠癌SW-620细胞株增殖、黏附和迁移的实验研究

目的 研究天花粉蛋白对结肠癌SW-.620细胞株增殖、黏附和迁移的影响.方法 采用MTT比色法检测天花粉蛋白对SW-620细胞的增殖影响;Hochest33258观察天花粉蛋白诱导SW-620细胞凋亡;流式细胞术检测天花粉蛋白对细胞周期和细胞凋亡的影响;细胞黏附和划痕实验检测天花粉蛋白作用后细胞黏附和迁移的改变.结果 1.天花粉蛋白对SW-620细胞的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和质量浓度依赖性;2.天花粉蛋白可将SW-620细胞阻滞于S期,并能诱导其凋亡;3.天花粉蛋白具有改变SW-620细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的黏附作用,并使其迁移能力下降.结论 天花粉蛋白能抑制SW620细胞的增殖、诱导其凋亡,并能改变其黏附和迁移能力.     

皮肤Merkel细胞癌1例

1病历介绍患者,女,71岁。发现骶尾部肿块20+d,破溃出血15 d。查体:骶尾部右侧见一约1.0 cm×1.0 cm×1.0 cm大小肿块,中央破溃,边界尚清,质中。病理检查:肉眼可见附皮肤的结节1个,大小2.5 cm×1.5 cm×1.0 cm,皮肤中央见一灰白色结节,直径0.8 cm,高出皮肤0.5 cm,无包膜,切面灰白色,质中。镜下见肿瘤位于真皮及皮下组织,瘤细胞弥漫分布,细胞较单一,中等圆形,胞质较少,弱嗜酸性,胞核圆且突出,呈空泡状,瘤细胞间有少许纤维间隔。免疫组化:CK、EMA、CgA、NSE均阳性,LCA、S-100、CD99、TDT均阴性。病理诊断:皮肤小细胞癌(Merkel细胞癌)。…     

丰城鸡血藤H-103树脂提纯物体外抗肿瘤作用研究

目的 明确丰城鸡血藤H-103树脂提纯物(H-103REM)体外抗肿瘤作用及其作用机制,为其临床应用提供实验依据.方法 MTT法检测不同浓度H-103REM对MCF-7细胞和A549细胞的24,48,72 h抑瘤率后,用HE染色法,DNA琼脂糖凝胶电泳,化学发光法检测其抑瘤作用机制.结果 MTT结果表明H-103REM作用后,对两种细胞均有较强的抑制作用,并且其抗瘤作用随着时间和剂量的增加而增强,同时HE染色可见有凋亡小体形成.DNA琼脂糖凝胶电泳图谱也显示H-103REM可引起细胞出现凋亡特有DNA ladder.且与阴性对照相比,H-103REM能显著提高两种肿瘤细胞caspase-3活性(P<0.001).结论 H-103REM对MCF-7和A549在体外具有显著抑制作用,而且其作用可能是通过caspase途径诱导肿瘤细胞发生凋亡来实现的.     

白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响

目的:探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡,二步法免疫组化检测Fas蛋白表达,半定量RT-PCR检测Fas和FasL mRNA表达。结果:白英提取液对Hela细胞增殖有较强的抑制作用,且这种作用呈一定的剂量-时间依赖性;细胞凋亡率明显升高;Fas基因mRNA和蛋白表达显著上升,FasL mRNA表达明显下降。结论:白英提取液通过上调Fas基因和下调FasL基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制Hela细胞增殖。     

应激与胶质细胞功能的关系及中医药的调节作用

本文对各胶质细胞暴露在应激环境中的形态功能变化以及中医药对应激中各胶质细胞功能变化 的调节作用进行了总结,为开展以便为开展应激致病机制,及其中医药对应激致病的调节机制研究提供新的思路。     

细胞凋亡与青光眼

近年来 ,细胞凋亡作为热门课题之一 ,活跃在生命科学领域。最近 ,有不少学者关于青光眼视网膜神经节细胞 (retinal ganglion cells,RGCs)凋亡的研究 ,显示了细胞凋亡在青光眼中起到了重要作用。本文就有关细胞凋亡与青光眼研究现状作一综述。1　细胞凋亡概述细胞生命过程中存在着两种不同的细胞死亡方式 ,坏死 (necrosis)和凋亡 (apoptosis)。细胞坏死是细胞被挤压或受到严重损害后发生细胞水肿、崩解 ,释放毒性产物 ,引起炎症反应[1,2 ] 。炎症的出现可以清除毒性产物 ,结果导致细胞死亡 ;另外炎症反应的本身造成组织损害、功能丧失。在…     

虎耳草提取物对前列腺癌细胞凋亡的影响

目的:研究虎耳草提取物对前列腺癌细胞凋亡的诱导作用.方法:从虎耳草中提取不同的有效部位,运用流式细胞仪,观察对体外培养的前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响.结果:虎耳草提取物对前列腺癌细胞的凋亡有诱导作用.结论:虎耳草提取物在体外可抑制前列腺癌细胞的增殖,诱导前列腺癌细胞凋亡,提示虎耳草可作为细胞凋亡诱导剂用于前列腺癌的治疗.     

碲化镉量子点对A549细胞的毒性研究

目的探讨碲化镉（CdTe）量子点的生物安全性。方法以水热法制备的、巯基丁二酸（MSA）包被的CdTe量子点为研究对象,作用于体外培养的A549细胞。实验设立对照组和不同浓度CdTe量子点作用组。CdTe量子点作用于细胞后,采用倒置荧光显微镜观察量子点作用下的细胞形态;使用alamar Blue检测CdTe量子点对细胞存活率的影响;使用Hoechst 33342单染法观察CdTe量子点对A549细胞核形态的影响;使用Annexin V—FITC单染法检测CdTe量子点对A549细胞凋亡的影响。结果CdTe量子点作用后,低浓度（2．5,5,10mg／L）实验组细胞变化不明显,高浓度实验组（25,50mg／L）中的细胞肿胀变圆,细胞数量减少;存活率显著下降;在染色下可见明显的细胞凋亡。结论MSA包被的CdTe量子点在达到一定浓度后对A549细胞有较强的毒性。这可能与量子点的纳米特性、CdTe的金属化合物毒性有关。     

花椒抗宫颈癌Caski细胞作用及其机制的初步研究

目的研究花椒挥发油抗宫颈癌Caski细胞作用及其可能的机制。方法花椒挥发油按不同时间（24,48,72 h）及不同浓度（0.5～8 mg/ml）分别处理Caski细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。结果4 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72h可显著地抑制Caski细胞增殖,1 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72 h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少。结论花椒挥发油可抑制Caski细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

中药多糖与过继免疫联合治疗卵巢癌

目的:观察比较中药多糖干预后的多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)细胞在不同条件下特异性杀伤卵巢癌SKOV3细胞的效果,探讨中药与过继免疫联合治疗卵巢癌的可行性。方法:实验分4组,CIK组、PBOC-CIK组、SKOV3Ag-PBDC-CIK组及SKOV3Ag-ADC-CIK组。联合猪苓多糖(100 mg.L-1)、茯苓多糖(100 mg.L-1)、黄芪多糖(100 mg.L-1)及多种细胞因子对卵巢癌患者外周血CIK细胞进行体外诱导和扩增,以卵巢癌细胞株SKOV3冻融抗原致敏外周血与腹水来源的DC细胞,比较单纯CIK、未经抗原负载的外周血树突状细胞(DC)活化的CIK、经抗原负载的外周血DC活化的CIK、经抗原负载的腹水DC活化的CIK对SKOV3细胞的杀伤作用,并动态观察CIK细胞的增殖情况。结果:①CIK与DC共培养可显著增加CIK增殖倍数(P<0.01);②中药多糖干预后CIK对SKOV3卵巢癌细胞株有明显杀伤作用,且杀伤率随效靶比增加而提高,细胞杀伤率分别为(9.12±0.21)%,(10.15±0.27)%,(11.20±0.34)%和(12.73±0.43)%(P<0.05);③SKVO3冻融抗原负载的外周血DC可显著增加CIK特异性杀伤卵巢癌SKOV3细胞的能力,杀伤率显著高于未负载抗原外周血DC活化的CIK细胞和单纯CIK细胞(P<0.05或P<0.01);④腹水来源DC负载抗原后所活化的CIK细胞对SKOV3细胞杀伤率,与负载抗原的外周血来源DC活化的CIK无明显差异。结论:经SKOV3肿瘤细胞冻融抗原冲击致敏的DC,可促进中药多糖干预后CIK细胞扩增,增强CIK细胞对SKOV3卵巢癌细胞的杀伤作用,且卵巢癌腹水可作为过继免疫治疗中效应细胞的一个重要来源。     

植物细胞固定化技术及其在药物生产中的应用

 利用固定化植物细胞生产各种植物性药物是生物工程和药物学的一个新领域，并有广阔的发展前景。本文综述了植物细胞的固定化方法、优点及其在植物药生产中的应用。     

艾可清对艾滋病猴T细胞各亚群的影响

目的:探讨艾可清对艾滋病猴T细胞各亚群的免疫调节作用。方法:选取经静脉注射感染SIVmac239的中国恒河猴15只,随机分为3组:艾可清低剂量组,艾可清高剂量组和模型对照组,每组5只。分别于给药前、给药4周、给药8周、停药4周和停药8周采集外周血,检测T细胞功能亚群、纯真亚群和记忆亚群,观察其变化;分离血浆检测外周血SIV病毒载量。结果:与对照组相比,高剂量组CD_4~+CD_(28)~-(%)在给药第4周、第8周和停药4周均显著上升(P0.05,P0.01);CD_4~+纯真细胞在高剂量组给药8周显著上升(P0.05),CD_8~+纯真细胞在低剂量组给药第4周、第8周和高剂量组给药8周均显著上升(P0.05,P0.01);高、低剂量组各时间点病毒载量与对照相比没有显著变化。结论:艾可清对艾滋病猴CD_4~+CD_(28)~-细胞和CD_4~+、CD_8~+纯真细胞有一定的提升作用。     

复方苦参注射液对肺癌和肝癌细胞抑瘤作用研究

目的 通过观察复方苦参注射液对肺癌LAC、Lewis细胞,肝癌Hep、H22肿瘤细胞体内、外的抑瘤效果,探讨其在治疗恶性肿瘤中的药理作用.方法 采用MTT法检测复方苦参注射液对肺癌LAC细胞的体外抑制率;以实体瘤模型观察该药对Lewis肿瘤细胞和H22肿瘤细胞的抑瘤作用;以腹水瘤模型观察其对肝癌HEP肿瘤细胞生长的影响.结果 复方苦参注射液对LAC细胞生长的抑制与含药血清的浓度及作用时间呈一定的相关性;复方苦参注射液高、中、低剂量组对Lewis肺癌的抑瘤率分别为46%、32.8%和22.3%(P＜0.01),对H22肿瘤细胞的抑瘤率分别为37.9%、30.6%和24.2%(P＜0.01);对Hep腹水型肝癌的抑瘤率分别为34.8%、17.5%和15.6%(P＜0.01),与血清对照组比较,均具有显著性差异.结论 复方苦参注射液对LAC细胞体外生长具有抑制作用;对实体瘤Lewis肺癌、H22肿瘤的生长均能产生明显的抑制作用;对Hep肝腹水癌细胞的生长亦有一定的抑制作用.     

人参多糖注射液联合DC干预肺、肠癌Th1/Th2研究

目的：探索人参多糖注射液（GPS）联合树突状细胞（DC） 对非小细胞肺癌（NSCLC）、大肠癌（CRC）异病同治的Th1/Th2相关肿瘤免疫调节机制。方法：80例NSCLC,CRC患者（各40例）按照不同疾病及治疗方法随机分4组：NSCLC对照组（DC治疗）、NSCLC研究组（GPS联合DC治疗）、CRC对照组（DC治疗）、CRC研究组（GPS联合DC治疗）,每组各20例。4组肿瘤患者干预前后分别检测血清γ干扰素（INF-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素5（IL-5）。结果：4组肿瘤患者治疗前后比较,Th1（INF-γ,IL-2）及Th1/Th2（INF-γ/IL-4,IL-2/IL-5）升高,Th2（IL-4,IL-5）降低（P<0.01）;4组肿瘤患者治疗后比较,Th1（INF-γ、IL-2）及Th1/Th2（INF-γ/IL-4,IL-2/IL-5）：NSCLC研究组>NSCLC对照组,CRC研究组>CRC对照组（P<0.05）,Th2（IL-4、IL-5）：NSCLC对照组>NSCLC研究组,CRC对照组>CRC研究组（P<0.05）。结论：GPS联合DC对此两类肿瘤患者Th1/Th2皆具有不同程度调节作用,此为其异病同治作用机制之一;GPS对DC免疫调节具有协同作用。