淫羊藿苷基于ERα-Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠成骨分化的影响及机制研究

目的:探讨淫羊藿苷基于ERα-Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠体内成骨分化的影响及作用机制。方法:80只雌性SD大鼠随机分为4组:假手术+生理盐水组(Sham-Veh)20只,假手术+淫羊藿苷组(Sham-Icariin)20只,去势+生理盐水组(Ovx-Veh)20只,去势+淫羊藿组(Ovx-Icariin)20只。分别在术后4周、8周进行Micro-CT相关参数(Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp、BV、BV/TV及BMD)、RT-PCR相关指标(ALP、COL-1、OPG/RANKL、OCN、Run X2、ERα和GAPDH)及染色(β-catenin免疫荧光染色、HE染色及TRAP染色)评价。结果:骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨体积(BV)、骨与组织体积比(BV/TV)及骨密度(BMD)在术后4周和8周时,淫羊藿苷组均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P0.05);而骨小梁间距(Tb.Sp)在术后4周和8周时,淫羊藿苷组均低于生理盐水组,差异具有统计学意义(P0.05)。淫羊藿苷组在ALP、COL-1、OCN、Run X2和ERα方面均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P0.05);而淫羊藿苷组在OPG/RANKL方面低于生理盐水组,差异具有统计学意义(P0.05)。淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的β-catenin免疫荧光染色明显多于生理盐水组(Sham+Ovx);在HE染色方面,淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的骨组织明显多于生理盐水组(Sham+Ovx);而在TRAP染色方面,淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的破骨细胞明显少于生理盐水组(Sham+Ovx)。结论:淫羊藿苷在大鼠体内可以通过ERα-Wnt/β-catenin信号通路促进BMSCs的成骨分化,促进骨生成,并可通过ERα相关的OPG/RANKL/RANK系统抑制破骨细胞的生成,抑制骨吸收。     

淫羊藿素与RANKL蛋白靶点结合抑制破骨细胞分化抗骨质疏松作用研究

目的探讨淫羊藿素(IT)与核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白靶点结合能力,并阐明其抗骨质疏松作用机制。方法采用分子对接技术模拟并预测RANKL与IT的相互作用,并通过切除大鼠双侧卵巢制备骨质疏松模型,评价IT对模型大鼠体质量、骨吸收血清指标碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸盐酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、骨密度(BMD)以及骨组织形态的调节作用。结果 IT可与靶蛋白RANKL发生稳定对接,IT组大鼠体质量较模型组显著降低(P0.05),IT能显著降低模型大鼠血清ALP、TRACP-5b水平(P0.01),显著降低模型大鼠股骨表面积与体积比值(BS/BV)、骨小梁分离度(Tb.Sp)值(P0.01),显著增加BMD、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th N)、骨小梁数目(Tb.N)值(P0.01)。结论 IT能通过与RANKL蛋白靶点结合,抑制破骨细胞分化并发挥抗骨质疏松作用。     

淫羊藿醇提物对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用及机制研究

目的评价淫羊藿醇提物对去除卵巢致骨质疏松大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法 SD大鼠切除双侧卵巢,造成骨质疏松大鼠模型。手术4周后,以阳性药依普黄酮片(200 mg/kg)和不同剂量的淫羊藿醇提物(170、85 mg/kg)连续ig给药8周,然后取血清测定其碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活性;采用免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;采用三点弯曲法测定其胫骨的生物力学性质;最后运用micro-CT对股骨远端的骨小梁参数进行分析,并对其进行三维重建,得到骨小梁的3D图形来直观地说明淫羊藿醇提物对骨质疏松大鼠的作用。结果淫羊藿醇提物高剂量组不仅能够显著降低血清ALP和StrACP活性,还能显著增加OPG蛋白表达,降低RANKL蛋白表达,且能有效地改善胫骨生物力学性质和股骨骨小梁参数。结论淫羊藿醇提物高剂量(170 mg/kg)对骨质疏松大鼠具有明显的治疗作用,其可能是通过促进成骨细胞活性、抑制破骨细胞活性来实现的。     

淫羊藿苷对尾悬吊模拟失重诱导大鼠骨丢失的防护作用

目的 研究淫羊藿苷对尾悬吊模拟失重大鼠骨丢失的影响。方法 大鼠随机分为空白组、模型组、阿仑膦酸钠组(2.0 mg/kg)、淫羊藿苷组(30 mg/kg),每组10只。大鼠灌胃给药6周,每周称重1次,从第3周开始,除空白组外,其他各组均给予尾悬吊处理。6周后,ELISA法检测大鼠相关骨代谢标志物水平;双能X线骨密度仪检测大鼠骨密度;三点弯曲力学实验分析大鼠股骨生物力学性能;Micro-CT扫描仪观察大鼠股骨形态结构特性并对骨小梁进行三维重建,测定相关空间结构参数;Schr9dinger Maestro 12.8软件将阿仑膦酸钠、淫羊藿苷分别与BMP-2、OPG、RANK、RANKL蛋白进行分子对接;Western blot法检测股骨组织BMP-2、OPG、RANK、RANKL蛋白表达。结果 与模型组比较,淫羊藿苷组骨吸收相关标志物水平降低(P<0.05,P<0.01),骨形成相关标志物水平、骨密度、股骨骨应力、弹性模量及最大载荷、股骨组织BMP-2和OPG蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);淫羊藿苷较阿仑膦酸钠与骨代谢蛋白对接更好,更易发生作用。结论 淫羊...     

淫羊藿苷对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠骨破坏及血清RANKL/OPG的干预作用

目的 观察淫羊藿苷对Ⅱ型胶原诱导型关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠血清破骨细胞分化因子（receptor activator of NFκB-ligand,RANKL）和护骨素（osteoprotegerin,OPG）的影响及对骨破坏的保护作用。方法 除正常组（8只）外,其余大鼠用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂注射诱导建立CIA大鼠模型。选取关节炎指数（arthritis index,AI）≥6分的CIA大鼠24只,根据其AI评分分为模型组、甲氨喋呤组和淫羊藿苷组,每组8只。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,甲氨喋呤组给予甲氨喋呤每周 5 mg/kg灌胃,淫羊藿苷组给予淫羊藿苷20 mg/（kg?d）灌胃,均连续给药4周。每周记录大鼠AI评分。给药结束后,HE染色观察踝关节组织形态学变化;X射线检查足趾骨质破坏与骨质疏松情况;ELISA法测定血清RANKL、OPG水平。结果 给药4周后,与模型组比较,淫羊藿苷组AI评分、Larsen评分、血清RANKL水平及RANKL/OPG比值明显降低,OPG水平明显升高,差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;甲氨喋呤组上述指标均降低,差异无统计学意义（P>0.05）。HE染色示淫羊藿苷组关节滑膜增生、炎症细胞浸润与软骨面破坏程度明显减轻。结论 淫羊藿苷能缓解或减轻CIA大鼠骨破坏程度,其作用机制可能与降低CIA大鼠血清RANKL水平,提高OPG浓度进而降低RANKL/OPG比例有关。     

淫羊藿总黄酮对老年骨质疏松大鼠Notch和Smads通路蛋白表达的影响

目的:观察淫羊藿总黄酮对老年骨质疏松大鼠Notch和Smads通路蛋白表达的影响。方法:将60只老年雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、试验组(包括低、中、高剂量组)和阳性对照组共6组,试验组根据淫羊藿总黄酮灌胃剂量分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,除空白对照组外,其他5组腹腔注射D-半乳糖建立老年骨质疏松大鼠模型,造模8周后连续灌胃给药12周,观察各组大鼠的骨密度和股骨抗弯力,ELISA法检测血清碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)及25-羟基维生素D(25OHD)含量,免疫组化法检测骨组织Notch1蛋白表达,免疫荧光法检测Smad4和Smad7,并比较肝肾功能指标变化。结果:试验组和阳性对照组的骨密度、股骨抗弯力、OPG和25OHD显著高于模型对照组,而ALP显著低于模型对照组,差异均有统计学意义(P0.001),但试验高剂量组和阳性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。试验组和阳性对照组的Notch1和Smad4蛋白表达显著高于模型对照组,而Smad7蛋白表达低于模型对照组,差异均有统计学意义(P0.001),但试验高剂量组和阳性对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:淫羊藿总黄酮可增加老年骨质疏松大鼠骨密度,改善骨代谢,可能与上调Notch1和Smad4蛋白表达及下调Smad7蛋白表达有关。     

杜仲提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度及骨微结构的影响

目的:研究杜仲提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢、骨密度以及骨微结构的影响。方法:通过双侧卵巢切除术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型,术后4 w将精神状态良好的成模大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇片(0.8 mg/kg)阳性对照组及杜仲提取物高(6 g/kg)、中(3 g/kg)、低(1.5 g/kg)剂量组,并设假手术组。连续给药16w,每周记录各组大鼠体质量。16 w后ELISA法检测血清中雌二醇(E2)、骨钙素(OC)含量及尿中脱氧吡啶啉(DPD)含量;全自动生化仪检测血清中钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)含量及尿中钙(Ca)、磷(P)、肌酐(Cre)含量;骨密度仪检测左侧股骨骨密度(BMD);取第五节腰椎骨(L5)行u CT检测骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨体积分数(BV/TV)、骨密度(BMD)、连接密度(Conn.D)。结果:给药16 w后,与模型组比较,杜仲提取物组大鼠体质量显著降低;血清E2显著升高,OC、ALP显著降低,尿中DPD/Cre、Ca/Cre、P/Cre显著降低;腰椎骨、股骨BMD均显著升高;大鼠第五节腰椎骨骨小梁Tb.N、BV/TV、Conn.D显著升高,Tb.Sp显著降低。结论:杜仲提取物对去卵巢大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用,可升高血清雌二醇水平,降低雌二醇缺乏引起的体质量增加,调节骨代谢平衡,显著提高去卵巢骨质疏松大鼠股骨及腰椎骨骨密度,改善骨小梁微结构。     

虫草素通过抑制氧化应激和炎症反应对骨折愈合的影响研究

[目的]探讨虫草素治疗骨折愈合的作用及机制.[方法]50只SPF级SD大鼠(240～270 g),采用标准的大鼠闭合性股骨横行骨折内固定模型,并腹腔注射给予虫草素治疗;采用微型CT扫描仪(Micro-CT)对骨折大鼠股骨进行放射学检测,并用骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb.Th),骨小梁数(Tb.N)和骨密度...     

淫羊藿提取物对去卵巢大鼠骨转换率增强的抑制作用

目的研究淫羊藿提取物对去卵巢大鼠骨转换的影响。方法取3月龄SD大鼠手术切除双侧卵巢,1个月后ig给予阳性药17β-雌二醇(2mg/kg)以及淫羊藿提取物混悬液(110mg/kg),连续给药3个月。采用全自动生化分析仪测定血清中钙(s-Ca)、磷(s-P)的量和碱性磷酸酶(ALP)的活性及尿中钙(u-Ca)、磷(u-P)和肌酐(Cr)的量。利用ELISA试剂盒测定尿脱氧吡啶酚(DPD)的量。取胫骨近端制成不脱钙骨切片进行骨组织形态计量学分析。结果与假手术组相比,去卵巢大鼠s-Ca、s-P没有变化,ALP活性增强,u-Ca排出显著升高,尿中DPD与Cr的比值(DPD/Cr)显著增加,子宫萎缩。骨小梁面积百分比降低,骨小梁间隙增加。ig给予雌二醇或淫羊藿提取物3个月,血清ALP活性降低,u-Ca排出量减少,尿中DPD/Cr降低,骨小梁增加,且骨小梁间隙减小。雌二醇组大鼠子宫增生,淫羊藿组大鼠子宫与模型组相比没有变化。结论淫羊藿提取物能够显著抑制由于雌激素缺乏引发的骨转换增强,调整骨形成和骨吸收的关系,对遏制去卵巢造成的骨质疏松有一定的作用,且长期服用对子宫没有刺激作用。     

仙茅酒炙前后对骨质疏松小鼠股骨组织中OPG及RANKL表达的影响

目的:探讨仙茅酒炙前后对骨质疏松小鼠股骨组织中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响及保护作用机制。方法:建立维甲酸诱导骨质疏松小鼠模型,在造模的同时,将小鼠随机分为模型对照组、仙茅15、30 g/kg组,酒仙茅15、30 g/kg及戊酸雌二醇0.15 mg/kg组,另设正常对照组,并按所述剂量灌胃相应药物或1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),每日1次,连续给药14 d。于末次给药后,以HE染色、CT、免疫组化、试剂盒检测相关指标。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)及抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)活力显著升高(P<0.01);小鼠股骨骨密度(BMD)和骨体积与组织体积比(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)均明显下降(P<0.05或P<0.01),骨小梁间距(Tb.Sp)明显升高(P<0.01);OPG蛋白表达显著下调(P<0.01),RANKL蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型对照组相比,仙茅及酒仙茅各剂量组均能显著降低小鼠血清中ALP和StrACP活力(P<0.01);显著升高小鼠股骨BMD、BV/TV、Th.N含量(P<0.05或P<0.01),显著降低Tb.Sp含量(P<0.01);显著上调小鼠股骨中OPG蛋白的表达(P<0.01),而仅仙茅30 g/kg组和酒仙茅30 g/kg组RANKL蛋白表达显著下调(P<0.05)。与仙茅30 g/kg组相比,酒仙茅30 g/kg组Tb.Sp明显下降(P<0.05);OPG蛋白表达显著升高(P<0.01),RANKL蛋白表达明显降低(P<0.05)。但各给药组小鼠与正常对照组之间仍存在差异,给药后并没有恢复到正常状态。结论:仙茅酒炙前后对维甲酸诱导的小鼠骨质疏松均有防治作用,其中以酒仙茅防治作用为优,其作用机制可能与上调OPG蛋白表达,下调RANKL蛋白表达相关。     

肾阳虚大鼠血清对OB-OC共育体系中β-catenin/OPG/RANKL表达的影响及淫羊藿苷的调控作用

目的:观察肾阳虚大鼠血清对共育体系中骨保护素(OPG),胞质蛋白(β-catenin)及核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达的影响及淫羊藿苷对其的调控,进一步探究其诱导骨质疏松发生的可能机制。方法:取16只雄性SD大鼠,随机分为空白组和模型组,每组8只,模型组以10 mL·kg-1腺嘌呤灌胃建立肾阳虚模型,造模成功后收集血清。体外分离培养成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC),采用茜素红、碱性磷酸酶(ALP)及姬姆萨染色观察并鉴定OB,OC用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定,transwell小室建立OB-OC共育体系,设置淫羊藿苷组(100μmol·L-1),空白组,淫羊藿苷(100μmol·L-1)+血清组(10%肾阳虚血清),血清组(10%肾阳虚血清)及Dickkopf1(DKK-1)药物组(100μg·L-1),干预共育体系2 d后,对OC进行计数,微板酶标法检测培养液中TRAP及ALP的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组OPG,β-catenin及RANKL蛋白的表达。结果:与空白组比较,血清组ALP活性,β-catenin及OPG蛋白表达均明显降低(P0. 05),而OC数量,TRAP活性及RANKL蛋白的表达明显升高(P0. 05);与血清组比较,淫羊藿苷组ALP活性显著降低(P0. 01),与淫羊藿苷组比较,淫羊藿苷+血清组ALP活性及OPG蛋白表达明显降低(P0. 05),TRAP活性及RANKL表达明显升高(P0. 05)。结论:肾阳虚大鼠血清能诱导骨质疏松的发病,其作用机制可能是通过降低ALP活性,下调OPG及β-catenin蛋白的表达,同时提高TRAP活性,上调RANKL蛋白的表达来实现的。     

右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度的影响研究

目的:探究右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度的影响。方法:选取40只C57BL/6品系雌性小鼠,切除卵巢构建骨质疏松症模型,饲养12周,分为假手术组、模型组、雷洛昔芬组及联合组。其中假手术组和模型组均用0.5 mL0.9%氯化钠溶液灌胃,雷洛昔芬组用5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗,联合组用0.2 m L右归饮+5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗。连续给药6周后眼球取血,检测血清骨钙素(Osteocalcin,OC)、I型胶原氨基端延长肽(Procollagen I N-terminal Propeptide,PINP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)等骨代谢指标水平。处死小鼠,测定骨密度,Micro-CT检测骨体积分数(Bone volume/total volume,BV/TV)、骨表面积/骨体积(Bone surface/bone volum,BS/BV)、骨小梁分离度(Trabecular separation/spacing,Tb.Sp)、骨小梁平均厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)等骨组织形态指标。胫骨组织HE染色,观察骨组织形态损伤情况。结果:与假手术组比较,模型组小鼠骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP降低,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP升高,差异均有统计学意义(P 0.05);与模型组比较,雷洛昔芬组、联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P 0.05);与雷洛昔芬组比较,联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:右归饮联合盐酸雷洛昔芬治疗骨质疏松症比单用盐酸雷洛昔芬能更显著地抑制骨丢失,改善骨代谢,促进骨形成,达到增加骨密度的治疗效果。     

3种补肾中药有效成分对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的调控作用

目的:观察3种补肾代表中药淫羊藿、补骨脂、女贞子各自有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对去卵巢3个月大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的调控作用。方法:40只Sprague Dawley(SD)雌性大鼠随机分为正常对照组、模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组(后3组合称治疗组)。模型组和治疗组切除双侧卵巢,正常对照组切除卵巢周围部分脂肪组织。治疗组于造模第2d开始按20mg/kg给予对应药物每日1次灌胃,连续12周。造模后第4周开始称量体质量,每周1次。造模后12周大鼠处死,取第4腰椎进行micro-CT扫描,评价骨量改变情况。采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSCs,于取材后第7d干细胞基因芯片技术检测mRNA表达。结果:造模后大鼠体质量增加,补骨脂素能减少增加幅度,而淫羊藿苷和齐墩果酸没有明显作用。Micro-CT显示,去卵巢12周后,模型组与正常对照组之间,骨形态计量学参数骨体积与组织体积之比BV/TV,骨小梁数目Tb.N,骨小梁厚度Tb.Th明显减少,骨小梁空间距离Tb.Sp明显增加。淫羊藿苷和齐墩果酸显著增加Tb.Th,对其他参数也有改善的趋势。补骨脂素有改善的趋势,但没有统计学差异。大鼠全基因表达谱显示在被检测的26 420个基因中,模型组比正常对照组下调2倍的基因有4 193个,约占15.87%,淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸比模型组上调2倍的基因分别有3 226,1 701和3 232个。模型组比正常对照组上调2倍的基因有5 015个,约占18.98%,3个有效成分比模型组下调2倍的基因分别有3 549,1 660和3 545个。基因功能分类分析显示3个有效成分共同改变的基因涉及的功能包括:细胞成分中的初级内体、分子功能相关的磷酸跨膜转运蛋白活性、GDP结合、内肽酶活性、酶调节剂活性、谷氨酸受体结合、转移酶活性、5-羟色胺受体活性、血清素结合;细胞外基质、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性、氨基酸结合、RNA甲基转移酶活性、磷蛋白磷酸激酶抑制剂活性等。结论:补肾中药可能从增加BMSCs细胞外基质、促进生长因子相关信号通路、增加蛋白质合成等方面发挥促进BMSCs成骨分化的作用,最终实现治疗骨质疏松的疗效,但其确切的机制还有待深入研究。     

淫羊藿、骨碎补对去睾丸大鼠骨质疏松症的影响

目的:观察补肾中药淫羊藿、骨碎补单用及合用对去睾丸SD大鼠骨质疏松症的影响。方法:将50只6月龄的雄性SD大鼠随机分为:正常组、病理组、淫羊藿组、骨碎补组以及淫羊藿合骨碎补5组。通过造模及分别用药12周后检测各组骨密度、骨形态计量学参数的变化并比较各组间差异。结果:淫羊藿组、骨碎补组、及淫羊藿合骨碎补组不同程度地抑制去睾丸大鼠的股骨、胫骨的BMD的下降(P<0.05),只有淫羊藿合骨碎补组与其他用药组BMD存在统计学差异(P<0.01);各药物干预可明显改善骨小梁面积百分率、骨小梁数目、骨小梁周长指标的降低,淫羊藿合骨碎补组组可见骨小梁厚度显著性增高(P<0.01)。结论:各药物治疗组对去睾雄性大鼠的骨质疏松症有一定疗效,且淫羊藿、骨碎补两者合用疗效更佳。     

基于抗骨质疏松作用的淫羊藿拆分组分的筛选研究

目的:研究淫羊藿及其拆分组分对维甲酸致骨质疏松模型大鼠的影响,筛选最有效组分。方法:考察淫羊藿各组分对维甲酸致骨质疏松模型大鼠血清中Ca~(2+)、P~(3+)、ALP、Str ACP、BCG、E2的含量变化以及对骨钙、骨磷、双侧腿骨骨质量/体质量比、单侧股骨灰质量/干质量比的影响,并对股骨进行骨组织病理学观察。结果:淫羊藿30%乙醇组分可显著增加模型大鼠骨钙、骨磷含量和血清E2水平,降低血清ALP、Str ACP、BCG及磷含量,显著提高双侧腿骨质量/体质量比和单侧股骨灰质量/干质量比;淫羊藿全成分可显著增加骨钙、双侧股骨骨质量/体质量比和单侧股骨灰质量/干质量比,降低血清ALP及磷含量;骨组织形态学观察结果显示,除阳性对组外,淫羊藿30%乙醇段对骨病理形态改善最明显,可明显增加骨小梁的密度和间隙,仅局部骨壁呈间断性松质骨结构;综合各指标得出各组分抗骨质疏松作用大小依次为:淫羊藿30%乙醇段淫羊藿全成分淫羊藿水段淫羊藿95%乙醇段淫羊藿多糖。结论:淫羊藿各拆分组分中淫羊藿30%乙醇段在抗骨质疏松方面作用最显著,淫羊藿全成分也有较好的抗骨质疏松作用,但效果不如淫羊藿30%乙醇段,淫羊藿水段和淫羊藿95%乙醇段对骨质疏松可能有一定的预防作用,淫羊藿多糖的抗骨质疏松作用不明显。     

口服与骨折局部应用淫羊藿对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响

目的研究口服与骨折局部应用淫羊藿对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响。方法取4月龄雌性清洁SD大鼠82只,体重210～250g,随机分成实验组75只,对照组7只。实验组切除双侧卵巢,对照组仅切除卵巢周围少许脂肪组织。术后10周骨密度及电镜证明实验组骨质疏松动物模型已制备成功。将实验组剩余的72只,再次手术制作右侧股骨远端松质骨骨折并随机分成3组,每组24只:磷酸钙骨水泥(calciumphosphate cement,CPC)治疗组(A组)、CPC-淫羊藿复合物治疗组(B组)及CPC加口服淫羊藿组(C组);分别在术后2、4、8、12周测定3组动物的血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),进行股骨生物力学检测及组织切片观察。结果骨折术后2、4、8周时,3组大鼠血清ALP均有不同程度升高,但B组较A、C两组升高更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。12周时,B组ALP基本降至正常范围;C组和A组由于骨折仍未完全愈合,ALP虽有所下降,但仍维持在一个相对较高水平,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。这与实验中组织学观察相一致,B组显示出更好的促成骨活性。B组在各个时间点的股骨生物力学检测均高于A、C两组(P<0.05)。结论局部应用淫羊藿能够促进骨质疏松骨折的愈合,相同剂量下比口服效用更显著。     

淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素联合作用对牙周炎大鼠牙周组织中RANKL和OPG表达的影响

目的研究淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素联合作用对牙周炎大鼠牙周组织中RANKL表达的影响。方法牙周组织局部注射大肠杆菌内毒素制造牙周炎动物模型,将淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素联合作用于实验动物,用原位杂交法检测用药前后牙周组织中RANKL的表达。结果空白对照组大鼠牙周组织中RANKL表达上升(P<0.01),OPG表达降低(P<0.05),RANKL/OPG比值上升(P<0.01);实验组RANKL表达量明显较空白对照组低(P<0.05),虽然OPG表达量与空白对照组相比无统计学意义(P>0.05),但RANKL/OPG比值明显低于空白对照组(P<0.05)。结论淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素联合作用能够抑制牙周炎大鼠牙周组织中RANKL的表达。     

黔产2种淫羊藿抗小鼠骨质疏松药效对比研究

目的:研究黔产2种淫羊藿(粗毛淫羊藿和黔岭淫羊藿)抗地塞米松致骨质疏松模型小鼠的药效,并比较其药效差异.方法:昆明种小鼠72只,随机分成空白组(Ⅰ)、骨质疏松模型组(Ⅱ)、粗毛淫羊藿高剂量(Ⅲ)、低剂量组(Ⅳ)、黔岭淫羊藿高剂量(Ⅴ)、低剂量组(Ⅵ).除空白组外各组均用地塞米松注射致骨质疏松小鼠模型,同时造模期间按剂量分组灌胃给药,持续给药28 d.然后小鼠断颈取血,检测S-Ca,S-P含量及S-ALP活性;取小鼠第一腰椎做骨组织病理切片;测量腰椎松质骨的静态参数.结果:各治疗组与模型组对比均有显著疗效,S-Ca,S-P,ALP均升高;骨小梁平均厚度、骨小梁数量、骨小梁面积百分数增加,骨小梁分离度变小;腰椎骨形态骨小梁密度、宽度均有不同程度增加,骨小梁间隙缩小.2种淫羊藿相比较粗毛淫羊藿的作用显著优于黔岭淫羊藿.结论:黔产2种淫羊藿对地塞米松致骨质疏松模型小鼠有明显的改善作用.在同等实验条件下,粗毛淫羊藿的抗骨质疏松效果显著优于黔岭淫羊藿.     

不同比例淫羊藿、蛇床子及川续断提取物配方的抗骨质疏松模型活性研究

目的将淫羊藿、蛇床子及川续断提取物以不同比例组方,采用大鼠骨质疏松模型,筛选出具有良好抗骨质疏松活性的最佳配比组方。方法以维甲酸构建大鼠骨质疏松模型,将淫羊藿,蛇床子及川续断提取物以不同比例组方,考察不同配比的的复方对大鼠血清磷(P)、血清钙(Ca)、碱性磷酸酶(ALP)以及抗酒石酸酸性磷酸酶(Sta ACP)等生化指标以及大鼠股骨质等指标的影响。结果以淫羊藿提取物,蛇床子提取物及川续断提取物以不同比例配伍的复方均对骨质疏松大鼠具有一定的抗骨质疏松药理活性,其中以2∶1∶1配伍时,抗骨质疏松活性最为显著。结论所筛选出的以淫羊藿提取物,蛇床子提取物及川续断提取物以2∶1∶1配伍的提取物复方有望开发为治疗骨质疏松新药。     

右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度影响的研究

目的:探究右归饮联合盐酸雷洛昔芬对骨质疏松症小鼠骨形成、骨密度的影响。方法:选取40只C57BL/6品系雌性小鼠,切除卵巢构建骨质疏松症模型,饲养12周,分为假手术组、模型组、雷洛昔芬组及联合组。其中假手术组和模型组均用0.5 mL0.9%氯化钠溶液灌胃,雷洛昔芬组用5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗,联合组用0.2 m L右归饮+5 mg/kg盐酸雷洛昔芬治疗。连续给药6周后眼球取血,检测血清骨钙素(Osteocalcin,OC)、I型胶原氨基端延长肽(Procollagen I N-terminal Propeptide,PINP)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)等骨代谢指标水平。处死小鼠,测定骨密度,Micro-CT检测骨体积分数(Bone volume/total volume,BV/TV)、骨表面积/骨体积(Bone surface/bone volum,BS/BV)、骨小梁分离度(Trabecular separation/spacing,Tb.Sp)、骨小梁平均厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)等骨组织形态指标。胫骨组织HE染色,观察骨组织形态损伤情况。结果:与假手术组比较,模型组小鼠骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP降低,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP升高,差异均有统计学意义(P 0.05);与模型组比较,雷洛昔芬组、联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P 0.05);与雷洛昔芬组比较,联合组骨密度、BV/TV、Tb.Th、PINP升高,差异均有统计学意义(P 0.05),BS/BV、Tb.Sp、OC、ALP、TRACP降低,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:右归饮联合盐酸雷洛昔芬治疗骨质疏松症比单用盐酸雷洛昔芬能更显著地抑制骨丢失,改善骨代谢,促进骨形成,达到增加骨密度的治疗效果。