补肾活血方对环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤的影响

目的观察补肾活血方对环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法将50只8～9周龄雄性Balb/C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾活血方低、中、高剂量组,每组10只。空白组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg造模。空白组和模型组给予蒸馏水灌胃,补肾活血方低、中、高剂量组给予相应浓度补肾活血方灌胃,每日1次,连续30 d。检测各组小鼠体质量、睾丸和附睾脏器指数、精子浓度和活力,睾丸组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR和Western blot分别检测小鼠睾丸组织Nrf2 mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、睾丸和附睾脏器指数、精子浓度和活力及睾丸组织SOD、CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,睾丸组织Nrf2m RNA和蛋白表达均显著降低;与模型组比较,补肾活血方组小鼠精子浓度和活力,睾丸组织SOD、CAT活性明显增加,MDA水平显著降低,睾丸组织Nrf2m RNA和蛋白表达均显著升高。结论补肾活血方可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,改善环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤。     

健延龄胶囊对大鼠生精作用研究

目的:观察健延龄胶囊对正常雄性大鼠以及环磷酰胺所致少、弱精雄性大鼠精子活力及质量的影响。方法:选取40只SD大鼠随机分为正常对照组、健延龄(0.8、1.6、3.2g/kg)给药组,除正常对照组灌胃给予生理盐水外,其余各组均灌胃给予健延龄,连续30天。给药结束后次日上午脱颈椎处死大鼠,取右侧完整附睾进行精子活力检测,并通过HE染色观察各组大鼠左侧睾丸与附睾病理形态学改变。另外,通过腹腔注射环磷酰胺方法制备少、弱精雄性大鼠模型,选取50只SD大鼠随机分为:正常对照组、模型对照组、健延龄(0.8、1.6、3.2g/kg)给药组,除正常对照组外,其余各组动物每只腹腔注射环磷酰胺0.3mg/kg/d进行造模,连续5天,第6天开始各给药组开始灌胃给予健延龄,正常对照组和模型对照组灌胃给予生理盐水,连续30天。于给药结束后次日上午脱颈椎处死大鼠,取右侧完整附睾进行精子活力检测,并通过HE染色观察各组大鼠左侧睾丸与附睾病理形态学改变。结果:健延龄1.6 g/kg对正常大鼠的精子运动速度有促进作用,显著增加正常大鼠的精子数量,提高正常大鼠的精子浓度;组织学检测显示,健延龄0.8 g/kg、1.6 g/kg和3.2 g/kg对正常大鼠睾丸组织及附睾组织均无明显影响;环磷酰胺注射后的大鼠经健延龄1.6 g/kg、3.2 g/kg给药后,能够显著增强精子的运动速度,明显增加精子数量;组织学检测显示,环磷酰胺所致大鼠少、弱模型,在给予健延龄0.8 g/kg、1.6 g/kg和3.2 g/kg药物后,发现个别大鼠睾丸曲细精管内生精细胞排列轻度紊乱,附睾管内精子数量轻微减少,且组织学评分结果为:模型组0.7分,健延龄0.8 g/kg组0.28分,健延龄1.6 g/kg组0.25分,健延龄3.2 g/kg组0.11分。结论:健延龄胶囊对正常大鼠的精子运动、精子密度方面有一定的增强作用;健延龄胶囊给药后,对环磷酰胺引起的大鼠精子运动减弱及数量减少等现象有明显的改善作用;健延龄对环磷酰胺所致大鼠少、弱精症睾丸的病理改变有明显改善作用。     

枸杞多糖对电离辐射小鼠睾丸组织损伤的保护作用

目的观察枸杞多糖对X射线电离辐射小鼠睾丸组织损伤的保护作用。方法雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、枸杞多糖低剂量和高剂量组,给药组动物分别按照0.25 g/kg和1 g/kg剂量灌胃枸杞多糖,其余组动物灌胃蒸馏水,每日一次。第7天小鼠经水合氯醛麻醉仰卧位固定,仅睾丸部位接受X射线照射(3.0 Gy),正常组小鼠仅麻醉不照射。照射后各组小鼠继续灌胃药物,第21天处死动物取睾丸及附睾,称定质量并观察精子活力、精子密度以及睾丸生精小管结构。结果枸杞多糖各组小鼠一般状况均优于模型组,枸杞多糖高剂量组小鼠睾丸质量与模型组比较明显增加,精子数量和活力明显升高,组织病理学显示枸杞多糖高剂量组小鼠睾丸生精小管内含大量精子,部分区域见少量生精细胞脱落。结论枸杞多糖对X射线所致的小鼠睾丸组织损伤有明显的保护作用。     

强精煎对少、弱精子症大鼠CFTR蛋白表达的影响

目的:观察强精煎对少、弱精子症大鼠睾丸及附睾精子CFTR蛋白表达的影响。方法:75只雄性成年SD大鼠随机分为模型组、正常组、黄精赞育胶囊组、强精煎低剂量组、强精煎高剂量组,除正常组外,采用环磷酰胺诱导少、弱精子症大鼠模型。正常组和模型组大鼠给予生理盐水;黄精赞育胶囊组给予黄精赞育胶囊;强精煎低、高剂量组给予强精煎免煎颗粒低、高剂量。采用Western blot检测睾丸CFTR蛋白表达,细胞间接免疫荧光检测附睾精子CFTR表达率。结果:模型组、正常组、黄精赞育胶囊组、强精煎低剂量组、强精煎高剂量组睾丸组织CFTR蛋白相对表达量分别为(0. 31±0. 03)、(1. 63±0. 05)、(1. 28±0. 03)、(0. 52±0. 03)、(1. 30±0. 09);附睾精子CFTR蛋白表达率(%)分别为:(0. 199±0. 079)、(0. 770±0. 075)、(0. 609±0. 068)、(0. 293±0. 086)、(0. 653±0. 089)。与模型组相比,强精煎低、高剂量组和黄精赞育胶囊组CFTR蛋白在睾丸、附睾精子的表达均显著上调(P 0. 05),强精煎高剂量组和黄精赞育胶囊组表达水平无显著差异(P 0. 05)。结论:强精煎不同剂量均可不同程度增加了CFTR蛋白表达,调控精子发生,调节精子获能,提高受精能力,以上可能为其治疗少、弱精子症的机制之一。     

五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B的影响

目的:观察五子衍宗方对生精障碍模型大鼠附睾精子参数及血清抑制素B水平的影响。方法:采用随机数字表法将50只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组、甲基睾酮组和五子衍宗方低、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠按醋酸棉酚50mg/kg体质量灌胃给药,制备生精障碍模型。正常组和模型组大鼠灌服蒸馏水,甲基睾酮组大鼠灌服甲基睾酮混悬液,五子衍宗方低、高剂量组大鼠分别给予低、高浓度(含1.75g、3.5g生药/mL)五子衍宗方混悬液灌胃,每天1次,连续1个月。观察各组大鼠睾丸湿重、睾丸指数及间质细胞数,按WHO标准,采用WLJY-9000荧光染色精子动(静)态图像分析系统检测附睾精子参数,ELISA法检测大鼠血清抑制素B水平。结果:棉酚可造成大鼠睾丸减轻、睾丸指数减小、间质细胞数减少(P0.01);附睾精子密度降低,活动率和前向运动率(a+b%)下降(P0.05,P0.01),血清抑制素B水平降低(P0.01);五子衍宗方能显著改善大鼠睾丸重量及睾丸指数,增加间质细胞数,改善附睾精子参数(P0.05,P0.01),上调血清抑制素B水平(P0.01),拮抗棉酚造成的大鼠睾丸生精功能损伤。结论:通过上调抑制素B水平,改善睾丸生精功能,可能五子衍宗方治疗不育症的作用机制之一。     

加味聚精食疗方对DS动物模型精子质量及睾丸组织中CR16表达的影响

目的:观察加味聚精食疗方对少、弱精子症小鼠睾丸组织中CR16表达的影响。方法:60只8周龄雄性小鼠适应性饲养1周后随机编号,采取区组随机化法将小鼠分为6组:正常组(G1)、DS模型空白对照组(G2)、低剂量治疗组(G3)、中剂量治疗组(G4)、高剂量治疗组(G5)、预防治疗组(G6),每组10只。G2~G6组通过尾静脉单剂量注射5-FU(100 mg/kg),14 d后形成稳定的DS模型。G1正常组全程给予蒸馏水4 g/kg灌胃,连续40 d;G2空白对照组及G3~G5治疗组自造模开始即给予蒸馏水4 g/kg灌胃,G6预防治疗组给予加味聚精食疗方6.3 g/kg灌胃,连续14 d。G2~G6组造模完成后,G2组予蒸馏水4 g/kg灌胃;G3~G5组分别予加味聚精食疗方低剂量(3.15 g/kg)灌胃、中剂量(6.3 g/kg)灌胃、高剂量(12.6 g/kg)灌胃;G6组继续蒸馏水4 g/kg连续灌胃。以上均1次/d,连续喂养26 d。各组治疗结束后作集中处死,计算机辅助精子分析(CASA)技术检测小鼠附睾精子质量;对小鼠肝、肾器官及睾丸组织进行病理学检查;免疫组织化学S-P法检测基因CR16在SD动物模型体内的表达。结果:在精子质量的改善方面,G2、G6组比较无明显差异,不具有统计学意义(P0.05)。G3、G4、G5组均较G2、G6组有明显改善(P0.05),且G4组优于G3、G5组(P0.05)。在阴性对照无特异性着色的情况下对结果进行判读,G3、G4、G5组小鼠睾丸组织生精小管上皮中CR16均有不同程度的表达,明显高于G2、G6组,差异具有统计学意义(P0.05),G4组小鼠睾丸组织结构修复情况、睾丸组织CR16的表达水平(染色程度)均明显上调。镜下观察见小鼠睾丸组织中CR16阳性反应呈棕褐色或浅棕色颗粒状,散在分布于支持细胞胞浆胞膜。结论:加味聚精食疗方能够一定程度上提高附睾精子的质量,安全无不良反应,其通过上调DS动物模型体内CR16的表达水平可能是治疗少、弱精子症的作用机制之一。     

益肾活血方对弱精子症模型大鼠精子质量的影响

目的观察益肾活血方对弱精症模型大鼠精子质量的影响。方法 50只大鼠随机分为正常组、模型组和中药高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外其余各组大鼠灌服雷公藤多苷片20 mg/(kg·d)连续5周建立弱精子症模型。造模成功后中药高、中、低剂量组分别给予益肾活血方15、10、5 g/(kg·d)灌胃,共5周,正常组和模型组普通饲养。末次给药后取大鼠双侧睾丸称重、测量体积,双侧附睾称重,检测精子密度、精子活率及精子活力。结果各组大鼠精子密度差异无统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型组大鼠精子活率和A级、B级、A级+B级精子均明显降低(P0.05)。中药低、中、高剂量组大鼠精子活率、B级、A级+B级精子较模型组明显升高(P0.05)。中药低、中、高剂量组大鼠两侧睾丸重量、体积及附睾重量与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论益肾活血方可提高弱精子症大鼠精子活力及精子活率,但不能改善精子密度,并对睾丸重量、体积及附睾组织的重量无影响。     

续断种子方对少精子症模型小鼠生精功能障碍的实验性研究

目的探讨续断种子方对少精子症模型小鼠生精功能障碍实验性研究。方法取45只6~8周龄C5BL/6小鼠,随机选取35只小鼠用白消安造模,建立少精子症小鼠模型,对造模成功后随机分为模型组(15只)、续断种子方组(10只)和左卡尼汀口服液组(10只)。另外10只小鼠为正常对照组,不造模。模型组和正常对照组正常喂养,左卡尼汀口服液组和续断种子方组每天给予剂量2000mg/(kg·d)灌胃给药,1次/日,给药8周后,各组实验小鼠全部处死,取出左侧附睾和睾丸,检测附睾精子质量、HE染色检测小鼠睾丸组织形态学和超微结构的改变。结果用药治疗组睾丸组织超微结构均有所改善,附睾精子质量、精曲小管直径、空泡化百分率、生精上皮细胞层数和厚度均明显高于模型组(P<0.01,P<0.05),但均仍未达到正常对照组的程度。结论续断种子方对生精功能障碍小鼠的作用机制是通过改善附睾及睾丸“微环境”,增加间质细胞和支持细胞,恢复附睾培育精子的内环境,为精子成熟提供有利条件。     

全反式虾青素对环磷酰胺诱发小鼠睾丸氧化损伤的保护作用

目的:研究全反式虾青素对环磷酰胺诱导小鼠睾丸氧化损伤的保护作用。方法:将成年60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、全反式虾青素低剂量组、全反式虾青素中剂量组、全反式虾青素高剂量组。模型组和不同剂量全反式虾青素组小鼠按40 mg/kg每日1次进行腹腔注射环磷酰胺,连续1wk,同时全反式虾青素低、中、高剂量组分别按照10 mg/kg、15mg/kg、20 mg/kg每日灌胃1次;正常对照组、模型组灌胃等量的食用油。饲养4wk后处死,观察小鼠附睾精子密度、活力、活动力、畸形率,睾丸匀浆测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。结果:与正常对照组相比,模型组精子密度、活力、活动力、SOD、GSH-Px活性均有所下降(P0.01),精子畸形率、MDA含量有所上升(P0.01);而与模型组相比,全反式虾青素各剂量组精子密度、活力、活动力、SOD、GSH-Px活性均有所升高(P0.01),精子畸形率、MDA含量有所下降(P0.01)。结论:全反式虾青素可以有效抑制环磷酰胺对小鼠睾丸造成的氧化损伤,并可恢复生精功能。     

续断种子方干预无精子症模型小鼠睾丸的精子发生

目的观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸精子发生发育过程中c-kit/CFTR表达的影响,探索中药干预睾丸生精功能的影响。方法按照随机数字表法分为对照组,模型组,麒麟丸组,续断种子方高、中、低剂量组。采用白消安和环磷酰胺建立无精子症小鼠模型。各治疗组给予相应药物灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,每日1次,连续8周。检测小鼠附睾的精子质量、睾丸组织显微超微结构、睾丸组织c-kit/CFTR蛋白的表达。结果模型组偶见散在精子,睾丸生精上皮不同程度破坏,精原细胞、精母细胞线粒体空化明显,部分线粒体脊消失,核膜局部破损,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞散在;续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠附睾精子浓度较高,睾丸生精上皮见精子、精子细胞、精母细胞,线粒体空化少,可见丰富的高尔基体、内质网结构,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞辉度大。与对照组相比,模型组α-葡糖苷酶、果糖浓度明显有差异性(P0.05);与模型组相比,续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、α-葡萄糖苷酶的活性、果糖浓度与模型组有差异性(P0.05)。结论续断种子方可以有效促进睾丸生精上皮的精子发生,增加精子的数量,达到"以通为用,和营生精"之效。     

丹参提取物原儿茶醛对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的作用研究

目的:观察丹参提取物原儿茶醛对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的作用。方法:将成年雄性昆明种小鼠分为正常对照组、模型组和原儿茶醛组共3组,模型组和原儿茶醛组腹腔注射环磷酰胺溶液60mg/kg/d,连续5d;对照组腹腔注射生理盐水;造模同时原儿茶醛组给予20mg/kg/d的原儿茶醛溶液灌胃,对照组及模型组灌胃给予等量生理盐水,共35d。实验结束后分离小鼠睾丸及附睾,计算脏器指数。HE染色观察小鼠睾丸组织形态学变化。试剂盒测定睾丸组织SOD活性。免疫组织化学实验检测小鼠睾丸中DJ-1蛋白表达。结果:原儿茶醛能增加小鼠的睾丸指数及附睾指数,保护睾丸的组织形态,增加睾丸中SOD活性,提高睾丸中DJ-1蛋白的表达。结论:原儿茶醛对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤具有保护作用,该作用与其增加睾丸中SOD活性、DJ-1蛋白表达有关。     

龟鹿二仙胶对少弱精子症小鼠的保护作用及机制研究

目的：研究龟鹿二仙胶对少弱精子症模型小鼠的保护作用及其机制。方法：50只KM小鼠随机分为正常组(Control)、模型组(Model)、左卡尼汀组(L-car)、龟鹿二仙胶低剂量组(GLEXJ-L)和龟鹿二仙胶高剂量组(GLEXJ-H),每组10只，正常组注射等剂量生理盐水，其余各组按照75 mg/kg的剂量给予环磷酰胺进行腹腔注射，连续3 d,建立少弱精子症模型。模型建立后，各组按照临床等效剂量给予相应药物或等量生理盐水灌胃4周，观察各组动物一般情况；记录动物体质量、脾脏和睾丸质量，并计算脾指数和睾丸指数；取附睾进行精子数量和活动率计算；HE染色观察各组动物睾丸和脾脏病理变化；免疫组化法定位各组动物睾丸组织ZO-1、TGF-β3、Smad1和Smad4蛋白并检测其表达水平；ELISA法检测各组小鼠血清中黄体生成素(LH)和睾酮(T)的水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠睾丸组织中生精细胞变性，数量减少，排列紊乱；睾丸指数、脾脏指数、精子数量和活动率、血清T水平和ZO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LH水平显著升高(P<0.05);与模型组比较，左卡尼汀组、龟鹿二...     

五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的保护作用

目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡的保护作用。方法:随机将50只成年雄性Balb/C小鼠分为正常对照组、模型组以及五子衍宗方低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,每组10只。五子衍宗方3个剂量组每天分别灌胃相应剂量五子衍宗方,正常对照组和模型组灌胃等体积双蒸水,1次/d。正常对照组从第4天开始腹腔注射生理盐水,其余各组从第4天开始腹腔注射环磷酰胺200 mg/kg,每隔7 d注射1次,共4次,同时各组每天继续灌胃相应药物。第4次腹腔注射环磷酰胺后间隔12 h称量小鼠体质量,乙醚麻醉颈椎脱臼处死小鼠,迅速取出睾丸去除多余组织,称量睾丸质量,计算睾丸指数,HE染色观察睾丸组织形态变化,TUNEL检测睾丸生殖细胞凋亡,Western blot检测睾丸组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、BAX、BCL-2表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠体质量、睾丸质量、睾丸指数、睾丸内各级生殖细胞数量及睾丸组织内BCL-2蛋白表达水平显著降低,睾丸内凋亡阳性染色细胞显著增多,睾丸组织内BAX、Caspase-3蛋白表达水平显著升高;而五子衍宗方可显著升高小鼠体质量、睾丸质量、睾丸指数、睾丸内各级生殖细胞数量以及睾丸内BCL-2蛋白表达水平,明显减少睾丸内凋亡阳性染色细胞,降低睾丸内BAX和Caspase-3蛋白表达水平。结论:五子衍宗方能显著减少环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞凋亡,其作用机制可能与升高BCL-2蛋白表达水平、降低BAX、Caspase-3蛋白表达有关。     

续断种子方对小鼠精子发生发育及c-kit蛋白表达的影响

目的观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸精子发生发育及c-kit蛋白表达的影响,探讨其相关作用机制。方法白消安和环磷酰胺腹腔注射建立无精子症小鼠模型。实验小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、麒麟丸组和续断种子方高、中、低剂量组。各治疗组予相应药物灌胃,对照组和模型组小鼠予等体积生理盐水,每日1次,连续8周。HE染色检测小鼠附睾精子质量,电镜观察睾丸组织显微、超微结构,免疫组化法检测睾丸组织c-kit蛋白表达。结果模型组偶见散在精子,睾丸生精上皮不同程度破坏,精原细胞、精母细胞线粒体空化明显,部分线粒体嵴消失,核膜局部破损,c-kit免疫组化结果显示棕黄色阳性表达的细胞散在;续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠附睾精子浓度较高,睾丸生精上皮见精子、精子细胞、精母细胞,线粒体空化少,可见丰富的高尔基体、内质网结构,c-kit免疫组化结果显示棕黄色阳性表达的细胞灰度大。结论续断种子方可有效促进睾丸生精上皮的精子发生发育,增加精子数量,达到健脾益肾、活血生精之效。     

二五四合剂对环磷酰胺致小鼠生精障碍的治疗作用

目的观察二五四合剂对环磷酰胺致小鼠生精障碍的治疗作用。方法将小鼠随机等分为4组:模型组,对照组,小、大剂量二五四合剂组。除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺建立生精障碍模型。造模后,小、大剂量二五四合剂组小鼠分别给予3 g/kg、9 g/kg剂量二五四合剂灌胃,模型组与对照组小鼠灌胃等量生理盐水,连续25 d。测定各组小鼠与雌鼠合笼后的胚胎数、睾丸质量、精子密度、活率及畸形率。结果模型组小鼠睾丸质量、精子参数、与雌鼠合笼后的胚胎数均差于对照组小鼠(P0.05);各剂量二五四合剂组小鼠睾丸质量、精子参数、与雌鼠合笼后的胚胎数均优于模型组小鼠(P0.05);与对照组比较,大剂量二五四合剂组小鼠睾丸质量、与雌鼠合笼后的胚胎数无显著差异(P0.05)。结论二五四合剂可有效治疗环磷酰胺所致小鼠生精障碍。     

五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响

目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量组分别提前灌胃给予五子衍宗方140、280 mg/kg,其余各组灌胃给予生理盐水。从第3天开始,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组注射CTX 50 mg/kg,隔2 d注射1次,连续10次。参照精液分析方法检测小鼠精子浓度、精子形态正常率、精子活率;单细胞凝胶电泳观察小鼠睾丸细胞DNA损伤的变化;免疫组化检测小鼠睾丸DNA损伤蛋白γ-H2AX的定位与表达变化;Western blot检测小鼠睾丸生殖细胞内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21核内表达水平。结果:与模型组比较,五子衍宗方低、高剂量均可显著升高模型组小鼠精子浓度、精子形态正常率及精子活率,显著降低彗星尾长、尾距、Olive尾矩和尾部DNA百分率及睾丸组织中γ-H2AX的阳性点数。Western blot结果表明,与模型组比较,五子衍宗方可显著降低睾丸生殖细胞核内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21的表达。结论:五子衍宗方能显著减轻CTX致小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,其机制可能与调控P53信号通路有关。     

调治天癸方对雷公藤多苷致少弱精症大鼠精子质量及Fas表达的影响研究

目的探讨调治天癸方对少弱精症大鼠精子质量及睾丸组织中Fas表达的影响。方法将72只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、生精胶囊组和调治天癸方高、中、低剂量组,每组12只。除正常组给予正常饮食外,其余各组大鼠连续灌胃雷公藤多苷片20 mg/(kg·d)5周建立少弱精症模型。造模成功后,生精胶囊组给予生精胶囊粉末0.06 g/100 g灌胃,调治天癸方高、中、低剂量组分别给予调治天癸方水煎液3.38 g/100 g、1.69 g/100 g、0.85 g/100 g灌胃,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃,均连续灌胃5周。末次灌胃后取大鼠双侧睾丸及附睾,采用计算机辅助精子分析方法检测精子密度及活动率,Western blot法检测睾丸组织中Fas蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠精子密度、精子活动率均明显降低(P均0.05),睾丸组织中Fas蛋白表达水平明显升高(P0.05);而生精胶囊组及调治天癸方各剂量组大鼠精子密度、活动率均明显高于模型组(P均0.05),睾丸组织中Fas蛋白表达水平均明显低于模型组(P均0.05);且调治天癸方各剂量组大鼠精子密度、活动率均明显高于生精胶囊组(P均0.05),睾丸组织中Fas蛋白表达水平均明显低于生精胶囊组(P均0.05),且调治天癸方高、中、低剂量组Fas蛋白表达水平呈剂量依赖性降低。结论调治天癸方可明显改善雷公藤多苷致少弱精症大鼠的精子质量,对睾丸组织中Fas的表达有明显抑制作用。     

雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响

目的观察雄黄对雄性成年大鼠精子质量的影响。方法利用部分雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验雄性大鼠进行精子质量分析。将SD雄性大鼠50只随机分为阴性对照组、阳性对照雷公藤多苷组（10 mg/kg）及雄黄低、中、高剂量组（50、125、250 mg/kg）。各给药组连续灌胃给予相应药物6周,每日1次。给药结束后,取大鼠一侧附睾用计算机辅助精子分析系统（CASA）做精子的数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾做HE染色,观察组织病理学变化。结果阳性对照雷公藤多苷组精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数（除鞭打频率外）均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。雄黄各剂量组精子活率、活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数与阴性对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且各剂量组间差异亦无统计学意义（P〉0.05）。组织病理学观察显示,阳性对照雷公藤多苷组的睾丸局部生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内可见大量降解的生精细胞及细胞碎片,精子细胞减少,静纤毛缩短。雄黄高剂量组附睾、睾丸未见明显组织学病理改变。结论雄黄对雄性大鼠的精子没有明显的毒性作用。     

松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用

目的探讨松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用。方法 60只雄性BALB/c小鼠以单纯随机抽样法分为对照组,模型组,松果菊苷低、中、高剂量组及阳性药物组,每组10只。除对照组外,其余5组小鼠每天腹腔注射醋酸铅20 mg·kg-1·d-1,连续7 d,制备小鼠生殖功能损伤模型。模型制备后,阳性药物组给予人绒毛膜促性腺激素(HCG)500 U·kg-1·d-1腹腔注射,松果菊苷低、中、高剂量组分别给予25 mg·kg-1、50 mg·kg-1、100 mg·kg-1松果菊苷灌胃,对照组和模型组给予等体积0.9%Na Cl溶液灌胃,连续30天;末次灌胃后24 h,分离附睾,观察精子密度、精子活率及精子畸形率;固定睾丸组织,观察组织病理改变;分离血清及匀浆睾丸组织,利用酶联免疫法检测睾丸组织睾酮(T)及血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)。结果与对照组比较,模型组精子密度、精子活率降低,精子畸形率升高,睾丸组织匀浆中T含量降低,血清FSH和LH水平升高,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,松果菊苷各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义(P0.01),且松果菊苷对生殖功能损伤的治疗作用呈剂量依赖性。组织学观察显示,松果菊苷各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善。结论松果菊苷对醋酸铅致生精障碍小鼠生精功能有明显的治疗作用,其作用机制可能与改善生殖激素水平,恢复下丘脑-垂体-性腺轴的调控功能有关。