前列腺癌与前列腺增生Ki-67/PCNA mRNA特异性表达比值的研究

目的 以实时荧光定量RT-PCR技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本Ki-67蛋白和组织核增殖抗原(PCNA)mRNA的比值,探讨此比值在PCa诊断中的特异性意义.方法 通过实时荧光定量RT-PCR检测63例PCa和37例BPH前列腺组织Ki-67/PCNAmRNA的表达,比较其在PCa与BPH组织中定量的差异.结果 BPH与PCa组织Ki-67/PCNA mRNA的定量表达值分别为2.264±0.460与5.905±0.780,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 实时荧光定量RT-PCR检测Ki-67/PCNA mRNA为PCa的诊断提供了可靠的辅助指标.     

前列腺癌与良性前列腺增生中NFKBIA及SREBF2的表达

目的 以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本NFKBIA及SREBF2 mRNA相对值,探讨NFKBIA及SREBF2比值在前列腺癌诊断中的特异性意义.方法 通过实时荧光定量PCR检测63例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织NFKBIA及SREBF2的表达,比较其在PCa与BPH组织中定量的差异.结果 与BPH比较,PCa组织NFKBIA及SREBF2 mRNA的定量表达值分别下调0.520和上调2.547,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 实时荧光逆转录(RT)-PER定量检测NFKBIA及SREBF2 mRNA为前列腺癌的诊断提供了参考.     

前列腺增生与前列腺癌中KLK11/TMPRSSmRNA表达比值

目的 以实时荧光定量PCR技术测定前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本KLK11/TMPRSS mRNA比值,探讨KLK11/TMPRSS比值在前列腺癌诊断的特异性意义.方法 通过实时荧光定量PCR对23例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织KLK11/TMPRSS的表达,比较其在PCa与BPH中组织定量的差异.结果 BPH与PCa组织KLK11/TMPRSS mRNA的定量表达值分别为2.264±0.460与5.905±0.780,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 实时荧光RTPCR定量检测KLK11/TMPRSS mRNA为前列腺癌的诊断提供了可靠的辅助指标.     

前列腺增生与前列腺癌特异性膜抗原mRNA的表达

目的以实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术研究良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(Pca)组织标本PSMmRNA的表达,探讨前列腺特异性膜抗原(PSM)在前列腺癌诊断的特异性意义。方法通过实时荧光定量PCR对23例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织PSMmRNA的表达,比较其在3种组织定量的差异。结果BPH与PCa组织PSMmRNA的定量表达值分别为1.54±0.21与4.95±0.78,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光RTPCR定量检测PSMmRNA为前列腺癌的诊断、治疗、预后监测等提供了更为可靠的辅助指标。     

尿AMACR mRNA定量检测在前列腺癌诊断中的价值

目的探讨前列腺按摩后尿沉渣中AMACR mRNA含量在前列腺癌诊断中的价值。方法前列腺癌（PCa）患者30例和良性前列腺增生（BPH）患者41例，在前列腺穿刺活检前收集前列腺按摩后的尿液，离心取细胞沉淀物，用实时荧光定量RT-PCR检测AMACR mRNA的含量，并用PSA mRNA进行校正，即用AMACR mRNA表达量／PSA mRNA表达量比值来表示AMACR mRNA的含量。结果AMACR mRNA在PCa组患者尿液中的含量明显高于BPH组，差异具有统计学意义（P〈0．01）。ROC曲线分析结果显示，曲线下面积为0．763，以0．277为截断值时，其诊断PCa的总体灵敏度和特异度分别为66．7％和75．6％。如果血清PSA以10ng／ml为临界值，其总体特异度为58．5％（24／41），尿液AMACR mRNA较血清PSA具有更高的特异性。不同临床分期、不同病理分级之间，AMACR mRNA表达量及检测阳性率均不具有统计学意义（P值均〉0．05）。结论尿液中AMACR mRNA的表达量可以作为前列腺癌诊断的一种非损伤性指标，而且在PCa的早期诊断中也有潜在的临床价值。     

自噬相关基因Atg5与前列腺腺癌发生的相关性分析

目的:探讨自噬相关基因5(Atg5)与前列腺腺癌发生的相关性。方法:实时荧光定量PCR及免疫组化方法检测50例前列腺上皮内瘤变(PIN)、69例前列腺腺癌及30例良性前列腺增生(BPH)组织标本中Atg5的表达情况。结果:实时定量PCR结果显示,PIN及PCa组织中Atg5 mRNA的相对表达量显著高于BPH组织(5.270±0.230 vs 1.723±0.017,5.131±0.252 vs 1.723±0.017,P<0.01)。免疫组化结果显示Atg5在BPH、PIN及PCa组织中的阳性表达率分别为6.7%、94%及88.4%,BPH组织中Atg5的阳性表达率明显低于PIN及PCa,且差异具有统计学意义(P<0.001),PIN与PCa组别之间无显著差异(P>0.05)。Atg5的表达与前列腺腺癌的Gleason评分分级无显著相关性(P>0.05)。结论:前列腺组织中Atg5的高表达可能对前列腺腺癌的发生起着一定作用。     

不同前列腺组织中雄激素受体的表达研究

目的:研究雄激素受体(AR)在正常前列腺、良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)组织中的表达,探讨AR与BPH和PCa的关系。方法:采用实时定量PCR、免疫荧光和组织蛋白电泳方法,分析15例正常前列腺、20例BPH与40例PCa标本中AR的表达情况。结果:实时定量PCR和组织蛋白电泳检测BPH组织与正常前列腺组织中AR的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。但免疫荧光检测发现BPH组织中AR蛋白表达量增高。3种方法检测PCa组织中AR表达量较正常前列腺组织和BPH组织增高(P<0.05)。高分化PCa的AR表达比低分化PCa高(P<0.05)。随着临床分期的增高,AR的表达降低(P<0.05),激素非依赖性前列腺癌(HRPC)组织中AR表达最低。结论:AR在PCa组织中的表达较正常前列腺和BPH组织中增高,AR的表达与PCa的分级、分期相关。     

XAGE-1 b基因在良性前列腺增生症与前列腺癌中的表达及其意义

目的 观察XAGE-1b基因在良性前列腺增生症和前列腺癌中的表达,探讨其数值对良性前列腺增生症和前列腺癌各项指标的临床意义.方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测38例前列腺癌病理组织以及40例良性前列腺增生症组织XAGE-1b的基因表达水平.结果 XAGE-1b在前列腺癌组织中表达值为8.299 50±0.97116,在良性前列腺增生症组织中表达值为3.007 80±0.91600,差异有统计学意义(P＜0.05).XAGE-1b表达值随着Gleason评分、临床分期和肿瘤恶性程度升高而表达增强(P＜0.05).结论 XAGE-1b基因高表达值有助于前列腺癌的诊断和指导前列腺癌的恶性程度分期.

Abstract：

Objective To study the XAGE-1 b mRNA expression in prostate cancer (PCa) tissues and benign prostate hyperplasia (BPH) tissues,and explore the diagnostic values of XAGE-1 b mRNA expression level in PCa and BPH.Methods A sensitive,real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR) assay was developed to compare the expression difference of XAGE-1b mRNA in PCa and BPH tissues,by testing 38 samples of PCa and 40 samples of BPH.Results The expression level of XAGE-1 b in PCa tissue was 8.299 50 ± 0.971 16,and 3.007 80 ± 0.916 00 in BPH tissue ( P＜0.05 ).The XAGE-1 b expression levels were increased with the increase of the Gleason score,clinical stage and malignant grade (P＜0.05).Conclusion The high expression of of XAGE-1 b mRNA can afford a reliable and helpful information for diagnosis of PCa and BPH,and PCa malignant grade.     

前列腺癌与前列腺增生相关基因的选择和克隆

目的 选择和克隆人前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)的相关基因。方法 根据当前前列腺癌与前列腺增生临床常规使用的肿瘤标记物和国内外基因表达谱的研究成果，选定了7个PCa上调表达。2个PCa下调表达基因和1个内参基因，采用聚合酶链反应(PCR)从正常人外周血DNA中扩增出上述10个基因的探针片段，并克隆至pGEM-T质粒中。重组质粒经PCR鉴定、EcoR Ⅰ单酶切或PSt Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切鉴定，产物电泳检测。结果 检测结果表明已经成功地将10个基因的探针序列克隆入pGEM-T质粒载体中。结论 前列腺癌和前列腺增生相关基因质粒构建与探针制备为临床前列腺癌的血清学诊断及与前列腺增生症的鉴别提供了实验基础。     

DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析

目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析。结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达。DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104拷贝/mg组织。PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P<0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P>0.05)。DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性。DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995)。当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11。结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性。DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性。DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值。