白念珠菌唑类耐药和生物膜相关基因的表达

目的研究白念珠菌临床分离株唑类耐药和生物膜形成相关基因的表达。方法收集上海市公共卫生临床中心2006至2011年92例感染性疾病患者[病毒性肝炎、结核、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)]血液、无菌部位和黏膜分离鉴定的白念珠菌104株,选用ATB FUNGUS3检测抗菌药物(氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑)的最低抑菌浓度(MIC),采用半定量逆转录聚合酶链反应(PCR)分析唑类敏感、浓度依赖性敏感(S-DD)和耐药菌株之间药物外排泵基因CDR1、CDR2、MDR1和药物靶酶基因ERG11表达的差异,同时通过甲基四氮盐(XTT)代谢试验筛选强生物膜形成能力菌株(HBFs),研究其与弱生物膜形成能力菌株(LBFs)相关基因ALS3和HWP1表达的差异。结果 104株白念珠菌中共检测出16株至少对1种唑类药物耐药,6株至少对1种唑类药物S-DD。药物靶酶基因ERG11在耐药株、S-DD株和敏感菌之间比较,差异有统计学意义(P=0.007 8),且耐药株、S-DD株分别与敏感菌比较,差异有统计学意义(P0.05),然而CDR1、CDR2和MDR1表达量在3种菌株间无明显差异。生物膜形成能力试验显示16株菌生物膜形成能力增强,其HWP1表达量与LBFs比较差异有统计学意义(P=0.007 9),ALS3表达量差异无统计学意义。结论 ERG11基因的过度表达为白念珠菌唑类耐药的重要机制。菌丝细胞壁蛋白HWP1基因的高表达与白念珠菌生物膜形成增强相关。     

芍药苷对白色念珠菌生物膜的作用

背景：研究证实中药赤芍有效成分对白色念珠菌有较好的抑制作用,但其单体芍药苷对白色念珠菌生物膜是否有抑制作用未见报道。目的：观察芍药苷对体外白色念珠菌生物膜的影响。方法：用RPMI-1640分别按2倍稀释法制备5个浓度梯度（4,2,1,0.5,0.25 g/L）的芍药苷溶液。用RPMI-1640稀释洗必泰为5个浓度梯度（2%,1%,0.5%,0.25%,0.125%）。采用琼脂扩散法检测不同浓度梯度芍药苷或洗必泰对白色念珠菌的抑菌直径。MTT法检测不同浓度洗必泰或芍药苷对白色念珠菌细胞黏附的作用,以及对白色念珠菌生物膜的抑制作用,并且利用激光共聚焦扫描显微镜和死菌活菌荧光染色技术相结合方法观察常态及药物作用下的白色念珠菌生物膜。结果与结论：洗必泰与芍药苷均有抑菌能力,抑菌环直径与药物浓度呈正相关;除2 g/L芍药苷组与1%,2%洗必泰组抑菌环直径无差异外,其余组间两两比较差异均有显著性意义。不同质量浓度芍药苷对白色念珠菌的细胞黏附都具有抑制作用,对白色念珠菌生物膜也具有抑制作用,且抑制率与药物质量浓度呈正相关。观察48 h时常态生物膜结构中大部分是活菌,有少量死菌存在;随芍药苷质量浓度改变白色念珠菌生物膜中死菌比例不断增高,其抑菌活性相对弱于洗必泰。表明芍药苷对体外白色念珠菌生物膜有较明显的抑制作用。     

白念珠菌MRR2基因错义突变C1409A与氟康唑耐药的相关性

目的 研究锌簇转录因子——多药耐药调节因子2(Mrr2)编码基因MRR2错义突变C1409A与白念珠菌氟康唑耐药的相关性。方法 利用白念珠菌工程菌株SN152构建MRR2基因敲除菌株,通过一步法克隆及定点突变技术构建MRR2基因C1409A突变型表达质粒,再用高效醋酸锂转染法将质粒片段转染入MRR2基因敲除菌株,异位表达于ADE2位点以构建MRR2基因定点突变菌株。通过体外药物敏感性试验及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析错义突变C1409A与氟康唑耐药的关系。结果 氟康唑对MRR2基因C1409A定点突变的白念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)较对工程菌株SN152的MIC增加4倍,CDR1表达上调约3倍。结论 MRR2基因错义突变C1409A可上调白念珠菌CDR1表达并介导白念珠菌对氟康唑的耐药。     

生殖道白色念珠菌耐吡咯类药物的基因表达

目的了解生殖道白色念珠菌耐吡咯类药物基因的表达情况。方法收集真菌性阴道炎患者分泌物标本93份,分离白色念珠菌后用纸片扩散法进行药敏试验,裂解法提取白色念珠菌的吡咯类药物耐药株和敏感株的总RNA,逆转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR技术检测白色念珠菌多药耐药基因CDRl、CDR2、MDRl的表达情况。结果共培养出59株白色念珠菌,18株热带念珠菌,10株克柔念珠菌,6株光滑念珠菌;白念珠菌中37株对氟康唑、酮康唑、咪康唑不同程度耐药,耐药率分别为16.7%、18.3%、51.7%;白念珠菌耐药株CDR1基因的2~(-△△Ct)为1.46±0.24,敏感株为1.09±0.27,两组比较,差异有统计学意义(t=-4.22,P=0.001);CDR2及MDRl基因的表达差异均无统计学意义(P=0.170,P=0.800)。结论白色念珠菌耐药机制较为复杂,可能与CDR1高表达有关,CDR2和MDR1表达与耐药性的关系有待进一步研究。     

口腔白念珠菌耐药性与基因分型及耐药基因表达的分析

目的了解口腔白念珠菌耐药情况及其基因型分布,初步探讨其耐药表型、基因型、生物膜与耐药基因(CDR1、ERG11)表达之间的联系。方法选用ATB Fungus 3药物敏感性试剂盒对所收集的125株口腔白念珠菌进行药物敏感性试验;采用结晶紫法检测白念珠菌的生物膜形成能力;通过重复序列聚合酶链反应(PCR)对白念珠菌进行基因分型;采用实时荧光定量PCR检测耐药基因CDR1和ERG11的表达。结果在125株白念珠菌中筛选出7株耐药株。白念珠菌对伊曲康唑的耐药率为4.8%(6/125),对氟康唑的耐药率为0.8%(1/125),对氟胞嘧啶的耐药率为0.8%(1/125)。重复序列PCR将菌株分为4个型别,其中1型19株、2型2株、3型2株、4型2株,各型之间在耐药率、生物膜形成能力、ERG11和CDR1的表达上差异无统计学意义(P值分别为0.645、0.769、0.686、0.782)。耐药组的生物膜形成能力和ERG11表达能力强于敏感组(P值分别为0.001、0.002),而CDR1的表达差异无统计学意义(P=0.836)。结论绝大部分口腔白念珠菌对抗真菌药物敏感,少数对抗真菌药物耐药,以对伊曲康唑耐药为主。各菌株生物膜形成能力存在一定的差异,耐药株的生物膜形成能力强于敏感株。口腔白念珠菌重复序列PCR分型与耐药之间没有必然的联系。耐药株耐药基因ERG11的表达总体强于敏感株。     

黄连解毒汤对白色念珠菌的抗真菌作用研究

目的 观察黄连解毒汤对白色念珠菌的体外抗真菌效果.方法 采用微量稀释法药物敏感性试验测定黄连解毒汤对标准菌株、氟康唑敏感株、氟康唑中度敏感株、氟康唑耐药株4种白色念珠菌的最低抑菌浓度.结果 黄连解毒汤对4种白色念珠菌均具有较好的抑制作用,其对白色念珠菌标准菌株的最低抑菌浓度为4mg/ml,对氟康唑敏感型白色念珠菌最低抑菌浓度为8mg/ml,对中度敏感型白色念珠菌最低抑菌浓度为16mg/ml,对耐药型白色念珠菌最低抑菌浓度为 64mg/ml.结论 黄连解毒汤对白色念珠菌有明显的抑制作用,可作为临床用药的参考.     

阴道光滑念珠菌耐药性及氟康唑耐药相关基因的表达

目的 研究阴道中光滑念珠菌耐药性及氟康唑耐药相关基因的表达.方法 分离、鉴定阴道分泌物中的光滑念珠菌,并进行药敏实验.抽提光滑念珠菌总RNA,通过RT-PCR检测耐药基因CDR1、CDR2和ERG11的相对表达量.结果 光滑念珠菌对制霉菌素、两性霉素B的药物敏感性最好,5-氟胞嘧啶次之,对唑类药物的耐药率(41.00%～67.00%)较高;对氟康唑的耐药率为44.00%.RT-PCR结果显示,光滑念珠菌氟康唑耐药组CDR1、CDR2和ERG11基因高表达.结论 光滑念珠菌对常用抗真菌药物的耐药率呈上升趋势.光滑念珠菌耐药基因CDR1、CDR2和ERG11的高表达,与临床光滑念珠菌对氟康唑耐药有关.     

四种根管封闭剂的体外抑菌性能

背景:根管封闭剂的抑菌性能有助于去除残留于根管内的微生物,是影响根管治疗预后的一项重要因素。目的:检测AHplus、Vitapex、Guttaflow及Endomethasone等4种根管封闭剂的体外抑菌性能。方法:采用琼脂扩散实验测定AHplus、Vitapex、Guttaflow及Endomethasone等4种根管封闭剂、盐酸米洛环素或咪康唑霜剂(阳性对照)组及生理盐水(阴性对照)组对粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及白色念珠菌等微生物的体外抑制作用,24h后检测各组材料抑菌环的大小。结果与结论:Endomethasone根管封闭剂对上述4种微生物均有良好的抑制作用,但其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及白色念珠菌的抑制作用显著低于阳性对照组(P<0.01),对粪肠球菌的抑制作用强于阳性对照组(P<0.01)。AHplus根管封闭剂仅对白色念珠菌有抑制作用,但抑制作用显著小于Endomethasone根管封闭剂及阳性对照组(P<0.01)。Vitapex及Guttaflow根管封闭剂对上述4种微生物无抑制作用;表明Endomethasone根管封闭剂的体外抑菌作用最强,AHplus根管封闭剂次之,而Vitapex及Guttaflow根管封闭剂无体外抑菌作用。     

热带假丝酵母菌外排泵基因与氟康唑耐药性的初步研究

目的探讨热带假丝酵母菌外排泵基因CDR1和MDR1表达水平与氟康唑耐药的关系。方法收集太原市中心医院检验科分离的41株热带假丝酵母菌;采用ATB FUNGU3试条进行药敏试验;RT-PCR的方法检测外排泵基因CDR1和MDR1在热带假丝酵母菌氟康唑耐药菌株和敏感菌株中的表达水平。结果主动外排泵基因CDR1和MDR1在氟康唑耐药热带假丝酵母菌临床分离菌株中的表达均显著高于敏感菌株(0.905±0.026vs.0.735±0.101;0.749±0.028vs.0.542±0.068,P均<0.05)。结论热带假丝酵母菌外排泵基因CDR1和MDR1高表达可能与氟康唑耐药相关。     

阴道白假丝酵母菌氟康唑耐药相关基因的表达

目的 研究阴道白假丝酵母菌氟康唑耐药相关基因的表达.方法 应用Real-time PCR检测白假丝酵母菌四个耐药基因的相对表达量.结果 耐药组CDR1、CDR2和MDR1表达显著高于敏感组;耐药组ERG11的表达与敏感组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CDR1、CDR2和MDR1的高表达,与临床白假丝酵母菌对氟康唑耐药有关;ERG11的表达与耐药无关.     

茶叶水浸液对口腔致病菌抑菌效果的研究

目的了解各种普通茶叶水浸液对口腔致病菌的抗菌作用。方法采用平板打孔法对茶叶水浸液抗菌效果进行了检测。结果普通绿茶、乌龙茶和普洱茶用茶叶2.5 g/L和5 g/L的初次水浸液对溶血性链球菌和变形链球菌抑菌环直径均>10 mm;用10 g/L茶叶的水浸液对包括肺炎双球菌和牙龈卟啉单胞菌在内的4种试验菌的抑菌环直径均>10 mm。红茶和菊花茶初次水浸液除对溶血性链球菌有抑菌作用之外,对其他试验菌基本没有抑菌作用。结论茶叶水浸液对口腔致病菌有抗菌作用,但不同茶叶抗菌作用差别明显。     

五种抗菌皂抗菌效果的评价

目的评价含有不同抗菌成分香皂的抗菌性能,以了解其质量状况。方法采用琼脂稀释法,对市售标有抗菌作用的抗菌肥皂的抗菌效果进行了体外抗菌性能评价。结果浓度为5 000 mg/L的上海药皂、上海硫磺皂、六神艾叶除菌香皂、六神除菌香皂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有抑制效果,达到广谱抗菌肥皂的要求;浓度为6 000 mg/L的舒服佳橄榄油润肤香皂对白色念珠菌亦无抑制作用。结论所抽检的五种抗菌肥皂中,只有四种在较高浓度下达到广谱抗菌肥皂的标准。     

纳米银抗菌材料的制备及其抗菌性能研究

目的研究一种负载型银系纳米抗菌剂的制备方法和体外抗菌性能。方法通过离子交换和原位还原法制备纳米银抗菌剂,并采用肉汤稀释法测定该抗菌剂体外抗菌效果。结果利用本实验室确定的工艺制得平均粒径为35 nm、体系均匀的纳米银固体制剂,载银量为质量分数0.89%。该纳米银抗菌剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌MIC值依次为50、50和100 mg/L,MBC值依次为100、100和500 mg/L。结论所制备的纳米银抗菌剂颗粒体系均匀,抗菌效果较好。     

家蝇抗菌肽的免疫诱导及抗菌活性研究

目的 诱导家蝇产生抗菌活性肽,鉴定其抗菌活性.方法 家蝇经针刺损伤感染大肠埃希菌,免疫诱导24h后制成组织匀浆,经低温盐析、超速离心、Sephadex G50层析、RP-HPLC等技术分离纯化抗菌肽.K-B法和稀释法测定抗菌活性.结果 家蝇体内含有抗菌活性成分,家蝇经损伤免疫诱导后分泌抗菌肽的量明显增加,经分离纯化得到了一个色谱纯的抗菌活性肽.该抗菌肽对标准菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)均有抗菌活性,其MIC分别为2.4 μmol/L、3.6 μmol/L和4.8 μmol/L.结论 免疫诱导可促进家蝇抗菌肽的分泌,分泌的抗菌肽有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有抑制作用.     

光触媒材料抗菌效果及其影响因素观察

目的观察光触媒材料抗菌性能及其影响因素。方法采用肉汤稀释法和琼脂扩散法,对不同光触媒材料抗菌效果进行了检测并比较不同检测方法对结果的影响。结果含量100mg/L的纳米二氧化钛粉剂肉汤对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌无抑制作用。将含量10g/L的纳米二氧化钛溶液涂布在玻片上,经日光灯照24h,对大肠埃希菌抑菌率为86.06%～97.55%;对金黄色葡萄球菌抑菌率为94.04%～95.81%。污染在纳米二氧化钛粘胶纤维上的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌不经过光照,其菌数下降对数值分别为0.22和0.00;经日光灯照24h,其菌数下降对数值分别为3.32和2.14。将纳米银混溶在营养琼脂培养基中对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌MIC为60mg/L。污染在载银光触酶粘胶纤维上的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌不经光照,其下降对数值分别为1.07和0.63;经日光灯照24h,其下降对数值分别为1.35和1.46;经紫外光照24h,其下降对数值分别为2.26和2.21。结论纳米二氧化钛只有在光照条件下,方可显示出抑菌作用;纳米银不经光照具有一定抑菌作用,经光照能增强其抑菌效果,紫外光增效作用更强。     

上海市皮肤黏膜抗(抑)菌产品生产与管理现状调查

目的了解上海市皮肤黏膜抗(抑)菌产品的生产与管理现状,发现存在问题,探讨监管方法。方法用现场抽样调查的方法,对本市所辖皮肤黏膜抗抑菌产品质量和生产企业管理情况进行了调查。结果本市企业生产的皮肤黏膜抗(抑)菌产品共17种,这些产品的主要杀菌成分以三氯羟基二笨醚和双胍类化合物及其复方制剂为主,产品抗菌成分的含量值符合国家限量值规定。经过上海市认证实验室检测,17种产品对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抗(抑)菌效果。17种产品中,有16种产品完成卫生安全评价,其中有7件产品的评价报告内容符合卫生部《消毒产品卫生安全评价规定》要求。结论本市生产的皮肤黏膜抗(抑)菌产品均为获准生产,有效成分及其限量值和抗(抑)菌效果符合相关规定,但安全性评价存在不足,应加强监管。     

两种铜基金属有机多面体凝胶的抑菌性能及其机理研究

摘要 目的 评价两种铜基金属有机多面体凝胶的抑菌性能,并对其抑菌机理进行研究。方法 采用浊度法、琼脂扩散法和急性毒性试验方法,对两种铜基金属有机多面体凝胶的抑菌性能和凝胶的安全性进行评价,并探讨其抑菌机理。结果 浊度法测定结果表明,两种铜基金属有机多面体在5 μmol/mL低浓度下对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抑菌率均＞90%。琼脂扩散法结果表明,两种凝胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌及枯草芽孢杆菌均具有抑菌效果。两种凝胶在Cu-MOP含量为3%范围内有良好的毒理安全性。有机多面体凝胶主要通过破坏细胞膜和诱导活性氧产生发挥抑菌作用。结论 两种铜基金属有机多面体凝胶均具有较强的抑菌效果,使用安全。     

清洁手术抗菌药物预防性用药调查

目的了解外科清洁手术围手术期抗菌药物预防使用情况,加强抗菌药物使用管理。方法采用回顾性调查方法,对医院外科部分清洁(Ⅰ类切口)手术围手术期预防性用药情况进行调查与分析。结果在调查的94例清洁手术患者中,抗菌药物预防性使用率94.68%,其中无指征用药占79.78%。预防用药开始时间在术前0.5～2h内执行占61.70%,术后24h内停药仅占13.82%。结论该医院Ⅰ类切口手术预防用药比例较大,用药起点较高,存在抗菌药物使用不合理现象。     

抗菌整理剂处理病房床单抗菌效果观察

目的研究WS-8810抗菌卫生整理剂对处理普通病房床单的抗菌效果。方法采用压印法采样和常规细菌培养方法,对WS-8810抗菌卫生整理剂处理的普通病房床单进行抗菌效果观察。结果含有阳离子型抗菌剂的WS-8810抗菌卫生整理剂处理的病房床单对自然菌的平均抗菌有效率为97.6%。对用该抗菌卫生整理剂处理的病房床单布样抽样作无菌检验,无菌率达到91.4%,未经抗菌卫生整理剂处理的布样无菌比例为0%。结论该抗菌卫生整理剂处理的病房床单显示出明显抗菌效果,抗菌率为97.6%(90%)消毒合格。