高效离子色谱法测定氨基葡萄糖类化合物

目的:建立快捷、灵敏检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐的离子色谱法。方法:采用离子色谱-积分脉冲安培检测法检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐的含量,以NaOH淋洗液梯度淋洗,在CarboPac PA10高效阴离子交换柱(HPAEC)上实现分离,用Au工作电极、Ag/AgCl参比电极的脉冲安培检测器测定N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐。结果:N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐在0.02~20 mg/L范围内线性相关良好,相关系数r2分别为0.9999和0.9995。进样25μl、S/N=3时,方法检出限分别为0.005 mg/L和0.01 mg/L。精密性实验相对标准偏差为0.35%和0.76%;两种糖的加标回收率均在95.3%~101.6%之间。结论:建立的离子色谱-脉冲安培检测法检测N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖盐酸盐,方法可靠、无需衍生、简便快捷、分离效果好、灵敏度高,可以在15 min内完成定量分析。     

高效毛细管电泳间接安培法的研究

利用自装的毛细管电泳仪和脉冲伏安仪,探讨毛细管电泳间接脉冲安培法的测定条件以扩大毛细管电泳安培法测定范围。同时采用Tris-阿魏酸及吡啶-对苯二酚两类缓冲溶液,研究了缓冲溶液配比、检测电压对间接脉冲安培法的影响。     

阴离子色谱-脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸

[目的]建立啤酒中氨基酸的高效阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定.[方法]样品用去离子水稀释后经滤膜过滤直接进样,采用梯度洗脱、阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸.[结果]5种品牌的啤酒氨基酸平均含量为773.54 mg/L,其中氨基酸含量最高的为1 040.72 mg/L,最低的为532.77 mg/L.[结论]不同原料、不同酿造方式使啤酒中的氨基酸含量各不相同;利用阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸,样品前处理简单,方法适用性宽,测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果满意.     

细胞吸附浓集法分离外环境水中脊髓灰质炎病毒

目的 建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法。方法 细胞吸附浓集法：将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后，加入适量的L20B细胞，混匀，充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒，然后收集细胞培养、分离病毒。同时用AlCl3-NaCl沉淀法浓集病毒，接种L20B细胞分离病毒，作为对照。结果 40份水样，用L20B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒，用AlCl3-NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒。结论 新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测，且检测的敏感性明显高于AlCl3-NaCl沉淀法。     

水源水中无机硫化物的离子色谱-脉冲安培测定法

目的 建立水源水中无机硫化物的离子色谱-脉冲安培测定法.方法 水样经0.22μm尼龙膜过滤后,进入配有IonPac AS7易极化阴离子专用分析柱和脉冲安培检测器的离子色谱系统,以100 mmol/L NaOH-250 mmol/L NaOAc-0.5%(V/V)乙二胺为淋洗液进行等度淋洗后,硫离子与其他阴离子分离后,经电位脉冲安培检测器进行检测.结果 在5～1 000μg/L线性范围内,硫化物的线性方程为r=0.325 4x-1.305 3,r=0.999 8,检测限为0.5μg/L,平均回收率为90.8%～96.7%,RSD为1.32%.结论 该方法具有操作简单,选择性好,灵敏度高,重复性好等特点,适用于水中无机硫化物的检测.     

高效阴离子色谱法快速分析保健食品中的左旋肉碱

目的建立一种测定保健食品中左旋肉碱的脉冲安培检测-高效阴离子色谱新方法。方法样品经乙醚溶解分散,用1.0mmol/L盐酸萃取其中的左旋肉碱后,上清液进离子色谱仪测定。以200mmmol/LNaOH为流动相,采用Amino PAC PA10氨基酸分离柱分离,Au为工作电极的脉冲安培检测器检测。结果左旋肉碱在0.08～1.00mg/ml浓度范围内线性关系良好,标准溶液测定的峰面积和保留时间的RSD为3.97%和0.62%,日间RSD为5.66%和0.69%。将此法用于保健食品样品分析,样品平均加标回收率为95.6%～113.5%,样品测定结果的RSD为7.34%。结论该方法简便准确,重现性好,15min可完成一次分析,适于保健品中左旋肉碱的定量快速检测。     

脉冲场电泳在霍乱弧菌分型中的应用

目的：了解天津市霍乱弧菌的基因型。方法：选择保留的20株埃尔托霍乱弧菌进行血清分型及生化实验确认，采用琼脂糖包埋胶块法制备染色体DNA，以sfi I内切酶进行切割，选定脉冲电泳参数进行片段分离。结果：20株霍乱保留株用脉冲场电泳分离可得到5种不同的基因型。结论：20株霍乱弧菌经血清学及生化检定确认未发生表型特征变异，脉冲场电泳分析表明，不同年代分离株基因型别重叠出现。     

耐碳青霉烯类抗菌药物鲍氏不动杆菌的分子流行病学研究

目的调查医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌(CRAB)的同源性,并了解是否存在耐药菌株的克隆流行。方法收集2009年6月-2010年6月临床分离的CRAB 39株,用微量稀释法检测其对13种抗菌药物的敏感性;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)的方法对所分离的菌株进行分子分型。结果 39株鲍氏不动杆菌主要分离自ICU;对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率为100.0%,敏感率较好的为米诺环素、阿米卡星、多黏菌素E,敏感率分别为100.0%、94.9%、61.5%;脉冲凝胶电泳结果显示,39株CRAB分为A、B、C型,其中A型17株、A1亚型1株、A2亚型1株、A3亚型1株,B型15株、B1亚型2株、B2亚型1株,C型1株。结论调查期间医院主要为A型和B型菌株克隆流行,C型菌株为散发株;菌株流行主要集中在ICU。     

用笔式数字万用表多加功能检测医疗设备

本文介绍了在保持普通笔式DVM（数字电压表）3211B体积和接出线根数的前提下增加测量射频与脉冲的功能,检测振荡回路、向AV电路注入信号定位故障点、用声音寻迹AV信号、测量线圈短路、分辨小于1/100Ω电阻差异;确定PCB（Printed circuitboard,PCB,印刷电路板）短路点和测量上安培电流等功能,用于检测医疗电子设备的实验及其原理。     

细胞法和鸡胚法分离流感病毒的实验研究

目的通过两种方法分离流感病毒的比较,提高流感病毒分离率和流感监测效果。方法对200份咽拭子标本同时采用MD-CK细胞和鸡胚双腔法分离。结果细胞培养法分离流感病毒15株,分离率7·5%;鸡胚双腔培养法分离流感病毒6株,分离率为3%。共15株病毒株,其中A3型8株,B型7株。结论在流感病毒分离中,细胞培养法比鸡胚培养法敏感,同时用两种方法培养,可明显提高流感病毒分离率。     

HBsAg脉冲的树突状细胞对CIK细胞功能的影响

目的探讨HBsAg脉冲的树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤细胞(C IK)增殖和杀伤作用的影响。方法选择慢性乙肝患者27例,分离外周血单个核细胞(PBMC),经HBsAg脉冲后,用3H-TdR掺入法检测该细胞对C IK细胞增殖的刺激作用,用乳酸脱氢酶释放法检测特异性C IK细胞对HepG2.2.15细胞的特异性杀伤作用。结果HBsAg脉冲的DC对C IK细胞的增殖具有刺激作用。由HBsAg脉冲的DC所诱导的特异性C IK细胞对HepG2.2.15细胞的特异性杀伤作用增强。结论HBsAg脉冲的DC可增强C IK细胞的杀伤活性。     

吉林省珲春市3株肾综合征出血热汉城型病毒的分离与鉴定

目的对2006年吉林省珲春市采集的鼠肺标本进行病毒分离与鉴定。方法采集鼠肺组织活体标本132份，用免疫荧光法筛检出阳性标本20份，用VeroE6细胞培养分离病毒，对病毒分离株进行血清学（EUSA和IFA方法）、分子生物学（RT-PCR）鉴定。结果本实验共筛检出阳性标本20份，分离到3株病毒，分离率为15％，分别命名为H156、H158、H162。结论在珲春市采集的褐家鼠标本中分离到3株病毒，经血清学和分子生物学鉴定为汉坦病毒汉城型，这是在珲春市首次分离到汉城型病毒。     

血流感染肺炎克雷伯菌耐药性及同源性分析

摘要:目的　分析血流感染（Bloodstream Infection,BSI）肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,Kpn）的耐药性及同源性。方法　收集2011年10月-2011年11月沈阳军区总医院血液培养中分离的Kpn 14株,用微量肉汤稀释法测定菌株对13种抗菌药物的敏感性,用脉冲场凝胶电泳（Pulsed-Field Gel Electrophoresis PFGE）检测其同源性。结果　14株BSI的Kpn对头孢菌素类、碳青霉烯类等抗菌药物耐药性较高;BSI 14株菌分7种基因型 A、B、C、D、E、F、G型,以E型（6株）和B型（3株）为主;其余菌株均为单一型,其中B型（3株）和E型（5株）分离自心外科,其他各型各1株分离来自心外科、泌外科、心内科和急诊科。结论　BSI E型（5株）和B型（3株）的Kpn来源于心外科,提示可能存在小范围内的克隆菌株的流行传播。     

脉冲场凝胶电泳技术在铜绿假单胞菌现场调查中的应用研究

目的建立铜绿假单胞菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法,对某医院患者送检标本及桶装矿泉水中分离到的铜绿假单胞菌进行分子分型,开展分子流行病学分析。方法将铜绿假单胞菌标准株和分离株进行复苏生化鉴定,用SpeI内切酶对试验株菌悬液凝胶块原位消化酶切后进行脉冲场凝胶电泳,比较获得的分子分型指纹图谱,运用Bionumerics5．1聚类分析。结果6株试验菌株中,有3株分离自患者,3株分离自桶装矿泉水,以及1株标准菌种,均获得清晰指纹图谱,条带数在20至25个之间,可分为A、B、C、D、E、F共6个基因型,相似度在70．6％～100．0％之间,其中两株患者来源的菌株相似度为100．O％。结论铜绿假单胞菌基因组经SpeI内切酶酶切后可获得理想的条带数便于分型。患者标本和饮用桶装矿泉水分离株没有直接相关性,但提醒仍需加强桶装矿泉水污染铜绿假单胞菌的管理;脉冲场凝胶电泳技术可有效应用于铜绿假单胞菌遗传学特征、传播途径及分布规律的分子流行病学研究。     

ICU多药耐药鲍氏不动杆菌连续流行的同源性分析

目的对某医院中心重症监护病房(ICU)2007年1月-2009年7月3次疑似多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)医院流行时间段内的MDRAB进行同源性分析。方法收集ICU住院患者标本中分离的28株MDRAB,以及从该病房环境中分离的7株ABA;运用脉冲场凝胶电泳分析菌株的同源性。结果脉冲场凝胶电泳结果表明,36株菌有4个克隆,其中克隆A包括临床分离株648,3个环境分离株B8、J4、C9;B型、C型全为临床分离株,分别包括1196、1201、1103、1205、1150和3325、3693、3334、3893、4006、4128、4358、3605;D型包括3次临床分离株433、438、458及一个环境分离株(B15)。结论 3次医院流行分别由克隆D、B、C引起,患者间MDRAB的交叉传播是医院流行的主要传播方式,环境样品分离鉴定及同源性分析结果提示,ICU的通风系统是MDRAB流行的源头;严格的消毒、隔离措施,强调手卫生,能有效控制MDRAB的医院流行。     

43株流感病毒型别鉴定及其特征分析

[目的]了解2002年福州市区分离的43株流感毒株型别特征。[方法]以MDCK和鸡胚法分离病毒,经红细胞凝集活性(HA)和红细胞凝集抑制(HI)试验鉴定分型。[结果]从806份流感样病人的咽拭中分离出43株流感病毒,其中41株从MDCK法分离。在22株A3型中21株是“0”相毒株,其HI效价均在1：320以上,其中02411株效价1：640。B型20株中类似B／沪防／20／2001型4株,类似B／浙江／2／2001型16株,其HI效价均≥1：640。[结论]2002年福州市区流感病毒以A3型为主,B型次之,且A3型抗原性已发生较大变异;WHO于2003年10月将以02411株为代表的A3型(A3／福建毒株／411／02)作为2004年南半球流感疫苗组分推荐株。     

高效离子色谱-脉冲安培检测法测定食品中多聚葡萄糖

目的在AOAC2000.11的基础上,应用高效离子色谱-脉冲安培检器联用技术,建立食品中多聚葡萄糖的检测方法。方法匀质样品通过热水浸提、超滤离心、酶解等处理后,进样20μl,以0.15mol/LNaOH、含有0.15mol/LNaOH的0.5mol/L乙酸钠进行梯度淋漓,CarboPACTM PA1阴离子交换柱-金电极脉冲安培检测。结果方法检出限、定量限分别为1.69μg/g、5.47μg/g,重复性和复现性RSD2.10%~6.62%,不同食品基质多聚葡萄糖的平均加标回收率为92.4%~104.4%。结论该方法重现性良好,能够准确定量食品中多聚葡萄糖含量。     

脉冲场凝胶电泳在沙门菌食物中毒溯源中的应用研究

目的用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法,追踪某次沙门菌食物中毒的来源,确定中毒食品,快速控制传染源。方法对食物中毒中分离的肠炎沙门菌用XbaI酶切总DNA,用脉冲场凝胶电泳（PFGE）法进行分子分型,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱进行电子化数据分析,绘出聚类分析图。结果脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型方法对患者样本分离的242株肠炎沙门菌进行分子分型,型别基本一致,表明是同一批食物中毒;从三文治等蛋糕制品中分离的9株菌株与患者分离株图谱完全一致,表明此次食物中毒的源头为某蛋糕厂生产的三文治等食品。结论脉冲场凝胶电泳技术适用于菌株的同源性的分析和传染源的追踪。     

密集型劳动空调车间生产环境的卫生学评价

本文试用综合大气质量指数和安培空气质量指数对密集型劳动空调车间的生产环境的空气质量进行了评价。结果表明：在新风量充足，换气次数足够的情况下，车间生产环境空气质量符合卫生要求；同时表明用大气质量指数法评价与用安培空气质量指数和其它污染指标评价结果的一致性。认为该评价法可用于评价密集型劳动空调车间生产环境的空气质量。     

肠炎沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分型研究

目的　为研究肠炎沙门氏菌菌株间的关系,特建立了分子流行病学研究方法脉冲场凝胶电泳分型方法,并对从食品中分离的肠炎沙门氏菌进行了分型研究。方法　1991～2 0 0 1年间,从河南、黑龙江等省份采集食品样品,分离出肠炎沙门氏菌,挑取单个菌落增菌,用溶菌酶、蛋白酶K和TE缓冲液依次提取菌体DNA后,用限制性内切酶XbaΙ消化胶块,然后在CHEFMapper仪上进行脉冲场凝胶电泳,电泳条件:0 . 5×TBE缓冲液、14℃、1%琼脂糖、脉冲时间5s～4 5s、2 6h、6V cm。应用λ噬菌体DNA作为脉冲场凝胶分子量标准。结果　从鸡肉、牛肉、熟肉及蔬菜中分离出30株肠炎沙门氏菌,其中18株来自河南省,绝大多数菌株(2 2株)分离于2 0 0 1年。对所得菌株进行脉冲场凝胶电泳后,结果显示30株肠炎沙门氏菌分为A、B两个型,两型图谱之间有8个条带的差异。A型菌株有19株,占全部菌株的6 3. 3% ,B型菌株有11株,占36 .7%。A型之内又可以分出2个亚型,其中A1型占78 .9% ,A2亚型与A1亚型相比的差别在于,A2型在5 0kb处有一条带缺失。在菌株分型与采集时间和采集地点之间没有相关性,但所有从鸡肉中分离到的菌株均为A1型,提示了某种有待进一步研究的流行病学趋势。结论　在研究肠炎沙门氏菌不同菌株之间的分子流行病学关系方面,脉冲场凝胶电泳是一种有