急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL系统表达改变？…

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生,发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义,方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法,原位杂交,半定量转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（〈２４小时）大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加,肺     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。     

急性肺损伤环氧合酶2表达的研究

目的：探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）肺组织环氧合酶 ２（ＣＯＸ ２）ｍ ＲＮＡ 表达和ＡＬＩ中前列腺素（ＰＧｓ）变化的关系,以及ＣＯＸ ２ 在ＡＬＩ发病中的可能作用。方法：在脂多糖（ＬＰＳ）诱发的ＡＬＩ模型,采用逆转录聚合酶链反应,检测肺组织ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达情况,并观察了ＰＧｓ的变化。结果：生理盐水对照组的大鼠肺组织有极少量的ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达（０．３２±０．１１）;而在ＡＬＩ大鼠,肺组织ＣＯＸ ２ｍ ＲＮＡ表达显著增加,比生理盐水对照组升高达５～８ 倍,同时伴有ＰＧｓ的升高〔生理盐水对照组为（１４１．６４±４１．７９）μｇ·Ｌ－ １ ·ｇ－ １ ,ＡＬＩ大鼠分别为（１９０．５３±４７．９１）～（４７０．９５±１８４．１７）μｇ·Ｌ－ １·ｇ－ １ 〕。结论：正常肺组织有极少量的ＣＯＸ ２ ｍ ＲＮＡ表达,ＣＯＸ ２参与ＡＬＩ的发病,并可能是引起ＡＬＩ时ＰＧｓ升高的主要同工酶。     

致痫大鼠脑组织中Fas表达及神经生长因子的干预性作用

目的：观察癫痫发作后大鼠脑组织中Ｆａｓ的表达及细胞凋亡的情况及神经生长因子（ＮＧＦ）的干预性作用。方法：采用ＬｉＣＬ－Ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎ致痫的Ｗｉｓｔｅｒ大鼠模型,通过ＴＵＮＥＬ和免疫组化方法对各组Ｆａｓ的表达、细胞凋亡情况进行观察。结果：癫痫后１ｈＦａｓ表达开始增加,１２ｈ达高峰,持续１周,Ｆａｓ的高表达与细胞凋亡的分布一致。ＮＧＦ组Ｆａｓ表达和细胞凋亡情况均致痫组有显的减少（Ｐ〈０．０１）,结论：癫痫发作可引起Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加,ＮＧＦ有抑制Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加的作用。     

系统性红斑狼疮患者细胞凋亡调节蛋白及其配体的变化

Ｆａｓ／ａｐｏ１蛋白为近年来发现的一种调节细胞凋亡的Ⅰ型跨膜糖蛋白受体,它通过与Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）或可溶性ＦａｓＬ（ｓＦａｓＬ）结合,可以介导细胞凋亡。作者单位：５１８０２０深圳市人民医院我们采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测４５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清Ｆａｓ和ＦａｓＬ的水平,并与一些实验室常用指标进行比较,以探讨Ｆａｓ和ＦａｓＬ在ＳＬＥ中的变化及其临床意义。一、材料和方法１－对象：４５例ＳＬＥ患者,男２例、女４３例,平均２７岁。其诊断均符合１９８２年美国风湿病学会（ＡＲＡ）修…     

己酮可可碱对创伤性急性肺损伤兔肺组织肿瘤坏死因子-α基因表达的影响及其意义

目的：观察己酮可可碱（ＰＴＸ）对创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）家兔肺组织肿瘤坏死因子 α基因（ＴＮＦ αｍ ＲＮＡ）表达的影响,探讨ＰＴＸ在创伤性ＡＬＩ治疗中的作用机制。方法：采用创伤性ＡＬＩ模型,实验动物随机分为正常对照组（８ 只）、创伤性ＡＬＩ模型组（２４ 只）和ＰＴＸ治疗组（２４ 只）,用ＥＬＩＳＡ 和逆转录聚合酶链反应（ＲＴ ＰＣＲ）方法分别检测不同时间点血浆ＴＮＦ α含量及肺组织ＴＮＦ αｍ ＲＮＡ表达水平。结果：血浆ＴＮＦ α含量创伤性ＡＬＩ模型组于创伤后１．５ 小时达峰值〔（１．２７±０．２６）μｇ／Ｌ〕,肺组织ＴＮＦ αｍ ＲＮＡ表达于创伤后８ 小时达高峰（２．６７±０．１８）,二者在时间上不完全平行。ＰＴＸ治疗组肺组织ＴＮＦ αｍ ＲＮＡ 的表达和外周血ＴＮＦ α含量均低于创伤性ＡＬＩ模型组（Ｐ均＜ ０．０５）。结论：ＰＴＸ能有效抑制创伤性ＡＬＩ家兔肺组织ＴＮＦ αｍ ＲＮＡ表达;本研究为ＰＴＸ治疗创伤性ＡＬＩ提供了实验依据。     

维甲酸诱导HL-60细胞Fas蛋白表达

目的：探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和９顺式维甲酸（９ｃｉｓＲＡ）对ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及维甲酸对抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡敏感性的影响。方法：用流式细胞仪检测ＨＬ６０细胞膜Ｆａｓ蛋白表达水平；分别采用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪检测抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结果：ＨＬ６０细胞Ｆａｓ弱表达。经１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ或９ｃｉｓＲＡ分别预处理４天后，ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性均显著提高。９ｃｉｓＲＡ提高ＨＬ６０细胞对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性的能力强于ＡＴＲＡ。结论：维甲酸可上调ＨＬ６０细胞表达Ｆａｓ，这可能与维甲酸诱导ＨＬ６０细胞分化相关。进一步深入探讨其分子机制，将为肿瘤治疗，特别是自体骨髓移植中骨髓净化提供新方法     

血浆血小板激活因子与急性肺损伤相关性及"神农33"注射液对其影响的观察

目的：探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导急性肺损伤（ＡＬＩ）时血小板激活因子（ＰＡＦ）含量变化情况及“神农３３”注射液对ＰＡＦ及ＡＬＩ的影响。方法：给Ｗｉｓｔａｒ大鼠静脉注射ＬＰＳ,制成ＡＬＩ模型;采用反相高效液相色谱法检测ＬＰＳ攻击后１小时大鼠血浆ＰＡＦ含量,观察ＬＰＳ攻击后３小时大鼠肺湿、干重,光镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：ＡＬＩ组动物的肺湿重、湿干重比、肺含水量均明显高于正常对照组（Ｐ均＜０．０５）,肺病理组织学改变明显且严重。ＡＬＩ组大鼠血浆ＰＡＦ含量明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）,单独给予“神农３３”注射液无明显降低ＰＡＦ的作用（Ｐ＞０．０５）,而以“神农３３”注射液保护的大鼠ＰＡＦ含量明显低于ＡＬＩ组,同时肺损伤也较轻。结论：ＰＡＦ在ＬＰＳ诱导的ＡＬＩ中起重要作用,“神农３３”注射液有拮抗ＰＡＦ及保护肺脏的作用     

血浆血小板激活因子与急性肺损伤相关性及“神农33”注射 …

目的：探讨内毒素诱导急性肺损伤时血小板激活因子含量变化情况及“神农３３”注射液对ＰＡＦ及ＡＬＩ的影响。方法；给Ｗｉｓｔａｒ大鼠静脉注射ＬＰＳ，制成ＡＬＩ模型，采用反相高效液相色谱法检测ＬＰＳ攻击后１小时大鼠血浆ＰＡＦ含量，观察ＬＰＳ攻击后３小时大鼠肺湿，干重，光镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：ＡＬＩ组动物的肺湿重，湿干重比，肺含不量均明显高于正常对照组，肺病理组织这改变明显且严重。     

激活诱导的T细胞死亡研究进展

Ｔ细胞激活诱导的细胞死亡（ＡＩＣＤ）是Ｔ细胞被激活后再次受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激而发生的细胞凋亡，这一机制对于调节机体免疫反应具有重要意义。研究表明，Ｔ细胞受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激后通过一系列信号传导引发多种细胞因子的转录和合成，Ｔ细胞被激活。活化的Ｔ细胞表达Ｆａｓ／ＦａｓＬ增加，通过自身ＦａｓＬ的可溶性ＦａｓＬ对Ｆａｓ的作用启动凋亡信号传导，使激活的Ｔ细胞发生凋亡。但特殊的是，Ｔｈ２细胞激活后却仍具     

黄芪皂苷钠治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL的表达

目的探讨黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及基因调控变化机制,为进一步阐明烫伤鼠肺组织细胞凋亡机制和在细胞凋亡水平防治烧伤后脏器损伤提供理论依据.方法采用Tunel法及免疫组化技术观察黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡,同时测定肺组织Fas/FasL的表达的变化.结果鼠烫伤后肺组织细胞凋亡明显增加,表现为肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡增加(P＜0.05);Fas抗原、FasL在烫伤鼠肺组织表达明显上调(P＜0.01),Fas抗原、FasL表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系;用黄芪皂苷治疗后凋亡明显减少,Fas抗原、FasL表达减弱.结论黄芪皂苷治疗后可在一定程度上防治烫伤鼠肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡,其机理可能与Fas/FasL系统参与有关.     

特发性肺纤维化患者支气管/肺泡上皮细胞凋亡和Fas/FasL基因表达

目的：检测细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白在特发性肺纤维化患者肺泡/支气管上皮细胞的表达,探讨细胞凋亡和促凋亡信号在此疾病中的意义。方法：应用末端原位杂交（TUNEL）、原位杂交、免疫组化技术,对12例特发性肺纤维化患者的肺活检组织（IPF组）及10例正常肺组织（对照组）检测了细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白表达的变化。结果：特发性肺纤维化组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数上调,明显高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞中Fas/FasL mRNA及其蛋白表达上调,高于对照组（P〈0.01）;IPF组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数与其Fas/FasL mRNA及蛋白表达之间均无明显相关（P〉0.05）。结论：肺纤维化时肺泡/支气管上皮细胞凋亡上调,Fas/FasL mRNA及其蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起重要作用。     

缺氧缺血肺损伤新生鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL mRNA的表达和意义

目的：探讨细胞凋亡与缺氧缺血肺损伤发生、发展的关系以及Fas／FasL系统表达的意义。方法：通过复制缺氧、缺氧后吸入纯氧大鼠肺损伤模型,采用TUNEL法、原位杂交检测、SqRT-PCR技术观察肺组织细胞凋亡情况、FasmRNA、FasLmRNA表达强度。结果：缺氧组或缺氧吸入纯氧组在缺氧4h后即可见大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞出现凋亡现象,并随着时间延长,细胞凋亡指数增高(P=0．003,P=0．005),同时FasmRNA、FasLmRNA表达上调,且缺氧后吸入纯氧组大鼠FasmRNA、FasLmRNA表达较单纯缺氧组明显增强(P<0．05)。结论：细胞凋亡与FasmRNA、FasLmRNA表达的上调可能参与缺氧和缺氧后吸入纯氧时导致的肺损伤。     

Expression of Fas antigen and Fas ligand in acute liver injury induced by carbon tetrachloride in rat]

OBJECTIVE: To investigate the dynamics of expression of Fas antigen and Fas ligand (FasL) in a rat model of carbon tetrachloride-induced acute liver injury, and explore the role of apoptosis in liver injury. METHODS: Thirty-five healthy male Wistar rats were randomly divided into normal control group and experiment group, and the latter group was divided into six subgroups: 3, 9, 16, 24, 36 and 48 hours groups with 5 rats in each group. The liver injury was induced by carbon tetrachloride. Sections of liver tissue were stained with hematoxylin and eosin and observed under optical microscope. Fas antigen and FasL in rat liver were determined at different time points with immunohistochemical method. Hepatocytes apoptosis were observed with terminal deoxynucleotidyl-transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) method. Superoxide dismutase (SOD) activity and malondialdehyde (MDA) concentration in the liver tissues were analyzed at the same time point. Serum aspartate aminotransferase (ALT) and alanine aminotransferase (AST) levels were also determined. RESULTS: Fas antigen and FasL were expressed in the liver tissues of control rats. Following carbon tetrachloride challenge, severe liver injury took place in rats as revealed under microscope and a large amount of hepatocytes apoptosis was found. Hepatic Fas and FasL expression were both increased markedly from 3 to 48 hours after carbon tetrachloride challenge in experiment group. Liver MDA concentration and serum ALT and AST were elevated significantly, while SOD activity decreased remarkably in the experiment group compared with control group (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSION: Expression of Fas/FasL is remarkably induced in acute liver injury and accords with the changes of hepatocytes apoptosis, which suggests that apoptosis mediated by Fas/FasL may play an important role in the pathogenesis of acute liver injury.     

急性肝损伤大鼠肝脏Fas和FasL的表达及其意义

目的 研究急性肝损伤大鼠肝脏Fas和FasL的表达情况，探讨细胞凋亡在中毒性肝损伤发病中的地位及其意义。方法 健康雄性Wistar大鼠35只，随机分为正常对照组和实验组，实验组再分为3、9、16、24、36和48h6个亚组，每组5只。制备四氯化碳中毒性肝损伤动物模型，采用苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察肝组织损伤情况，采用免疫组化方法测定不同时间点肝组织Fas和FasL的表达，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）观察肝细胞凋亡情况。同时测定各时间点血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、肝组织丙二醛（MDA）含量变化。结果 Fas和FasL在正常大鼠肝细胞中未见表达，实验组3h后即开始有明显表达，并随时间延长表达相应增强；病理学和TUNEL检测结果均显示肝脏有严重损伤，大量肝细胞发生凋亡。大鼠染毒后血清ALT、AST活性和肝组织MDA含量明显升高，肝组织SOD活性显著降低，与正常对照组比较差异均十分显著（P〈O．05或P〈O．01）。结论 大鼠急性肝损伤时Fas和FasL表达显著增加，和肝细胞凋亡变化相一致，提示Fas／Fasl。系统及介导的细胞凋亡反应在中毒性肝损伤的发病机制中可能占有重要地位。     

大鼠肾缺血/再灌注损伤不同时相Fas、FasL蛋白表达及意义

AIM: To study the relationship between the expression of Fas/FasL protein and apoptosis in rats after renal ischemia/repernision. METHODS: Establish the models of renal ischemia/reperfusion injury in rat and SABC im-munohistochemical methods were used to detect the changes of expression of Fas/FasL protein. Pathomorphological changes in renal ischemia/reperfusion injury were observed. RESULTS: The expression of Fas/FasL proteins was negative in the sham operated group. Fas/FasL proteins were increased in renal in ischemia/reperfusion group, and gradually upregulated with the duration of ischemia or reperfusion and peaked at 72 h of reperfusion. The expression of Fas/FasL proteins was atronger in 60 min ischemia group than 30 min ischemia group and they were mainly expressed in renal tubule. We observed local necrosis and inflammatory cells infiltration around infracted area in ischemia/repernision group by HE dyeing methods. And the necrosis area was mainly occurred around proximal convoluted tubule. CO     

Fas和FasL在Na+/H+交换器-1抑制诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用

目的探讨Fas、FasL在Na^＋／H^＋交换器-1（NHE-1）抑制所诱导的缺氧大鼠肺动脉平滑叽细胞（PASMCs）凋亡中的作用。方法将转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMCs置于缺氧条件下（O2的体积分数低下1％）培养。缺氧培养2、6、12、24和48h后用原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况；半定量逆转录-聚合酶链反应（sqRT—PCR）疗法检测细胞内fas和fasL mRNA表达变化；免疫细胞化学法检测细胞内Fas和FasL蛋白表达变化。结果转染NHE-1特异性核酶基因的大鼠PASMCs在缺氧培养时，其细胞凋亡率随缺氧时间的延长而逐渐升高，但细胞内fas、fasL mRNA及Fas、FasL蛋白表达与对照组细胞比较差异均无显著性。结论Fas／FasL死亡通路可能不参与NHE-1抑制而诱导缺氧大鼠PASMCs凋亡的调控。     

N-乙酰半胱氨酸对百草枯中毒大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL的影响

目的 探讨百草枯( paraquat,PQ)中毒所致大鼠急性肺损伤时N-乙酰半胱氨酸( N-acetylcysteine,NAC)对肺组织的细胞凋亡和Fa/FasL表达的影响.方法 将SD大鼠随机(随机数字法)分为对照组、PQ染毒组和NAC治疗组,每组15只.复制PQ染毒大鼠急性肺损伤模型,腹腔注入2％百草枯液( 25 mg/ kg);NAC治疗组为0.5h后对PQ染毒大鼠,再腹腔注射NAC (200 mg/kg)进行干预;对照组腹腔注射等量生理盐水.利用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法分别检测肺组织Fas/FasL mRNA和蛋白的表达.结果 PQ组和对照组相比细胞凋亡率和Fas/FasL系统表达差异均具有统计学意义(P＜0.05);NAC治疗组细胞凋亡率和fas/fasL表达明显降低,和PQ组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NAC可能通过抑制Fas/FasL系统活化抑制百草枯中毒大鼠肺组织细胞凋亡.