人非小细胞肺癌中HIF-1α的表达与血管生成和细胞凋亡的关系及意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与血管生成和细胞凋亡的关系,评估它在NSCLC发生发展过程中的作用.方法 采用免疫组织化学的方法检测HIF-1α在正常肺组织、良性病变、癌前病变、原位癌、非小细胞肺癌及肺癌转移淋巴结中的表达,及血管内皮生长因子(VEGF)在NSCLC中的表达;采用TUNEL法检测部分NSCLC中细胞凋亡指数AI.结果 HIF-1α在支气管黏膜非典型增生、原位癌、NSCLC及肺癌转移淋巴结中的阳性表达率相似,总阳性表达率为40.0%(68/170),其在正常及良性病变中的总阳性表达率为6.0%(4/67),两组间有显著差异(P＜0.01).HIF-1α在NSCLC中的表达与各项临床病理特征均无明显相关性,仅与患者术后生存时间明显正相关(P＜0.01).VEGF在NSCLC中的表达与HIF-1α的表达呈正相关(P＜0.01),与患者预后呈负相关(P=0.027).凋亡指数(AI)在各组织类型和各分化程度的Ⅰ期肺癌中无明显差异,但生存期≥5年的肺癌患者AI明显高于生存期＜5年的患者(P=0.004).AI与HIF-1α的表达明显正相关(P=0.004).结论 HIF-1α在非小细胞肺癌组织中的表达较正常及良性病变肺组织明显上调,其与肿瘤血管生成及细胞凋亡均密切相关,在NSCLC生长中的作用具有多向性.HIF-1α可以作为评估患者预后的重要指标.     

BCRP、LUNX基因mRNA表达水平与非小细胞肺癌患者的病理类型及分期的相关性

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和肺特异性X蛋白(LUNX)基因的mRNA水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者病理类型及分期的相关性及其对于预后的价值。方法选取2015年6月至2018年6月河南大学淮河医院收治的89例患者为NSCLC组, 以同期收治的55例肺良性病变患者为对照, 检测两组患者外周血中BCRP、LUNX的mRNA表达水平, 并分析其与临床病理特征及预后的相关性。结果 NSCLC组外周血中BCRP、LUNX mRNA的阳性表达率显著高于肺良性病变组(P<0.05);NSCLC患者BCRP mRNA的表达与分化程度、TNM分期有关(P<0.05), 与性别、年龄、吸烟、病理类型、淋巴结转移无关(P>0.05);其LUNX mRNA的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05), 与性别、年龄、吸烟、病理类型无关(P>0.05);BCRP mRNA表达组与LUNX mRNA表达组的总体生存率均显著低于无表达组(P<0.05);分化程度、TNM分期、淋巴结转移、BCRP mRNA表达、LUNX mRNA表达均为影响NSCLC患...     

非小细胞肺癌中MMP-9和MMP-13的表达及意义

目的：分析MMP-9和MMP-13在非小细胞肺癌( non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达及相关性,探讨二者与NSCLC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测88例NSCLC和18例癌旁正常肺组织中MMP-9、MMP-13的表达。结果 MMP-9与MMP-13在NSCLC中的阳性率均高于癌旁正常肺组织( P<0．05)。 MMP-9表达与患者年龄、分化程度、淋巴结转移有关(P<0．05);MMP-13表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0．05)。 NSCLC中MMP-9与MMP-13的表达呈正相关(P<0．05)。 MMP-9和MMP-13阳性组的生存率均低于阴性组,差异有显著性(P<0．05);且肿瘤大小、淋巴结转移和MMP-13阳性表达与NSCLC的预后密切相关( P<0．05)。结论 MMP-9与MMP-13均与NSCLC的侵袭、转移及预后密切相关,MMP-13可能主要通过激活MMP-9途径来参与NSCLC的侵袭、转移。     

14-3-3zeta在T1期非小细胞肺癌中的表达及其临床病理意义

目的探讨14-3-3ζ在T1期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化、免疫印迹及RT-PCR技术检测110例T1期NSCLC及癌旁正常肺组织中14-3-3ζ蛋白的表达。结果 T1期NSCLC中14-3-3ζ蛋白及mRNA表达水平均较正常肺组织明显增强,14-3-3ζ的表达与患者的年龄、性别及病理学分型不相关。但随着肺癌分化程度的降低,14-3-3ζ的表达逐渐增强。在淋巴结转移阳性的癌组织中,14-3-3ζ表达高于淋巴结转移阴性的癌组织。生存曲线分析结果显示14-3-3ζ表达阴性患者的5年生存率及平均生存时间均高于表达阳性者。结论 14-3-3ζ与肺癌的分化程度、淋巴结转移及患者预后密切相关,提示14-3-3ζ有可能作为判断T1期NSCLC发展与预后的生物学指标之一。     

非小细胞肺癌中Naked1的表达及意义

目的探讨Naked1(NKD1)蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达与预后的关系。方法采用RT-PCR、Western blot法对35例新鲜肺癌组织进行检测;采用免疫组化SP法对100例NSCLC石蜡标本进行检测。结果在79%的新鲜肺癌标本中,NKD1的蛋白水平明显低于相对应的癌旁正常肺组织,而mRNA水平明显高于正常肺组织(P<0.01)。在78%的NSCLC免疫组化标本中,NKD1的表达明显低于正常肺组织(P<0.01)。在肺鳞癌中NKD1的表达低于腺癌,并与分化程度呈正相关(P<0.01),与淋巴结转移(P<0.05)和TNM分期(P<0.01)呈负相关,NKD1低表达者的术后生存时间明显低于正常表达者(P=0.01)。结论在NSCLC中,NKD1 mRNA上调,而蛋白水平下调,其蛋白的下调程度与临床病理因素和不良预后相关。     

STAT5、VEGF和EGFR在非小细胞肺癌中表达的相关性研究

目的:检测信号转导与转录激活因子5(STAT5)、血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,探讨三者与NSCLC临床病理特征之间的关系及三者彼此的关系。方法:采用免疫组化(SP法)检测STAT5、VEGF和EGFR在68例NSCLC及26例癌旁正常对照组织中的表达情况。结果:(1)STAT5、VEGF及EGFR在NSCLC组织中的阳性表达明显高于肺正常组织(P<0.05);(2)STAT5的阳性表达与NSCLC组织学类型有关,在腺癌中的表达明显高于鳞癌,与组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移无关;(3)VEGF的阳性表达与NSCLC的分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.01),与NSCLC的组织学类型无关(P>0.05);(4)EGFR的阳性表达与NSCLC的TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01),与NSCLC的组织学类型和分化程度无关(P>0.05);(5)Spearman相关分析显示STAT5、VEGF和EGFR在NSCLC中的阳性表达两两比较(秩和检验方法)均呈正相关。结论:STAT5、VEGF、EGFR可能在肺癌的发生、侵袭和转移中起重要的作用,抑制STAT5信号通路可望成为非小细胞肺癌的治疗靶点。     

非小细胞肺癌中LASS2/TMSG1的表达及其临床意义

目的探讨LASS2/TMSG1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及与临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测NSCLC和癌旁正常组织中LASS2/TMSG1蛋白的表达,分析其表达与NSCLC临床病理特征的关系,并进行术后随访。结果LASS2/TMSG1蛋白在NSCLC组织中的表达(21/87,24.13%)明显低于正常肺组织(15/25,60.00%)。LASS2/TMSG1在NSCLC组织中的表达与肿瘤分化、淋巴结转移呈负相关(P<0.05),且LASS2/TMSG1阳性患者的总生存期及无瘤生存期均明显高于LASS2/TMSG1阴性患者(P<0.05)。多因素Cox分析显示,LASS2/TMSG1是NSCLC患者的独立预后因素。结论LASS2/TMSG1可能抑制肺癌的发生、分化及转移,有望成为肺癌患者的预后指标之一。     

非小细胞肺癌中KLF6-SV1的表达及临床病理学意义

目的观察抑癌基因KLF6的剪切变异体KLF6-SV1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达特点,探讨其与临床病理学参数的关系。方法应用免疫组化检测42例NSCLC和40例良性肺疾病(肺的炎性肌纤维母细胞瘤、肺脓肿、肺结核、肺的硬化性血管瘤等)中KLF6-SV1蛋白的表达水平,原位杂交检测42例NSCLC和40例良性肺疾病中KLF6-SV1基因mRNA的表达。结果 KLF6-SV1在NSCLC中的蛋白阳性率为71.4%(30/42),表达水平均高于良性肺疾病(P<0.05)。KLF6-SV1基因mRNA的阳性率为69.0%(29/42),表达水平高于良性肺疾病(P<0.05)。KLF6-SV1的蛋白表达水平与其mRNA表达水平之间具有较好的一致性。KLF6-SV1的表达与有无淋巴结转移及肿瘤的分化程度有关,组间差异具有统计学意义(P<0.05),与病理分型、组织大小和临床分期无关,组间差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论 KLF6-SV1的过表达可能与NSCLC的发生、发展及早期淋巴结转移密切相关,有望成为今后诊断的参考指标之一,并有可能成为肿瘤基因治疗的新靶点之一。     

CyclinD1, Bax及MDR1在非小细胞肺癌中的表达及生物学特性

目的:探讨细胞周期蛋白CyclinD1、促凋亡基因Bax及多药耐药基因MDR1在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及生物学特性。方法:用鼠抗人CyclinD1、鼠抗人MDR1及鼠抗人Bax单克隆抗体(mAb)对56例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色,并与20例肺良性病变作对照,对其表达情况进行检测分析。结果:CyclinD1表达为恶性病变高于良性病变(P<0.05),与P-TNM分期及分化程度无关。Bax蛋白在NSCLC和肺良性病变中表达无明显差异性,但在NSCLC中,肿块≥3cm时其表达高于肿块<3cm,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,Ⅲ~Ⅳ期高于I~Ⅱ期,中~高分化高于低~中分化(各组P<0.05)。MDR1在NSCLC中的表达高于肺良性病变(P<0.05),并且在肿块≥3cm高于肿块<3cm(P<0.05),有淋巴结转移高于无淋巴结转移(P<0.05)。结论:CyclinD1的过表达与肺癌的发生有关:Bax在NSCLC发生的早期低表达,而在中晚期高表达,说明Bax在早期的抑制有诱癌形成的可能,晚期则加速癌细胞凋亡,参与机体的抗癌机制;MDR1的过表达与NSCLC的发展与预后有关,并有利于NSCLC耐药的监测与评价。     

非小细胞肺癌中ASAH2的表达及临床意义

目的 探讨ASAH2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达及其与临床病理学特征和预后的相关性。方法 收集5例手术切除的新鲜NSCLC组织及癌旁肺组织、94例手术切除的NSCLC和癌旁肺组织石蜡标本，采用PCR-Array法筛选ASAH2基因，采用免疫组化EnVision两步法检测ASAH2、Ki-67表达，并复习相关文献。结果 ASAH2在NSCLC组织中呈高表达(P<0.001),且其表达与Ki-67表达呈正相关(P=0.015)。ASAH2在NSCLC中的表达与分化程度呈负相关(P<0.001),与病理学分级(P=0.008)、淋巴结转移(P=0.017)呈正相关，与NSCLC患者年龄、性别、肿瘤最大径、TNM分期及远处转移无相关性(P>0.05)。ASAH2高表达NSCLC患者的5年生存率低于低表达NSCLC患者(P=0.003)。结论 ASAH2在NSCLC中呈高表达，其表达越高，NSCLC恶性程度越高、分化程度越低；ASAH2高表达患者的5年生存率降低，其与患者不良预后相关。     

Brk在非小细胞肺癌中的表达及与Ki67表达的关系

目的探讨乳腺肿瘤激酶(breast tumorkinase,Brk)在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)的表达及与临床病理因素,Ki67表达之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测105例NSCLC及相应癌旁正常肺组织中Brk和Ki67的表达,采用Western Blot方法检测30例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中Brk的表达情况。结果 Western Blot结果显示NSCLC中Brk蛋白表达水平显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01)。免疫组织化学结果发现Brk在NSCLN的细胞浆阳性率为51.4%(54/105),明显高于其在癌旁正常肺组织的细胞浆阳性率18.1%(19/105,P=0.003)。Brk在NSCLC细胞浆的阳性表达与肿瘤的大小(P=0.042),淋巴结转移(P=0.012),TNM分期(P=0.042)正相关;Ki67的表达与肿瘤的大小正相关(P=0.033);Brk在细胞浆中的表达与Ki67表达呈正相关(r=0.217,P=0.026)。结论 Brk在NSCLC的细胞表达上调,与肿瘤大小,淋巴结转移,TNM分期正相关;Ki67表达与肿瘤的大小正相关;Brk与Ki67的协同表达可能是促进NSCLC进展的重要因素。     

High expression of MAGE-A9 in tumor and stromal cells of non-small cell lung cancer was correlated with patient poor survival

Melanoma associated antigen-A (MAGE-A) is an oncogene and correlated with tumor initiation and development. However the roles of MAGE-A9 in non-small cell lung cancer (NSCLC) are still unknown. We investigated MAGE-A9 mRNA expression in 18 tumor tissues of NSCLC by qRT-PCR and MAGE-A9 protein expression in 213 NSCLC samples of tissue arrays by immunohistochemical staining. We assessed the relationship between MAGE-A9 expression and clinical parameters. The results showed that the high expression of MAGE-A9 protein in NSCLC tumor cells were commonly present in squamous cell carcinomas (P = 0.030). It was also related to larger tumor diameter, lymph node metastasis and later stage grouping with TNM classification (all P < 0.05). Whereas the expression of MAGE-A9 in stromal cells was higher in squamous cell carcinomas as well. Cox regression univariate and multivariable analysis revealed that MAGE-A9 expression in tumor cells of NSCLC (P < 0.001) is an independent prognostic factor in five-year overall survival rate. We concluded that the molecular assessment of MAGEA9 could be considered to improve prognostic evaluation and to identify eligible patients for potential target therapy.     

非小细胞肺癌中窖蛋白1和pERK1/2表达与预后相关性研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织窖蛋白1与pERK1/2的表达及其与预后的关系.方法 应用免疫组织化学(sP法)检测160例NSCLC及20例正常肺组织标本中窖蛋白1与pERK1/2的表达.结果 窖蛋白1在NSCLC和正常肺组织阳性率分别为65.6%(105/160)和100%(20120),P=0.002.中-高分化组和低分化组阳性率分别为56.8%(46/81)和75.7%(53/70),P=0.015;Ⅰ-Ⅱ期阳性率为58.2%(53/91),Ⅲ-Ⅳ期阳性率75.4%(52/69),P=0.024;有淋巴结转移组阳性率为77.8%(56/72),无淋巴结转移组阳性率为55.7%(49/88),P=0.003.窖蛋白1阳性患者1、3、5年生存率(71.4%、37.1%、17.1%)低于阴性患者(89.1%、69.1%、43.6%),P=0.000.pERK1/2在NSCLC和正常肺组织阳性率分别为61.3%和0,P=0.000;中-高分化组和低分化组阳性率分别为53.1%(43/81)和71.4%(50/70),P=0.021;Ⅰ-Ⅱ期阳性率为49.5%(45/91),Ⅲ-Ⅳ期阳性率76.8%(53/69),P=0.000;有淋巴结转移组阳性率为80.6%(58/72),无淋巴结转移组阳性率为45.5%(40/88),P=0.000.pEBK1/2阳性患者1、3、5年生存率(74.5%、42.9%、19.4%)低于阴性者(82.3%、56.5%、37.1%),P=0.002.窖蛋白1与pERK1/2负相关,P=0.000.结论 窖蛋白1在NSCLC中低表达,pEBK1/2在NSCLC中高表达.窖蛋白1蛋白阳性表达和pEBK1/2蛋白高表达与NSCLC的发生及侵袭、转移相关.窖蛋白1和pERK1/2可作为NSCLC一个预后预测的指标.     

长链非编码RNA MIAT在非小细胞肺癌中的表达及功能研究

目的:研究长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(MIAT)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达情况及其对NSCLC细胞功能的影响。方法:利用Gene Expression Omnibus(GEO)数据库提取GSE19804和GSE30219数据集的生物信息学资料和临床预后资料,分析MIAT在NSCLC组织和正常肺组织中的表达差异,以及MIAT表达水平与NSCLC患者生存期的关系;用q PCR检测25对NSCLC肿瘤组织和其癌旁组织,以及NSCLC细胞系A549、NCI-H266和NCI-H1299及人正常支气管上皮细胞系HBE中MIAT的表达情况;将MIAT si RNA(si-MIAT)和对照序列(si-NC)分别转染NSCLC细胞系A549,采用流式细胞术、CCK-8实验和细胞集落形成实验检测2组细胞的增殖情况,并且用q PCR和Western blot实验检测2组细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(CDKN1A)的表达情况。结果:GSE19804数据集分析显示MIAT在NSCLC组织中的表达高于正常肺组织(P0.05),GSE30219数据集分析显示MIAT高表达患者的生存期显著短于低表达患者(P0.01)。此外,与癌旁正常组织和HBE细胞相比较,NSCLC组织和细胞系中MIAT的表达水平升高(P0.05);si-MIAT组A549细胞中MIAT表达水平明显低于si-NC组(P0.01),且细胞活力和细胞集落数均低于siNC组,差异均有统计学意义(P0.05);同时,相较于si-NC组,si-MIAT组cyclin D1的表达受到明显抑制(P0.05),而CDKN1A的表达明显升高(P0.05)。结论:NSCLC组织及细胞系中MIAT呈高表达,沉默MIAT表达可明显抑制NSCLC恶性增殖的表型。MIAT可作为NSCLC靶向治疗的潜在靶标。     

粒细胞集落刺激因子在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床病理意义

目的 观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达并探讨其临床病理意义.方法 收集解放军总医院2001 - 2010年伴有大量粒细胞浸润的NSCLC 53例,同时选用无粒细胞浸润的NSCLC 61例作对照,共114例.观察癌组织中粒细胞浸润情况,同时用免疫组织化学(EnVision法)检测癌组织中G-CSF的表达情况.对G-CSF表达情况及其与NSCLC临床病理特征的关系进行统计学分析,并随访全部患者,分析G-CSF表达对预后的影响.结果 114例NSCLC中55例癌细胞表达G-CSF.其中大细胞癌41例(41/54,75.9％),腺癌9例(9/30,30.0％),鳞状细胞癌5例(5/30,16.7％).G-CSF表达与癌组织中粒细胞浸润、组织学类型、坏死、肿瘤分级、局部淋巴结转移和远处转移、复发密切相关(P＜0.01),而与原发肿瘤大小无密切关联(P＞0.05);表达阳性者发生坏死、淋巴结转移、远处转移复发的相对危险度分别是阴性者的5.57、6.28和5.24倍(P＜0.05).阳性者与阴性者中位生存期分别为42和62个月,5年生存率分别为0和12.1％,生存期间的差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 部分NSCLC能产生G-CSF,且以大细胞癌最常见.产生G-CSF的NSCLC组织分化差,异型性明显,恶性度高;易发生广泛坏死,常伴有粒细胞浸润;易发生淋巴结转移、远处转移和复发;生存率低,预后差.     

Expression of miR-32 in human non-small cell lung cancer and its correlation with tumor progression and patient survival

Introduction: miR-32 has recently been found to be implicated in many critical processes in various types of human cancer. However, its clinical significance in human non-small cell lung cancer (NSCLC) has not yet been elucidated. In the present study, we investigated the expression of miR-32 in NSCLC and analyzed its association with clinical features and prognosis of NSCLC patients. Methods: Quantitative real-time PCR (qRT-PCR) was used to measure expression level of miR-32 in lung cancer cell lines, normal bronchial epithelial cells, 90 pairs of tumor samples and adjacent non-tumor tissues. To determine its prognostic value, overall survival was evaluated using the Kaplan-Meier method. Univariate and multivariate analysis were performed using the Cox proportional hazard analysis. Results: The expression of miR-32 was significantly decreased in lung cancer cell lines and NSCLC tissues compared with normal bronchial epithelial cells and adjacent non-tumor tissues (P < 0.05). This reduction of miR-32 was associated with tumor stage and lymph node metastasis (P < 0.05). Moreover, Kaplan-Meier analysis demonstrated that patients with low miR-32 expression had shorter overall survival time than those with high miR-32 expression (P < 0.05). Univariate analysis revealed statistically significant correlations between overall survival and miR-32 level, tumor stage and lymph node metastasis (P < 0.05). Furthermore, miR-32 levels, tumor stage and lymph node metastasis were independently associated with overall survival (P < 0.05). Conclusions: Our results provided the first evidence that down-regulation of miR-32 was correlated with NSCLC progression, and miR-32 might be a potential molecular biomarker for predicting the prognosis of patients.