TGF—β1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的：研究β转化生长因子－1（TGF－β1）在胎儿髁突软骨中表达,探讨该因子在软骨发育中的作用。方法：30例13－33周胎儿分为A、B、C和D四组,应用HE染色和免疫组化S－P法观察髁突软骨TGF－β1的表达。结果：TGF－β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达,成软骨细胞 层表达最强,主要在胞浆。TGF－β1积分光密度在上、中、下三层之间 存在差异（P＜0．05）。平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异（P＜0．05）。A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异。结论：在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF－β1的表达水平不同。     

血管内皮生长因子及其受体在大鼠下颌骨髁突软骨细胞中的表达和意义

目的：研究VEGF及其受体(Fh—1和Flk—1)在大鼠下颌骨髁突软骨细胞中的表达，探讨其对大鼠下颌骨髁突软骨生长发育的影响。方法：用免疫组化方法，对VEGF及其受体(Fh—1和Flk—1)在大鼠下颌骨髁突软骨细胞中的表达进行检测。结果：大鼠下颌骨髁突软骨的增殖层、肥大层、矿化和钙化层均有表达，而纤维层没有表达。结论：大鼠下颌骨髁突软骨的增殖层、肥大层及矿化和钙化层软骨细胞可产生并分泌VEGF及其受体(Fh—1和Flk—1)，VEGF可能在大鼠下颌骨髁突软骨生长发育中发挥作用。     

RUNX蛋白在不同发育时期小鼠髁状突中的表达

目的：探索小鼠髁状突形态发育及此过程中RUNX蛋白的表达变化及意义。方法：取胚胎14．5d（E14．5）至出生后7．5d（P7．5）的小鼠下颌骨,制备髁突矢状位切片,苏木素一伊红（HE）染色观察。免疫组化方法检测RUNX蛋白表达分布。结果：E14．5开始,髁突间充质细胞聚集,而后逐渐分化出完整的软骨细胞分层,髁突逐渐由半圆变扁平。免疫组化示RUNXl、2阳性信号主要位于增殖层、前软骨细胞层及部分肥大层细胞,RUNX3阳性信号主要位于前软骨细胞层及肥大层。髁突前后部,RUNXl、2在前软骨细胞层的信号强度较肥大层更高。RUNX整体的表达呈现双峰曲线。结论：髁突前后部成熟较晚,更易发生改建。RUNXl、2协同作用于软骨细胞分化早期,RUNX3调节作用于软骨细胞成熟期。     

大鼠髁状突发育和软骨细胞凋亡的研究

目的研究大鼠髁状突形成和发育过程,以及凋亡相关因子(Fas)和一氧化氮(NO)凋亡途径在其发育中作用。方法收集胎鼠及幼鼠的颞下颌关节标本,通过苏木精-伊红染色、原位末端脱氧核糖昔酞转移酶分析法(TUNEL)和Fas及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)免疫组化检测髁状突发育特征。结果胚胎15.5d时髁状突和关节窝已基本出现,胚胎17.5d时髁状突出现完整的软骨细胞分层和软骨内成骨,胚胎19.5d时出现清晰的关节盘,各期均可见凋亡的软骨细胞,凋亡细胞在关节软骨表层细胞中所占比例高于深层细胞,Fas阳性细胞分布大致同凋亡细胞,而iNOS阳性细胞较少,主要分布在肥大层。结论髁状突的发育与软骨细胞凋亡密切相关,Fas和NO凋亡途径在其发育中均起到一定作用。     

兔颞颌下关节盘前移位后关节软骨细胞的凋亡及其意义

目的：观察颞下颌关节盘前位动物模型的关节软骨细胞凋亡动态改变，探讨软骨细胞凋亡的意义。方法：日本大白兔26只，实验组20只行手术，在不打开颞下颌关节囊的情况下制成关节盘前移位动物模型，采用原位末端标记法（TUNEL）观察术后不同时期关节区组织学的改变和软骨细胞凋亡的情况。结果：术后1－2周为髁状软骨细胞凋亡的高峰期，集中于功能区的肥大层和增殖层。4－6周进入关节改建期。结论：关节盘前移位后可激活软骨细胞的凋亡机制，启动关节软骨的适应性改建。     

rhIL—1β及TGF—β对髁状突软骨细胞增殖影响的研究

目的：探讨rhIL-1β及TGF－β对髁状突软骨细胞增殖的影响。方法：以酶消化法获得兔髁状突软骨细胞。用MTT法及PCNA免疫组化染色检测不同浓度rhIL-1β及TGF－β对体外培养的兔髁状突软骨细胞增殖的影响。结果：MTT检测，rhIL-1β（10，20ng/ml）处理软骨细胞48h后，可明显抑制软骨细胞增殖，经统计学检验，处理3－6d有显著性差异（P＜0．01,t检验）；加入TGF－β（10，20ng/ml)可明显拮抗rhIL-1β对软骨细胞增殖的抑制作用，并且浓度愈高对rhIL-1β的抑制作用愈强。PCNA检测，rhIL-1β处理软骨细胞后PCNA阳性细胞率降低，随rhIL-1β的刺激浓度增加，阳性率明显降低；加入外源性TGF－β可以使PCNA的阳性率提高。结论：rhIL-1β对髁状突软骨细胞增殖具有报制作用，外源性TGF－β对该作用具有明显的拮抗效应。     

甲状旁腺相关蛋白在鼠胚髁突外植体软骨内成骨中的作用

目的探讨甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)对体外培养的鼠胚髁突软骨内成骨的影响。方法体外解剖分离鼠胚髁突,行外植体培养,通过组织学、免疫组化等方法观察PTHrP对体外培养的髁突外植体软骨内成骨的影响。结果髁突外植体在无血清半固态培养系统中能正常发育。加入人PTHrP(1-34)后,实验组髁突长度的增加较对照组明显,两组间差异有显著性(P<0.05);组织学及免疫组化染色显示:加入人PTHrP(1-34)后培养的髁突外植体增殖层和肥大软骨细胞层明显增厚,同时Ⅱ及Ⅹ型胶原在增殖层和肥大软骨细胞层中表达增强。结论PTHrP可刺激髁突外植体软骨增殖层和肥大层软骨细胞的增殖,促进髁突软骨内成骨的形成。?     

FAM20C在小鼠下颌髁突发育过程中的时空表达

目的 观察小鼠髁突发育过程的不同阶段,FAM20C在髁突软骨中的时空表达特点,试探究其在小鼠髁突发育过程中的可能作用机制。方法 苏木精-伊红(HE)染色和改良番红O-固绿染色观察胚胎17.5 d和出生后0、7、21 d 4组小鼠髁突软骨及软骨下骨的形态学变化。免疫组化染色观察相应时间点FAM20C在小鼠髁突软骨组织中的定位及表达。测量FAM20C阳性表达的平均光密度值,并进行单因素方差分析。结果 HE染色和改良番红O-固绿染色结果表明:随着软骨内骨化的进展,髁突软骨细胞层长度减少,软骨下骨体积增加,下颌髁突体积增大;免疫组化结果表明:4组小鼠髁突软骨组织中均有FAM20C阳性表达,FAM20C主要表达于髁突软骨增殖软骨细胞层和前肥大软骨细胞层,少量表达于肥大软骨细胞层及软骨下骨层,随着髁突发育,FAM20C表达逐渐减少。统计学结果显示,各时间点FAM20C阳性表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论 FAM20C参与小鼠下颌髁突发育,可能通过调节髁突软骨细胞的增殖和分化在髁突形成中发挥重要作用。     

咀嚼力降低对发育期大鼠髁突软骨中细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究咀嚼力降低对发育期大鼠下颌髁突软骨细胞增殖和细胞凋亡活性的影响。方法：40只18d雄性大鼠随机分为两组。一组喂以标准的硬食,另一组以粉末状软食喂养。于大鼠4周、5周、6周、7周龄时取其髁突软骨,分别采用免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察髁突软骨中增殖细胞核抗原阳性细胞数和凋亡细胞数。结果：在4～7周,PCNA阳性细胞数在软、硬食组都逐步上升。但在各相同时间点,软、硬食组的PCNA阳性细胞数不存在统计学差异。在4～7周,硬食组大鼠髁突软骨中凋亡细胞数基本保持一致,而软食组凋亡细胞数随时间推移而降低,但在4周、5周、6周时,软食组的凋亡细胞数均明显多于同期硬食组（P〈0.05）。结论：咀嚼力降低对发育期大鼠髁突软骨中的细胞增殖活性影响不大,但却使细胞凋亡的数量增加,提示咀嚼力降低可能加速了髁突软骨中细胞的分化、成熟、凋亡,进而影响髁突的正常发育。     

髁突与生长板软骨发育早期组织学特征的比较研究

目的探讨髁突软骨与生长板软骨发育早期组织学特征上的异同,进一步了解髁突软骨的发育过程和生长特点,为临床上功能矫形的治疗提供理论依据。方法选用胚胎SD大鼠的髁突软骨与生长板软骨作为研究对象,建立发育早期的动物模型,对两种软骨进行组织切片染色观察,比较它们组织学特征上的异同。结果胎龄14~19 d,髁突软骨与生长板软骨的组织结构大体相似,但存在一定的差异。两种软骨分层不同,细胞形态不同,生长板增殖层和前肥大层软骨细胞更为扁平;细胞排列不同,生长板软骨细胞平行于长骨呈柱状排列,髁突软骨细胞分层排列,无细胞柱;另外,生长板软骨中肥大软骨细胞的出现较髁突软骨早。结论发育早期,髁突软骨与生长板软骨组织结构大体相似,但在软骨细胞分层、形态及排列方式方面存在一定差异。