3种血型鉴定方法监测ABO血型不合造血干细胞移植患者血型嵌合体

目的 探讨盐水介质试管法(试管法),ABO正反定型/RhD定型卡(血型卡)和低离子/抗人球蛋白微柱凝胶卡(LISS/Coombs卡)在ABO血型不合造血干细胞移植(HSCT)患者血型鉴定中的应用价值,指导临床安全输血.方法 以血型卡、试管法和LISS/Coombs卡对24例ABO不合造血干细胞移植患者血型抗原、抗体进行...     

卡式抗人球蛋白法在交叉配血中的应用

1984年Lapierre首先采用凝胶技术进行抗人球蛋白试验,以提高试验的灵敏度及特异性。近年来,微柱凝胶试验在国内、外输血领域已逐渐作为常规应用,其原理是通过中性凝胶微小的过滤网把凝集的与游离的红细胞分开,借以判断红细胞是否被多价抗人球蛋白或补体成分致敏。我科自2002年3月份开始使用卡式抗人球蛋白法进行配血1 800例,对其中20例阳性者同时进行凝聚胺、木瓜酶、盐水法重复试验,对照如下:     

2种方法检测孕妇免疫球蛋白G抗-A(B)效价的对比研究

目的探讨微柱凝胶法和抗人球蛋白试管法检测O型孕妇血清免疫球蛋白G(IgG)抗-A(B)效价的差异及相关性。方法采用微柱凝胶法和抗人球蛋白试管法同时检测133例O型孕妇血清IgG抗-A(B)水平,并比较2种方法的检测结果。结果 2种检测方法结果呈高度相关。若以凝集强度1+为判定终点,微柱凝胶法比抗人球蛋白试管法检测结果高出2个稀释倍数;微柱凝胶法以256作为临床参考值,试管法以64作为临床参考值,2种方法阳性检出率差异无统计学意义(P0.05)。若微柱凝胶法以凝集强度3+为判定终点,试管法以1+为判定终点,2种方法检测结果差异无统计学意义(P0.05)。结论 2种检测方法的一致性较好,微柱凝胶法的灵敏度高于抗人球蛋白试管法。若以凝集强度1+为判定终点,推荐微柱凝胶法正常参考值为小于256;若以凝集强度3+为判定终点正常参考值为小于64。     

预防不规则抗体漏检的实验技术研究

目的 探讨预防不规则抗体漏检的实验技术原因,分析比较四种不同介质对临床样本的应用效果。方法 用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶卡法和木瓜酶法分别检测倍比稀释的抗-D、抗-Jk^a、抗-Fy^a和抗-M四种抗体,采用效价评分进行比较分析; 并对该四种方法对1 174例临床标本的检出效果进行比较分析。结果 盐水法仅检出IgM类抗体; 凝聚胺法能同时检出IgG和IgM抗体,但对一些低效价低亲和力抗体凝集弱,易导致假阴性; 微柱凝胶卡法检出效果最佳; 木瓜酶法对Rh等血型系统抗体特异性高,但检测效果具有一定局限性。1 174例临床样本,不规则抗体阳性率为1.79%。盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶卡和木瓜酶法对1 174例临床样本不规则抗体检出率分别为0.17%,1.53%,1.79%和1.62%。盐水法完全漏检IgG类抗体,凝聚胺法、微柱凝胶卡法和木瓜酶法对不规则抗体检出率差异无统计学显著性意义(P>0.05)。结论 单一方法不能满足不规则抗体筛查要求,盐水法和微柱凝胶卡法结合具有一定的优越性,能有效预防不规则抗体漏检。     

酸放散方法对弱D抗原的筛选研究

目的 目的确定用盐水抗D检测为D阴性的红细胞标本中是否存在Del型红细胞标本。方法 将待检红细胞样本与人血清抗D抗体混合吸收。采用酸放散方法将致敏在红细胞上的抗D抗体放散下来，用微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡及试管法检测放散液中是否存在抗体。结果 51份由盐水抗D确定为D阴性的红细胞样本中有3人用传统试管法抗人球蛋白实验检测为弱凝集；经酸放散实验后，检测放散液，此3人放散液中均存在较强的抗D抗体，以此确定此3人红细胞抗原为Del型。结论 酸放散实验在临床输血中可做为确定红细胞上是否存在弱D抗原的敏感方法。     

微柱凝胶交叉配血不合原因分析

输血前交叉配合试验是安全输血的重要手段.通过检测受、供者血液间有无不相配合的抗原、抗体成分,有效地预防溶血性输血反应的发生.交叉配血试验方法很多,有盐水介质法、酶法、凝聚胺法（MPT）、抗人球蛋白法（AGT）.近年来,微柱凝胶试验（MGT）由于其明显的优点已在国外成为常规的输血检测方法.我院从2002年应用LISS/Coombs凝胶卡,常规开展交叉配血试验.现将近二年多遇到的交叉配血不合的原因分析如下.     

微柱凝胶法在新生儿溶血病诊断中的应用

目的比较微柱凝胶法和传统试管法在新生儿溶血病直接抗人球蛋白试验中的应用价值。方法分别用微柱凝胶法和传统试管法对68例确诊的新生儿溶血病患者血清标本行直接抗人球蛋白实验。结果以出现凝集为阳性,微柱凝胶法敏感性为41.1%,传统试管法敏感性为22.0%,微柱凝胶方法敏感性明显高于试管法。结论与传统试管法相比,微柱凝胶技术操作简便,结果易判读,可以提高直接抗人球蛋白试验的阳性率。     

高效价IgG抗A(B)盐水效价与微柱凝胶效价的对比观察

高效价IgG抗A(B)在盐水中能引起红细胞凝集,称为盐水效价[J].本人在日常实验中发现IgG抗A(B)盐水效价与微柱凝胶法测得的抗人球蛋白效价之间存在着一定的关系,现将结果报告如下.     

人红细胞非凝集型单克隆抗体的研制及鉴定

以人Ｏ型红细胞免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，以红细胞凝集试验，剔除分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞后，以抗球蛋白试验筛选分泌非凝集型抗体的杂交瘤细胞株，共获４株分泌非凝集型抗体的杂交瘤细胞株并对其进行鉴定。结果表明，４株杂交瘤细胞所分泌的抗体在盐水介质中不能直接使红细胞发生凝集反应，但可使人红细胞致敏，在抗鼠球蛋白搭桥下可使红细胞凝集。这种凝集反应与红细胞血型无关，与红细胞的形态及疾病亦无关。     

微柱凝集抗人球蛋白试验在贫血患者输血前的应用

目的探讨微柱凝集抗人球蛋白试验(AGT)在贫血患者输血前的应用价值。方法对234例贫血患者输血前进行微柱凝集直接抗人球蛋白试验(DAT),阳性者再利用标准抗体筛查细胞进行间接抗人球蛋白试验(IAT)。结果 234例标本中DAT阳性者10例,经抗体筛查,其中IAT阳性者3例。结论微柱凝集AGT是一种灵敏度较高的可靠方法,该方法可以检测贫血是否由抗体致敏红细胞所导致,对指导临床输血具有决定意义。     

12例急性自身免疫性溶血性贫血患者体外溶血试验配血与输血研究

本研究采用体外溶血试验配血方法,为微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者筛查配血相容的红细胞。对照组选择26例AIHA患者,采用微柱凝胶抗人球蛋白法,确定配血结果凝集强度最弱的同型供血者红细胞输注。实验组为12例微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性AIHA患者,采用体外溶血试验配血法,选取配血结果出现不溶血的同型供血者红细胞输注。结果表明,体外溶血试验法输血组与微柱凝胶抗人球蛋白法配血组输血效果相比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。实验组患者平均每次输注去白细胞红细胞悬液2.26单位,输血后患者血红蛋白、网织红细胞及总胆红素等指标变化与输血前相比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：在微柱凝胶抗人球法配血困难时,采取体外溶血试配血可以顺利为AIHA患者筛查到相容红细胞。     

3种交叉配血方法在新生儿输血安全中的应用

目的探讨盐水介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法3种交叉配血法在新生儿输血安全中的应用价值。方法同时用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶法对174例需要输血的新生儿进行同型交叉配血,常规检测不规则抗体,直接抗人球蛋白试验,不规则抗体阳性者进一步做抗体特异性鉴定。结果盐水法有14例(8.05%)配血不合;凝聚胺法有1例(0.57%)配血不合;微柱凝胶法有62例(35.63%)配血不合,其中31例为直抗阳性引起的次侧不合,1例为抗-D抗体导致的3种方法均不合。凝聚胺法和微柱凝胶法差异有统计学意义(P0.05)。结论微柱凝胶法用于新生儿交叉配血标本用量少,操作简便,易于标准化,结果清晰易判,敏感度高于凝聚胺法,对保障新生儿安全输血具有重要意义。     

同种抗体合并模拟同种特异性自身抗体血清学特点分析及配血对策

目的通过对1例同种抗体合并模拟同种特异性自身抗体患者的抗体进行鉴定,了解Rh血型系统中模拟同种自身抗体的血清学特点,以便提供合适的配血策略。方法采用常规血清学方法对患者进行ABO血型、Rh分型鉴定;并完成直接抗人球蛋白试验、抗体鉴定及交叉配血试验;采用患者Rh抗体类似特异性对应抗原阴性的献血者细胞(B型RhccDEE)进行患者血浆吸收放散试验,对吸收后的血浆、红细胞酸放散液进行抗体鉴定。采用患者红细胞放散液稀释技术鉴定抗体特异性。采用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶广谱抗球蛋白卡(LISS/coombs)法、经典抗球蛋白法、酶法、酶-IAT法进行交叉配血试验。结果患者为B型RhccDEE,直抗阳性。血浆抗体鉴定为IgG类的抗-C、e(不排除抗-Ce可能性)、效价为256。对应抗原阴性的献血者细胞吸收血浆后放散液抗体鉴定为IgG类的抗-C、e(不排除抗-Ce可能性)。患者自身红细胞酸放散液8倍稀释后可鉴定为类似抗-C、e特异性(不排除抗-Ce可能性)。对应抗原阴性的献血者红细胞与患者进行主侧配血,经典抗球蛋白法、酶法结果相合;而凝聚胺法、微柱凝胶广谱抗球蛋白卡(LISS/coombs)法、酶-IAT法不合。结论模拟同种自身抗体的正确鉴定对选择适合的交叉配血方法起着至关重要的作用,而筛选出相应抗原阴性的血液输注,可最大程度保证输血的安全、及时、有效。     

VitC、KCl及止血敏对3种交叉配血方法的影响探讨

目的了解药物维生素C（VitC）、氯化钾（KCl）及止血敏对盐水介质、微柱凝胶配血法的影响,并与凝聚胺配血法对比。方法分别在含与不含有特异性抗体两种条件下,加入KCI注射液、酚磺乙胺（止血敏）注射液、VitC注射液、生理盐水,与相应红细胞进行免疫学反应。观察3种药物对不同介质配血方法的影响。结果低浓度的VitC、KCl不影响凝聚胺介质配血,止血敏令试验产生假凝集;高浓度的3种药物可导致试验失败。盐水介质法检测敏感性略低,VitC、KCl对试验的影响不明显,而KCl组随着抗体被稀释,凝集强度减弱甚至于消失。结论3种药物对微柱凝胶配血法均有影响,尤其受KCI影响较大。     

Du血型一例报道

我室在常规配血工作中,发现R h血型卡中出现不完全凝集,经上级血站鉴定为Du血型,现报道如下。患者,女,78 y,以食道癌入院,ABO血型为A型。在用试剂卡[本品系在聚丙烯塑料透明卡上的六支微柱型管中填充葡萄糖凝胶和抗人球蛋白(多抗)制成抗人球蛋白微柱试剂卡]做血型鉴定时,发现R     

3种交叉配血方法在儿童输血安全中的应用评价

目的探讨盐水介质法、凝聚胺法(MPT)、微柱凝胶法(MGT)3种交叉配血法联合应用在儿童输血安全中的价值。方法同时用3种方法对需要输血的患者进行交叉配血,对配血不合者,做直接抗人球蛋白试验(DAT)和抗体筛选、鉴定试验。结果 5 301例交叉配血中,48例出现配血不合,其中盐水介质法、凝聚胺法和微柱凝胶法分别检出8例、22例和42例。结论 3种交叉配血法各有优缺点,联合应用,更能保证输血安全;同时还能准确了解凝集的性质、不配合的原因,避免抗体漏检。     

不同保存时间红细胞对三种方法抗-D抗体鉴定结果的影响

为了检测红细胞在不同保存时间抗体鉴定对试验的影响，采用三种不同方法，即木瓜蛋白酶法、博唯优(Biovue)配血卡(柱凝集技术试验法)和戴安娜(DianaGel)配血卡(微柱凝胶试验法)，检测7批不同保存时间(0—9个月)的Rh(D)阳性红细胞，用Rh血型抗—D抗体效价进行了比较。结果表明，微柱凝胶试验法较柱凝集技术效价能高出1管。且凝集强度较柱凝集技术好；保存9个月的红细胞，用微柱凝胶试验法可检测到256；而木瓜蛋白酶法。保存9个月的红细胞，同样的抗血清效价只能检测到2。结论：微柱凝胶试验法与柱凝集技术试验结果差别不大，木瓜蛋白酶法检测效价最低。     

RhD多肽抑制抗原抗体结合的效果

目的 评价RhD多肽抑制抗-D抗体与RhD抗原结合的效果。方法 根据随机噬菌体展示文库筛选得到RhD抗原模拟多肽的氨基酸序列,合成RhD多肽。利用生物信息学技术分析多肽理化性质及二级结构,微柱凝胶低离子抗人球蛋白卡凝集抑制试验验证有效多肽,显微镜观察多肽有效抑制浓度,流式细胞仪法检测多肽抑制效果。结果 Peptide 4噬菌体多肽最为稳定,未形成无规则卷曲与抗原性,且抑制IgG型单克隆抗-D与RhD抗原的反应效果较为明显,显微镜观察呈一定的剂量效应。流式细胞仪法显示当Peptide 4浓度达2.5 mg/50μL时对IgG型单克隆抗-D抗体与O型RhD阳性红细胞的凝集具有抑制作用。结论 Peptide 4为有效多肽,对抑制抗-D与RhD抗原的凝集具有一定效果,对RhD蛋白结构与功能研究及抗原性改造,提高临床输血的安全性等具有重要意义。     

IgM IgG混合型抗－c引起交叉配血不合一例

ＩｇＭＩｇＧ混合型抗－ｃ引起交叉配血不合一例郭永芳，夏卫（无锡市红十字中心血站，江苏无锡２１４０２１）最近，我们在为一例胃出血患者配血时，发现其血清与同型供者红细胞在盐水介质中发生凝集，在３７℃盐水介质及抗人球蛋白介质中的凝集强度均大于室温盐水介质，...     

微柱凝胶卡在Rh血型鉴定上的应用

交叉配血试验，过去是单一的盐水配血法，只能检测出血清中的完全抗体；后来发展到抗人球法，酶法，再到聚凝胺配血法，现在又发展到抗人球蛋白微柱凝胶技术，后几种方法均可检测出血清中的不完全抗体，但微柱凝胶技术由于标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简便，结果可较长时间保存等优点。我们自2004年2月-2005年2月对本院输血的病人应用微柱凝胶卡进行Rh血型鉴定，现将结果报告如下：