外周血LncRNA MIR155HG、miR-155检测在肺结核筛查中的临床价值

目的探讨微小RNA-155(miR-155)、长链非编码RNA MIR155宿主基因(LncRNA MIR155HG)在肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,并分析其临床筛查价值。方法选取阿坝藏族羌族自治州人民医院诊治的肺结核患者130例作为肺结核组,其中活动性肺结核(ATB)患者56例(ATB组)、潜伏结核感染(LTBI)患者74例(LTBI组),并以体检健康者134例作为健康人对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平;分析ATB患者PBMC中LncRNA MIR155HG的表达水平与miR-155的相关性,并评估二者对ATB患者的临床筛查价值。结果肺结核组患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(1.78±0.57)、(1.65±0.54)]均显著高于健康人对照组[(1.02±0.32)、(1.01±0.33)],差异有统计学意义(t分别为13.410、11.658,P均0.05);ATB组患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(2.02±0.68)、(1.90±0.63)]亦显著高于LTBI组[(1.55±0.53)、(1.41±0.46)],差异有统计学意义(t分别为4.430、5.127,P均0.05);未治愈组ATB患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平[(2.34±0.78)、(2.15±0.72)]显著高于治愈组[(1.83±0.61)、(1.75±0.58)],差异有统计学意义(t分别为2.725、2.280,P均0.05)。ATB、LTBI患者PBMC中LncRNA MIR155HG的表达均与miR-155呈正相关(r分别为0.461、0.397,P均0.05); LncRNA MIR155HG、miR-155筛查ATB的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))分别为0.824(95%CI:0.749～0.900)、0.843(95%CI:0.772～0.914),当cut-off值分别为1.81、1.72时,其敏感性分别为71.4%、73.2%,特异性分别为87.8%、86.5%;二者联合检测筛查ATB的AUC~(ROC)为0.917(95%CI:0.871～0.964),当cut-off值为0.46时,其敏感性、特异性分别为89.3%、82.4%。结论肺结核患者PBMC中LncRNA MIR155HG、miR-155的表达水平较高,且在ATB患者中的表达水平显著高于LTBI患者,二者联合检测有助于临床筛查ATB,评估患者病情。     

肺结核患者外周血单个核细胞中lncRNA NEAT1的检测及临床意义

目的探讨肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中长链非编码RNA(lncRNA)核富含丰富的转录本1(NEAT1)的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测65例肺结核病患者(结核组)及30例健康体检者(健康对照组)PBMC中lncRNA NEAT1的表达量,分析其与结核病发生发展以及转归的相关性。结果 RT-PCR检测结果显示lncRNA NEAT1在肺结核患者PBMC中的相对表达水平是健康对照组的4.90±0.72倍,差异有统计学意义(P0.01)。LncRNA NEAT1在初治和复治病例中表达差异无统计学意义(P0.05);lncRNA NEAT1在肺部有无空洞及空洞数量分组之间表达差异有统计学意义(P0.05),即lncRNA NEAT1随空洞累及范围的增加而升高。肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达量随着治疗时间逐渐下降,恢复至正常水平。结论肺结核患者PBMC中lncRNA NEAT1表达升高,且与肺结核的发展和转归有关,监测PBMC中lncRNA NEAT1表达或可以评估结核病患者预后情况。     

非小细胞肺癌患者血清中MALAT1表达水平及其临床意义

目的探讨肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达水平及其诊断价值。方法提取60例NSCLC患者、42例肺良性病变患者及50例健康人血清中的总RNA,用Taq Man实时荧光定量RT-PCR检测MALAT1基因的表达水平并分析其与NSCLC患者临床病理因素的关系,以受试者工作特征曲线(ROC)分析血清MALAT1的诊断效能。结果肺癌组血清MALAT1相对表达水平(0.51±0.09)低于肺良性病变组(0.80±0.12)及健康人对照组(1.01±0.30),差异有统计学意义(q分别为13.95、12.27,P0.01);肺良性病变组血清MALAT1表达水平低于健康人对照组(q=10.24,P0.01);腺癌患者血清MALAT1相对表达量(0.57±0.04)较鳞癌患者(0.45±0.07)明显增高(t=4.260,P0.01),而与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分布部位无显著相关性(P0.05);ROC曲线下面积(AUCROC)为0.956,当cut off值为0.62时,敏感性和特异性分别是87.5%和94.1%,诊断指数为181.6%。结论血清MALAT1检测效能好,可用于NSCLC的诊断及病理类型的鉴别。     

免疫性血小板减少症患者外周血中滤泡辅助性T细胞和IL-21的水平及临床意义

目的探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)和IL-21在免疫性血小板减少症(ITP)中的作用。方法采集15例ITP患者及20例健康对照者外周血,用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+CD4+Tfh细胞的百分率,ELISA法检测血清IL-21水平;用实时荧光定量PCR检测PBMC中IL-21 mRNA的表达。结果 ITP组PBMC中CXCR5+CD4+Tfh细胞比例(17.55±1.015)%显著高于健康人对照组(10.19±0.343)%,差异有统计学意义(t=7.657,P0.01);ITP组血清中IL-21水平(100.7±3.71)pg/mL显著高于健康人对照组(64.6±0.81)pg/mL,差异有统计学意义(t=10.84,P0.01),且两者之间存在明显相关性(r=0.689 3,P0.01)。ITP患者IL-21 mRNA的相对表达量4.319±0.767明显高于健康人对照组1.125±0.052,差异有统计学意义(t=4.813,P0.01)。结论 ITP患者外周血Tfh细胞比例、IL-21水平及IL-21 mRNA表达均增高,可能在ITP的发病机制中发挥重要作用。     

肺部相关疾病外周血T淋巴细胞表面标志物表达分析

目的观察肺部相关疾病外周血T淋巴细胞表面标志物的表达,从细胞免疫水平探究肺部相关疾病发病机制。方法选择2016年1-12月于浙江省绍兴市立医院呼吸科就诊的肺部疾病患者84例,根据诊断结果分为肺结核组(n=34)、肺癌组(n=25)及非结核性肺炎组(n=25),同时设立健康对照组(n=35)。检测各组外周血T细胞表面表达CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD3^+CD45RA+/CD45RO^+、CD3^+HLA-DR^+、CD8^+HLA-DR^+、CD4^+CD25^+的百分比,采用t检验对结果进行统计分析。结果肺结核组、肺癌组、非结核性肺炎组外周血T淋巴细胞表面标志物CD4^+/CD8^+比值(1.01±0.48、1.17±0.39、1.35±0.55)低于健康对照组(1.48±0.52,t=2.562,t=2.341,t=2.112,P<0.05);肺结核组、肺癌组、非结核性肺炎组表达CD3^+CD45RO^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(65.20%±12.63%、56.70%±9.98%、55.90%±9.29%)高于健康对照组(49.60%±11.52%,t=3.422,t=2.647,t=2.084,P<0.05),且肺结核组高于肺癌和非结核性肺炎组(t=2.153,t=3.112,P<0.05);肺结核组、肺癌组表达CD3^+HLA-DR^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(19.59%±7.01%、21.7%±7.34%)高于健康对照组(11.40%±5.33%,t=2.383,t=2.533,P<0.05);肺结核组表达CD8^+HLA-DR^+T细胞占总淋巴细胞百分比(11.26%±4.88%)高于健康对照组(7.10%±3.07%,t=2.244,P<0.05);肺结核组和肺癌组表达CD4^+CD25^+的T细胞占总淋巴细胞百分比(10.70%±3.06%、10.40%±2.33%)高于健康对照组(8.20%±2.79%,t=2.647,t=2.662,P<0.05)。结论肺结核、肺癌和肺炎患者外周血T淋巴细胞表面标志表达改变,尤以肺结核患者改变最显著,可能与肺结核独特的发病机制有关。     

心房颤动患者血浆miRNA-1和miRNA-155检测在复律后复发预测的应用研究

目的探讨血浆miRNA-1和miRNA-155检测在心房颤动患者复律后复发预测中的临床应用价值。方法收集2015年10月~2017年11月于西安市第八医院和咸阳市中心医院心内科住院治疗的110例房颤患者的血液及临床资料(复律组110例,复发组30例,未复发组80例),比较分析三组患者血浆miRNA-1和miRNA-155表达水平的变化与房颤复发的关系。两标志物的表达采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测。应用心动超声仪评价患者的左房内径及左心室射血分数。采用罗氏MODULARP800全自动生化分析仪检测患者的空腹血糖及总胆固醇水平。建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价miRNA-1和miRNA-155在房颤复发中的临床意义。结果血浆miRNA-1和miRNA-155在未复发组、复律组和复发组的水平分别为0.38±0.09,0.39±0.08,0.82±0.15和0.87±0.17,0.85±0.18,0.21±0.05。它们在复发组的表达与未复发组和复律组分别比较明显上调、下调(t=21.37,20.57,均P0.01;t=18.77,11.71,均P0.01),而在未复发组与复律组的表达比较差异无统计学意义(t=0.67,0.54,均P0.05)。房颤患者的收缩压、血清总胆固醇水平(TC)、左房内径、空腹血糖水平(FBG)和左室射血分数(EF)分别在未复发组、复律组和复发组的检测结果为(133±7mmHg,3.87±0.73mmol/L,44.97±6.82mm,4.13±0.57mmol/L,61.20%±7.38%),(134±6mmHg,3.98±0.70mmol/L,45.50±6.72mm,4.17±0.46mmol/L,61.07%±7.19%),(145±7mmHg,4.03±0.71mmol/L,58.97±7.33mm,4.20±0.50mmol/L,60.30%±7.21%)。复发组的左心房内径和收缩压分别与复律组和未复发组比较显著增高(t=6.69,10.23,P0.01;t=8.42,15.53,P0.01);而复律组的两项指标分别与未复发组比较差异均无统计学意义(t=0.73,0.27,均P0.05);各组间的TC,FBG和EF比较,差异均无统计学意义(t=0.58,0.61,0.52,均P0.05;t=0.65,0.58,0.41,均P0.05;t=0.61,0.41,0.52,均P0.05)。在复发组中,miRNA-1和miRNA-155表达具有负相关(r=-0.673,P0.01),且它们分别与左心房内径、收缩压也具有相关性(r=0.528,-0.537),均P0.01。ROC曲线的分析中,复发组分别以复律组和未复发组为参照,血浆miRNA-1的AUC分别为0.743(95%CI:0.627~0.839),P0.01;0.730(95%CI:0.21~0.826),P0.01,血浆miRNA-155的AUC分别为0.703(95%CI:0.628~0.837),P0.01;0.685(95%CI:0.603~0.813),P0.01。结论血浆miRNA-1和miRNA-155检测可应用于房颤患者复律后复发的预测,并成为房颤复发有效的预警标志物和干预靶点。     

非小细胞肺癌患者血浆中miR-26b的表达及其临床意义

目的探讨微小RNA-26b(miR-26b)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中的表达水平及其在肺癌辅助诊断及疗效监测中的作用。方法收集80例NSCLC患者(肺癌组,其中腺癌48例、鳞癌32例,临床分期Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期分别有30、24、26例)及45例健康人(对照组)的血浆,应用实时荧光定量PCR(FQPCR)检测miR-26b水平。80例肺癌患者中有50例收集到配对的治疗前后血浆,通过FQ-PCR检测上述50例肺癌患者治疗前后血浆中的miR-26b水平。结果对照组血浆miR-26b相对表达量为33.03±19.6,肺癌组为11.57±9.41,肺癌组血浆miR-26b显著低于对照组(t=6.908,P0.01)。肺腺癌和肺鳞癌患者血浆miR-26b水平分别为11.32±8.56、12.03±9.92,均低于对照组(t=6.841、6.162,P0.01);肺腺癌和肺鳞癌患者之间血浆miR-26b水平无显著差异(P0.05)。肺癌组中,Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者血浆miR-26b相对表达量分别为15.26±11.17、9.47±7.04、9.37±6.66,Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期血浆miR-26b水平均低于对照组(t值分别为4.987、7.235、7.394,P0.01);Ⅲ期和Ⅳ期患者血浆miR-26b水平低于Ⅰ/Ⅱ期患者(t值分别为2.32、2.43,P0.05);Ⅲ期与Ⅳ期患者之间血浆miR-26b水平无显著差异(P0.05)。50例肺癌患者治疗前后血浆miR-26b相对表达量分别为10.68±8.18、18.69±10.71,治疗后血浆miR-26b水平较治疗前显著升高(t=-4.855,P0.01)。结论 miR-26b在肺癌患者血浆中明显降低,并且血浆miR-26b水平与肺癌分期密切相关,血浆miR-26b在治疗后显著升高,血浆miR-26b水平有可能作为肺癌辅助诊断及疗效监测的新指标。     

miRNA-21-5P在食管鳞癌患者中的鉴别诊断价值

目的检测食管癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平,探讨miRNA-21-5P对食管癌患者的鉴别诊断价值。方法选取2019年12月至2020年3月于朝阳市中心医院就诊的食管鳞癌患者50名(疾病组)及食管炎患者20名(相关疾病对照组),采集食管炎患者血清样本及组织样本,以及食管鳞癌患者治疗前血清样本、术中食管鳞癌组织及癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组血清及组织样本中miRNA-21-5P的表达水平,分析miRNA-21-5P表达水平与食管鳞癌患者临床病理参数的关系,采用ROC曲线评估其对食管鳞癌的鉴别诊断价值。结果食管鳞癌患者血清miRNA-21-5P的表达水平(3.60±0.09)显著高于食管炎患者(1.01±0.05),差异有统计学意义(t=24.43,P0.05);食管鳞癌患者癌组织中miRNA-21-5P的表达水平(4.36±0.29)显著高于癌旁组织(1.31±0.16),差异亦具有统计学意义(t=20.10,P0.05);而食管癌患者组织中miRNA-21-5P的表达水平显著高于食管炎患者组织(t=20.100,P0.05)。ROC曲线分析结果显示,组织中miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.767(95%CI:0.650,0.859),当cut-off值为0.39时,其敏感性88%,特异性为75%。血清miRNA-21-5P筛查食管鳞癌的AUC~(ROC)为0.671(95%CI:0.549,0.779),当cut-off值为0.63时,其敏感性为80%,特异性为66%。结论 miRNA-21-5P在食管鳞癌血清中的诊断价值与组织相当,或可用于对食管鳞癌的鉴别诊断。     

外周血单个核细胞Blimp1、IFN-γ、IL-10水平与重症肺结核患者预后的相关性分析

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)Blimp1、干扰素γ(IFN-γ)、白介素10(IL-10)水平与重症肺结核患者预后的相关性。方法收集2017年8月-2019年8月本院的重症肺结核患者92例的临床资料进行回顾性分析,根据临床预后的不同将其分为存活组(n=60)与死亡组(n=32),比较两组一般资料情况,观察临床预后的相关影响因素并对其进行Logistic回归分析,采用ROC曲线分析PBMC Blimp1、IFN-γ、IL-10水平对重症肺结核患者预后的预测价值。结果是否合并呼吸衰竭、Blimp1、IFN-γ、IL-10水平是重症肺结核患者死亡的独立影响因素(OR=1.413、2.280、2.307、1.570,P0.05),ROC曲线分析结果显示,Blimp1、IFN-γ、IL-10及其三者联合对重症肺结核患者临床预后均具有预测价值(P0.05),且Blimp1、IFN-γ、IL-10三者联合的AUC大于各单一指标,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论合并呼吸衰竭、Blimp11.45、IFN-γ70.74pg/mL、IL-1069.67pg/ml是重症肺结核患者死亡的独立危险因素,Blimp1、IFN-γ、IL-10水平与重症肺结核患者临床预后密切相关,有望成为临床预测重症肺结核患者预后的新指标。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞中KLF4、RORγt与miR-206水平变化的临床意义

目的检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用。方法采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量。结果重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P0.05,r=-0.806,P0.05)。结论重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA表达水平变化

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR3mRNA表达及其与疾病发病机制、疾病活动性的关系.方法 采用逆转录实时荧光定量(FQ-RT)-PCR的方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测59例PBC患者(活动期29例、缓解期30例)、结缔组织病(CTD)患者20例(疾病对照组)、健康体检者29名(健康对照组)外周血PBMC中CXCR3 mRNA的表达水平和含量.以Act=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)比较基因表达水平的变化.结果 活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于缓解期PBC患者(Act=7.77±2.74,t=3.39,P＜0.01);活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于正常对照组(Act=7.16±2.76,t=2.45,P＜0.01)和疾病对照组(Act:7.24±2.75,t=2.53,P＜0.01);缓解期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平与正常人及疾病对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PBC患者CXCR3 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示CXCR3的表达与PBC的发生发展存在一定关联性.     

MALAT1在子宫内膜异位症中的表达及研究

目的探讨肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)中的表达及其诊断价值。方法于GCBI平台收集并分析EMS相关样本基因信息,筛选出MALAT1基因;提取EMS患者及非子宫内膜异位症患者(非EMS)组织及血清样本中的总RNA,qRT-PCR验证MALAT1基因的表达水平,并分析其与月经周期的关系,采用ROC曲线分析血清MALAT1鉴别EMS的效能。结果 GCBI平台基因信息分析结果提示,与非EMS组相比,EMS组中MALAT1基因表达下调1.35倍(t=-3.27,P0.01);EMS患者卵巢囊肿组织及在位内膜MALAT1的表达水平(0.41±0.18,0.61±0.12)均低于非EMS患者子宫内膜组织(1.05±0.34),差异有统计学意义(t分别为5.87和4.48,P0.01),但与EMS患者及非EMS患者月经周期均无关(t分别为1.54和1.52,P0.05);EMS患者卵巢异位囊肿组织MALAT1的表达水平低于其在位内膜(t=3.77,P0.01);EMS患者血清MALAT1表达水平(0.60±0.18)低于非EMS患者(1.05±0.32),差异有统计学意义(t=5.18,P0.01);ROC曲线下面积(AUCROC)为0.88,当cut-off值为0.74时,MALAT1鉴别EMS的敏感性和特异性分别为82.4%和92%,约登指数为74.4%。结论 MALAT1的低表达可能与EMS发生、发展有关,血清MALAT1水平对EMS具有一定的鉴别价值。     

血清lncRNA H19在非小细胞肺癌筛查及预后评估中的价值

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清lnc RNA H19表达水平及其筛查和预后价值。方法实时荧光定量PCR检测70例NSCLC患者和60例体检健康者血清lnc RNA H19表达水平,并分析血清H19水平与NSCLC患者临床病理参数的关系;利用ROC曲线分析H19对NSCLC的筛查效能;Kaplan-Meier法绘制不同H19水平的NSCLC患者生存曲线,Cox多因素回归模型分析NSCLC预后的独立危险因素。结果NSCLC组血清H19表达水平(1.72±0.27)明显高于健康人对照组(1.00±0.08),差异有统计学意义(t=19.911,P0.01)。ROC曲线结果表明,血清H19筛查NSCLC的AUC~(ROC)为0.864,特异性为81.7%,敏感性为74.3%。血清H19表达与TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移有关(P均0.05),但与年龄、性别、吸烟史、分化程度、病理分型等无关(P0.05)。H19高表达组中位生存时间为35个月,而H19低表达组中位生存时间为49个月,差异有统计学意义(Log-rankχ~2=4.874,P=0.027)。TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移、血清H19表达水平是影响NSCLC患者预后的独立风险因素(P均0.05)。结论NSCLC患者血清Lnc RNA H19明显升高,并且与NSCLC不良预后密切相关,有望成为NSCLC筛查和预后评估的分子标志物。     

肺癌和肺结核患者血浆中D-二聚体检测的临床意义

目的探讨肺癌和肺结核患者血浆中D-二聚体水平及其临床意义。方法收集2014年7~10月首都医科大学附属北京胸科医院130例肺癌患者、126例肺结核患者和50例健康者血浆标本,应用全自动分析仪检测所有血浆标本中的D-二聚体水平。结果肺癌患者血浆中D-二聚体的水平显著高于健康者和肺结核患者(Z=2.704,P0.01);肺结核患者血浆中D-二聚体的水平显著高于健康者(Z=2.54,P0.05);血浆中D-二聚体在晚期肺癌(Ⅲ期和Ⅳ期)患者中的表达水平显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(Z=2.195,P0.05)。血浆D-二聚体在肺癌患者中的阳性率(61.2%)显著高于肺结核患者(41.3%)(χ2=10.525,P0.01)。结论肺癌和肺结核患者存在着明显的凝血和纤溶激活状态,通过监测血浆D-二聚体的水平,血浆D-二聚体水平与肺癌临床分期密切相关。     

感染性心内膜炎患者外周血中性粒细胞外诱捕网水平与T 细胞水平表达和预后的相关性研究

目的 探讨感染性心内膜炎(infective endocarditis,IE) 患者外周血中性粒细胞外诱捕网(neutrophil extracellulartrap nets,NETs) 水平与T 细胞水平表达和预后的相关性。方法 选取2018 年11 月～ 2021 年2 月在青岛阜外心血管病医院治疗的53 例IE 患者作为IE 组,选取同期进行体检的50 例健康人群,作为对照组。比较两组血浆NETs 水平和T 细胞表达水平之间的差异,采用Pearson 相关性检验分析血浆NETs 水平和 T 细胞水平表达的相关性。根据IE 患者生存情况分为存活组（29 例）和死亡组（24 例）,采用受试者工作特征曲线（ROC 曲线）分析血浆NETs 水平对IE患者死亡的预测价值。结果 IE 组患者cf-DNA/NETs（465.15±146.38μg/L）,WBC（16.14±5.36）×109/L,NEUT（75.42±10.25）%,hs-CRP（39.38±10.75g/L）,CD3+（66.23±6.74）%,CD4+（44.35±4.26）%和CD4+/CD8+（1.65±0.43）水平均显著高于对照组[135.76±37.52 μg/L,（6.24±1.53）×109/L,（62.28±6.45）%,2.37±1.04g/L,（54.21±5.13）%,（35.14±3.52）%,1.34±0.33],差异有统计学意义（t=18.093,11.036,7.352,22.960,9.505,10.298,5.289,均P ＜ 0.01）。血清Alb（35.38±10.75g/L vs 42.15±9.78 g/L）和CD8+ 水平[(23.75±3.68)% vs(26.75±3.66)%] 显著低于对照组,差异有统计学意义（t=-4.039,-4.961,均P ＜ 0.01)。IE 死亡组cf-DNA/NETs 水平显著高于存活组(611.46±102.15μg/L vs407.53±76.49μg/L),差异均有统计学意义（t=7.007,P ＜ 0.01）。血浆cf-DNA/NETs 水平与CD8+ 水平、患者预后不良呈正相关（r=0.282,0.352,均P ＜ 0.05),与CD3+,CD4+ 和CD4+/CD8+ 水平呈负相关(r=-0.424,-0.535, -0.328,均P ＜ 0.05）。ROC 曲线分析NETs 预测IE 患者死亡的曲线下面积为0.736（95%CI:0.684 ～ 0.829,P ＜ 0.01）。结论 感染性心内膜炎患者血浆NETs 水平显著升高,血浆NETs 水平与T 细胞水平表达及患者预后不良显著相关,对预测IE 患者死亡有一定临床价值。     

急性肺损伤患者血浆miR-127及miR-155表达水平及对预后的影响

目的:探讨急性肺损伤(ALI)患者血浆miR-127及miR-155表达水平及其临床意义。方法:选取2016-01—2019-06期间我院收治的ALI患者145例,根据ALI患者生存情况分为存活组(n=91)和死亡组(n=54)。采用急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分标准将ALI患者分为低中危组(n=79)和高危组(n=66)。采用实时荧光定量PCR检测各组血浆miR-127及miR-155表达水平。应用多因素Logistic回归分析ALI患者死亡的危险因素。绘制ROC曲线分析血浆miR-127及miR-155表达水平及APACHEⅡ评分预测ALI患者死亡的价值。结果:死亡组血浆miR-127(3.22±1.04 vs.1.05±0.46)及miR-155(2.46±0.75 vs.0.84±0.32)表达水平均明显高于存活组(P0.01)。高危组血浆miR-127(3.04±0.95 vs.1.31±0.52)、miR-155(2.38±0.71 vs. 0.97±0.38)表达水平及死亡率(60.6%vs. 17.7%)均明显高于低中危组(P0.01)。多因素Logistic回归分析显示,APACHEⅡ评分(OR=2.582,95%CI:1.674～4.105)、血浆miR-127(OR=3.306,95%CI:2.428～6.174)及miR-155(OR=2.804,95%CI:1.903～5.226)表达水平升高是ALI患者死亡的独立危险因素(P0.01)。ROC曲线分析显示,血浆miR-127、miR-155表达水平及APACHEⅡ评分预测ALI患者死亡的最佳截断值分别为2.25、1.64、18.50分,3项联合预测ALI患者死亡的曲线下面积(0.922,95%CI:0.864～0.983)最大,其敏感度(93.7%)和特异度(87.4%)较好。结论:血浆miR-127及miR-155表达水平升高与ALI患者预后不良相关,是ALI患者死亡的独立危险因素,联合APACHEⅡ评分对预测ALI患者死亡具有一定的价值。     

miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究

目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P0.01;t=23.14,P0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P0.01;t=7.94,P0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。     

血清miR-25在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨miR-25在不同病理类型肺癌的血清表达量与应用价值及其与临床参数的相关性。方法收集非小细胞肺癌(30例)、小细胞肺癌(28例)、健康人(30例)共88例样本,采用实时定量PCR对血清miR-25含量进行定量检测,并建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算敏感度及特异度,评价其对肺癌的诊断价值。结果 miR-25在健康人血清表达量比小细胞肺癌组(P=0.000)、非小细胞肺癌组(P=0.001)显著减低,且小细胞肺癌组血清miR-25含量比非小细胞肺癌组明显增高,差异具有统计学意义(P=0.001);进一步建立ROC曲线分析血清miR-25对肺癌的诊断价值,非小细胞肺癌患者的ROC曲线下面积为0.659,敏感度为56.7%,特异度为90%,对应的临界值为1.854;小细胞肺癌的ROC曲线下面积为0.869,敏感度为78.6%,特异度为97%,对应的临界值为2.424。Spearman秩相关表明,血清miR-25表达量与病理分型(r=0.422,P=0.001)、肿瘤分期(r=0.370,P=0.004)、淋巴结转移(r=0.670,P=0.000)、肿瘤标记物(r=0.372,P=0.004)显著相关。结论血清miR-25在肺癌患者中表达量明显升高,尤其是在小细胞肺癌中,可能是小细胞肺癌诊断的一个潜在肿瘤标记物。     

miR-99a对类风湿性关节炎及TH17/Treg细胞的影响

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-99a的表达与辅助性T细胞17(T helper cell 17,T_H17)、调节性T细胞(regulatory cells, Treg)比率失衡的关系。方法收集于我院就诊的RA患者80例,分为活动期RA组(42例)和稳定期RA组(38例),以体检健康者42例作为健康人对照组。流式细胞术测定各组外周血PBMC中T_H17、Treg细胞数;ELISA法检测各组血清IL-17、IL-6、TFN-α、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定T_H17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FoxP3 mRNA以及RA患者PBMC中miR-99a的表达水平;western blot检测各组RORγt和FoxP3蛋白的表达水平。结果与健康人对照组相比,活动期和稳定期RA患者的T_H17细胞数、RORγt mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,Treg细胞数及FoxP3 mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低(P均0.01)。活动期RA患者血清IL-17、IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平均显著升高,而IL-4和IL-10的表达水平均显著降低(P均0.01)。此外,活动期RA患者T_H17细胞中miR-99a的表达水平显著升高,Treg细胞中miR-99a的表达水平显著降低(P均0.01)。Pearson相关分析结果显示,RA患者T_H17细胞中miR-99a与RORγt mRNA的表达水平呈正相关(r=0.721,P0.01),Treg细胞中miR-99a与FoxP3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.815,P0.01)。结论 RA患者T_H17和Treg细胞中miR-99a的表达与T_H17、Treg细胞发育分化关键转录因子RORγt、FoxP3密切相关,miR-99a可能通过影响RORγt和FoxP3,参与RA患者T_H17/Treg细胞比率失衡。     

LDB2在肺癌组织中的表达及与S1PR1的相关性分析

目的探讨LIM域结合蛋白2(LDB2)在肺癌组织中的表达及其与1-磷酸神经鞘氨醇受体1(S1PR1)的相关性。方法选取2010年4月至2011年5月南通市肿瘤医院就诊的52例肺癌患者的癌组织作为实验组,相应的癌旁组织作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组LDB2及S1PR1基因的表达水平;通过Oncomine数据库对LDB2的表达结果进行验证,并分析其与临床病理参数之间的关系;绘制ROC曲线,评价其对肺癌的诊断价值;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析其与肺癌预后的关系;同时检测其与S1PR1的相关性。结果 LDB2基因在肺癌组织中的表达量为0.158(0.062,0.383),癌旁组织中表达量为0.403(0.261,0.711),两组间差异具有统计学意义(U=700.0,P0.01)。Oncomine数据库共检索出9项符合筛选条件的研究,其LDB2基因均呈低表达(P0.01)。肺癌组织中LDB2基因的表达与性别、年龄、吸烟情况、病理类型、肿瘤大小、TNM分期及是否淋巴结转移均无关(P0.05)。ROC曲线分析结果表明,当ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.741(95%CI:0.643～0.839),cut-off值取0.247时,LDB2筛查肺癌的敏感性为80.8%,特异性为61.5%。Kaplan-Meier生存分析发现,低表达LDB2患者的5年总生存期显著低于高表达患者(P0.01)。S1PR1基因在肺癌组织中表达量为0.710(0.337,1.523),在癌旁组织中的表达量为1.582(0.913,3.533),两组间差异具有统计学意义(U=780.0,P0.01),且肺癌组织中LDB2与S1PR1的表达水平呈正相关(r=0.827,P0.01)。结论 LDB2及S1PR1在肺癌中均低表达且呈强相关性,两者在肺癌的发生、发展中具有重要的作用。