浙江省柯萨奇病毒A16 VP1基因特征分析及B细胞抗原表位预测

目的了解浙江省柯萨奇病毒A16(CA16)VP1基因特征及其变迁规律并预测VP1蛋白上B细胞抗原表位。方法在Gen Bank检索并下载35个浙江省CA16流行株及69个已知基因型CA16参考株的VP1基因序列,使用MEGA 6.0软件进行比对分析和构建种系进化树,确定浙江省CA16流行株的基因型,并分析VP1核苷酸和氨基酸同源性及氨基酸变异;运用DNA Star中的Protean模块预测VP1上可能的线性B淋巴细胞抗原表位。结果浙江省CA16病毒基因型为B1基因型(34株)和A基因型(1株)。B1型中以B1b亚型(24株)占绝对优势,其次为B1a亚型(10株)。浙江省CA16流行株VP1核苷酸和氨基酸同源性分别为75.5%~100%和89.5%~100%;VP1区氨基酸序列高度保守,但也存在部分变异。VP1中可能的B细胞抗原表位(氨基酸肽段)有13个,分别为10-20、30-38、57-62、73-79、98-106、118-123、159-168、173-177、184-189、240-246、265-273、274-284和289-295。结论浙江省CA16流行株存在A、B1 2个基因型,B1b和B1a为主要基因型,其VP1区氨基酸变异程度较低,VP1中13个预测的B细胞抗原表位可为CA16疫苗的研制提供科学依据。     

麒麟丸对糖尿病大鼠睾丸保护作用机制初步探究

目的研究麒麟丸对糖尿病大鼠睾丸保护作用及可能机制。方法 6周龄清洁级雄性wistar大鼠,体质量180~220g,共60只,随机分A组(正常组)10只、B组(正常+麒麟丸)10只和模型组40只。模型组高脂高糖饮食1月后,应用链脲佐菌素制作糖尿病模型。成模25只随机分成C组(糖尿病组)12只,D组(糖尿病+麒麟丸)13只。B组和D组大鼠每天按0.36g/kg麒麟丸灌胃。动物中心饲养6周后测量大鼠体质量和血糖并取材,双侧睾丸称量后取右侧睾丸组织固定后制作免疫组化薄片观察终末糖基化产物(AGEs)及终末糖基化产物受体(RAGEs)表达,左侧睾丸提取蛋白后电泳观察RAGEs蛋白表达量,左侧附睾放在精子孵育液中剪碎后孵育计数左侧附睾中精子数。结果糖尿病组大鼠较正常组大鼠睾丸质量减轻,附睾精子数减少,AGEs累积增加,RAGEs表达量增高;(糖尿病+麒麟丸)组大鼠较糖尿病组大鼠睾丸质量增加,附睾精子数增加,AGEs累积减少,RAGEs表达降低;正常组大鼠和(正常+麒麟丸)组大鼠比较睾丸质量、附睾精子数、AGEs及RAGEs均无明显变化。结论麒麟丸可能干预糖尿大鼠睾丸组织中AGEs累积降低RAGEs的表达,干预AGEs通过RAGEs介导的信号通路作用,对糖尿病大鼠睾丸起保护作用。     

杭州市2013~2014年流感暴发流行期甲型流感病毒H3N2亚型基因特性分析

目的分析杭州2013~2014年冬春季流感暴发期间流行的甲型流感病毒H3N2亚型的分子特性。方法选取H3N2阳性标本提取病毒RNA,PCR扩增全基因组并测序,构建血凝素(HA)及神经氨酸酶(NA)分子进化树,对H3N2亚型的病毒进化进行分析。结果 6个代表株中H3N2未发生片段间的重配。以WHO推荐流感疫苗株A/TEXAS/50/2012为参考,HA1蛋白主要抗原决定区发生N145S氨基酸替换,并有其他多个位点的突变。病毒基质蛋白(M2)的金刚烷胺耐药位点全为S31N,神经氨酸酶抑制剂耐药位点未发生突变。结论 H3N2亚型甲型流感病毒HA1蛋白的氨基酸变异与2013~2014年杭州地区暴发流行有关。另外,病毒已出现对金刚烷胺的耐药突变,而对神经氨酸酶未发生耐药突变。     

γδT细胞在病毒免疫中的作用

γδT细胞被视为天然免疫和获得性免疫之间的桥梁,与NK细胞、巨噬细胞及树突状细胞等免疫细胞共同构成机体抵抗病原微生物的第一道防线.γδT细胞可以通过释放如穿孔素、颗粒酶等细胞毒性分子,表达Fas-FasL诱导细胞凋亡以及分泌IFN-γ等方式发挥细胞免疫效应,也可以释放IL-2、IL-4、IL-5、IL-7、IL-22等细胞因子调节体液免疫.γδT细胞在抗感染、抗肿瘤及免疫耐受等病理生理中发挥着重要作用.本文就γδT细胞及其主要功能在抗病毒免疫中所扮演的作用作一综述.     

2013-2015年浙江地区新型甲型H1N1流行性感冒的流行病学和临床特征调查

摘要：目的：调查2013-2015年浙江地区哨点医院监测的新型甲型H1N1流行性感冒（简称流感）的临床特征及其流行病学特征。 方法：对2013-2015年浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染的患者进行流行病学和临床特征调查,采集研究对象呼吸道标本进行流感病毒检测,分析新型甲型H1N1流感病毒阳性组与阴性组的临床和流行病学特征。 结果：8家哨点医院共纳入7 602例急性呼吸道感染患者,其中,实验室确诊新型甲型H1N1流感779例（10.2%）,新型甲型H1N1流感患者中位年龄为51岁,115例（33.6%）患有至少1种慢性基础性疾病,新型甲型H1N1流感中哮喘比例（2.6%）高于流感病毒阴性患者（0.6%）,差异有统计学意义（χ²=12.706,P<0.01）。新型甲型H1N1流感中恶心、呕吐所占比例高于流感病毒阴性患者,排痰性咳嗽、腹泻所占比例低于流感病毒阴性患者。新型甲型H1N1流感患者的白细胞计数和中性粒细胞计数均低于流感病毒阴性组,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论：浙江地区人感染新型甲型H1N1流感的高发期为每年的冬春季节,其他时间呈散发。新型甲型H1N1流感的临床症状与非流感患者相比较无特异表现。     

儿童麻疹流行的临床特点及基因特征

目的探讨儿童麻疹流行的临床特点及基因特征,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2012年3-8月38例麻疹患儿的临床特点,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测麻疹患者的咽拭子病毒标本,对部分PCR扩增阳性的片段进行研究基因测序、并绘制系统进化树进行同源性分析。结果 38例麻疹患者咽拭子标本中经RT-PCR检测阳性32例,阳性率84.2%;随机选择8例阳性标本进行基因测序,均为H1a基因亚型;与该型参考株AF045205﹑AF045206核苷酸同源性为98.0%⁹9.0%。结论麻疹病毒流行优势株均是H1a基因亚型,无输入性的其他亚型出现。     

利用甲型流感病毒阳性临床标本制备质控品

目的制备一种能适用于甲型流感病毒核酸提取和PCR检测全过程的质控品。方法采用TRIzol试剂灭活高、中、低3种浓度的甲型流感病毒阳性的痰液标本,分析TRIzol试剂对检测结果的影响;放置于35℃以及反复冻融,评估灭活后标本的稳定性;并在不同实验室间采用不同试剂进行适用性评价。结果 TRIzol试剂对核酸检测无影响,处理后的高、中、低浓度标本反复冻融40次病毒浓度无明显降低,变异系数分别为1.26%、1.54%、1.54%,均低于试剂盒批内精密度。TRIzol试剂处理的标本在35℃环境保存40 d后高、中、低浓度变异系数分别为3.13%、2.77%、2.20%,变异系数均低于试剂盒批间精密度。在不同单位采用不同试剂均能检测出高、中、低不同浓度质控品。结论采用TRIzol试剂灭活甲型流感病毒阳性标本制备的质控品在瓶间差、热稳定和长期保存时效等方面性能较优,可成为日后临床实验室开展甲型流感病毒核酸检测的理想质控品。     

江苏省2013至2015年人H7N9流感病毒的分子特征

摘要：目的：探讨江苏省2013至2015年人源H7N9禽流感病毒的分子特征。 方法：从全球禽流感共享数据库(GISAID)中下载江苏省2013至2015年上传的人感染H7N9禽流感病毒株(37株)和禽源性H7N9病毒株(7株)的全基因序列,用MEGA 6.0软件分析人感染H7N9禽流感病毒HA、NA、M及PB2等基因的分子遗传特征、关键氨基酸位点的改变情况,并构建HA和NA的系统进化树。 结果：江苏省内人源和禽源H7N9禽流感毒株与参考株相比较,HA蛋白的差异均较小,其同源性分别为97.2%～100%和98.2%～100%;NA蛋白之间的差异也较小,其同源性分〖JP2〗别为99.8%～100%和99.9%～100%;人源与禽源H7N9病毒HA或NA之间的同源性分别为98.5%～100%和99.8%～100%。人源和禽源H7N9毒株的HA蛋白均发生G186V和D225G变异,44株发生Q226L变异,4株出现A134V变异,但HA的裂解位点均未发生改变。2013年1株NA蛋白出现R294K耐药位点的变异。PB2蛋白分析显示：所有毒株均发现L89V变异,其中人源H7N9毒株中,26株发现E627K变异,5株发现D701N变异。所有毒株的M2蛋白均发生S31N变异。 结论：江苏省2013-2015年人感染H7N9流感病毒与禽源性H7N9毒株的氨基酸序列高度同源,关键氨基酸位点的变异与人感染该病毒密切相关,应加强人源和禽源H7N9病毒的分子监测。     

Mohnarin2011年度报告:华北地区细菌耐药监测

目的 调查分析2011年度华北地区医院临床分离细菌构成以及对常用抗菌药物的耐药性,为临床抗菌药物应用提供依据.方法 北京、天津、内蒙和山西成员单位,按照统一方案分离菌株,进行药物敏感性试验,结果用WHONET 5.6软件进行统计分析.结果 2011年华北地区8所医院共收集菌株19 324株,其中革兰阳性菌5108株占26.4％,革兰阴性菌14 216株,占73.6％,MRSA和MRCNS的检出率分别为58.0％和77.5％,未发现耐万古霉素葡萄球菌;粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁不敏感株分别为0.7％和0,屎肠球菌不敏感菌株分别为6.3％和6.7％,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形菌产ESBLs率分别为59.9％、32.1％、20.3％和34.9％,肺炎链球菌1 62株,其中PRSP占8.3％;流感嗜血菌144株,产酶率为10.9％,肠杆菌科细菌仍对亚胺培南和美罗培南保持＞90.0％的敏感率;铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌的耐药率分别达23.6％、19.2％和51.3％、48.4％.结论 细菌耐药性仍呈上升趋势,需要关注耐万古霉素肠球菌、耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌及多药耐药非发酵菌情况,采取积极措施控制进一步恶化.     

硫化氢信号在糖尿病大鼠阴茎海绵体中表达的研究

目的探讨胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、胱硫醚-β-合成酶(CBS)与硫化氢在糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中的表达及与大鼠勃起功能的关系。方法从30只SD雄性大鼠中随机选取15只设为糖尿病组,15只设为对照组。糖尿病组大鼠饲喂高糖、高脂饮食4周,而后腹腔注射链脲佐菌素制备二型糖尿模型,造模成功后继续饲喂高糖、高脂饮食4周。对照组大鼠给予正常饮食4周后,腹腔内注射相同剂量生理盐水,继续正常饮食喂养4周。8周后,分别测定两组大鼠阴茎海绵体内压/平均动脉压(ICP/MAP),采用Elisa检测血浆和阴茎海绵体内源性H_2S含量,采用免疫组化和Western blot分析CSE和CBS在阴茎海绵体内的表达。结果与对照组大鼠相比,糖尿病组大鼠ICP/MAP比值显著降低(P0.05);血浆H_2S浓度,阴茎海绵体组织H_2S含量显著降低(P0.05);阴茎组织内CSE和CBS的含量也明显减低(P0.05)。结论糖尿病组大鼠高血糖可以通过抑制CBS和CSE的表达,降低阴茎海绵体组织内H_2S浓度,引起阴茎海绵体舒张功能障碍,导致阴茎勃起功能受损。