白细胞介素-4和γ-干扰素在哮喘发病机制中的研究

对发作期哮喘和慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）病人及正常人各２０例，检测外周血淋巴细胞（ＰＢＬＣｓ）培养上清液中白细胞介素－４（ＩＬ－４）含量、γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）活性及其血清ＩｇＥ总浓度。结果表明，发作期哮喘组ＩＬ－４和ＩｇＥ均明显高于ＣＯＰＤ组及正常对照组（Ｐ＜０．００１）。ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ及ＩＦＮ－γ与ＩｇＥ均呈负相关（ｒ＝－０．４８，－０．７５；Ｐ＜０．０５，０．００１）。而ＣＯＰＤ组与正常对照组之间的ＩＬ－４和ＩｇＥ无显著差异（Ｐ＞０．０５）。３组之间ＩＦＮ－γ活性亦无差异（Ｐ＞０．０５）。提示ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ之间的相互平衡是哮喘发病过程中血清ＩｇＥ浓度调节的一种重要因素。     

用微量细胞病变抑制法观察三种天然人干扰素的协同抗病毒作用

用微量细胞病变抑制法观察天然α，β，γ干扰素（ｎｈｕＩＦＮ－α，β，γ）在体外诱导ＨＥｐ－２细胞的抗病毒协同作用。ｎＨｕＩＦＮ－γ和ｎＨｕＩＦＮ－α或ｎＨｕＩＦＮ－β共同作用于ＨＥｐ－２细胞表现为抗病毒协同增强效应；ｎＨｕＩＦＮ－α和ｎＨｕＩＦＮ－β共同作用于ＨＥｐ－２细胞只表现为抗病毒协同相加效应。实验结果表明：ｎＨｕＩＦＮ－γ和ｎＨｕＩＦＮ－α或ｎＨｕＩＦＮ－β的抗病毒协同增强作用，与不同干扰素（ＩＦＮ）处理ＨＥｐ－２的顺序及ＩＦＮ的浓度比例有关；ｎＨｕＩＦＮ－γ与ｎＨｕＩＦＮ－α的抗病毒协同增强作用是细胞接受ＩＦＮ作用后早期即发生的现象。     

低剂量辐射对小鼠脾脏和胸腺Ⅰ型和Ⅱ型辅助性T细胞的影响

目的研究低剂量辐射对Ⅰ型辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ１）和Ⅱ型辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ２）的影响，揭示低剂量辐射使Ｔｈ激活的分子机理。方法采用分子杂交方法，检测Ｘ射线全身照射后小鼠脾脏和胸腺细胞ＩＦＮ－γ和ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果７５ｍＧｙＸ射线全身照射后小鼠脾脏和胸腺ＩＦＮ－γ和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达水平明显增高。结论低剂量辐射诱导Ｔｈ１和Ｔｈ２激活，其分子机理与其启动调节Ｔｈ１和Ｔｈ２克隆发育的细胞因子的基因表达有关     

L─ARGININE IMPROVES THE SPLANCHNIC VASODILATATION AND INTESTINAL BLOOD FLOW IN ENDOTOXEMIA

Ｌ┐ＡＲＧＩＮＩＮＥＩＭＰＲＯＶＥＳＴＨＥＳＰＬＡＮＣＨＮＩＣＶＡＳＯＤＩＬＡＴＡＴＩＯＮＡＮＤＩＮＴＥＳＴＩＮＡＬＢＬＯＯＤＦＬＯＷＩＮＥＮＤＯＴＯＸＥＭＩＡＸＩＡＯＮａｎ（肖南），ＣＨＥＮＨｕｉ－ｓｕｎ（陈惠孙），ＨＵＤｅ－ｙａｏ（胡德耀）ＬＵＳ...     

基因重组干扰素γ对骨髓增生异常综合征

用基因重组干扰素（ＩＦＮ－γ）对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人造血祖细胞的作用进行了体外观察，结果：①ＩＦＮ－γ体外对非血液病对照组病人的红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）无明显促增殖作用，而对ＭＤＳ病人的ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ有明显促增殖作用。其作用呈剂量依赖型，在ＩＵ／ｍｌ时作用最小，１００Ｕ／ｍｌ时作用最强；②ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ原ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ增殖正常组加入ＩＦＮ－γ后集落数增加最明显，而对增殖明显减低组集落数无明显增加；③ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ不同亚型病人ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ作用不同，其中对转化中原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ－Ｔ）型病人有效率较高。     

阳江高本底地区居民中免疫水平与对病毒免疫反应的研究

探讨在天然高本底电离辐射作用下机体的免疫水平与对病毒的免疫反应。方法利用单克隆抗体ＡＰＡＡＰ法检测白细胞介素－２分泌细胞（ＩＬ－２ＳＣ）；利用间接免疫酶法检测抗ＥＢ病毒抗原抗体水平（ＶＣＡ／ＩｇＡ，ＶＣＡ／ＩｇＧ，ＥＡ／ＩｇＡ，ＥＡ／ＩｇＧ）；采用酶标免疫吸附沉淀法检测乙型肝炎（ＨＢＶ）表面抗原（ＨＢｓＡｇ），表面抗原抗体（ＨＢｓＡｂ）和核心抗体（ＨＢｃＡｂ）。结果高本底地区（ＨＢＲＡ）居民外周血淋巴细胞ＩＬ－２ＳＣ频数显著高于对照（ＣＡ）；ＶＣＡ／ＩｇＡ、ＶＣＡ／ＩｇＧ、ＥＡ／ＩｇＧ抗体水平均高于ＣＡ，但仅ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体滴度水平存在差异显著性，两地区ＶＣＡ／ＩｇＡ≥１５阳性检出率均显著高于广东地区的平均水平；ＨＢＶ感染率与ＨＢｓＡｂ阳性率为ＨＢＲＡ高于ＣＡ（Ｐ＞０．０５）。结论提示长期低水平电离辐射作用机体免疫功能有增强的趋势。     

KINETICS OF PLASMA ENDOTOXIN,TNF AND IL-6 AND THEIR CORRELATION AFTER TRAUMATIC SHOCK IN RABBITS

ＫＩＮＥＴＩＣＳＯＦＰＬＡＳＭＡＥＮＤＯＴＯＸＩＮ，ＴＮＦＡＮＤＩＬ┐６ＡＮＤＴＨＥＩＲＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＡＦＴＥＲＴＲＡＵＭＡＴＩＣＳＨＯＣＫＩＮＲＡＢＢＩＴＳＪＩＡＮＧＪｉａｎ－ｘｉｎ（蒋建新），ＴＩＡＮＫｕｎ－ｌｕｎ（田昆仑），ＣＨＥＮＨｕ...     

截肢伤小鼠巨噬细胞对T细胞的直接接触抑制作用

利用小鼠截肢伤模型，观察创伤小鼠巨噬细胞对Ｔ细胞的直接接触抑制作用。结果显示：以２５μｇ／ｍｌ的丝裂霉素Ｃ处理巨噬细胞３０ｍｉｎ，可阻断巨噬细胞白介素１（ＩＬ－１）、白介素６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的合成与分泌。创伤小鼠巨噬细胞经丝裂霉素Ｃ处理后，可明显抑制正常Ｔ淋巴细胞转化活性、白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒα）ｍＲＮＡ水平、ＩＬ－２     

白细胞介素-10和地塞米松对人外周血单个核细胞核因子-κB活化及肿瘤坏死因子产生的影响

为观察白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）和地塞米松（Ｄｅｘ）对核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）的活化及α肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）释放的影响,采用分离培养的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,分为正常对照组、脂多糖（ＬＰＳ）刺激组、ＩＬ－１０ 和Ｄｅｘ 干预组。用凝胶电泳迁移率改变分析法（ＥＭＳＡ）检测ＰＢＭＣ核提取物中ＮＦ－κＢ的活性,ＥＬＩＳＡ法检测培养上清中ＴＮＦα的含量。结果发现,ＬＰＳ刺激后１ｈ ＮＦ－κＢ活性显著高于正常对照组（Ｐ＜ ０．０１）,ＴＮＦα的释放显著增加（Ｐ＜ ０．０１）;ＩＬ－１０、Ｄｅｘ 显著抑制ＮＦ－κＢ活性（Ｐ＜ ０．０１） ,也显著抑制ＴＮＦα的释放。提示抑制ＮＦ－κＢ激活和ＴＮＦα的产生可能是ＩＬ－１０ 和Ｄｅｘ 发挥抗炎作用的重要机制之一     

低剂量辐射对小鼠脾脏和胸腺Ⅰ型和Ⅱ型辅助性T细胞...

目的 研究低剂量辐射Ⅰ型辅助Ｔ细胞和Ⅱ型辅助性Ｔ细胞的影响，揭示低剂量辐射使Ｔｈ激活的分子机理。方法 采用分子杂交方法，检测Ｘ射线全身照射后小鼠脾脏和胸腺细胞ＩＦＮ－γ和ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果 ７５ｍＧｙＸ射线全身照射后小鼠脾脏和胸腺ＩＦＮ－γ和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达水平明显增高。结论低剂量辐射射诱Ｔｈ１和Ｔｈ２矩形其分子机理调节Ｔｈ１，Ｔｈ２克隆发育的细胞因子的基因表达有关。     

马尔堡病毒GP蛋白高抗原性片段筛选及免疫性研究

目的 从马尔堡病毒GP蛋白上寻找与GP免疫原性相当的小片段用于疫苗设计,以克服全长蛋白缺陷.方法 基于GP(aa:1～681)结构及功能分区,构建3个片段[GP1△(aa:25～239)、GPM(aa:250～520)、GP2△(aa:436～648)],经原核表达后免疫小鼠,不同时间检测血清特异抗体滴度,检测脾淋巴细胞增殖指数及测定细胞因子浓度.结果 ELISA检测结果显示,GP2△组与GP混合组(GP1△+ GPM+GP2△)产生体液免疫能力相当,明显高于GP1△与GPM组(P<0.05);ConA非特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的SI值高于GP混合组(P<0.05),GP混合组特异刺激后,GP2△组脾淋巴细胞的刺激指数(SI)值低于GP混合组(P<0.05);细胞因子检测中,GP2△组的白细胞介素2(IL-2)及干扰素γ(IFN-γ)浓度均高于对照组,低于GP混合组(P<0.05).结论 马尔堡病毒GP2△片段免疫小鼠能诱导与完整GP蛋白相当的体液免疫,同时也能诱导一定的细胞免疫, 可用来替代完整GP用于疫苗设计.     

白细胞介素2与狂犬疫苗联合免疫小鼠的抗体动态观察

组织培养制备的狂犬病毒灭活疫苗与重组白细胞介素２同时免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠和Ｓｗｉｓｓ鼠，检测不同时间的鼠血清中抗狂犬病毒ＩｇＧ抗体和中和抗体效价。结果显示，在白细胞介素２的作用下，抗体产生的时间提前，抗体效价提高（Ｐ＜０．０１），ＢＡＬＢ／ｃ鼠和Ｓｗｉｓｓ鼠比较，前者的抗体效价更高（Ｐ＜０．０１）。说明白细胞介素２可以提高小鼠的体液免疫反应。     

白细胞介素12真核表达载体对DNA疫苗诱导免疫应答的影响

目的 观察白细胞介素１２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法 肌肉注射ＤＮＡ疫苗主白细胞介素１２真核表达载体,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果：对     

多脏器功能不全综合征小鼠IL-12的表达及其在免疫失衡中的作用

目的　探讨多脏器功能不全综合征 (MODS)小鼠在伤后不同时相IL 12水平的变化趋势及其与创伤后免疫失衡的关系。方法　选择 6～ 8周龄雄性C5 7BL/ 6小鼠 96只 ,随机分为正常组 ,伤后 3h、1、3、7和 12天组。腹腔注射酵母多糖复制MODS动物模型 ,用Powervision法行脾脏IL 12p40的免疫组织化学标记 ,采用ELISA法分别检测血清与脾脏组织匀浆上清中IL 12 p40和IL 12 p70的水平 ,流式细胞术检测外周血T细胞亚群。结果　在MODS病程早期和晚期的“两次打击”中 ,小鼠脾脏与血清中IL 12p40含量显著增高 ,IL 12p70相对减少 ,同时伴有外周血CD4/CD8比值下降。结论　MODS小鼠发生免疫抑制可能与免疫器官中抗原提呈细胞高表达IL 12p40有一定相关性。     

嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗在小鼠体内的免疫保护作用

目的：评价嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗在小鼠体内的免疫保护性。方法利用甲醛制备嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗并免疫小鼠，检测其抗体效价达到要求后，通过体外健康人血调理杀伤实验以及体内攻毒实验评价全菌灭活苗的保护作用。结果在第二次加强免疫后，免疫组血清中特异性IgG滴度显著增加，其抗血清在体外具有明显的调理杀伤能力；在体内的攻毒实验中也具有显著的保护作用。结论灭活的嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活苗可刺激诱导动物产生体液免疫应答，使小鼠产生有效的免疫保护作用，为进一步探讨嗜麦芽窄食单胞菌全菌灭活疫苗奠定了良好的实验基础。     

利用DNA免疫建立分泌登革2型病毒E蛋白单抗的杂交瘤细胞系

目的:利用DNA免疫建立分泌登革2型病毒E蛋白特异单抗的杂交瘤细胞系,为研究E蛋白的结构和功能及其抗原表位提供新手段.方法:以构建的病毒全长prM-E基因的真核重组质粒DNA作为免疫原,免疫BALB/c小鼠后将其脾细胞和SP2/0瘤细胞融合,通过IFA、间接ELISA和空斑减少中和试验对杂交瘤细胞系进行筛选和鉴定.结果:获得了4株分泌登革2型病毒E蛋白单抗的杂交瘤细胞系(2B4,6B4,4C10和2D5),它们结合的抗原表位均位于E蛋白Ⅲ区,其中4C10对登革2型病毒具有中和活性.这些单抗与登革1、3和4型病毒有强的交叉反应,但与黄病毒其他成员反应较弱.结论:DNA免疫法可用于分泌登革2型病毒E蛋白特异单抗的杂交瘤细胞系的建立,该结果有利于登革病毒E蛋白特异抗原表位的研究及新的登革病毒诊断试剂的研制.     

Effect of radiation on tumor-specific delayed-type hypersensitivity (DTH) response in mice

Delayed-type hypersensitivity (DTH) response is generally considered as one of major mechanism of anti-tumor immunity in vivo. We studied the effect of radiation on the immune spleen cells mediating tumor-specific DTH response based on an local adoptive transfer system. The spleen cells from C3H mice which were immunized with syngenic MH134 hepatoma cells were employed for the effector cells. The immune spleen cells were irradiated in vitro. Then the spleen cells and mitomycin C (MMC)-treated MH134 cells were mixed and inoculated into the hind footpad of normal C3H mice. Twenty-four hours later, the thickness of the footpad was measured with micrometer and increase in the footpad thickness was calculated comparing with a value before the inoculation. Irradiation with 4 Gy-12 Gy did not affect the DTH response. Then irradiation over 16 Gy dose dependently decreased the DTH response. Irradiation with 20 Gy decreased the DTH response about 50% and 28 Gy abolished the response to a control level. As two types of cells, antigen specific effector T cells and non-specific effector cells such as macrophages, are required to induce DTH response, we studied which type of cells is suppressed by irradiation. Non-irradiated normal spleen cells as a source of non-specific effector cells were added into the irradiated immune spleen cells. The addition of normal spleen cells to 20 Gy irradiated immune spleen cells recovered the DTH response to a control level of non-irradiated group. The other hand, the addition of normal spleen cells to 32 Gy irradiated immune spleen cells failed to recover the DTH response.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

登革3型病毒NS1基因重组质粒DNA的构建及其免疫原性观察

目的：构建登革3型病毒NS1基因的真核重组表达质粒，观察其免疫原性，为登革新型疫苗的研究提供依据。方法：从感染鼠脑中提取登革3型病毒RNA，经RT－PCR获得NS1基因片段，然后将其克隆到真核表达载体中。用电穿孔法将重组质粒NDA转入COS7细胞，通过免疫荧光法检测外源基因在真核细胞中的表达，将重组质粒DNA免疫BALB／c小鼠，观察其免疫原性。结果：通过酶切鉴定和序列测定证实了NS1基因片段已经插入真核表达载体，用免疫荧光法证明转染了重组质粒的COS7细胞的胞浆中有特异荧光。重组质粒DNA免疫小鼠后可观察到诱发产生的细胞免疫应答。结论：含有登革3型病毒NS1基因的真核重组表达质粒可以在COS7细胞中进行表达，而且能够诱导小鼠产生细胞免疫应答。     

Influence of whole body irradiation on intraperitoneal immunity in a syngeneic mouse lymphoma system.

DBA/2 mice were immunized against the syngeneic SL2 lymphoma by two injections with irradiated lymphoma cells or by two injections with irradiated cells followed by one injection with unirradiated cells. Whole body irradiation (500 rad) of the immunized mice caused a significant decrease in the number of peritoneal macrophages and lymphocytes. The spleen weight showed a transient decrease. However, whole body irradiation did not cause a significant decrease of the survival time of immunized mice challenged intraperitoneally with SL2 lymphoma cells.     

增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）自身增强子I（enhancerI，ENHI）对HBV DNA疫苗免疫应答的影响。方法 采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原（HBsAg）和HBsA-ENHI基因片段，重组到载体VR1012中，构建两种HBV DNA疫苗，转染CADS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB／c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果 转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHI的HBV DNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高，两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异；免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHI可使HBV DNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加，对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB／C小鼠引起的免疫应答无明显影响。