蛇床子素对新生大鼠颅盖骨成骨细胞功能的调节作用

目的　研究蛇床子素对成骨细胞功能的影响。方法　原代培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞 ,3H 胸腺嘧啶掺入法测定成骨细胞的增殖 ;Griess试剂法测定培养上清中NO的含量 ;小鼠胸腺细胞增殖法测定IL 1的含量 ;B9细胞增殖法测定IL 6的含量 ;RT PCR法检测IL 6的mRNA的表达。结果　蛇床子素抑制成骨细胞自发地或在炎性细胞因子及LPS刺激下产生NO、IL 1及IL 6和IL 6mRNA表达。结论　蛇床子素通过减少NO、IL 1和IL 6的分泌而调节成骨细胞的功能     

参麦注射液对培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响和机理研究

目的 研究参麦注射液对血管平滑肌细胞增殖的影响和机理。方法 以培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞为模型，通过细胞计数及测量3H-胸腺嘧啶核苷掺入量观察细胞增殖情况，同时测定培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、脂质过氧化物、前列环素(PGI2)的含量，比较分析加入不同剂量参麦注射液后上述指标的变化和相互关系。结果 不同剂量参麦注射液组的平滑肌细胞增殖及3H—胸腺嘧啶核苷掺入量均显著低于对照组，SOD活性及PGI2含量显著高于对照组，脂质过氧化程度显著降低。结论 参麦注射液对血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用，并呈剂量依赖关系，其作用可能与增加SOD活性、降低脂质过氧化物水平，升高PGI2／TXA2有关。     

雌激素促进人的类成骨细胞TE85成骨作用的受体机制

目的：研究雌激素促进人的类成骨细胞株TE85细胞骨形成的作用。方法：用³H-胸腺嘧啶、³H-脯氨酸参入法分别测定细胞的增殖和胶原合成; 紫外分光光度法测定细胞内骨碱性磷酸酶（ALP）活性; 放免法测定细胞内骨钙素（BGP）含量; 放射配基法测定细胞核雌激素受体结合。结果：雌激素（E₂, 0.01～1.0 nmol.L^-1）可浓度依赖地刺激TE85细胞的³H-胸腺嘧啶和³H-脯氨酸的参入量; 在相同的时间点和剂量下,可增加成骨细胞内ALP活性和BGP的含量。结论：E₂通过增加成骨细胞数量、促进细胞胶原蛋白及ALP和BGP的合成而促进成骨作用,这些作用是通过雌激素受体介导的。     

α_(1A)-和α_(1B)-肾上腺素受体介导HEK293细胞增殖和Ca~(2 )-钙调蛋白依赖性蛋白激酶激活(英文)

目的:研究α_1-AR三种亚型对细胞增殖和Ca~(2 )-钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CCDPK)的作用。方法:采用磷酸钙沉淀法进行转染,用放射配基结合实验测定α_1-AR表达量。用[~3H]胸腺嘧啶参入量测定细胞增殖,用免疫沉淀和髓鞘蛋白底物法测定CCDPK的活性。结果:三株表达α_(1A)-,α_(1B)-和α_(1D)-AR的细胞株表达受体密度约为0.6 nmol·g~(-1)。在普萘洛尔存在下,去甲肾上腺素(NE)作用24 h可浓度依赖地刺激HEK293/α_(1A)-AR和HEK293/α_(1B)-AR细胞DNA合成。NE 10 μmol·L~(-1)可促进HEK293/α_(1A)-AR和HEK293/α_(1B)-AR细胞DNA合成增加,刺激CCDPK活性的升高。NE不引起HEK293/α_(1D)-AR细胞DNA合成和CCDPK活性的显著改变。结论:在转染α_1-AR亚型的HEK293细胞中激动α_(1A)-或α_(1B)-AR可引起细胞增殖,激动α_(1D)-AR则无显著改变。     

17β-雌二醇对人的类成骨细胞株TE85和U2功能的调节

目的：以人的类成骨细胞株TE85和U2为细胞模型，观察雌激素对细胞功能的影响。方法：³H-胸腺嘧啶参入法测细胞增殖；ELISA法测细胞因子IL-6含量；精氨酸转化法测iNOS活性。结果：IL-1(20 U.mL^-1)和TNFα(50 U.mL^-1)刺激细胞分泌IL-6，并抑制细胞增殖。在TE85细胞，17β-雌二醇(E₂)可抑制IL-6分泌并能对抗IL-1和TNFα对细胞增殖的影响。NOS抑制剂L-NMMA使细胞³H-胸腺嘧啶的参入降低，E₂(1 nmol.L^-1)可对抗L-NMMA的抑制作用。结论：E₂通过减少IL-6分泌和影响iNOS活性而调节细胞功能。     

黄芪抑制血管平滑肌细胞增殖及其作用机制

目的 观察黄芪(AS)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用，了解黄芪是否通过刺激VSMC产生一氧化氮(nitric oxide，NO)，使细胞周期停滞于G0／G1期，从而抑制平滑肌细胞增殖。方法 [3H]-胸腺嘧啶核苷酸([3H]-TdR)掺入测定VSMCDNA合成，流式细胞仪检测细胞周期情况，硝酸还原酶法测定细胞培养上清中NO水平。结果 黄芪以剂量依赖关系抑制血清诱导的VSMC[3H]-胸腺嘧啶核苷酸掺入，使G0／G1期细胞比例明显增多，S期细胞比例显著减少，黄芪刺激VSMC后，细胞培养上清中NO水平呈剂量依赖上升。结论黄芪能抑制VSMC增殖，使细胞周期停滞于G0／G1期，这一过程可能与黄芪刺激VSMC产生NO有关。     

芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成及iNOS表达的影响

目的观察芦荟大黄素(aloe-emodin)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的作用。方法采用LPS诱导的RAW264.7细胞株建立细胞炎症反应模型。采用Griess试剂法测定NO释放量;采用硝普钠释放NO法测定NO自由基含量的变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析iNOS mRNA表达改变。结果芦荟大黄素在0.69～2.50mg·L-1剂量范围内可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,并呈剂量和时间依赖关系;芦荟大黄素在0.63～5.00mg·L-1剂量范围内可下调LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA含量;而此范围内芦荟大黄素无直接清除NO自由基作用,不影响iNOS活性。结论芦荟大黄素可明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放,呈时间和剂量依赖关系,此作用并非通过捕捉NO或抑制iNOS活性来实现,而是通过抑制iNOS mRNA表达发挥作用的。     

尼卡地平升高小鼠胸腺细胞胞浆钙浓度(英文)

研究尼卡地平(nicardipine,Nic)对小鼠胸腺细胞胞浆钙浓度([Ca~(2 )]_i)及增殖的影响.方法:用Fura-2掺入细胞的荧光测定法测定[ca~(2 )]_i;用[~3H]thymidine掺入法测定胸腺淋巴细胞的增殖.结果:无论在含Ca~(2 )或无Ca~(2 )介质中,Nic 1—30 μmol·L~(-1),以浓度依赖的方式升高静息胸腺细胞的[Ca~(2 )]_i.丝裂原Con A 5 mg·L~(-1)也从细胞内库释放Ca~(2 ),而Nic抑制Con A引起的[Ca~(2 )]_i升高.在上述升高[Ca~(2 )]_i的浓度中,Nic不刺激静息胸腺淋巴细胞增殖,但显著抑制Con A的增殖反应.结论:Nic升高[Ca~(2 )]_i,干扰了细胞Ca~(2 )稳态,因而抑制淋巴细胞对丝裂原的反应.     

洛伐他汀对醛固酮诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨洛伐他汀对醛固酮诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法:采用胰酶消化法分离培养SpragueDawley大鼠心肌成纤维细胞,以3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)掺入法、四氮唑蓝比色法和流式细胞仪观察洛伐他汀对醛固酮诱导心肌成纤维细胞增殖的DNA合成、细胞数目和细胞周期的影响。结果:(1)0.1,1,10μmol·L-1浓度的洛伐他汀抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞3HTdR掺入率和A490值,其中1,10μmol·L-1组的3HTdR掺入率[(1292±s152),(1030±163)counts·min-1]和A490值[(0.287±0.008),(0.231±0.007)]显著低于对照组、0.1和0.01μmol·L-1组(P<0.01);(2)洛伐他汀可增加G0/G1期细胞百分率,降低S期细胞百分率、增殖指数和DNA含量;(3)甲羟戊酸可逆转洛伐他汀的上述作用。结论:洛伐他汀可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及DNA合成,阻止其由G1期进入S期,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关。     

二噁英对成骨肉瘤细胞增殖和胰岛素样生长因子2表达的影响

目的探讨环境类致癌因子二噁英(TCDD)对成骨肉瘤细胞增殖及胰岛素样生长因子2(IGF-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法TCDD作用于人成骨肉瘤细胞SaOS-2细胞株24~48h。MTT法检测细胞增殖率;对硝基酚磷酸盐法测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-PCR半定量分析细胞IGF-2 mRNA的表达;Western蛋白质印迹法测定细胞IGF-2和丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路中p38 MAPK蛋白表达及其磷酸化水平。结果与对照组比较,TCDD 1,10和100nmol·L-1作用48h,使SaOS-2细胞内ALP活性分别增加38%,95%和142%。TCDD 1,10及100nmol·L-1作用24h后,SaOS-2细胞存活率分别增加21%,47%和56%,细胞内IGF-2 mRNA和IGF-2蛋白表达均增加。TCDD对SaOS-2细胞内p38 MAPK蛋白表达无明显影响,但明显降低其磷酸化水平。结论TCDD具有促进SaOS-2细胞增殖的作用。TCDD可能通过促进SaOS-2细胞内IGF-2的表达,并抑制MAPK信号通路中转录因子p38 MAPK活性而促进细胞增殖。     

17β-雌二醇对人成骨细胞株HOS TE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对ＨＯＳＴＥ８５细胞增殖及胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ影响。方法［３Ｈ］－ＴｄＲ参入，放射免疫及Ｌ－３Ｈ－精氨酸转化法。结果Ｅ２１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理４８ｈ，细胞计数为（９４．３×１０７±７．５×１０７）个·Ｌ－１，对照组为（６５．０×１０７±５．９×１０７）个·Ｌ－１，［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量增加４５．０％；细胞ｉＮＯＳ活性为（７３．０±６．６）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·ｇ－１·ｍｉｎ－１（比对照组增加４６１．５％），ｃＧＭＰ为（０．６９±０．０３）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·１０－８ｃｅｌ（比对照组增加３０５．９％）；抑制ｈＰＴＨ诱导胞内ｃＡＭＰ升高。结论Ｅ２能刺激成骨细胞增殖。Ｅ２可能通过影响胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ含量和活性而发挥作用。     

17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85 45Ca摄取及间质矿化

目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E₂)对HOS TE85细胞骨形成的长时程效应。方法³H-胸腺嘧啶参入法(³H-TdR)测细胞增殖;⁴⁵Ca沉积法测细胞钙摄取;茜素红染色法测间质矿化。结果E₂(0.1～10 nmol·L^-1)作用14 d剂量依赖地刺激细胞³H-TdR参入、增加⁴⁵Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI182,780(1.0 nmol·L^-1)能部分抑制E₂作用,使其³H-TdR参入分别减少了36.56%,19.6%和15.4%,⁴⁵Ca的摄入则分别减少了22.27%,37.28%和40.1%,茜素红染色面积减少。结论E₂通过增加细胞数量、增加钙摄入而促进骨间质生成和矿化。     

木豆叶提取物对人的类成骨细胞TE85成骨功能和体外破骨细胞分化的影响

木豆素是从天然植物木豆叶中提取的单体化合物，结构类似乙烯雌酚。本文观察木豆素及4种木豆叶提取物总成分(32-1，35-1，35-2和35-3)对人的类成骨细胞HOS TE85成骨功能、间质矿化及体外破骨细胞分化的影响。以木豆叶提取物作用于细胞48 h，观察细胞增殖、³H-脯氨酸掺入量及碱性磷酸酶活性；用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察体外破骨细胞形成；作用于细胞18 d，用茜素红染色法观察细胞间质矿化。结果表明，作用于细胞48 h后，木豆素可促进细胞增殖，在1×10^-8 g·mL^-1时细胞数增加57.7%，³H-脯氨酸掺入量增加98.5%。35-1和35-3还可明显增加碱性磷酸酶活性。长时程作用后，32-1和35-3可明显增加成骨细胞间质矿化程度。木豆素(1×10^-7 g·mL^-1)对破骨细胞形成有明显的抑制作用，抑制率为22.8%，32-1(1×10^-7 g·mL^-1)的抑制率为37.9%。木豆素及木豆叶提取物都具有刺激成骨细胞骨形成、促进细胞间质矿化及抑制破骨细胞形成的活性，提示木豆素在骨细胞上有类雌激素样作用，具有抗骨质疏松新药的研究前景。     

骨靶向新化合物四环素 哌嗪雌酚酮的雌激素活性测定

为寻找副作用小而有抗骨质疏松作用的雌激素衍生物,用雌激素受体结合竞争抑制实验,小鼠阴道细胞学实验,幼雌小鼠子宫重量法分别研究了骨靶向新化合物四环素-哌嗪雌酚酮(XW630)的雌激素活性。结果表明:XW630与子宫组织雌激素受体的相对亲和力为0.011,而雌酚酮与雌二醇分别为0.325及1.000。XW630的雌激素活性指数及细胞学实验均表明XW630的雌激素活性明显小于雌酚酮及雌二醇。提示有抗骨质疏松活性的XW630由于其雌激素活性低,值得进一步研究。     

C-type natriuretic peptide inhibits rat mesangial cell proliferation by a phosphorylation-dependent mechanism

We studied the effects of C-type natriuretic peptide (CNP) on rat cultured mesangial cell proliferation. (1) Exposure to CNP (10 nM–1 μM for 72 h) inhibited [³H]thymidine incorporation into mesangial cells in a concentration-dependent manner. Atrial natriuretic peptide (1 nM–1 μM), a peptide related to CNP, also decreased [³H]thymidine incorporation into these cells in a concentration-dependent manner. (2) Both CNP (10 nM-1 μM) and atrial natriuretic peptide (10 nM-1 μM) also decreased mesangial cell number. (3) The cyclic GMP analog, 8-bromo-cyclic GMP (100 μM and 1 mM), mimicked the inhibitory effects of CNP and atrial natriuretic peptide on [³H]thymidine incorporation into mesangial cells, whereas inhibitors of protein kinase C, protein kinase A, and protein kinase G reduced the effect of both natriuretic peptides. Moreover, the phoshpatase inhibitor, calyculin A, increased [³H]thymidine incorporation into mesangial cells. (4) CNP and atrial natriuretic peptide decreased interleukin-1-, interleukin-6-, platelet derived growth factor-, angiotensin II-induced [³H]thymidine incorporation into mesangial cells. These results suggest that CNP exerts inhibitory effects on mesangial cell proliferation and that this effects depend on protein phosphorylation pathways. Received: 17 March 1997 / Accepted: 29 August 1997     

曲匹地尔阻抑内皮素—1诱导的培养大鼠主动脉平滑肌细胞增生

AIM: To study the effect of trapidil (Tra) on endothelin-1-induced proliferation of cultured rat aortic vascular smooth muscle cells (VSMC). METHODS: The [3H]TdR incorporation into DNA assay, the number of VSMC, and cell cycle distribution were measured. RESULTS: Pretreated with endothelin-1 100 nmol.L-1, cell number, [3H]TdR uptake, and cell mitogenic activity increased 134% +/- 23%, 210% +/- 70%, and 86% +/- 18%, respectively. This proliferation was inhibited by Tra 5, 50, 500 mumol.L-1. The inhibitory rates were 12%-48%, 35%-54% and 15%-47%, respectively. Tra did not influence the proliferation of VSMC without endothelin-1 pretreatment. CONCLUSION: Tra antagonized the proliferation of VSMC induced by endothelin-1.     

前胡丙素对牛主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨前胡丙素(pra-C)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响 方法:细胞DNA的合成量由~3H-胸腺嘧啶核苷[~3H]TdR)掺入试验测定,应用流式细胞术测定细胞周期,用乳酸脱氢酶活性测定观察药物的毒性.结果:无论有无血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),在0.01μmol/L到10μmol/L浓度范围内,pra-C均可呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖,抑制作用主要与阻止细胞进入有丝分裂期有关,而与细胞毒性无关.结论:pra-C能够完全阻断Aug Ⅱ诱导SMC的增殖效应,部分阻止小牛血清诱导的细胞分裂,这对于血管增生性疾病的防治有重要意义.     

XW630对去卵巢大鼠骨质疏松的作用(英文)

目的:研究XW630对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法:血清E_2和骨钙素(BGP)浓度用放射免疫测定法。骨组织计量学用四环素内标法。结果:去卵巢后,血清E_2水平下降61.9％,子宫减轻72.7％,动情次数减少63.6％。XW630治疗13周后,血清BGP浓度增加75.7％,动情次数略增加,但低于假手术组,血清E_2浓度及子宫重量无明显变化。与OVX组相比,XW630组骨组织计量学指标TBV/TTV,TBV/SBV和MTPD增加;Sfract(s),Sfract(d),TOS和Svf增加,OMP缩短。结论:XW630增加骨激活频率、骨小梁连接性、稳定性和张力。表明XW630促进骨形成、抑制骨吸收,对生殖系统无影响。