两种木贼提取物对AS大鼠平滑肌增殖凋亡及P_(53)的干预

目的:研究木贼正丁醇提取物及提取剩余物对大鼠动脉粥样硬化早期主动脉平滑肌细胞增殖、凋亡及突变型P53表达的影响。方法:选用雄性SD大鼠,复制食饵性动脉粥样硬化早期模型,用木贼提取物、提取剩余物分别预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。实验9周,流式细胞术定量检测主动脉平滑肌细胞增殖指数、凋亡率及突变型P53的表达。结果:木贼正丁醇提取物及提取剩余物预防性给药可降低平滑肌增殖指数,减少突变型P53表达,升高其凋亡率。结论:两种木贼提取物均可降低突变型P53表达,促进AS早期平滑肌凋亡,抑制其增殖,具有阻断AS早期病变进展的作用。     

木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白致内皮细胞凋亡及Caspase-3的表达

目的探讨木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC-ECV304)凋亡的可能机制。方法体外ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤,用木贼有效部位进行干预;采用流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3蛋白;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞Caspase-3mRNA表达。结果 ox-LDL可明显诱导内皮细胞凋亡,上调Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达,木贼有效部位干预后细胞凋亡率明显下降(P0.05),Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达明显下调(P0.01)。结论木贼有效部位通过对凋亡相关基因的调控最终抑制Caspase-3蛋白的表达来减少内皮细胞的凋亡。     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

沥水调脂胶囊对氧化型低密度脂蛋白影响内皮细胞Bcl-2、Bax、p53和caspase-3蛋白表达的调节

目的：研究沥水调脂胶囊抑制氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡的机制。方法：沥水调脂胶囊舍药血清和ox-LDL与人脐静脉内皮细胞(hUVEC)共同孵育15h，用免疫荧光标记结合流式细胞仪分别测定Bcl—2、Bax、p53和caspase-3蛋白表达量。结果：发现ox-LDL可使hUVEC Bcl—2蛋白表达降低，Bax、p53和caspase-3蛋白表达量升高，而沥水调脂胶囊可使ox-LDL对Bcl-2、p53和caspase-3的上述作用明显减弱，但对Bax未见明显影响。结论：沥水调脂胶囊抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡，可能是从正反两个方面、多条途径调节与凋亡密切相关的基因表达以及保护细胞结构功能有关。     

白附子提取物抑制人胃癌 SGC-7901 细胞增殖及诱导凋亡的机制研究

 目的 探讨白附子提取物对人胃癌 SGC-7901 细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及其可能机制。 方法 分别采用噻唑蓝（ MTT ）法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、光镜观察细胞结构变化、 Hoechst33342/PI 荧光染色检测细胞凋亡、 Western blotting 法检测 caspase-3 、 Bax 和 Bcl-2 蛋白表达。 结果 0.072~7.2 mg · L^-1 白附子提取物处理 24 h 后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;光镜下可观察到细胞凋亡形态的改变; Western blotting 结果显示,半胱氨酸蛋白酶（ caspase-3 ）酶原蛋白的激活, Bcl-2 蛋白表达的降低和 Bax 蛋白表达上调。 结论 白附子提取物通过影响 SGC-7901 细胞的增殖、周期和凋亡相关蛋白的表达发挥凋亡诱导作用。     

龙葵碱调控p-AKT、Cleaved caspase-3和p53蛋白表达抑制卵巢癌细胞增殖实验研究

目的:研究龙葵碱调控磷酸化蛋白激酶B((Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、Cleaved caspase-3和p53蛋白表达抑制卵巢癌细胞增殖诱导其凋亡。方法:将SKOV3卵巢癌细胞分为模型对照组、龙葵碱15μmol/L、龙葵碱10μmol/L、龙葵碱5μmol/L组,同时选择正常卵巢细胞作为正常对照组,并进行培养。使用倒置显微镜观察卵巢癌细胞的形态,使用MTT法、流式细胞仪、蛋白质印迹法(Western blot)检测不同浓度龙葵碱对卵巢癌细胞的增殖率、细胞凋亡及Cleaved caspase-3和p53蛋白表达。结果:倒置显微镜观察SKOV3卵巢癌细胞形态,随着龙葵碱的浓度越高,细胞凋亡的形态学表现越明显。正常对照组的细胞凋亡率和细胞增值率显著低于其他各组,具有统计学差异(P<0.05)。随着时间的延长和药物浓度的提高SKOV3卵巢癌细胞的生长抑制作用越来越显著,与模型对照组相比,具有统计学意义(P<0.05)。模型对照组p-AKT、Cleaved caspase-3的表达显著低于龙葵碱5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L组,正常对照组低于模型对照组,龙葵组p53蛋白显著高于模型对照组,正常对照组p53蛋白低于卵巢癌组,有统计学意义(P<0.05)。龙葵碱5μmol/Lp-AKT、Cleaved caspase-3的表达显著低于龙葵碱10μmol/L、15μmol/L组,p53蛋白表达高于其他两组浓度,随着龙葵碱浓度的升高,p-AKT、Cleaved caspase-3表达逐渐升高,p53蛋白表达逐渐降低,有统计学差异(P<0.05)。结论:龙葵碱可能通过调控p-AKT、Cleaved caspase-3和p53蛋白的表达而抑制SKOV3卵巢癌的增殖能力,诱导其凋亡,其能力呈现浓度依赖。     

吴茱萸碱对人胃癌BGC-823细胞增殖的影响及分子机制研究

目的:研究观察吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,PI单染、Annexin V/APC+7AAD双染流式细胞术分析吴茱萸碱对胃癌BGC-823细胞周期和细胞凋亡的影响;采用Western-blot检测细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白表达变化。结果:CCK-8结果表明,与对照组相比,吴茱萸碱能显著抑制胃癌BGC-823细胞的增殖活性,并且呈时间-剂量依赖性;流式细胞术分析显示10μM吴茱萸碱处理细胞24h后,能显著地将其阻滞于G_2/M期,诱导BGC-823细胞凋亡,并且主要是早期凋亡。Westernblot结果显示,吴茱萸碱处理BGC-823细胞后能下调细胞周期,促进蛋白Cdc25C的表达,促进细胞周期抑制蛋白p53的表达水平上升,并能上调细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved PARP-1的表达,且呈时间依赖性。结论:吴茱萸碱可能是通过下调Cdc25C的表达和促进p53的表达使细胞周期阻滞于G_2/M期,又通过上调cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved PARP-1的表达诱导细胞凋亡,抑制胃癌BGC-823细胞增殖。     

复元胶囊对实验性骨关节炎软骨细胞凋亡和P53、caspase-3 mRNA表达的影响

目的:观察复元胶囊对大鼠膝骨关节炎模型软骨细胞凋亡及P53、caspase-3 mRNA表达的影响,探讨其治疗骨关节炎的作用机制。方法:采用Hulth法建立大鼠膝骨关节炎动物模型,4 w后给与壮骨关节丸、复元胶囊灌胃。8 w后取大鼠膝关节软骨作透射电镜观察细胞超微结构,原位末端标记法(TUNEL法)检测软骨细胞凋亡,逆转录/聚合酶链反应(RT-PCR)法检测P53、caspase-3 mRNA的表达。结果:复元胶囊能抑制骨关节炎软骨细胞过度凋亡,减少凋亡基因P53和凋亡执行因子caspase-3 mRNA的表达。结论:复元胶囊通过减少凋亡基因P53和凋亡执行因子caspase-3 mRNA的表达而抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡。     

荔枝核提取物L2.3对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用及机制

目的:探讨荔枝核提取物对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的增殖抑制及至凋亡机制。方法:采用MTT法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞形态改变;流式细胞术测定细胞凋亡率、细胞周期的变化及Fas的表达;活性检测试剂盒测定样品对细胞caspase活性的影响。结果:荔枝核提取物L2.3对SH-SY5Y细胞的增殖抑制活性呈时间、剂量双重依赖性,细胞内可见染色质固缩,出现凋亡小体。细胞凋亡率于处理48 h后显著增高,G0/G1及G2/M期细胞减少,S期细胞增多,Fas的表达明显增高,caspase-3、8、9的活性均时间依赖性地增高。结论:荔枝核提取物L2.3可通过诱导细胞凋亡、影响细胞周期分布而抑制SH-SY5Y细胞增殖,caspase-3、caspase-8、caspase-9及Fas蛋白可能参与了L2.3诱导SH-SY5Y细胞凋亡的通路。     

甘木通乙酸乙酯提取物对低糖缺氧诱导的神经细胞的保护作用

目的 研究甘木通乙酸乙酯提取物对低糖缺氧诱导神经细胞凋亡的保护作用.方法 PC12细胞结合物理缺氧方式建立缺血性中风的细胞模型,CCK-8检测细胞活性,测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出分析细胞膜完整性,流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,JC-1法测定细胞内线粒体膜电位,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达,检测SOD、MDA水平分析甘木通乙酸乙酯提取物的抗氧化能力.结果 与模型组比较,甘木通乙酸乙酯提取物可以有效提高缺氧PC12细胞的存活率(P<0.01),降低LDH漏出量(P<0.01),提高线粒体膜电位,增加细胞内SOD水平,降低MDA水平,增加Bcl-2蛋白表达,减少Bax,cleaved caspase-3蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),降低细胞凋亡率.结论 甘木通乙酸乙酯提取物可抑制低糖缺氧诱导PC12细胞凋亡,该神经保护作用可能与细胞的线粒体凋亡途径有关.     

银杏叶提取物对高脂胆固醇喂饲家兔血管神经酰胺含量和泡沫细胞凋亡的影响

目的：观察预防性应用银杏叶提取物对家兔实验性动脉粥样硬化的形成、血管壁神经酰胺量和泡沫细胞凋亡的影响，探讨银杏叶提取物抗AS的作用及可能机制。方法：将24只新西兰家兔随机分为3组：正常对照组、高胆固醇组、银杏叶提取物组。分别给予普通饲料(正常对照组)和高胆固醇饮食(其它2组)喂养；银杏叶提取物组另预防性给予银杏叶提出物；实验结束后，运用图象分析法测定主动脉内膜脂质斑块面积百分比；用高效薄层层析扫描分析血管组织神经酰胺的变化；用Tunel法检测血管组织泡沫细胞的凋亡指数。结果：银杏叶提取物可明显缩小主动脉内膜脂质斑块面积，降低动脉组织神经酰胺浓度，减少血管壁泡沫细胞凋亡的数量。结论：银杏叶提取物具有较好的抗AS作用，神经酰胺与动脉粥样硬化形成和泡沫细胞凋亡有关。     

两种木贼提取物对AS早期大鼠血管平滑肌细胞形态学影响

目的研究木贼正丁醇提取物及提取剩余物对大鼠高脂血症及动脉粥样硬化早期主动脉平滑肌病变的影响。方法选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照、病理模型、阳性药、木贼正丁醇提取物、提取剩余物组。复制食饵性早期动脉粥样硬化模型,用木贼提取物预防性给药,以吉非罗齐为阳性药对照。实验9周,测定血脂,光镜及电镜下观察主动脉平滑肌细胞形态学变化。结果木贼正丁醇提取物及提取剩余物组血清TG,VLDL较模型组显著降低。提取物两组平滑肌病变较模型组明显减轻。结论木贼两种提取物均有降低血脂,影响动脉粥样硬化早期血管平滑肌细胞转型的作用。     

木犀草素预防高脂介导的小鼠胸主动脉血管内皮依赖性舒张功能损害

目的探讨木犀草素是否可以对抗高脂饮食介导的血管功能损害。方法 30只C57BL/6J小鼠分正常饮食对照组（10只）,高脂膳食组（对照组,10只）和高脂膳食加2%木犀草素组（木犀草素组,10只）,干预16周,观察：①血压水平的变化;②胸主动脉血管功能的变化及长期木犀草素预防性饮食干预对血管功能的影响。③木犀草素短期孵育对肥胖小鼠血管功能的影响及机制。结果①小鼠在给予高脂膳食16周后,血压水平显著高于正常饮食对照组及高脂饮食＋木犀草素组,P〈0.05。②长期高脂膳食损害小鼠胸主动脉的血管内皮依赖性舒张功能,P〈0.05;而木犀草素预防性膳食干预可防止血管内皮依赖性舒张功能的损害。③木犀草素孵育可改善高脂小鼠胸主动脉的内皮依赖性舒张功能,但该作用可被PPARγ的特异性阻断剂GW9662阻断。结论木犀草素可预防高脂膳食介导的小鼠胸主动脉血管内皮功能损害,该作用可能与激活PPARγ有关。     

淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠血清脂联素水平的影响

目的探索淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠血清脂联素水平的影响及其改善内皮细胞作用的可能机制。方法将SD大鼠随机分为高脂饮食组（26只）和对照组（9只）。高脂饮食组高脂饮食喂养12周后,随机分为模型组（8只）和低剂量淫羊藿总黄酮组（9只）、高剂量淫羊藿总黄酮组（9只）,灌胃相应药物4周后检测各组大鼠血脂水平并观察主动脉病理变化,采用ELISA法检测脂联素水平。结果与模型组比较,高、低剂量淫羊藿总黄酮组甘油三酯、总胆固醇水平降低（P〈0.05或0.01）,可明显减轻高脂饮食所致主动脉内皮损伤、内膜断裂,改善平滑肌增生,血清脂联素水平显著升高（P〈0.01）,并且高剂量组脂联素水平比低剂量组升高明显（P〈0.05）。结论淫羊藿总黄酮能够调节血脂,提高血清脂联素水平。这与淫羊藿总黄酮改善内皮功能、抗动脉粥样硬化有关。     

煦少火胶囊对家兔血脂和主动脉粥样硬化斑块的影响

目的：探讨煦少火胶囊抗AS的作用并为临床用药提供实验依据。方法：选择新西兰雄性大白兔40只，随机分为正常对照组、高脂造模组，8周后将成模的实验动物随机分为高脂模型组、煦少火组、通心络组、辛伐他汀组，分别给予普通饲料、高脂饲料、高脂饲料＋煦少火胶囊、高脂饲料＋通心络胶囊、高脂饲料＋辛伐他汀，继续喂养4周。实验结束后进行病理组织学及血脂各项指标观察。结果：①煦少火组TG、LDL较通心络组降低明显（P〈0．05）；HDL较通心络组、辛伐他汀组明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。②主动脉内膜斑块面积占整条主动脉内膜面积的比，煦少火组、通心络组、辛伐他汀组的程度轻于高脂模型组（P〈0．01）。结论：煦少火胶囊能明显改善AS家兔紊乱的脂质代谢，有效地减少脂质沉着、缩小斑块面积，保护动脉内皮细胞。     

黄芩苷抗肺炎衣原体致动脉内皮细胞损伤研究

目的:探讨肺炎衣原体(CPn)感染对主动脉内皮细胞的损伤作用及黄芩苷的干预作用。方法:小鼠随机分为黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、模型组、正常对照组。喂饲高胆固醇饲料1周后,经一侧鼻腔吸入含CPn的培养液,每周1次,共3次。最后1次接种5天后开始给药至实验结束,第1次接种后第18周处死全部动物。取主动脉检测血管反应性、电镜检测内皮细胞(EC)损伤和动脉粥样硬化斑块细胞凋亡。结果:模型组主动脉对内皮依赖舒张反应降低,细胞凋亡指数、内皮细胞损伤程度升高,3个给药组以上3个指标均趋向正常。结论:黄芩苷和阿奇霉素具有保护血管内皮细胞从而阻断AS发病过程的作用。     

Bee venom reduces atherosclerotic lesion formation via anti-inflammatory mechanism

The components of bee venom (BV) utilized in the current study were carefully scrutinized with chromatography. Despite its well documented anti-inflammatory property, there are no reports regarding the influence of BV on the expression of cellular adhesion molecules in the vascular endothelium. A great amount of information exists concerning the effects of an atherogenic diet on atherosclerotic changes in the aorta, but little is known about the molecular mechanisms and the levels of gene regulation involved in the anti-inflammatory process induced by BV. The experimental atherosclerosis was induced in mice by a lipopolysaccharide (LPS) injection and an atherogenic diet. The animals were divided into three groups, the NC groups of animals that were fed with a normal diet, the LPS/fat group was fed with the atherogenic diet and received intraperitoneal injections of LPS, and the LPS/fat + BV group was given LPS, an atherogenic diet and intraperitoneal BV injections. At the end of each treatment period, the LPS/fat + BV group had decreased levels of total cholesterol (TC) and triglyceride (TG) in their serum, compared to the LPS/fat group. The LPS/fat group had significant expression of tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-1β in the serum, compared with the NC group (p < 0.05). The amount of cytokines reduced consistently in the BV treatment groups compared with those in LPS/fat group. BV significantly reduced the amount of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and fibronectin in the aorta, compared with the LPS/fat group (p < 0.05). A similar pattern was also observed in the heart. In conclusion, BV has anti-atherogenic properties via its lipid-lowering and anti-inflammatory mechanisms.     

CRP与在体兔动脉粥样硬化相关性的研究及桑葚提取物的影响

目的探讨炎症敏感指标C－反应蛋白（CRP）与实验性高脂饮食新西兰兔动脉粥样硬化的相关性及桑葚提取物对其的影响。方法36只新西兰免随机分为6组,正常对照组给予普通饮食;模型组给予高脂饮食;血脂康阳性对照组予高脂饮食加血脂康;预防用药组将桑葚提取液与高脂饲料喂养新西兰兔,该组又分为低剂量组（1g／kg）、中卉j量组（5g／kg）,高剂量组（10g／kg）。于用药即刻、2周、4周、6周、8周末时测定血清CRP的含量,8周末杀兔取胸主动脉,测定动脉内膜的厚度确定动脉粥样硬化的程度。分析CRP与动脉内膜厚度的相关性。结果从实验第2周起与正常对照组相比模型组兔血清CRP含量显著升高（P〈0．01）,桑葚3个剂量组与模型组相比CRP含量显著降低（P〈0．01）;与正常对照组比较模型组动脉内膜显著增厚（P〈0．01）;与模型组相比桑葚3个剂量组动脉内膜的厚度显著减小（P〈0．01）;CRP浓度与动脉内膜厚度呈显著正相关（r=0．56,P〈0．01）。结论CRP与动脉粥样粥样硬化的形成呈正相关。桑葚提取物可有效降低高脂饮食新西兰免血清CRP的水平,从而抑制和延缓兔动脉粥样硬化的形成。     

银杏达莫注射液对糖尿病肾病微量白蛋白尿的影响

目的 探讨银杏达莫注射液对糖尿病肾病尿蛋白排泄率的影响.方法 选择糖尿病肾病患者90例分为A、B两组.A组为微量白蛋白尿组,B组为大量白蛋白尿组.两组均静脉滴注银杏达莫注射液15 ml,1次/d,4周为1个疗程,同时维持原降糖约物治疗,比较两组治疗前后尿蛋白的变化.结果 A组尿蛋白排泄率显著降低(P＜0.01).结论 银杏达莫注射液可降低尿微量白蛋白,对糖尿病肾病早期有一定治疗作用.