亚硒酸钠对体外培养人甲状腺细胞氧化损伤的影响

目的 研究硒对人甲状腺上皮细胞氧化损伤的影响.方法 取良性甲状腺腺瘤手术中的腺瘤旁正常甲状腺组织进行细胞培养.加硒(10-7mol/L)或不加硒后加入不同质量浓度H2O2(0～800μg/mL)刺激单层培养的甲状腺细胞,测定细胞膜GSH-Px活性和MDA含量变化.结果 经过H2 O2作用24 h的甲状腺细胞,其GSH-Px活力下降、MDA含量升高,并表现为浓度,效应关系.加入10-7mol/L硒预干预后,各组细胞呈GSH-Px活力升高、MDA含量下降.结论 硒对H2 O2引起的甲状腺细胞氧化损伤可能有保护作用.     

补阳还五汤提取液对Schwann细胞氧化损伤的保护作用

本实验建立了Schwann细胞的体外氧化损伤模型,从对Schwann细胞的抗氧化损伤作用探讨补阳还五汤的疗效机制。用原代培养的Schwann细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分为氧化损伤组,补阳还五汤处理组及正常组:(1)应用MTT方法检测细胞的活性;(2)应用生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量;(3)采用荧光探针Fluo-3-AM标记细胞,用激光共聚焦显微镜观察H_2O_2对Schwann细胞内游离钙([Ca2+])抗氧化损伤的影响。结果显示:与对照组相比,H2O2处理组细胞活性降低(P<0.01),SOD含量明显减少(P<0.01),而补阳还五汤预处理后细胞内[Ca2+]i升高明显被减弱(P<0.01),细胞存活率明显升高(P<0.01)。以上结果表明补阳还五汤能通过抗过氧化损伤保护Schwann细胞。     

胰岛素样生长因子-1对雪旺细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对雪旺细胞氧化损伤的保护作用。方法:用体外纯化培养的雪旺细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分成氧化损伤组、IGF-1保护组和正常对照组。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的活性,生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量,免疫印迹法检测凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。结果:与对照组相比,H2O2处理组细胞胞体积缩小、空泡化,细胞活性降低,SOD含量明显减少,Bcl-2表达减弱;而IGF-1保护组细胞存活率明显升高,SOD含量较损伤组高,Bcl-2表达明显上调。结论:IGF-1对氧化损伤的雪旺细胞有保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对小鼠耐缺氧及抗疲劳作用的实验研究

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对小鼠的缺氧耐受及抗疲劳作用并初步探讨其机制与抗氧化作用的关系.方法:将小鼠随机分成对照组、低浓度组(EGCG1)和高剂量组(EGCG2),低剂量EGCG每天灌胃10 g?kg-1,高剂量EGCG每天灌胃50 g?kg-1,25d后,采用低张性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧、急性脑缺血实验,比较各组的小鼠存活时间观察EGCG对缺氧耐受的影响,检测低张性缺氧小鼠肝脏的超氧化歧化酶(Superoxiadeismutase,SOD)活性、丙二醛(Maleicdicdialdehyde,MDA)含量,初步探讨EGCG对小鼠缺氧耐受及抗疲劳的作用及机制.结果:与对照组相比,EGCG1和EGCG2组可以明显延长低张性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧以及急性缺氧条件下小鼠存活时间,EGCG不同剂量组小鼠负重游泳时间明显延长;且EGCG1与EGCG2提高小鼠肝脏SOD活性,降低肝脏MDA含量(P<0.05).结论:EGCG具有耐缺氧和抗疲劳作用,其机制可能与增强肝脏SOD的活性,减少MDA含量,从而提高抗氧化活性,减少氧化损伤有关.     

脑源性神经营养因子保护H_2O_2诱导的氧化损伤血管内皮细胞

目的:研究脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤血管内皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:离体培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),建立H2O2致HUVECs氧化损伤模型后,利用不同浓度(1、10和100μg/L)BDNF处理HUVECs,同时设置未损伤对照组、H2O2损伤后PBS处理组和Trk B inhibitor组(同时加入100μg/L BDNF和1∶1 000的Trk B inhibitor)。利用MTT方法检测各组细胞存活率;同时测定各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平变化;ELISA方法检测各组细胞分泌一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)及细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度变化;流式细胞术检测各组细胞中活性氧簇(ROS)含量及细胞凋亡的变化;Western blot检测各组细胞中Trk B、p-Trk B、cleaved caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白水平。结果:与未损伤组相比,经H2O2氧化损伤后,PBS处理组的HUVECs存活率显著下降,LDH和MDA含量显著上升而SOD和GSH的活性显著下降,细胞中NO分泌功能显著降低而ET-1和ICAM-1的分泌浓度则显著增加,ROS的含量和细胞凋亡率均显著上升,cleaved caspase-3和Bax的蛋白水平显著上升,Bcl-2蛋白表达则显著下降;与PBS处理组相比,不同浓度BDNF处理组中HUVECs的存活率逐渐上升,LDH和MDA含量逐渐下降,而SOD和GSH活性逐渐上升,细胞中的NO分泌量显著上升而ET-1和ICAM-1分泌量逐渐下降;ROS含量和细胞凋亡率则逐渐下降,Trk B和p-Trk B水平均显著上升,cleaved caspase-3和Bax的蛋白水平逐渐下降而Bcl-2蛋白表达逐渐上升,但BDNF的作用均受到Trk B inhibitor的抑制。结论:BDNF能够通过提高HUVECs细胞存活率,增强细胞抗氧化损伤能力,降低ROS产生和细胞凋亡率而保护氧化损伤的血管内皮细胞,并通过其与Trk B结合后激活BDNF-Trk B信号通路发挥作用。     

硫化氢对缺氧诱导的大鼠皮层神经元损伤的保护作用

 目的:探讨硫化氢(H 2S)对缺氧诱导的皮层神经元损伤的影响及作用机制。方法:将SD大鼠皮层神经元在2% O 2、5% CO 2、93 % N 2、37 ℃培养箱培养24 h,建立细胞缺氧模型。以硫氢化钠（NaHS）作为H 2S的供体,应用CCK-8分析细胞活性;采用荧光探针DCFH-DA检测神经元活性氧(ROS)含量;用Rh123染色测定线粒体膜电位(MMP);采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒分析神经元LDH释放率,反映神经元的损伤情况。结果:(1)缺氧引起神经元ROS含量和LDH释放率升高,NaHS预处理可抑制缺氧所致神经元ROS含量和LDH释放率的升高;(2)缺氧降低神经元MMP和细胞活性,NaHS和活性氧清除剂NAC预处理均显著抑制缺氧所致神经元MMP和细胞活性的降低。结论:缺氧增加神经元ROS含量,降低神经元MMP和细胞活性,而H 2S通过其抗氧化作用,减轻缺氧所致神经元的损伤。     

氧化低密度脂蛋白诱导巨噬细胞泡沫化氧化损伤后血管紧张素转化酶2的表达变化及意义

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化后血管紧张素转化酶2(ACE2)的表达变化与氧化应激损伤的关系,探讨ACE2的抗氧化作用。方法用不同浓度ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7泡沫化,油红O染色观察巨噬细胞内脂质堆积变化,并定量分析细胞内脂滴含量,通过检测细胞上清中丙二醛(MDA)含量鉴定细胞氧化损伤程度,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测ACE2及MAS m RNA表达,化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性与还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。结果不同浓度(20、40、60、80mg/L)ox-LDL处理巨噬细胞24 h,油红O染色可见巨噬细胞变大、变圆,胞质内脂滴含量呈剂量依赖性增加;用60mg/L ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化模型组中MDA含量较对照组明显升高(P0.01);Real-time PCR结果显示,模型组ACE2和MAS m RNA表达水平较对照组显著减少(P0.05);与对照组比较,模型组中SOD活性与GSH含量显著降低(P0.05或P0.01)。结论巨噬细胞泡沫化氧化损伤进程与ACE2及其下游受体MAS表达下调密切相关,提示ACE2具有一定的抗氧化作用,其机制可能与SOD及GSH有关。     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分、氧化损伤和形态学的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损评分、氧化损伤和形态学的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(IR)、NBP预处理低剂量组(NBPⅠ)、NBP预处理中剂量组(NBPⅡ)和NBP预处理高剂量组(NBPⅢ),每组18只,制造模型前7d开始灌胃给药,1次/d。线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2h再灌注24h后进行神经功能缺损评分;2,3,-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑组织梗死的情况;苏木素-伊红(HE)染色显微镜下观察脑组织形态学变化;采用羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量。结果 (1)Sham组神经功能缺损评分为零,脑组织无梗死情况发生,神经元形态规则,脑组织中SOD、GSH-PX活性和MDA含量正常。(2)与IR组比较,NBP预处理各组大鼠神经功能评分显著降低(均P0.01),NBPⅠ、Ⅱ、Ⅲ组神经功能评分依次递减(均P0.05)。(3)与IR组比较,NBP预处理各组脑组织梗死体积依次减小(均P0.05),神经元损伤减轻。(4)NBP预处理各组脑组织中SOD、GSH-PX活性明显升高,MDA含量显著减少(P0.01);NBPⅠ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-PX活性依次递增,MDA含量依次递减(均P0.05)。结论丁苯酞预处理可上调SOD、GSH-PX活性,降低MDA含量,减小脑梗死体积,减轻神经元损伤,发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠的预防性保护作用。     

人参皂苷Rg_2对体外培养的海马缺氧神经元的预防保护作用

为观察人参皂苷Rg_2对缺氧大鼠海马神经元的保护作用,选取Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5μmol/L尼莫地平组(尼莫地平组)、Rg_20.025mmol/L组(Rg_21组)、Rg_20.050mmol/L组(Rg_22组)。将相应药物加入到培养液中孵育4h后,建立急性缺氧细胞模型。采用流式细胞仪检测各组神经元缺氧后的细胞凋亡情况,用酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,并对所得结果加以比较。结果发现,离体条件下人参皂苷Rg_2可显著增强海马神经元的活性,降低其凋亡率及死亡率;提高细胞上清液中超氧化物歧化酶的活性,降低MDA及NO的含量,且呈量效比例关系。以上结果提示,人参皂苷Rg_2在体外有抗缺氧损伤的作用。其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡、提高抗氧化酶的活力、清除自由基而发挥作用。     

非促分裂型haFGF对H2O2损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况，并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm-haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法： 采用胰蛋白酶消化法，体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞，建立H2O2损伤心肌细胞的模型，检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化，以评价H2O2对心肌细胞的损伤状况，并加入一定浓度的nm-haFGF，观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变，以及凋亡的变化。结果： H2O2对心肌细胞的损伤呈浓度依赖地加剧；在H2O2压力作用下，10-80 μg/L nm-haFGF逐步提高H2O2损伤心肌细胞的存活率，其中80 μg/L组的细胞存活力明显大于对照组(P＜0.05)，同时逐步提高SOD活性和降低MDA含量，其中40和80 μg/L组的SOD活性明显大于阳性对照组(P＜0.05)，40和80 μg/L组的MDA含量明显小于阳性对照组(P＜0.05)；此外，在0.01 mmol/L H2O2作用24 h后，10 μg/L和40 μg/L nm-haFGF组的心肌细胞凋亡百分率分别为32.4%和10.7%。结论： 心肌细胞的损伤与H2O2的浓度呈剂量依赖关系；nm-haFGF对由H2O2引起的心肌细胞损伤具有拮抗作用。     

远志皂苷元对H2O2诱导的大鼠海马神经元损伤的影响及其机制

目的: 观察远志皂苷元(senegenin, Sen)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的SD大鼠海马神经元损伤的影响并探讨其作用机制。方法: SD大鼠海马神经元培养至第6 d,随机分为正常组、H₂O₂组、Sen+ H₂O₂ 组和Sen组,药物干预后检测细胞存活率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用 Hoechst 33258染色观察细胞核形态变化,荧光定量PCR(real-time PCR)检测神经元凋亡相关基因 bcl-2和bax 的表达,进一步采用Western blotting观察Bcl-2和Bax蛋白表达,酶荧光活性检测试剂盒测定caspase-3的活性改变。结果: 与正常组相比,H₂O₂组细胞存活率降低。与H₂O₂组相比,20 μmol/L Sen+ H₂O₂ 组细胞存活率升高,SOD活性升高,MDA含量下降,并且远志皂苷元能够上调bcl-2 mRNA表达、下调bax mRNA表达,降低caspase-3活性,Western blotting结果进一步表明Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达下降,各指标均有显著差异(P<0.05)。结论: 远志皂苷元对H₂O₂处理的海马神经元有一定保护作用,其机制可能与远志皂苷元增强海马神经元抗氧化能力、调节细胞凋亡相关蛋白从而抑制凋亡有关。     

远志皂苷元对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞的保护作用

目的: 观察远志皂苷元(senegenin,Sen)对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的影响并初步探讨其作用机制。方法: 采用上丘荧光金逆行标记RGCs后,体外原代RGCs混合细胞培养,随机分为control组、H₂O₂组、Sen+H₂O₂和Sen组。检测带荧光金荧光细胞的活力。同上述分组处理视网膜,用Hoechst 33258 染色后观察视网膜细胞核形态的变化,Western blotting检测视网膜细胞cleaved caspase-3、细胞色素C及Bcl-2蛋白的表达。结果: 与control组比较,Sen浓度在10、20和40 μmol/L时, RGCs活力无明显变化(P>0.05),但Sen浓度达到80和160 μmol/L时,RGCs活力明显下降,差异显著(P<0.01)。25、50、100和200 μmol/L H₂O₂明显降低RGCs活力(P<0.05)。Sen浓度在10、20和40 μmol/L时,对50 μmol/L H₂O₂损伤的RGCs有较好的保护作用(P<0.05),其中40 μmol/L Sen保护作用最为明显。Hoechst 33258染色表明Sen可以减少H₂O₂引起的视网膜细胞凋亡。Western blotting结果表明Sen促进Bcl-2蛋白的表达,降低线粒体细胞色素C的释放,下调cleaved caspase-3的表达。 结论: Sen保护RGCs对抗氧化应激引起的损伤,其机制可能与其增强Bcl-2蛋白表达和减少氧化应激引起的细胞凋亡有关。     

贯叶金丝桃素衍生物GF1029体外抗AD活性及对AD模型大鼠行为学的影响

目的探讨贯叶金丝桃素衍生物GF1029对大鼠原代培养皮层细胞的保护作用及对衰老模型小鼠空间探索能力和脑抗氧化酶的影响。方法采用大鼠原代培养皮层细胞,用MTT法观察GF1029对100 nmol/L H2O2及20μmol/LAβ25-35损伤后的神经细胞的生长情况。用Aβ25-35侧脑室注射联合D-半乳糖腹腔注射的SD大鼠痴呆模型,经GF1029处理后,用Morris水迷宫实验(MWM)检测大鼠学习记忆能力;并取脑测定脑中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。结果 GF1029在40及80μmol/L预处理2 h可减轻对H2O2及Aβ25-35诱导的大鼠皮层神经细胞损伤,GF1029在30、60 mg/kg灌胃可延长模型大鼠的逃避潜伏期(P<0.05),延长平台所在象限的停留时间(P<0.05),和增加跨平台次数(P<0.05),并可提高小鼠脑SOD活性,减少MDA含量(P<0.05)。结论贯叶连翘衍生物GF1029对H2O2及Aβ25-35诱导的大鼠皮层神经细胞损伤有保护作用,并可改善痴呆模型大鼠学习记忆,对抗神经系统衰老,提高脑组织抗氧化能力,抑制脂质过氧化损伤可能是其抗衰老机制之一。     

N-copine基因反义核酸对原代培养的小鼠皮质神经元的影响

目的：通过研究N-copine基因反义核酸(ant isense)对体外培养的小鼠大脑皮质神经元的影响，在细胞学层面上探索N-copine基因的功 能。 方法： 原代培养小鼠大脑皮质神经元，用反义核酸抑制N-copine基 因的表达，分析抑制N-copine基因表达对神经元生长及死亡的影响。 结果：寡核苷酸处理72 h，antisense组神经元轴突长度短了而且胞体变小，而对照组神经元轴 突和胞体都正常生长；antisense组台盼蓝着色细胞明显多于对照组，培养液中LDH活力明显 高于 对照组。 结论： 抑制N-copine基因表达，能影响体外培养的皮质神经元 的生长，并导致神经元严重损伤和死亡。这提示N-copine可能是神经元的一种保护性蛋白， 可能具有防止神经元退变和促进再生的重要作用。     

雄激素对自由基损伤后海马神经元的保护作用

目的:探讨雄激素对培养大鼠海马神经元自由基损伤后的神经保护作用.方法:取新生大鼠进行海马神经元培养,用不同浓度的H_2O_2造成海马神经元的损伤模型,观察细胞的活力并测量超氧化物歧化酶(SOD)值,一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的含量,预先给予睾酮后(24h)观察细胞的活力及SOD值,NO及MDA的含量变化,同时观察不同时间给予睾酮后细胞的活力.结果:给予H_2O_2后,神经元的活力明显下降,预先进行睾酮培养后细胞的活力明显升高,NO和MDA的生成降低,SOD值升高,睾酮给予后短时间内可以引起神经保护作用.结论:雄激素对H_2O_2造成的神经元损伤具有明显的保护作用,发挥作用为短时间的作用模式,可能与自由基引起的凋亡相关.     

Prion Protein-Deficient Neurons Reveal Lower Glutathione Reductase Activity and Increased Susceptibility to Hydrogen Peroxide Toxicity

The prion protein (PrP) has a central role in the pathogenesis of transmissible spongiform encephalopathies (TSE). Accumulating evidence suggests that normal cellular PrP (PrP(c)) may be involved in copper homeostasis and modulation of copper/zinc superoxide dismutase (Cu/ZnSOD) activity in neurons. Hydrogen peroxide (H(2)O(2)) is a toxic reactive oxygen species generated through normal cellular respiration, and neurons contain two important peroxide detoxifying systems (glutathione pathway and catalase). To determine whether PrP expression affects neuronal resistance to H(2)O(2), we exposed primary cerebellar granule neuron cultures derived from PrP knockout (PrP(-/-)) and wild-type (WT) mice to H(2)O(2) for 3, 6, and 24 hours. The PrP(-/-) neurons were significantly more susceptible to H(2)O(2) toxicity than WT neurons after 6 and 24 hours' exposure. The increased H(2)O(2) toxicity may be related to a significant decrease in glutathione reductase activity measured in PrP(-/-) neurons both in vitro and in vivo. This was supported by the finding that inhibition of GR activity with 1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosurea (BCNU) increased H(2)O(2) toxicity in WT neurons over the same exposure period. The PrP toxic peptide PrP106-126 significantly reduced neuronal glutathione reductase activity and increased susceptibility to H(2)O(2) toxicity in neuronal cultures suggesting that PrP toxicity in vivo may involve altered glutathione reductase activity. Our results suggest the pathophysiology of prion diseases may involve perturbed PrP(c) function with increased vulnerability to peroxidative stress.     

过氧化氢诱发小脑皮质神经元凋亡

采用分离细胞培养的新生SD大鼠小脑皮质神经元，用Ara－c抑制非神经元细胞生长，研究了过氧化氢能否诱导种经元凋亡．用荧光染料Hoechst33258染色鉴别凋亡神经元，可见凋亡神经元的细胞核体积缩小至正常神经元的40％～50％，核形不规则，核内染色质块状深染．少量神经元可见到不规则的核碎片及凋亡小体。结果表明：（1）小剂量过氧化氢（50μmol／L）作用12h，可见1％～3％神经元凋亡，与对照组比较，无明显差异；24、36h凋亡神经元比对照组显著增多；48h凋亡神经元数量达高峰。（2）大剂量过氧化氢（70μmol/L）作用12h，凋亡神经元的出现明显增多，作用24、36h凋亡神经元增加均比小剂量组更显著，出现高峰更早、更高．（3）对照组随培养时间延长凋亡细胞的数量增长速度比较缓慢．以上结果提示过氧化氢能诱发小脑皮质神经元凋亡，尤以大剂量过氧化氢的诱发作用为更强．     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脊髓损伤(SCI)大鼠神经元凋亡和凋亡调控蛋白Caspase-3时间、空间表达的影响,探讨其脊髓损伤保护机制。方法 SD大鼠75只,分为假手术组、SCI组、EGCG组(n=25只);钳夹法制作脊髓损伤模型,EGCG组和SCI组损伤后即刻和1h后腹腔注射EGCG(50 mg/kg)和等量生理盐水;用结晶紫(CV)染色法、TUNEL和免疫组织化学方法,观察SCI后6h、12h、24h、3d和7d时间范围内,从损伤中心到头端0~5.00mm空间范围内,EGCG对脊髓神经元存活、凋亡以及相关调控蛋白Caspase-3表达的影响。结果 CV染色发现,SCI后6h~7d,在0~0.50mm空间范围内均未发现存活的神经元,在1.00~4.60mm范围内,EGCG和SCI组相比存活的神经元数明显增加(P0.01);TUNEL结果发现,SCI后6h~7d,在1.05~3.05mm范围内,EGCG与SCI组相比凋亡神经元数明显减少(P0.01);免疫组织化学发现,SCI后6h~7d,在1.10~3.10mm范围内,EGCG与SCI组相比Caspase-3阳性表达的神经元数明显减少(P0.01)。结论 EGCG在一定时间、空间范围内能下调Caspase-3表达,减少神经元凋亡,对继发性SCI有拮抗作用。     

重组人BDNF对快速老化模型小鼠及神经元培养的影响

目的探讨重组人BDNF(rhBDNF)对快速老化模型小鼠(SAM)及应激衰老神经元的抗凋亡作用。方法将SAM鼠分为正常组。实验对照组和hBDNF实验组,将培养的神经元分为正常组。衰老模型组和hBDNF实验组。对SAM鼠进行行为学测试,对培养的神经元进行了形态学观察。bcl-2免疫组织化学染色及MTT自动比色微量分析。结果rhBDNF实验组SAM鼠的学习记忆能力明显增强,与对照组相比有显著性差异。衰老模型组神经元存活率降至58.7%,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。rhBDNF实验组神经元存活率达到71.5%,显示实验组和衰老模型组之间有显著性差异(P<0.01),bcl-2阳性细胞数量和平均面积以及bcl-2免疫着色的灰度值较AD模型组显著增高。结论rhBDNF在培养的神经元和SAM鼠有营养作用,BDNF通过增加抗凋亡蛋白bcl-2的表达保护神经元抵抗凋亡,有助于衰老的防治。