胎膜组织BMP-2及MMP-9的表达及与胎膜早破的关系

目的:探讨胎膜组织骨形成蛋白-2(BNP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胎膜早破(PROM)发生的关系.方法:选择足月临产产妇、足月PROM产妇、早产临产产妇、早产PROM产妇及足月未临产产妇(对照组)各18例,分娩后取破口处胎膜组织,采用免疫组织化学法染色,并使用病理影像多媒体图文操作系统对BMP-2、MMP-9阳性表达物的面积积分光密度(AIOD)进行半定量分析.结果:①胎膜组织中BMP-2和MMP-9阳性表达的AIOD在足月临产组、足月PRON组、早产临产组、早产PROM组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.0071);②足月PROM组BMP-2和MMP-9高于足月临产组(P=0.0065,P=0.0069);早产PROM组BNP-2和NMP-9高于早产临产组(P=0.0069,P=0.0052);早产PROM组BMP-2和MMP-9高于足月PROM组(P=0.0037,P=0.0065);③5组胎膜组织中BMP-2和MMP-9的表达均呈明显正相关(r_s=0.76159,P<0.0001).结论:BMP-2和MMP-9与胎膜破裂的发生密切相关,胎膜组织中BMP-2与MMP-9的表达水平相关.     

NLRC5和Caspase-1在胎膜早破合并组织学绒毛膜炎患者中的表达及临床意义

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体5(NLRC5)和半胱天冬梅-1(Caspase-1)在胎膜早破(PROM)合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)患者中的表达及临床意义。方法:选取2021年8月至2022年1月徐州医科大学附属徐州妇幼保健院就诊的PROM患者和同期足月正常剖宫产孕妇作为研究对象。根据是否诊断PROM、胎膜破裂时间、胎膜组织病理检查结果分为5组：未足月胎膜早破(PPROM)合并HCA组(PPROM+HCA组,(印)n(正)=30)、足月胎膜早破(TPROM)合并HCA组(TPROM+HCA组,(印)n(正)=32)、PPROM未合并HCA组(PPROM组,(印)n(正)=30)、TPROM未合并HCA(TPROM组,(印)n(正)=28)、足月正常剖宫产孕妇(对照组,(印)n(正)=30)。收集入院时孕妇的血清样本以及分娩时新鲜胎膜组织标本,用酶联免疫吸附(ELISA)法、免疫组化法、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NLRC5及Caspase-1表达水平和定位,用线性相关分析NLRC5和Caspase-1之间的相关性。结果:PPROM+HCA组、TPROM+HCA组孕妇血清和胎膜组织中NLRC5、Caspase-1的含量较其他3组显著增加((印)P(正)<0.05);其他3组之间比较差异无统计学意义((印)P(正)>0.05)。PPROM+HCA组、TPROM+HCA组胎膜组织中NLRC5和Caspase-1的蛋白及mRNA的表达较其他3组显著增加((印)P(正)<0.05);其他3组比较差异无统计学意义((印)P(正)>0.05)。PPROM+HCA组、TPROM+HCA组孕妇血清NLRC5、Caspase-1水平与胎膜组织中NLRC5 mRNA、Caspase-1 mRNA相对表达量呈正相关(r>0,(印)P(正)<0.05)。结论:血清中NLRC5与Caspase-1的浓度及胎膜组织中两者的mRNA表达呈一致性变化,NLRC5和Caspase-1参与了PROM合并HCA的发生。     

Nrf_2与足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的关系

目的:探讨核因子E2相关因子(Nrf_2)表达与足月胎膜早破(PROM)合并绒毛膜羊膜炎(HCA)的关系。方法:选取足月PROM患者60例,根据胎膜组织病理检查结果分成PROM合并HCA组(HCA组,21例)和未合并HCA组(对照组,39例)。采用免疫组化法、蛋白印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测Nrf_2在胎膜组织、母血和脐血中的表达。结果:(1)HCA组胎膜组织、母血和脐血中Nrf_2mRNA表达水平分别为0.48±0.09、0.73±0.11和0.51±0.09,Nrf_2蛋白表达水平分别为0.101±0.019、0.294±0.051和0.175±0.028;HCA组中Nrf_2mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)Nrf_2在胎膜组织羊膜层、绒毛膜层和底蜕膜层中的细胞核和细胞质均有表达。Nrf_2定位于细胞核的表达在HCA组的每一层表达均低于对照组(P0.05);两组中,Nrf_2在羊膜层、绒毛膜层和底蜕膜层中的表达水平比较,均存在显著差异,底蜕膜最低,羊膜层最高。结论:Nrf_2表达水平显著下降是PROM合并HCA的重要发病机制。Nrf_2含量变化可成为一种新的生物学标记物用于诊断PROM合并HCA的孕妇和评估新生儿预后。     

妊娠合并外阴阴道假丝酵母菌病的治疗对胎膜早破预防作用的研究

目的:观察妊娠合并外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的干预治疗对胎膜早破(PROM)的预防作用.方法:选取妊娠合并VVC治疗组30例,妊娠合并VVC未治疗组10例,足月非阴道炎胎膜早破组30例,足月正常妊娠组30例,观察前两组的妊娠结局并取羊水及胎膜做假丝酵母菌培养及分型鉴定;用免疫组织化学技术检测4组胎膜中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达率.结果:①未治疗组羊水和胎膜培养结果显示有1例克柔假丝酵母菌感染,治疗组羊水和胎膜培养结果均阴性;②胎膜早破组和未治疗组的MMP-9 PU值及MMP-9/TIMP-1 PU比值差异无统计学意义(P>0.05),但分别高于治疗组和正常对照组的MMP-9 PU值,MMP-9/TIMP-1 PU比值(P<0.05);③4组的TIMP-1的PU值比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:妊娠合并VVC时,胎膜中MMP-9升高,MMP-9/TIMP-1失衡,增加了发生胎膜早破的危险性,治疗对预防妊娠合并VVC所致胎膜早破是有益的.     

胎膜早破孕妇胎膜组织中TRAIL、NF-κB的表达及意义

目的:探讨胎膜组织中TRAIL、NF-κB表达与胎膜早破(PROM)的关系。方法:免疫组化及RT-PCR法检测30例足月胎膜早破患者(PROM组)、30例同孕期正常妊娠妇女(对照组)分娩后胎膜组织中TRAIL、NF-κB表达水平。结果:PROM组胎膜组织中TRAIL、NF-κB表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。PROM组中TRAIL与NF-κB表达呈显著正相关(r=0.875,P0.05)。结论:PROM孕妇胎膜组织中存在TRAIL、NF-κB高表达,可能是胎膜早破发病机制的重要环节之一。     

羊水过多孕妇胎膜组织中水通道蛋白-1、3、8、9 mRNA的表达

目的 探讨水通道蛋白-1、3、8、9在羊水平衡分子机制中的可能作用.方法 收集足月选择性剖宫产分娩的羊水过多和正常孕妇的胎膜组织样本各5例,运用RT-PCR方法检测胎膜组织中水通道蛋白-1、3、8、9 mRNA的表达.结果 水通道蛋白-9 mRNA的表达水平在羊水过多组胎膜组织的水平(1.1403±0.0831)显著高于对照组(0.5903±0.1909)(P=0.002);水通道蛋白-1、3和8 mRNA在羊水过多组和对照组胎膜的表达差异无统计学意义(P=0.972,0.242,0.608).结论 水通道蛋白-9 mRNA在人羊水过多病例的胎膜组织表达显著升高,在维持羊水量及羊水成分的平衡中可能发挥重要作用.     

自发性早产患者胎盘组织中fFN、MMP-9、COX-2的表达及意义

目的:胎儿纤维连接蛋白(fFN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、环氧化酶2(COX-2)在自发性早产患者胎盘组织中的表达及意义。方法:选择2012年12月至2013年6月在西京医院妇产科住院分娩的90例孕妇,其中自发性早产30例,足月顺产30例,择期剖宫产30例。采取免疫组化法、RT-PCR法检测胎盘组织中fFN、MMP-9、COX-2的表达。结果:(1)fFN、MMP-9、COX-2的阳性表达主要定位于滋养细胞胞浆。fFN、MMP-9、COX-2在自发性早产组的阳性表达率分别为96.7%、90%和93.3%,显著高于足月顺产组(86.7%、70%和83.3%)和择期剖宫产组(56.7%、46.7%和50%)(P0.01);足月顺产组显著高于择期剖宫产组(P0.01)。(2)fFN mRNA、MMP-9 mRNA、COX-2 mRNA在早产组中的表达水平显著高于足月顺产组、择期剖宫产组(P0.01);足月顺产组显著高于择期剖宫产组(P0.01)。结论:fFN、COX-2、MMP-9在自发性早产中呈高表达,推测其可能参与了自发性早产的发病过程。     

热休克蛋白70的表达与自发性早产合并组织学绒毛膜羊膜炎的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)的表达与自发性早产合并组织学绒毛膜羊膜炎(HCA)的关系。方法:选择2015年6月至2016年1月在郑州大学第三附属医院产科住院并分娩的早产临产孕妇46例为早产临产组,并随机选择同期足月正常分娩的孕妇31例(足月正常组)为对照组。早产临产组孕妇根据分娩后胎膜组织病理学检查结果,分为早产合并HCA组(21例)及早产未合并HCA组(25例)。ELISA法测定并比较各组孕妇外周血、脐血中HSP70蛋白水平,采用免疫组化SP法、Western blotting法及RT-PCR法检测并比较各组孕妇胎膜组织中HSP70蛋白及mRNA的表达水平。采用Pearson相关分析法分析各组HSP70蛋白的相关性。结果:(1)早产合并HCA组孕妇外周血、脐血及胎膜组织中HSP70蛋白的表达和胎膜组织中HSP70 mRNA的表达高于早产未合并HCA组,早产临产组均高于足月正常组,3组间两两比较,差异均有统计学意义(P0.01)。(2)早产合并HCA组中孕妇外周血与脐血及胎膜组织中HSP70蛋白的表达均呈正相关(P0.05)。(3)早产合并HCA组中新生儿败血症发生率高于其余两组(P0.05)。结论:HSP70在早产及其合并HCA时表达增加,HSP70可能参与了早产的发生机制,同时与HCA及新生儿败血症有关。     

基质金属蛋白酶2,9在胎膜早破产妇胎膜的表达变化

目的:探讨基质金属蛋白酶- 2、- 9(MMP - 2、MMP - 9)在胎膜早破(PROM)发病机制中的作用。方法:选择早产PROM(PPROM)产妇1 1例、足月PROM产妇32例及足月临产产妇1 6例作为研究组,1 1例足月未临产产妇作为对照组;采用免疫组织化学法检测胎膜宫颈部和宫体部中MMP 2及MMP - 9的分布与表达。结果:①各研究组宫颈部胎膜MMP 2的表达均高于同组宫体部(P <0 .0 5 ) ;胎膜(宫颈部和宫体部)MMP - 2的表达在两PROM组间无差异(P >0 .0 5 ) ,但均高于足月临产组和对照组(P <0 .0 1 )。②MMP - 9在对照组中未见表达;MMP - 9在研究组胎膜宫颈部的表达均明显高于宫体部(P <0 .0 1 ) ,其中PPROM组宫颈部胎膜MMP 9表达的IH积分明显高于其余各组(P <0 .0 1 )。③胎膜宫颈部MMP - 2的表达与MMP 9的表达呈正相关(P =0 .0 0 0 )。结论:MMP -2和MMP - 9参与了产程中胎膜的破裂,在PROM的发病机制中起着重要的作用,其中MMP - 9在PPROM发病机制中的作用更为重要。     

人胎膜组织中E26转录因子1的表达及其与胎膜早破的关系

目的 检测人胎膜组织中E26转录因子1(Ets-1)的表达及定位,探讨其与胎膜早破发生的关系.方法 选择2007年2-11月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的产妇100例为研究对象,按足月与否、有无胎膜早破、分娩方式将其分为早产临产、未足月胎膜早破(PPROM)、足月临产、足月胎膜早破(TPROM)组,以足月择期刮宫产产妇为对照组,每组各20例,分娩后采集其胎膜组织,用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测Ets-1蛋白的表达水平及定位,每组选取6例以逆转录(RT)-PCR技术检测Ets-1 mRNA的表达水平,并进行半定量分析.结果 (1)各组胎膜组织中Ets-1 mRNA的表达:早产临产、PPROM、足月临产、TPROM、对照组胎膜组织中Ets-1mRNA表达水平分别为0.342±0.016、0.603±0.027、0.325±0.013、0.582±0.075、0.139±0.012,PPROM组和TPROM组均高于对照组.分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);早产临产组与足月临产组,PPROM组与TPROM组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(2)Ets-1蛋白在胎膜组织的定位:Ets-1蛋白集中在羊膜和绒毛膜的间质层、滋养层细胞的胞质和胞核中表达;细胞内可见清晰的棕黄色颗粒.在羊膜上皮细胞中未见Ets-1蛋白表达.(3)各组胎膜组织中Ets-1蛋白的表达:早产临产、PPROM、足月临产、TPROM、对照组胎膜组织中Ets-1蛋白表达水平分别为0.552±0.018、2.853±0.174、0.538±0.042、2.731±0.090、0.214±0.013,PPROM组与TPROM组均高于对照组,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但早产临产组与足月临产组,PPROM组与TPROM组胎膜组织分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Ets-1在人类胎膜组织中有表达,且在胎膜早破时表达水平升高.     

母血羊水中基质金属蛋白酶-9水平与胎膜早破关系的研究

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)水平在胎膜早破孕妇血浆和羊水中的变化及与胎膜早破的关系。方法　 2 0 0 1年 2～ 12月采用酶联免疫吸附法对 2 6例胎膜早破孕妇和 2 0例正常妊娠孕妇血浆、羊水中MMP 9水平进行检测。结果　胎膜早破孕妇血浆与羊水中MMP 9水平分别为 4 2 2 2 7ng/L、187 2ng/L ,均明显高于对照组 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。结论　MMP 9与胎膜早破有关 ,当MMP 9高于 35 0 0ng/L时 ,易发生胎膜早破 ,需及时采取预防措施。     

Cx43、Bax和Bcl-2在胎膜早破患者胎膜组织中的表达及意义

目的检测间隙连接蛋白43（Cx43）在胎膜早破患者胎膜组织中的表达,分析其与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的相关性,探讨三者与胎膜早破发生的关系。方法随机选择本院剖宫产分娩的孕32-42周胎膜早破孕妇30例（胎膜早破组）,其中未足月胎膜早破（pPROM）15例,足月胎膜早破（tPROM）15例;无胎膜早破孕妇30例（对照组）。采用免疫组化法（PV法）检测Cx43、Bax和Bcl-2的表达并进行图像分析。结果①各组胎膜组织中均可见Cx43、Bax、Bcl-2不同程度的表达。②tPROM组Cx43、Bcl-2的表达明显低于对照组（P〈0．01）,而Bax的表达高于对照组,差异均有显著性（P〈0．05）。tPROM组Cx43的表达高于pPROM组,差异有显著性（P〈0．01）;而Bcl-2、Bax在两组中比较,差异无显著性（P〉0．05）。③PROM组人工胎膜破口附近Cx43、Bcl-2的表达低于非人工胎膜破口附近,Bax的表达则相反,两组比较,差异有显著性（均P〈0．01）。④PROM组Cx43的表达水平与Bax呈负相关（r=-0．309,P〈0．05）。结论胎膜组织中Cx43的低表达及细胞的过度凋亡可能对胎膜早破的发生起一定的促进作用。     

基质金属蛋白酶2、9及其特异性组织抑制剂在自发性胎膜早破发病中的作用

目的　探讨基质金属蛋白酶 (MMP) 2、9及其特异性组织抑制剂 (TIMP)在自发性胎膜早破发病中的作用。方法　采用RT PCR方法对 8例自发性胎膜早破患者 (胎膜早破组 )、8例正常阴道分娩产妇 (阴道分娩组 )以及 8例择期剖宫产产妇 (剖宫产组 )的胎膜组织中MMP 2、MMP 9和TIMP 2、TIMP 1mRNA的表达进行检测。结果　 (1)MMP 2 :胎膜早破组为 0 84 9± 0 0 37,阴道分娩组为 0 32 7± 0 0 2 3,剖宫产组为 0 30 7± 0 0 2 8。胎膜早破组MMP 2表达水平明显高于阴道分娩组和剖宫产组 ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阴道分娩组MMP 2表达水平与剖宫产组比较 ,差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。 (2 )MMP 9:胎膜早破组为 0 0 2 6± 0 0 0 4 ,阴道分娩组为 0 0 0 8± 0 0 0 1,剖宫产组无表达。胎膜早破组MMP 9表达水平明显高于阴道分娩组 ,两者比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。 (3)TIMP 2 :胎膜早破组为 0 4 2 0± 0 12 2 ,阴道分娩组为 0 730± 0 14 8,剖宫产组为 0 885± 0 0 6 5。胎膜早破组TIMP 2表达水平明显低于阴道分娩组和剖宫产组 ,两者比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;阴道分娩组TIMP 2表达水平明显低于剖宫产组 ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。 (4)TI     

The role of extracellular inducer of matrix metalloproteinases in premature rupture of membranes

Objective: To investigate the role of matrix metalloproteinases (MMP-2, MMP-9) and their inducer (CD147) in premature rupture of membranes (PROM) at term labor.

Methods: In a cross-sectional study, 24 women aged 19–39, with 37–40-week pregnancy, and no clinical and histological signs of chorioamnionitis, were divided into two groups with and without PROM. The histological and immunohistochemical study of the fetal membranes was performed with polyclonal rabbit antibodies to MMP-2/MMP-9 and monoclonal rabbit antibodies to CD147.

Results: The analysis of MMP revealed the increase of MMP-9 expression in the amniotic epithelium during premature membrane rupture both in rupture area, and beyond it, and increased MMR-2 expression in the mesodermal cells. We also found high level of CD147 in the amniotic epithelium in PROM group. The above-mentioned changes were found in all areas of fetal membranes, regardless of the rupture localization.

Conclusions: The study results demonstrate the increased expression of MMR-2 and MMR-9, which regulate the catabolism of fetal membrane extracellular matrix proteins, in amniotic membranes of women with PROM at term labor. The increased expression of CD147 may be one of the mechanisms triggering PROM in the absence of infection.     

水通道蛋白3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的 探讨水通道蛋白(AQP)3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达、分布及其在特发性羊水过多发病巾的作用.方法 2006年6月至2008年3月,选择在温州医学院附属第二医院产科住院并分娩的21例特发性羊水过多的足月产妇为研究组,同期分娩的30例羊水量正常的足月产妇为对照组.采用实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9 mRNA的表达及分布,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白.过氧化物酶(SP)连接法枪测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9蛋白的表达及分布.结果 (1)两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中均可检测到AQP3、9 mRNA的表达.AQP3、9主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞、胎盘滋养细胞.(2)研究组羊膜上皮细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的5.00倍和3.25倍,而研究组绒毛膜滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的2.03倍和2.08倍,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但是研究组胎盘滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达均明显低于对照组,差异也有统计学意义(P<0.01).(3)AQP3、9蛋白在研究组羊膜上皮细胞的表达强度为7.5±2.0、11.1±1.8,对照组为5.3 ±1.6、5.6±2.3,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);AQP3、9蛋白在研究组绒毛膜滋养细胞的表达强度为7.5±2.0、10.0±1.6,对照组为5.4±2.2、5.6±2.1,分别比较,差异也有统计学意义(P<0.05),但是AQP3、9蛋白在胎盘滋养细胞的表达强度(3.5±1.4、4.0 ±2.5)较对照组(5.6±1.3、7.1±2.9)明显下调(P<0.05).结论 AQP3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化可能为羊水增加后的代偿性反应,其调节机制尚待进一步研究.     

HMGB1-RAGE signaling pathway in pPROM

Objective

Increased inflammation of the placenta is considered as a risk factor and a promoter of preterm premature rupture of the membranes (pPROM). High-mobility group box 1 (HMGB1) is a recently identified inflammatory cytokine, and HMGB1-RAGE signaling pathway has been associated with many pathophysiological processes. This study aims to reveal the mechanisms of HMGB1-RAGE signaling pathway in pPROM.

Ⅲ型胶原及CTGF在胎膜早破发病机制中的作用

目的探讨Ⅲ型胶原、结缔组织生长因子（CTGF）在人胎膜组织中的表达及在胎膜早破发病机制中的作用。方法38例胎膜早破孕妇为胎膜早破组，其中未足月胎膜早破组（pPROM组）18例，足月胎膜早破组（tPROM组）20例；与胎膜早破组孕周相对应的非胎膜早破孕妇作为对照组，早产对照组18例，足月对照组20例。应用免疫组化及图像分析法检测胎膜Ⅲ型胶原、CTGF表达水平，以阳性区平均灰度值为检测依据。将各组孕妇胎膜Ⅲ型胶原、CTGF测定结果进行直线相关分析。结果①四组胎膜中均存在不同程度的Ⅲ型胶原、CTGF的表达；②pPROM组Ⅲ型胶原（88．81±5．25）、CTGF水平（85．45±6．91）均低于早产对照组（95．99±8．41，90．30±5．74），差异有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）；tPROM组Ⅲ型胶原（94．53±6．43）、CTGF（88．15±4．93）均低于足月对照组（100．80±9．77，93．20±5．33），（P〈0．05）；pPROM组Ⅲ型胶原（88．81±5．25）表达低于tPROM组（94．53±6．43），两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）；pPROM组CT—GF灰度值（85．45±6．91）表达低于tPROM组（88．15±4．93）．但无统计学差异（P〉0．05）；③Ⅲ型胶原、CTGF水平在pPROM组中的表达呈正相关性，r=0．830（P〈0．01），而tPROM组中两者则无相关性。结论pPROM组与tPROM组中存在Ⅲ型胶原与CTGF的低表达。tPROM的发生可能与胎膜的退行性变有关，而pPROM的发生与胎膜本身结构病变密切相关。